Метод пцр в диагностике геморрагических лихорадок используют

За звучной аббревиатурой ПЦР скрывается сложная и не слишком понятная для рядового пациента расшифровка — полимеразная цепная реакция. Что же такое ПЦР-диагностика, на чем она основана и почему в последнее время ее стали считать самой перспективной технологией в постановке диагнозов, касающихся инфекционных и вирусных заболеваний? Мы расскажем о преимуществах ПЦР-метода, его особенностях и этапах проведения.

ПЦР-диагностика: что это такое?

Диагностика методом ПЦР существует чуть более 30 лет. Значительно эволюционировав за это время, она зарекомендовала себя как один из наиболее точных способов выявления инфекций. В основе метода лежит принцип многократного увеличения микроскопических концентраций фрагментов ДНК возбудителя в биологической пробе пациента в искусственных условиях. В результате сложного процесса, называемого амплификацией, под воздействием ферментов и изменения температуры (от 50 до 95°С) из одной молекулы ДНК образуется две. При этом происходит копирование участка ДНК, который присутствует только у того вида патогенного микроорганизма, который интересует врача.

Цикл образования новой молекулы ДНК занимает всего около 3 минут, а тридцати-сорока циклов вполне достаточно, чтобы получить количество молекул, необходимое для достоверного визуального определения методом электрофореза.

Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т.д. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов.

ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. На сегодня существует множество различных модификаций ПЦР, включая технологии с использованием не только ДНК, но и фрагментов рибонуклеиновой кислоты (РНК). В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется.

Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация (МПА), которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР.

В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах:

Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ (ИФА), выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
Высокая специфичность метода . Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов.
Высокая чувствительность . При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно. ПРЦ определяет наличие всего 10–100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103–105.
Универсальность . Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы.
Скорость получения результатов . Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4–5 часов.
Диагностика латентных инфекций . ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания.

Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода:

Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма . При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени (1–2 месяца), за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме.
Возможность возникновения перекрестной реакции . Подбор фрагментов ДНК (праймеров) осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа.
Изменчивость микроорганизмов . Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа.

Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.

ПЦР-диагностика проводится в специальной лаборатории в несколько этапов.

Забор биоматериала . Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть:
- Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови.
- Моча . Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций.
- Мокрота . Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту собирают в стерильный флакон в количестве 15–20 мг.
- Кровь, сыворотка, плазма . С их помощью диагностируются гепатиты, герпес, ВИЧ-инфекция. Для анализа используется венозная кровь (1–1,5 мл), собранная у пациента натощак в стерильную пробирку. Хранить биоматериал можно не более суток при температуре 4°С. Замораживать кровь категорически запрещается.
- Биологические жидкости . К ним относятся слюна, сок простаты, околоплодная, плевральная, спинномозговая, суставная жидкости. Собираются при помощи пункции с использованием стерильного инструментария в количестве 0,1–1,5 мл в стерильные пробирки.
- Биоптаты , т.е. материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2–3 мм 3 .
Хранение и транспортировка биоматериала . Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Если необходимо длительное хранение, то пробы помещают в холодильник с температурой 2–8°С на срок не более одних суток. Допустимо хранение некоторых биоматериалов в течение двух недель в замороженном виде при температуре -20°С. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
Выделение ДНК из образца . Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором.
Проведение ПЦР . Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2–3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные , включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные , не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе.
Регистрация результатов . Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35–40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате.
Интерпретация результатов исследования . Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.

Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.

Таблица 1 . Примерные цены на анализы ПЦР в Москве

Название анализа	Цена, руб.
Определение ДНК хламидия	750
Определение ДНК микоплазмы хоминис	540
Определение микоплазмы гениталиум	350
Определение ДНК уреаплазмы	350
Гонококк, определение ДНК	350
Определение ДНК герпеса (разные типы)	350–600
Определение ДНК кандиды	570
Вирус краснухи, определение РНК	800
Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (разные типы)	350–1900 [1]

[youtube.player]

Конго-крымская геморрагическая лихорадка (ККГЛ) - широко распространенная болезнь, которую вызывает передаваемый клещами вирус. Вирус ККГЛ вызывает вспышки тяжелой геморрагической лихорадки, при которой летальность достигает 40%.

