Маркер острого инфекционного процесса

Инфекционный процесс( далее- ИП) представляет собой сложное общепатологическое явление, имеющее длительную эволюционную историю. ИП возникает вследствие взаимодействия макро- и микроорганизмов, каждый из которых имеет свои закономерности развития и адаптации.

Этиология ИП. Инфекционный процесс может возникать в организме при попадании в него патогенных грибов, вирусов, бактерий и простейших а также гельминтов и насекомых. Возникновение ИП и его развитие зависят от свойств микроорганизма, таких как патогенность, вирулентность, адгезивность и инвазивность.

Патогенность –способность микроорганизма вызывать повреждения в макроорганизме. В зависимости от степени патогенности микроорганизмы разделяются на патогенные, условно-патогенные и непатогенные.

Вирулентность –степень патогенности, определяемая инфицирующей дозой. Вирулентность микроорганизма может меняться в зависимости от условий пребывания в среде.

Адгезивность и инвазивность определяют способность микроорганизма преодолевать защитные барьеры макроорганизма.

В возникновении и развитии ИП важна и роль макроорганизма, его реактивность –видовая, возрастная, половая, конституциональная. Наряду со свойствами макро-и микроорганизма, в этиологии ИП важны и условия их существования. Такие параметры внешней среды, как температура, влажность, загрязнения среды химическими соединениями, освещенность сильно меняют основные свойства патогенных микроорганизмов и восприимчивость к ним макроорганизма.

Классификация ИП. Инфекционные заболевания разделяют на антропонозы –заболевания, развивающиеся только у людей( примеры – брюшной ИФ, холера, оспа) и антропозоонозы – заболевания, вызываемые у человека и животных( примеры – чума, бешенство, сальмонеллезы, сибирская язва). В зависимости от происхождения инфекционного агента выделяют экзогенные и эндогенные инфекции. В зависимости от пути заражения различают инфекции оральные( кишечные), воздушно-капельные(инфекции верхних дыхательных путей), трасмиссионные( передающиеся через кровь), инфекции наружных покровов. В зависимости от поражения того или иного органа или системы различают кожные инфекции( дерматиты, рожа), инфекции дыхательных путей( пневмонии), пищеварительного тракта( дизентерия, холера),крови( малярия). Тяжесть клинических проявлений отражается в классификации инфекций на молниеносные, острые и хронические.

Патогенез инфекционного заболевания. Любой ИП имеет возбудителя и ворота инфицирования, где происходят местные изменения. В области проникновения возбудителя первичные нарушения( первичный аффект) наблюдаются в виде воспаления, отека, кровоизлияний и тромбоза. Здесь происходит подавление иммунных реакций,гибель лейкоцитов, выделение эндо- и экзотоксинов. Из области первичного аффекта начинается распространение возбудителя и его токсинов по лимфатической системе в регионарные лимфатические узлы. В них происходит воспаление в виде лимфангита и лимфаденита. В совокупности, первичный аффект, лимфангит и лимфаденит составляют первичный инфекционный комплекс.

Далее возбудитель распространяется по всему организму с преимущественным поражением органа-мишени или системы. Пути распространения могут быть различными –они впервые были изучены еще Р.Вирховым в середине 19 века. Это гематогенный путь( через кровь распространяются малярия, сыпной тиф), лимфогенный( кишечные инфекции – сальмонеллез, дизентерия, холера), периневральный( бешенство, полиомиелит, столбняк),контактный( от соприкосновения инфицированной ткани с другой( аппендицит, перитонит).

Развитие ИП сопровождают и другие общепатологические явления, определяющие течение и исходы инфекционной болезни. Это такие явления, как стресс, лихорадка, аллергия и иммунодефицит, интоксикация и гипоксия,обменные нарушения.Течение ИП нарушает работу основных систем организма.Расстройства деятельности ЦНС во многом зависят от типа инфекции, однако общей чертой является угроза развития токсико-инфекционного шока и даже комы. Наиболее характерны расстройства ВНД( высшей нервной деятельности) –апатия, ослабление памяти, гипокинезия( снижение подвижности).

Функция сердечно-сосудистой системы подвергается напряжению под действием лихорадки, гормональных нарушений, обезвоживания организма. Чаще это отмечается в виде тахикардии, гипертензии, мозговой гипоксии.