Геморрагическая лихорадка Крым-Конго распространена в Африке, на Балканах, на Ближнем Востоке и в азиатских странах к югу от 50-й параллели северной широты, совпадая по ареалу с географической границей распространенности клещей рода Hyalomma, являющихся основными переносчиками.

Сезонность инфекции на юге России — с мая по август. Вспышки заболевания ежегодно бывают в Краснодарском и Ставропольском крае, Волгоградской, Астраханской и Ростовской областях, в республиках Калмыкия, Дагестан и Карачаево-Черкесии.

Возможности клинической диагностики ККГЛ ограничены, поскольку множество инфекций, включая трансмиссивные, протекают с развитием геморрагического и/или ДВС-синдрома. В современной практике чаще всего применяются три метода диагностики ККГЛ: вирусологический, серологический и молекулярно-биологический.

Методы диагностики ККГЛ

Наиболее широко в практической диагностике используется выявление IgG- и/или IgM-антител в сыворотке крови методом ИФА. Принципиальным ограничением ИФА-диагностики ККГЛ является то, что IgM-антитела появляются на 5-7 день заболевания, а IgG-антитела - не ранее 2-ой недели болезни. Таким образом, серологические методы не могут обеспечить своевременную диагностику заболевания, что создает проблемы для выбора адекватной терапии, своевременного проведения противоэпидемических мероприятий, предотвращения внутрибольничного инфицирования больных и персонала. Серологический метод пригоден для постановки окончательного диагноза перед выпиской больного, то есть имеет в основном ретроспективное эпидемиологическое значение.

Молекулярно-биологические методы (в частности - ПЦР) направлены на обнаружение РНК вируса ККГЛ в различных биологических материалов от больных. Наиболее информативным биоматериалом для ПЦР-исследования является плазма крови; допускается использование сыворотки. Принципиальным преимуществом ПЦР-диагностики ККГЛ является то, что вирусная нагрузка в крови больного при госпитализации высока и сохраняется у большинства больных вплоть до 7-14 дня заболевания. Таким образом, диагностика возможна в ходе всего лечения, в том числе в критический момент поступления в стационар, когда сероконверсия (IgM) наблюдается лишь у 3-7% больных и метод ПЦР незаменим: чувствительность и специфичность ПЦР-диагностики в этот период превышает 95%. Метод ПЦР также используется в эпидемиологических исследованиях для выявления РНК вируса ККГЛ в популяции клещей. Поскольку вакцинация от ККГЛ для людей или животных не проводится, такие мероприятия очень важны для предотвращения заражения людей и возникновения вспышек.

Реагенты для выявления конго-крымской геморрагической лихорадки

Набор реагентов АмплиСенс® CCHFV-FL предназначен для выявления РНК вируса геморрагической лихорадки Крым-Конго в клиническом материале (плазма и сыворотка крови) и клещах методом ОТ-ПЦР. Реакции обратной транскрипции и ПЦР совмещены в одном этапе (one step), что обеспечивает простоту и высокую скорость анализа.

Рекомендации по пробоподготовке клещей рода Hyalomma:

Состояние клещей	Рекомендации по пулированию	Объем физ. раствора/PBS для гомогенизации	Объем клещевой суспензии для экстракции РНК	Набор реагентов для экстракции РНК
голодные	по 5-7 особей	700 мкл	50 мкл	АмплиПрайм РИБО-преп
полунапитавшиеся	по 2-3 особи	1000 мкл	50 мкл	АмплиПрайм РИБО-преп
полностью напитавшиеся	не пулировать, исследовать индивидуально	1000 мкл	100 мкл	РИБО-золь-В

Для экстракции РНК из плазмы и сыворотки крови рекомендуется использовать набор реагентов АмплиПрайм РИБО-преп.

Для гомогенизации клещей рекомендуется использовать гомогенизаторы TissueLyser LT или TissueLyser II.

Нормативные документы

МУК 4.2.3007-12 Порядок организации и проведения лабораторной диагностики Крымской геморрагической лихорадки для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней (Скачать)

МУ 3.1.1.2488-09 Организация и проведение профилактических и противоэпидемических мероприятий против Крымской геморрагической лихорадки (Скачать)

Публикации

Поддержка
Сервис
Информационные материалы
Специальные предложения
8 (800) 100-28-84

Главный офис г. Москва
+7 (495) 664-28-84

[youtube.player]

Геморрагические лихорадки – это группа острых инфекционных заболеваний, вызванных представителями четырех видов вирусов: аренавирусами, буньявирусами, флавивирусами и филовирусами. Общим для этих заболеваний является тяжелая интоксикация и характерный тромбогеморрагический синдром.

Вирусы, вызывающие геморрагические лихорадки, широко распространены во многих странах мира. Некоторые встречаются и в развитых странах, однако эндемичными районами для большинства видов возбудителей являются Африка, Азия и Южная Америка.

Течение геморрагической лихорадки, в зависимости от возбудителя, может варьироваться от умеренного до крайне тяжелого. Смертность от отдельных вариантов инфекции составляет от 10 до 90 %. Определенные варианты геморрагической лихорадки приводят к тяжелому поражению внутренних органов и нередко к летальному исходу.

Прогноз заболевания зависит от типа вируса, возраста и общего состояния пациента, в частности от активности его иммунной системы.

Viral hemorrhagic fevers, hemorrhagicfevers, VHF, VHFs.

Симптомы геморрагических лихорадок различаются в зависимости от типа вируса, вызвавшего заболевание. Общими проявлениями для всех инфекций являются сама сильная лихорадка и повышенная кровоточивость. Симптомы в начальной стадии болезни чаще всего неспецифичны, однако в процессе дальнейшего развития патологического процесса могут появляться признаки поражения определенных органов и систем организма.

Основные симптомы геморрагических лихорадок:

лихорадка;
слабость, головокружение;
мышечные боли;
гиперемия кожи;
петехиальная сыпь на коже и слизистых оболочках;
нарушение сознания;
покраснение глаз;
кровь в стуле, рвота с кровью;
падение артериального давления.

Общая информация о заболевании

Геморрагические лихорадки могут быть вызваны представителями четырех семейств РНК-содержащих вирусов: аренавирусами (Arenaviridae), буньявирусами (Bunyaviridae), филовирусами (Filoviridae) и флавивирусами (Flaviviridae). Аренавирусы вызывают лихорадку Ласса, аргентинскую, бразильскую, венесуэльскую и боливийскую лихорадку, буньявирусы – лихорадку Крым-Конго, лихорадку долины Рифт, геморрагическую лихорадку с почечным синдромом, филовирусы – лихорадку Эбола, флавивирусы – желтую лихорадку, лихорадку Денге и др.

Все представители вирусов, вызывающих геморрагические лихорадки, объединены общим патогенезом. Они склонны поражать эндотелий сосудов, что объясняет развитие геморрагического синдрома при большинстве геморрагических лихорадок. После проникновения вируса в кровь через укусы насекомых, расчесы, ссадины, инъекции, слизистую дыхательных путей сначала формируется локальная реакция на инфекцию, вслед за которой быстро развивается вирусемия и генерализованное поражение системы микроциркуляции (вирус поражает также клетки сосудистой стенки). При проникновении возбудителя в кровь он прилипает к мембране клетки, проникает внутрь нее, активно размножается и распространяется по другим тканям организма. Это сопровождается выделением биологически активных веществ, которые нарушают проницаемость сосудов, реологические свойства крови. Проявлением этого процесса является сыпь, гиперемия кожи, покраснение сосудов склер, могут возникать внутренние кровотечения, сопровождаемые резким падением артериального давления, шоком. Ряд вирусов вызывает поражение костного мозга, в частности мегакариоцитов. Ослабление иммунной системы организма, слабый или запоздалый ответ защитных механизмов может приводить к стремительному развитию патологического процесса, сопровождаемому массивными кровотечениями, полиорганным поражением.