Внешнее дыхание при ИП подвергается токсическим и аллергическим воздействиям, что приводит к легочной недостаточности и легочной гипоксии.

Патология крови проявляется в угнетении гемопоэза, анемии, тромбозов и геморрагий. Органы пищеварения подвергаются значительному нарушению функций вследствие интоксикации и дегидратации( потери воды). При ИП, как правило, отмечается недостаточность поджелудочной железы и печени. Результатом этих нарушений служит диарея,активизация внутрикишечной микрофлоры, усугубляющей течение первичного ИП.

Анти-инфекционные адаптационные реакции.Весь инфекционный процесс представляят собой борьбу макро- и микроорганизма. Сущность этой борьбы состоит в том, что макроорганизм использует ресурсы анти-инфекционной защиты, а жизнедеятельность микроорганизма направлена на их преодоление. Исход этого взаимодействия зависит от адаптационных ресурсов каждой из этих систем.

Существует две группы анти-инфекционных механизмов у макроорганизма:неспеци-

фические и специфические. Неспецифические включают такие, как биологически активные вещества лизоцим, бета-лизины,интерферон, фибронектин, естественные иммуноглобулины, связывающие и инактивирующие микроорганизмы. Кроме того, существуют и системные защитные реакции неспецифического характера, такие как кашель, чихание, рвота,которые обеспечивают удаление инфекционных агентов из организма.Эти возможности организм реализует против любой инфекции вне зависимости от ее специфики. Помимо этого, к неспецифическим иммунным механизмам относится и фагоцитоз.

Кроме того, адаптационные неспецифические процессы дополняются типовыми общепатологическими реакциями –воспалением, лихорадкой и общим адаптационным синдромом(стрессом).

Специфические анти-инфекционные процессы направлены против определенных микроорганизмов.Они включают гуморальные факторы и клеточные реакции. При попадании инфекционного агента в тело в иммунной системе происходит распознавание возбудителя и выработка на него специфических иммуноглобулинов( гуморальный иммунитет) и активация клеточных реакций Т-лимфоцитов. Однако существует большая вариабельность специфической иммунной реактивности у разных людей, определяемая наследственностью( первичный иммунодефицит) или приобретенными нарушениями иммунореактивности(вторичный иммунодефицит).

Периоды развития инфекционного процесса. 1). С момента внедрения микроорганизма начинается инкубационный(латентный) период. Продолжительность этого периода составляет 1-3 недели. В этот период микроорганизм адаптируется к жизни в теле хозяина. При этом он может изменяться, приобретая новые свойства. Со своей стороны, макроорганизм мобилизует защитные резервы для противодействия.

2).На смену этому периоду приходит следующий –продромальный период –появление первых клинических признаков заболевания. Он обычно продолжается 2-3 дня. В это время отмечается недомогание, расстройство сна, головная боль, снижение аппетита, озноб и подъем температуры. В это время продолжают действовать адаптационные резервы макроорганизма.

3. Следующий период –манифестации, или основных проявлений болезни. В этот период появляются определенные симптомы и синдромы болезни. Продолжительность этого периода сильно варьирует от нескольких дней до нескольких недель и месяцев. Наступление этого периода свидетельствует о неэффективности адаптационных процессов макроорганизма. Исход болезни в этот период зависит от начального уровня адаптационных резервов человека. При существенном дефиците анти-инфекционной защиты и наличии осложнений на высоте инфекционного процесса больной может погибнуть.

4.Благоприятное течение ИП завершается периодом выздоровления( далее-В), когда исчезают основные проявления болезни и происходит нормализация общего состояния организма. Сущность В состоит в уничтожении возбудителя заболевания и восстанов-лении нарушенного обмена веществ, структуры и функции органов и систем.

Выздоровление никогда не бывает возвратом к исходному состоянию, после выздоровления организм приобретает новые свойства. Различают полное и неполное В. При полном В нормализуются все ранее нарушенные функции и структуры органов, т.е. организм восстанавливает здоровье. При неполном В сохраняются остаточные явления, снижающие адаптационные возможности организма. К примеру,инфекционное заболевание может приводить к сердечно-сосудистым заболеваниям, параличам, даже утрате органа или его части.

Еще один исход ИП – переход в хроническую форму. Принято считать, что это зависит от характера взаимодействия макро-и и микроорганизма, когда устанавливается неустойчивое равновесие.

Осложнения инфекционного процесса. Сепсис. Осложнения ИП( далее-О) возникают в любом из его периодов. В зависимости от времени развития О бывают ранние и поздние. Кроме того, в учении об инфекциях принято различать специфические и неспецифические О. Специфические О возникают в результате действия того же возбудителя, который вызвал заболевание. Пример –осложнением вирусного гепатита может быть печеночная недостаточность. Неспецифические О возникают как результат ослабления или истощения анти-инфекционных резервов и подключения вторичных инфекций.

Особой, тяжелой формой ИП является сепсис. Это генерализованный инфекционный процесс, возникающий самостоятельно или как осложнение основного заболевания. При сепсисе отмечаются общие и местные нарушения. Местные имеют характер очага гнойного воспаления. Общие нарушения проявляются в виде дистрофии, некроза в паренхиматозных органах, воспаления и гиперплазии в кроветворной и лимфоидной тканях, анемии и геморрагического синдрома.

Развитие сепсиса( далее –С) связано с проникновением возбудителя в кровоток( бактериемия) и нарушением реакции макроорганизма на него. В настоящее время считается, что прорыв инфекции из первичного септического очага в кровоток связан с недостаочностью иммунной защиты организма. Этот иммунодефицит реализуется в виде ослабления фагоцитарной функции, нарушении синтеза иммуноглобулинов, активации аллергических реакций и, наконец, повреждении проницаемости стенок микрососудов.

Отличительной особенностью С является то, что первичный септический очаг становится лишь пусковым фактором, а сам процесс генерализации инфекции развивается по своим, другим законам.

Наиболее типичные симптомы С – нарушение активности ЦНС – головная боль, бессонница, судорожные состояния, даже бред и галлюцинации. Увеличиваются печень и селезенка, появляются тошнота и рвота, изнуряющий понос. Состояние пациентов сильно усугубляется в случае, если возникает бактериальный шок вследствие нарушения жизненно-важных функций – ВНД, кровообращения, внешнего дыхания и выделения.

Принципы терапии сепсиса. Такое тяжелое состояние требует активных и незамедли-тельных мер. Они направлены на нахождение и удаление первичного септического очага, применение активной антибиотикотерапии, инактивации токсического действия возбудителя, стимуляции защитных сил организма, стабилизации жизненно-важных функций.

2.Характерные свойства микроорганизмов, способствующие развитию ИП

3.Роль макроорганизма в ИП

6.Адаптационные реакции организма при ИП

7.Периоды развития ИП

8.Сепсис –основные характеристики

9.Терапия инфекционных заболеваний и сепсиса

Полезная информация для каждого

Пресепсин (sCD14-ST) - укороченный sCD14.
В 2005 г. в крови септических пациентов была обнаружена ранее неизвестная форма sCD14. Было показано, что при бактериальной инфекции в составе комплекса sCD14–ЛПС–ЛСБ под действием циркулирующей протеазы от sCD14 отщепляется пептидный фрагмент. В результате образуется укороченная форма sCD14 из 64 аминокислотных остатков, первоначально названная субтипом sCD14 (subtype sCD14-ST) и затем переименованная в пресепсин. Пресепсин (ПСП) – это белок с молекулярной массой 13 кДа, содержащий N-терминальный фрагмент CD14 и не содержащий С-терминальный участок, ответственный за связывание с ЛПС. Неожиданно было обнаружено, что у кроликов с индуцированным сепсисом и у септических пациентов уровни ПСП резко повышены, что указывало на перспективность ПСП как маркера сепсиса.

Механизм образования ПСП.
Специальные эксперименты показали, что воспаление, индуцированное у кроликов с помощью препаратов ЛПС, не содержащих бактерий, не сопровождалось повышением уровня ПСП в крови, а сепсис, вызваный перевязкой и пункцией слепой кишки (cecal ligation and puncture – CLP) и инфицированием жизнеспособными бактериями, вызывал существенный рост концентрации ПСП (рис.1). Это привело к пониманию того, что для образования ПСП лейкоцитами одного лишь действия эндотоксина недостаточно, необходима активация фагоцитоза. Дальнейшие исследования показали, что факторы, стимулирующие фагоцитоз, активируют и образование ПСП, а ингибирующие факторы, напротив, подавляют его образование. Таким образом – ПСП – это гуморальный фактор, специфичный для фагоцитоза.