Кто в группе риска?

Работающие с инфицированными людьми или животными, в частности медицинские работники, биологи, дератизаторы, работники скотоводческих ферм.
Проживающие в эндемичных районах.
Употребляющие внутривенные наркотики.
Те, кто пренебрегает барьерными способами контрацепции.

Диагностика основана на анамнезе, осмотре, результатах лабораторных и инструментальных исследований. При опросе пациента обращается внимание на возможный контакт с возбудителем – путешествие в эндемичные по заболеванию регионы, контакт с животными-переносчиками или инфицированными людьми. Инкубационный период большинства геморрагических лихорадок составляет 10-21 день, поэтому болезнь может развиться уже после возвращения из путешествия в опасный район. При подозрении на наличие геморрагической лихорадки необходимо в условиях стационара в кратчайшие сроки провести ряд исследований, позволяющих дифференцировать болезнь от других заболеваний и установить тип возбудителя:

Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ). В общем анализе крови при геморрагических лихорадках могут быть выявлены лейкопения и тромбоцитопения. В некоторых случаях, например при лихорадке Ласса, эти изменения отсутствуют. Уровень гемоглобина может понижаться.
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Может быть повышена.
Протромбиновый индекс (ПИ),активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) бывают увеличены.
Фибриноген. Контроль уровня фибриногена и тромбоцитов используется для выявления возможного процесса диссеминированного внутрисосудистого свертывания.
. Анализ используется при подозрении на инфекцию мочевыделительной системы.
Посев биологических жидкостей: крови, мочи, мазка из зева и носа. Используется для выявления возможных возбудителей инфекции.
Выявление возбудителя инфекции в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Выявление в крови антител к возбудителю инфекции.

Оставьте ваш E-mail и получайте новости, а также эксклюзивные предложения от лаборатории KDLmed

[youtube.player]

Геморрагическая лихорадка – это вирусное заболевание, входящее в группу полиэтиологических острых вирусных патологий зоонозного характера (резервуарами возбудителя являются животные).

Группа объединяется общей симптоматикой:

геморрагические проявления;
интенсивные лихорадочно-интоксикационные симптомы;
генерализованное поражение сосудистых структур (наиболее показательным является поражение микроциркуляторных структур);
развитие тромбогеморрагических синдромов.

Одной из наиболее часто встречаемых инфекций из этой группы является геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС).

ГЛПС – что это

системными повреждениями микроциркуляторных сосудистых структур,
развитием диатезов геморрагического характера,
тяжелыми расстройствами гемодинамики,
поражением тканей почек,
развитием тяжелых нарушений в работе почек.

Данный тип геморрагических лихорадок также называют:

геморрагический нефрозонефрит,
эпид. нефрозонефрит,
маньчжурская лихорадка, и т.д.

Согласно классификации МКБ10 данная инфекция классифицируется как А98.5.

Этиологические факторы заболевания

ГЛПС относятся к распространенным на территории Евразии очагово-природным инфекционным патологиям. Чаще всего заболевание регистрируют на территории Китая и Российской Федерации.

Возбудителем заболевания являются арбовирусы, входящие в семейство Bunyaviridae. Данный тип вирусов относят к хантавирусам.

Проявления инфекционного процесса не зависят от типа серовара возбудителя.

На территории России и чаще всего регистрируются ГЛПС, вызванная вирусами типа Добрава-Белград и Пуумала.

При температуре до двадцати градусов и при температуре ниже -20 градусов, вирус отличается относительной устойчивостью. В образцах крови, при температуре до 4 градусов, вирус может сохраняться в течение четырех дней.

ГЛПС – эпидемиология заболевания

Главным источником вирусных частиц считаются мышевидные грызуны.

Грызуны переносят данную инфекцию бессимптомно. В окружающую среду вирус выделяется с испражнениями и мочой.

Инфицирование человека осуществляется аспирационными и контактными путями.

Контактное инфицирование реализуется при непосредственных контактах с грызунами, а также материалами и поверхностями, загрязненными их испражнениями (сено, зерна, солома и т.д.).

Также возможно алиментарное инфицирование, реализуемое при употреблении термически необработанных продуктов, загрязненных испражнениями больных грызунов.

Показатель естественной чувствительности к возбудителю заболевания высокий во всех возрастных группах.

Чаще всего (приблизительно в восьмидесяти-девяноста процентах всех случаев) ГЛПС регистрируется у лиц мужского пола от шестнадцати до пятидесяти лет.

Заболевание развивается преимущественно у работников сельской промышленности, трактористов и т.д.

Природные очаги данной инфекции регистрируются по всему миру. На территории России заболевание регистрируется во всех районах. Наиболее распространена данная инфекция на территории Татарстана, Башкортостана и т.д.

В структуре заболеваемости отмечается выраженная сезонность. ГЛПС регистрируется преимущественно с мая по декабрь.

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом – профилактика

Для специфических профилактических мероприятий применяют корейские вакцины, созданные на основе вирусных частиц типа Хантаан. В России данный тип вакцин не сертифицирован, поэтому специфическую профилактику заболевания на территории российской Федерации не проводят.

Для проведения неспецифической профилактики применяют:

эпидемический контроль за проведением дератизации в очагах;
использование специальных защитных очков, перчаток и респираторов при работе с зерном, сеном, работе в сильно запыленных помещениях;
контроль за качеством хранения продуктов и т.д.

Патогенез развития заболевания

Патогенез развития инфекционного процесса малоизучен. На данный момент выделяют пять основных
стадий ГЛПС:

В дальнейшем, вирус начинает активно размножаться в тканях лимфатических узлов и клетках МФС (фагоцитарно-мононуклеарных систем).

вирусемии и генерализации инфекционного процесса – на данной стадии отмечается активное распространение вирусов и поражение сосудистых рецепторов и нервных тканей токсинами возбудителя. Данный этап соответствует периоду инкубации заболевания.

токсико-аллергическо-иммунных реакций – указанная стадия соответствует периоду лихорадочных проявлений. Данная фаза ГЛПС развивается, когда нарушается захват циркулирующих в крови вирусных частиц клетками МФС.

В норме, при нормальных показателях иммунореактивности организма, вирус поглощается МФС и уничтожается. Нарушение иммунных реакций сопровождается повреждениями циркулирующими иммунными комплексам сосудистых стенок, повышением проницаемости сосудистых структур и развитием специфических геморрагических диатезов с активной плазмореей (пропотеванием плазмы) в тканевые структуры.

Также происходит активное повреждение инфицированных вирусными частицами клеток клеточными иммунными факторами (цитотоксические лимфоциты, киллерные клетки, противовоспалительные цитокины и т.д.).
висцеральных повреждений и обменных нарушений – данная стадия соответствует олигурическим стадиям заболевания. В результате развития геморрагических, дистрофических и некротических повреждений тканей гипофиза, надпочечников, почек и т.д. отмечается развитие ДВС, снижение СКФ, нарушение процессов реабсорбции в канальцевых структурах.

Также развивается олигурия, азотемия, протеинурия, тяжелые нарушения кислотно-щелочного равновесия, нарушение водно-электролитного состава крови, острые почечные дисфункции и т.д.

анатомической репарации – на данной стадии ГЛПС отмечается образование стойкой пожизненной иммунной защиты, а также восстановления полноценного функционирования почек.

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом – симптомы

Заболевание отличается четко выраженной цикличностью. Степень тяжести заболевания может значительно варьировать (от легких лихорадочных форм до тяжелейших геморрагических вариантов, сопровождающихся развитием стойких почечных дисфункций).

В течение заболевания выделяют начальные (лихорадочные), олигурические, полиурические и реконвалесцентные периоды.

В некоторых случаях может регистрироваться продромальная симптоматика, сопровождающаяся жалобами на недомогание, познабливание, повышенную утомляемость, субфебрильную температуру.