Актуальность ранней и точной диагностики сепсиса.

Каждый год в мире регистрируется 18 миллионов случаев сепсиса, 30% из них закачиваются летальным исходом. Надежды, что с развитием санитарно-гигиенических мер динамика сепсиса пойдет вниз, оказались тщетными. Только в США с 1979 по 2000 гг. среди 750 млн. случаев госпитализации зарегистрировано 10 319 418 случаев сепсиса. Ежегодный прирост частоты сепсиса — 8,7%, от 164 000 в 1979 г. (82,7 на 100 000 человек) до 660 000 в 2000 г. (240,4 на 100 000 человек). 50% летальных исходов в американских отделениях интенсивной терапии происходят именно из-за сепсиса (2). Одна из основных причин этой удручающей картины – трудности своевременной и точной постановки диагноза сепсиса.

Пресепсин достаточно высокоэффективный маркер сепсиса, что подтверждается следующими случаями:
Наблюдалось 140 септических пациентов, поступивших в отделение неотложной терапии (ОНТ), контрольная группа включала 119 здоровых лиц. Уровень ПСП и ПКТ определяли при поступлении, через 24 и 72 ч. Для оценки тяжести сепсиса фиксировались 30-дневная летальность, необходимость интенсивной терапии, искусственной вентиляции легких (ИВЛ), диализа. Среднее значение ПСП (пг/мл) составило: в контрольной группе — 159 (148-171), у пациентов — 2563 (1458-3669). В течение 72 ч у пациентов с будущими неблагоприятными исходами уровни ПСП возрастали, а у пациентов, у которых таких исходов не было – снижались.
Уровень ПСП, соответствующий 99-й процентили, не зависел от пола и возраста и составил 320 (238-335) пг/мл. Значения ROС AUC (receiver operating characteristics curve) при оценке тяжести сепсиса составляли: для ПСП — 0,71 (0,62-0,78), для ПКТ — 0,64 (0,55-0,72). Дискриминирующая способность ПСП по отношению к нетяжелому сепсису (n=85), тяжелому сепсису или септическому шоку
(n=55) хорошо соответствовала значениям шкалы APACHE II и оказалась выше таковой для ПКТ (APACHE II — Acute Physiology And Chronic Health Evaluation шкала оценки острых и хронических функциональных изменений). 30-дневная летальность при нетяжелом сепсисе составила 3,5%, при тяжелом – 25%, при септическом шоке — 67%. Она возрастала от 2,7% в первой квартили ПСП до 39,4% в четвертой (табл. 1)

Весьма интересным оказался следующий клинический случай. Пациент Н., возраст 51 год, поступил с обширными ожогами (76% поверхности тела). При поступлении отмечался лейкоцитоз — 38880/мкл, гемокультура отрицательная, уровни ПСП и ПКТ — ниже пограничных (281 пг/мл и 0,98 нг/мл соответственно). Был поставлен диагноз ССВО.

При развитии грамположительного сепсиса ПСП начинает повышаться на 6-й день, а ПКТ – лишь на 14-ый.

Научный обзор пресепсина.

Научный обзор, посвященный пресепсину (ПСП) — новому и весьма перспективному маркеру сепсиса. Рассматриваются патофизиологический механизм образования пресепсина при активации макрофагов и при фагоцитозе и связь уровней ПСП с тяжестью сепсиса. Основная цепь событий, ведущих к синтезу ПСП, такова;
а) мембранный рецептор моноцитов / макрофагов mCD14 после связывания с эндотоксинами активирует провоспалительный ответ и затем,
б) отщепляется от макрофагов и в растворимой форме (как sCD14) выходит в циркуляцию,
в) после активации фагоцитоза лизосомальные протеиназы расщепляют sCD14 с образованием фрагмента sCD14-ST, который получил название пресепсин.
Многочисленные исследования показывают, что ПСП является специфическим маркером сепсиса и быстро повышается в ответ на повышение его тяжести. При воспалительных процессах, не связанных с фагоцитозом, ПСП не повышается. Поскольку ПСП – это гуморальный фактор, выделяемый фагоцитами при фагоцитозе, его использование весьма перспективно не только для диагностики и мониторинга сепсиса, но и для научных исследований, включающих выявление факторов, стимулирующих или ингибирующих фагоцитоз при различных патологиях, а также для поиска (скрининга) препаратов, влияющих на фагоцитоз.

Лабораторная диагностика сепсиса: успехи и проблемы.

ССВО (синдром системного воспалительного ответа) диагностируется при наличии 2-х или более признаков из 4-х:

· 1) лейкоцитоз >12000 или 10%;

· 2) частота сердечныхсокращений > 90 в мин;

· 3) частота дыхания > 20 в мин;

· 4) температура тела >38°или ПРОКАЛЬЦИТОНИН

Больные пневмогенным сепсисом (2)

Больные абдоминальным сепсисом (3)

ПКТ при поступлении

ПКТ у всех больных

ПКТ при поступлении у больных ВП, пневмогенным, абдоминальным сепсисом и другими воспалительными заболеваниями не различался.
ПКТ через 5 и более дней после поступления у больных ВП составил 0,2 ± 0,04; n = 9, что было ниже, чем у больных с другими воспалительными заболеваниями — 3,4 ± 1,43; n = 9 (р прокальцитонин -> кальцитонин). Кроме этой, другой биологической функции он не имеет и норме в крови не практически не обнаруживается.
ПКТ при воспалительных процессах – маркер сепсиса. Если суммировать результаты многочисленных исследований, то текущая картина такова: при воспалительном процессе, вызванном бактериальными и грибковыми инфекциями, а также простейшими, уровень ПКТ в крови возрастает в течение 6-12 часов. При этом концентрация кальцитонина не повышается, то есть в данном случае ПКТ
прогормоном кальцитонина не является.

Существенно, что при инфекции:

КЛИНИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ ПРОКАЛЬЦИТОНИНА

Определение уровней РСТ в сыворотке и плазме крови по данным разных авторов может быть полезным в следующих ситуациях :

• В качестведиагностики сепсиса, септического шока и тяжелых бактериальных инфекций. Для дифференциального диагноза инфекционной и неинфекционной этиологии лихорадки неясного генеза.
• Для мониторинга состояния больных с сепсисом, шоком; оценки эффективности проводимого лечения; оценки прогноза для данного больного.
• PCT подходит для ранней диагностики инфекционных осложнений :
1. Хирургических пациентов
2. Пациентов интенсивной терапии
3. Реципиентов после пересадки
4. Пациентов на искусственной вентиляции
5. Пациенты с иммуносуперссией
6. Пациенты с нейтропенией
7. Пациенты с заболеваниями неясного генеза
• PCT можно ииспользовать для дифференциального диагноза:
1. Инфекционной и неинфекционной этиологии (например. ОРДСВ, острого панкреатита)
2. Бактериальных и вирусных инфекционных заболеваний (например острого менингита, сепсиса новорожденных)
3. Острых бактериальных инфекций и хронических воспалительных процессов например аутоиммунных заболеваний
4. Реакций против трансплантанта и инфекционных осложнений бактериальной и грибковой природы
• Уровни РСТ повышаются также при тяжелой пневмонии, перитоните, бактериальном менингите.
• Кроме того, уровни РСТ могут повышаться при малярии, мелиодозе, системных грибковых инфекциях.

Прокальцитонин был впервые описан в 1984 году как белок, состоящий из 116 аминокислот и имеющий молекулярную массу 14.5 кDa. Первоначально РСТ привлек внимание исследователей в качестве возможного маркера злокачественных новообразований. Bohuon с соавторами в институте G. Roussy изучали кальцитонин как маркер медуллярного рака щитовидной железы и параллельно начали изучать информативность предшественников кальцитонина, для чего были получены моноклональные антитела к РСТ и разработан радиоиммунометрический тест для определения его концентрации. Эта же группа исследователей выявила, что концентрации прокальцитонина повышены у больных с мелко-клеточной карциномой легкого, что свидетельствовало о том, что РСТ вырабатывается не только в щитовидной железе.
С начала 1990-х к прокальцитонину приковано внимание исследователей, которые пытаются выяснить – является ли он специфическим маркером инфекции. Впервые данные о повышении концентрации РСТ в крови при воспалении были получены группой французских военных врачей (Dr. Carsin и др.), которые изучали маркеры острого повреждения легкого, у больных с обширными ожогами. В качестве потенциально полезного маркера в исследовании также изучался РСТ и было выявлено, что концентрации его были во многих случаях значимо повышены и часто были во много раз выше, чем концентрации при новообразованиях. Ретроспективный анализ выявил, что у больных с наиболее высокими уровнями РСТ в крови, развились инфекционные осложнения, в том числе сепсис и септический шок. Такие результаты впервые позволили установить взаимосвязь между уровнем РСТ в крови и наличием системного воспаления.
Следующим было исследование уровней РСТ в крови у детей с менингитом. Было обнаружено, что уровень РСТ заметно повышен у детей с бактериальным, а не вирусным менингитом, после чего данные были опубликованы. В дальнейшем большое количество исследователей в разных странах изучали роль прокальцитонина в качестве маркера тяжелой инфекции, а также как медиатора системного воспаления.
Первоначально, РСТ мог быть получен только в небольших количествах путем сложного синтетического процесса. В настоящее время на материале E. Coli получен рекомбинантный РСТ, разработаны чувствительные и специфичные методы измерения концентрации РСТ.

ФУНКЦИИ ПРОКАЛЬЦИТОНИНА В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ

В нормальной физиологии, единственная роль, установленная для PCT – это роль предшественника кальцитонина. Кальцитонин, как известно, регулирует метаболизм костей и кальция, а также ингибирует резорбцию кости остеокластами. Ранее предполагали, что кальцитонин (CT), названный так за гипокалиемический эффект, имеет исключительно тиреоидное происхождение и играет важную роль в скелетном гомеостазе. Однако было выявлено, что при тиреоидектомии у людей не происходит никаких значительных патологических последствий в отношении гомеостаза кальция, и плотность костей в большинстве случаев остается прежней. Таким образом, физиологические функции зрелого CT у человека пока еще остаются неизвестными, не были также до сих пор определены нарушения, которые возникают в организме при избытке или дефиците зрелого кальцитонина.

По традиционным представлениям в эндокринологии, предшественники кальцитонина вырабатываются главным образом в нейроэндокринных C-клетках щитовидной железы. В отсутствие инфекции, экстратиреоидная транскрипция CALC-I гена подавлена и огранивается селективной экспрессией в нейроэндокринных клетках, обнаруживаемых главным образом в щитовидной железе и легком. В этих нейроэндокринных клетках синтезируется зрелый гормон и запасается в секреторных гранулах.
При тяжелой системной инфекции, прокальцитонин продуцируется тканями вне щитовидной железы. Это подтверждается тем, что у пациентов, которые предварительно подверглись тотальной тиреоидектомии все равно, продуцируются высокие уровни прокальцитонина в течение тяжелой инфекции. Кроме тканей щитовидной железы РСТ продуцируется атипичными клетками мелкоклеточной карциномы легкого.
Кальцитонин и родственные пептиды обнаруживаются у человека в нейроэндокринных клетках легкого. Было выявлено, что м-РНК прокальцитонина экспрессируется у человека в мононуклеарах периферической крови, а липополисахарид оказывает на эту экспрессию заметный стимулирующий эффект. Моноциты, выделенные из крови больных с септическим шоком показывали более высокий базальный уровень и увеличение содержания РСТ в ответ на стимуляцию липополисахаридом. Примерно треть нестимулированных лимфоцитов содержат иммунологически демонстрируемые количества РСТ, однако в данном случае было отмечено лишь незначительное индуцирование синтеза бактериальным липополисахаридом. В других исследованиях периферические мононуклеары крови не демонстрировали выработки РСТ в ответ на стимуляцию липополисахаридом. Причины таких расхождений пока не известны. Инкубация срезов человеческой печени с интерлейкином-6 и фактором некроза опухоли альфа демонстрировали увеличение концентрации РСТ более чем в 2 раза, в то время, как концентрации протеина сывороточного амилоида А (SAA) и С-реактивного протеина (CRP) увеличивались лишь умеренно и только в ответ на стимуляцию ФНО-?. Возможно также острофазовое происхождение в печени.
Некоторые авторы считают, что микробная инфекция стимулирует повсеместное увеличение экспрессии CALC-I гена и индукцию CTпр во всех тканях и типах клеток организма. Таким образом, при септических состояниях весь организм может рассматриваться как эндокринная железа. Установлено, что транскрипционная экспрессия CT-мРНК более стабильно индуцируется при сепсисе, чем м-РНК классических цитокинов (например. TNF-a и IL-6). Наибольшая индукция СТпр м-РНК и выделение CTпр пептидов происходит в паренхиматозных клетках, а не в циркулирующих клетках, что возможно указывает скорее на тканевые механизмы защиты, чем на лейкоцитарные, поэтому была предложена гипотеза, что продукты CALC-генов являются прототипами гормокиновых медиаторов и могут индуцироваться как классической гормональной экспрессией так и, альтернативно, путем цитокино-подобной экспрессии. Продукция гормокинов индуцируется неизвестными пока еще факторами и может быть вызвана как непосредственно воздействием микробных токсинов так и косвенно, через гуморальный или клеточный ответ хозяина. При сепсисе, Спр являются продуктом физиологичного синтеза, а доминирование CTпр по отношению к зрелому CT является следствием преобладания клеток, испытывающих недостаток секреторных гранул и следовательно требующих значительной ферментной обработки. Следовательно, как и большинство цитокинов, СТпр накапливаются внутриклеточно лишь в очень небольшом количестве при сепсисе.
Weglohner и др. исследовали первичную структуру сывороточного PCT у пациентов с сепсисом. Были собраны сыворотки, содержащие высокие концентрации PCT (> 100 ng/ml) от 22 пациентов с тяжелым сепсисом и были объединены для дальнейшей очистки. Объединенный PCT был очищен на CT 21-иммуноаффинной колонке, затем очищен обратной фазой HPLC, и полученный чистый PCT был обработан эндопротеиназой Asp-N. Отщепление N-терминала показало, что первые две аминокислоты (Ala-Pro) в изучаемом пропептиде отсутствовали. Было продемонстрировано, что PCT в сыворотке пациентов с сепсисом является пептидом, состоящим только из 114 аминокислот, вместо 116 аминокислот, что связано с недостатоком в N-терминале дипептида Ala-Pro.
Также как и у людей, у хомяков при сепсисе увеличиваются уровни CTпр. В исследовании Nylen с соавт. сепсис индуцировался у хомяков внутрибрюшинным введением шариков, содержащих 5 x l08 кфе Escherichia coli. Во время внедрения шарика, животным вводилось также 3 мг человеческого РСТ или эквивалентный объем альбумина сыворотки. Они наблюдались в течение 72 часов. При этом исследовалась смертность в качестве первичного показателя исхода. В результате, у контрольных животных с перитонитом и получивших альбумин смертность через 48 часов составила 50 %, а смертность к 72 часам — 56 %. У экспериментальных животных с перитонитом, которым ввели РСТ смертность через 48 часов составила 87 % (p

Первая частная лаборатория, выполняющая полный спектр микробиологических исследований на территории Перми и Пермского края. Лаборатория оснащена современным оборудованием, персонал лаборатории – врачи и лаборанты высшей квалификационной категории, что позволяет нам гарантировать высокий уровень и качество выполнения анализов.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.

ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.

Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.

Спецпредложения, скидки и акции помогут существенно сэкономить на медицинском обследовании.

Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
   • IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
   • IgG к ВИЧ;
   • Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
   • Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
   • Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
   • Ig M и IgG к токсоплазмозу;
   • Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
   • IgG к паразитарным заболеваниям;
   • Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
   • IgG к хеликобактерной инфекции.
2. Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
3. Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
4. Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

• IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
• IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
• IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
• IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

Информативность ИФА делает этот анализ важным инструментом в работе многих медицинских центров. Но можно ли доверять такую диагностику государственным лабораториям или лучше самим выбрать, где провести такое исследование?