Данные симптомы могут регистрироваться в течение от одного до трех дней.

Также может отмечаться появление диареи (до пяти раз в сутки) или запора.

Специфическим проявлением является стойкая гиперемия (покраснение) на лице, шее и груди (ее верхней части).

Также может отмечаться гиперемия конъюнктивы и слизистой зева, появление геморрагических элементов на слизистых, выстилающих мягкое небо.

Часто отмечается умеренная брадиаритмия.

Часто отмечается появление незначительных носовых кровотечений, рвоты, болей в поясничной области, абдоминальных болей.

При тяжелом течении заболевания, на фоне поражения нервной системы может отмечаться симптоматика менингизма (резкие головные боли, появление менингеальных знаков, рвота, светобоязнь и т.д.).

Олигурическая стадия начинается с третьего-шестого дня заболевания и длится до восьмого-четырнадцатого дня болезни. После стихания лихорадки состояния пациента, как правило, ухудшается.

Отмечается увеличение интенсивности интоксикационной симптоматики, снижение количества суточной мочи, появление резкой слабости, выраженных геморрагических синдромов (появление массивных кровоизлияний в склеры, развитие носовых кровотечений, кровотечений из ЖКТ, маточных кровотечений и т.д.).

При развитии кровоизлияний в органы (поражение гипофиза, надпочечников и т.д.) возможен летальный исход.

Также отмечается выраженная бледность кожи, одутловатость лица, отек век, снижение давление (а затем развитие гипертензии), снижение частоты сердечных сокращений.

На стадии полиурической симптоматики (начинается с девятого-тринадцатого дня болезни) отмечается увеличение объема суточной мочи (до пяти литров в сутки). Прекращается рвота, снижается интенсивность интоксикационной симптоматики и т.д.

Однако на фоне увеличенного объема диуреза может развиться азотемия, дегидратация, гипонатриемия и гипокалиемия.

На стадии реконвалесцентного периода отмечается восстановление функции почек и значительное улучшение состояния пациента.

Длительность нормализации функционирования почек может занимать от трех недель до трех лет и зависит от тяжести перенесенного инфекционного процесса и адекватности терапии.

Осложнения заболевания

Осложнения специфических характеров могут проявляться:

инфекционно-токсическими шоками,
диссеминированным внутрисосудистым свертыванием крови,
азотемической уремией,
отеком легких,
кровоизлияниями во внутренние органы,
развитием эклампсий,
профузными кровотечениями,
разрывами почечных капсул,
инфекционными миокардитами и т.д.

Осложнения неспецифического характера могут проявляться развитием пиелонефритов, восходящих пиелитов, гнойных отитов, различных абсцессов и флегмон, септических осложнений и т.д.

Геморрагическая лихорадка – диагностика заболевания

Диагностика основывается на данных эпид. анамнеза (проф. деятельность из групп риска, проживание в эндемичных очагах и т.д.), выявлении специфической цикличности симптомов.

Для специфической диагностики используют реакцию РНИФ, ИФА, ПЦР.

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом – лечение

На все время заболевания назначается строгий постельный режим.

Питание должно быть полноценным и обогащенным витаминами. В стадии олигурической симптоматики исключают продукты, содержащие большое количество калия, а на стадии полиурической симптоматики наоборот увеличивают употребление калия.

Питьевой режим подбирают согласно количеству выделяемой жидкости.

Лекарственная терапия зависит от стадии заболевания.

Рекомендовано использование рибавирина, йодофеназона, тилорона, донорских иммуноглобулинов, виферона и т.д.

На стадии олигурии показано промывание желудка и очистительные клизмы (для снижения интенсивности уремической интоксикации).

По показаниям проводят гемодиализ.

На стадии полиурических проявлений применяют препараты для восстановления электролитного баланса, витамины, общеукрепляющую терапию, препараты уросептиков.

Дополнительно показано симптоматическое лечение (нормализация артериального давления, обезболивание и т.д.).

[youtube.player]

Читайте также: