Антитела в диагностике инфекционных заболеваний

1) выявление антител в сыворотке больного с помощью стандартных антигенов-диагностикумов (для серологической диагностики инфекционных болезней);

2) для выявления неизвестных антигенов по известным стандартным сывороткам, содержащим антитела определенной специфичности (для серологической идентификации возбудителей).

Например, если сыворотка больного реагирует с конкретным микробным антигеном – значит в сыворотке больного есть антитела против данного микроорганизма.

Серологическая диагностика – берут стандартный антиген (диагностикум), представляющий собой инактивированные или живые бактерии, вирусы или же их антигены (компоненты) в изотоническом растворе.

Серологическая идентификация – используют стандартные иммунные сыворотки, которые получают от иммунизированных животных (в крови животных в результате многократной иммунизации возбудителем появляется большое количество антител).

Агглютинация.

Агглютинация – серологическая реакция между антителами (агглютининами) и антигенами (агглютининогенами), размещенными на поверхности бактериальной клетки, а в результате образуется комплекс антиген-антитело (агглютинат).

Механизм агглютинации – под влиянием ионов электролита уменьшается негативный поверхностный заряд бактериальной клетки и следовательно они могут сблизиться на такое расстояние при котором возникает склеивание бактерий.

Макро- и микроскопический вид агглютината:

1) О-агглютинация (соматическая) – мелкозернистая, при микроскопии – бактерии склеиваются полюсами клеток, образуя сеть.

2) Vi-агглютинация (капсульная) – мелкозернистая, при микроскопии - склеивание бактерий происходит всей поверхностью клетки.

3) Н-агглютинация (жгутиковая) – агглютинины взаимодействуют с жгутиками обездвиживая бактерии, при микроскопии – крупнохлопчатая, склеивание бактериальных клеток в области жгутиков.

Реакция агглютинации используется для определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта, Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) других инфекционных болезнях, а также при определении возбудителя, выделенного от больного. Эту же реакцию применяют для определения групп крови с использованием моноклональных антител против аллоантигенов эритроцитов.

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная, непрямая и др.

Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации:к разведениям сыворотки крови больного добавляют взвесь убитых микробов (диагностикум)и через несколько часов инкубации при 37°С отмечают наибольше разведение (титр) сыворотки, при котором произошла агглютинация, т.е. образовался осадок.

Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител.

Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную реакцию агглютинации,применяя диагностические антитела, т.е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К 1 капле диагностической иммунной сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Если появляется хлопьевидный осадок, то реакцию проводят в пробирках с увеличивающимися разведениями диагностической сыворотки, добавлял в каждую дозу сыворотки 2—З капли взвеси возбудителя. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком к титру диагностической сыворотки. В контролях (сыворотка, разведенная изотоническим раствором хлорида натрия, или взвесь микробов в том же растворе) осадок в виде хлопьев должен отсутствовать.

Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыворотками,из которых удалены перекрестно реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии. Получение таким способом монорецепторных диагностических агглютинирующих сывороток было предложено А.Кастелляни (1902).
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА) основана на использовании эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гормона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительности к лекарственным препаратам и гормонам и в некоторых других случаях.
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. РТГА применяют для диагностики многих вирусных болезней, возбудители которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных.
Реакцию агглютинации для определения групп крови применяют для установления системы АВО с помощью РА эритроцитов, используя антитела к группам крови А(II), В(III). Контролем служит сыворотка, не содержащая антител, т.е. АВ(IV) группы крови, антигены, содержащиеся в эритроцитах групп А(II), В(III); отрицательный контроль не содержит антигенов, т.е. используют эритроциты группы 0 (I).
В реакции агглютинации для определения резус-фактора используют антирезусные сыворотки (не менее двух различных серий). При наличии на мембране исследуемых эритроцитов резус-антигена происходит агглютинация этих клеток. Контролем служат стандартные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты всех групп крови.

Реакцию агглютинации для определения антирезусных антител (непрямую реакцию Кумбса) применяют у больных при внутрисосудистом гемолизе. У некоторых таких больных обнаруживают антирезусные антитела, которые являются неполными. Они специфически взаимодействуют с резус-положительными эритроцитами, но не вызывают их агглютинации. Наличие таких неполных антител определяют в непрямой реакции Кумбса. Для этого в систему антирезусные антитела + резус-положительные эритроциты добавляют антиглобулиновую сыворотку (антитела против иммуноглобулинов человека), что вызывает агглютинацию эритроцитов. С помощью реакции Кумбса диагностируют: патологические состояния, связанные с внутрисосудистым лизисом эритроцитов иммунного генеза, например гемолитическую болезнь новорожденных: эритроциты резус-положительного плода соединяются с циркулирующими в крови неполными антителами к резус-фактору, которые перешли через плаценту от резус-отрицательной матери.

Реакция коагглютинации- разновидность РА: клетки возбудителя определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой. Стафилококки, содержащие белок А, имеющий сродство к иммуноглобулинам, неспецифически адсорбируют антимикробные антитела, которые затем взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами, выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба.

Схема постановки реакции агглютинации.

КС – контроль сыворотки; КД – контроль диагностикума

Титр сыворотки - наибольше разведение сыворотки, при котором произошло образование агглютината, т.е. образовался осадок. Фактически – это разведение сыворотки в последней пробирке, где произошло образование агглютината.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Антитела как показатель состояния иммунной системы

В организме человека присутствует пять классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgG, IgE, IgM. Они отличаются по массе, по составу, и, что самое главное, по свойствам.

IgE и IgD содержатся в сыворотке крови в малом количестве и не имеют диагностической ценности. Наиболее значимыми для анализа состояния иммунной системы и постановки диагноза являются IgM, IgA и IgG.

IgM — первый иммуноглобулин, который начинает вырабатывать организм в ответ на инфекцию. Он обладает высокой активностью, стимулирует различные звенья иммунитета. Составляет 10% от всех фракций иммуноглобулинов.

Примерно через пять суток после попадания антигена в организм начинает вырабатываться IgG (70–75% от всех иммуноглобулинов). Он обеспечивает основной иммунный ответ. Более половины всех выделяемых во время болезни иммуноглобулинов относятся именно к этому классу.

IgA в основном локализуется в слизистых оболочках дыхательных путей, желудка, кишечника и мочеполовой системы. То есть там, где болезнетворные микроорганизмы чаще всего проникают в наш организм. Этот класс иммуноглобулинов как бы связывает чужеродные вещества и не дает им прикрепиться к поверхности слизистых оболочек. Доля IgA 15–20% от всего числа присутствующих в организме иммуноглобулинов.

Концентрация антител к определенной инфекции помогает поставить диагноз, определить уровень иммунитета после вакцинации, выявить скрытые заболевания. Чаще всего анализы на антитела назначают при подозрении на такие заболевания (или для контроля их лечения), как:

• корь;
• гепатит;
• ветрянка (ветряная оспа);
• краснуха;
• гельминтоз;
• хеликобактер пилори;
• лямблиоз;
• вирус Эпштейна — Барр;
• полиомиелит;
• герпес.

Анализ на иммуноглобулины определенного класса могут также назначить также при:

• сепсисе;
• ревматоидном артрите;
• циррозе печени;
• онкологии;
• хронических гнойных отитах, менингитах, пневмониях, синуситах;
• нарушении работы иммунной системы;
• миеломной болезни;
• ВИЧ-инфекции.

При выявлении причин бесплодия могут назначить анализ на антитела к ХГЧ или на антиспермальные антитела. При беременности проводится исследование на антитела к резус-фактору.

Анализы на антитела к вирусам и другим инфекционным агентам проводятся исключительно по назначению врача.

Кровь на анализы на антитела сдается натощак. Забор биоматериала осуществляется из вены. Перед проведением исследования пациенту желательно избегать эмоциональных перегрузок, не заниматься тяжелой физической работой, не посещать спортзал и не принимать алкоголь.

Метод ИФА чувствителен даже к небольшому количеству иммуноглобулинов и обладает высокой специфичностью. Это значит, что результаты исследования будут достоверными и точными.

Обычно исследование занимает 1–2 рабочих дня. Некоторые лаборатории готовы выдать срочный результат уже через 2–3 часа, но стоимость будет примерно вдвое выше.

Правильно интерпретировать результаты анализа на иммуноглобулины может только врач. Он учитывает не только показатели в бланке исследования, но и состояние пациента, симптомы заболевания или их отсутствие, данные других исследований.

Каждая лаборатория использует свои тест-системы, потому результаты анализов, проведенных в разных диагностических центрах, могут отличаться. Указанные в статье границы являются ориентировочными.

Нормы общего IgA для детей:

• до 3 месяцев — от 0,01 до 0,34 г/л;
• от 3 месяцев до 1 года – от 0,08 до 0,91 г/л;
• от 1 года до 12 лет:
  • девочки: от 0,21 до 2,82 г/л;
  • мальчики: от 0,21 до 2,91 г/л;

• 12–60 лет — от 0,65 до 4,21 г/л;
• После 60 лет — от 0,69 до 5,17 г/л.

• 12–60 лет — от 0,63 до 4,84 г/л;
• после 60 лет — от 1,01 до 6,45 г/л.

Иммуноглобулин класса А повышается при хронических инфекциях, при муковисцидозе, при поражении печени. Также антитела этого типа могут активно вырабатываться при аутоиммунных болезнях. Снижение титра антител происходит при атопическом дерматите, некоторых заболеваниях крови и лимфатической системы. А также при нарушении синтеза белковых молекул и приеме некоторых лекарств.

Содержание IgM в сыворотке крови у новорожденных должно быть в пределах 0,06-0,21 г/л.

• старше 3 месяцев и до 1 года:
  • девочки: от 0,17 до 1,50 г/л;
  • мальчики: от 0,17 до 1,43 г/л;
• от 1 года до 12 лет:
  • девочки: от 0,47 до 2,40 г/л;
  • мальчики: от 0,41 до 1,83 г/л;

Для женщин: от 0,33 до 2,93 г/л.

Для мужчин: от 0,22 до 2,40 г/л.

IgM повышается при остром воспалении, пневмонии, синуситах, бронхите, болезнях кишечника и желудка. Выход концентрации за верхнюю границу нормы может говорить о поражении печени, паразитарных заболеваниях, а также о миеломной болезни. Понижение уровня IgM наблюдается при нарушениях синтеза белка или поражениях иммунной системы. Это может происходить после удаления селезенки, при большой потере белка, при лечении цитостатиками и другими препаратами, которые подавляют иммунитет, при лимфоме, а также при некоторых врожденных состояниях.

В отличие от предыдущих иммуноглобулинов, уровень IgG отличается у мужчин и женщин с самого рождения.

У представительниц женского пола его нормы составляют:

• до 1 месяца — от 3,91 до 17,37 г/л;
• от 1 месяца до 1 года — от 2,03 до 9,34 г/л;
• в 1–2 года — от 4,83 до 12,26 г/л;
• старше 2 лет — от 5,52 до 16,31 г/л.

У сильной половины человечества:

• до 1 месяца — от 3,97 до 17,65 г/л;
• от 1 месяца до 1 года — от 2,05 до 9,48 г/л;
• 1–2 года — от 4,75 до 12,10 г/л;
• старше 2 лет — от 5,40 до 16,31 г/л.

IgG может повыситься при хронических инфекциях, при аутоиммунных заболеваниях, при паразитарных заболеваниях, саркоидозе, муковисцидозе, при поражении печени, миеломе и гранулематозе.

Понижение уровня IgG может наблюдаться при онкологии кроветворной и лимфатической системы, при мышечной дистрофии и некоторых других заболеваниях.

При ВИЧ-инфекции уровень IgG может быть как крайне высоким, так и крайне низким, в зависимости от стадии заболевания и состояния иммунной системы.

С антителами к резус-фактору все немного проще. В норме их не должно быть. Если антитела обнаружены, значит, произошла иммунизация во время предыдущей беременности или при переливании донорской крови.

Аутоантитела в норме также должны отсутствовать. Их наличие говорит о развитии аутоиммунных заболеваний.

Существует огромное количество видов исследований на обнаружение антител. Например, комплексный анализ на TORCH-инфекции (токсоплазма, краснуха, цитомегаловирус, герпес), который необходимо сдавать при планировании беременности, будет стоить 2000–3000 рублей. Анализ на антитела к резус-фактору обойдется примерно в 450–600 рублей.

Анализ на антитела к определенным инфекциям стоит от 350 до 550 рублей. При этом стоит учитывать, что определение, например, IgG и IgM — это два разных исследования, каждое из которых нужно будет оплачивать отдельно.

Определение антиядерных (антинуклеарных) антител обойдется примерно в 500–750 рублей, антиспермальных — 700–1250 рублей, анализ на антитела к тиреоглобулину и тиреопероксидазе стоит примерно 400–550 рублей.

Нужно также заложить в расходы около 120–180 рублей за взятие крови.

Анализ крови для определения уровня иммуноглобулинов проводят многие лаборатории. Но как выбрать ту, где его проведут одновременно быстро, качественно и недорого?

Выбирая лабораторию, обратите внимание на перечень анализов. Чем больше этот список, тем более широкими возможностями для диагностики обладает лаборатория.

Еще один фактор — время, через которое вам обещают результат. Большинство лабораторий отводят на это исследование 2–3 дня, некоторые предоставляют услуги срочного анализа — 1 день.

При заборе крови обратите внимание на процедурный кабинет, его оснащение, используемые расходные материалы. Все должно быть стерильным: обычно прямо при вас медсестра протирает стол, подушечку и т.д. дезинфицирующим средством. Это гарантия вашей безопасности.

Еще один фактор — удобство. Не стоит ехать через весь город, чтобы сдать анализ на антитела на 20–30 рублей дешевле. За время дороги вы можете испытать физические или эмоциональные перегрузки, из-за которых результаты будут искажены.

Итак, выбирайте лабораторию или медицинский центр с современным медицинским оснащением, широким перечнем анализов, находящийся недалеко от вашего дома либо по пути на работу или учебу. Если эта лаборатория работает много лет и успела набрать определенный авторитет среди врачей и пациентов — это дополнительный плюс.

Анализ крови на выявление антител — высокоточный и информативный метод исследования. Его используют как для уточнения диагноза при определенных инфекциях, так и для определения общего состояния иммунной системы или выявления некоторых соматических заболеваний. Но интерпретировать результаты анализа должен врач с учетом всех клинических данных, возраста, пола и состояния пациента.

Под­го­тов­ка к ана­ли­зу на ан­ти­те­ла не от­ли­ча­ет­ся слож­ностью, но все же не­ко­то­рые пра­ви­ла со­блю­дать сто­ит: во-пер­вых, ис­клю­чи­те фи­зи­чес­кие на­груз­ки, в том чис­ле и фи­зио­те­ра­пию, за па­ру дней до ис­сле­до­ва­ния, во-вто­рых, воз­дер­жи­тесь от жир­ной, со­ле­ной и ост­рой пи­щи, ал­ко­го­ля и ко­фе. Если вы при­ни­ма­е­те ка­кие-ли­бо пре­па­ра­ты или не­дав­но пе­ре­нес­ли ка­кое-ли­бо за­бо­ле­ва­ние — со­об­щи­те об этом вра­чу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Кокорев B. C., Кржижановская О. А.

АВИДИТЕТ АНТИГЕНОВ И АНТИТЕЛ В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

B.C. Кокорев, O.A. Кржижановская

В формировании иммунитета при инфекционных заболеваниях одно из ведущих мест занимают антитела (как фактор специфической ответной реакции организма), обладающие не только количественной, но и функциональной характеристикой.

Сила иммунных сывороток, по теории Пауля Эрлиха, полностью соответствует и целиком зависит от количества содержащихся в них антител. Принципы количественного определения антител, как показателя активности иммунных сывороток, до сих пор применяются при приготовлении различного рода лечебных и профилактических сывороток, в различных диагностических и экспериментальных исследованиях. Этот факт отмечал в 1957 г. и В.Б. Фрейман [7] в своей работе, посвященной исследованию авидитета иммунных агглютинирующих противодизенте-рийных, антитоксических противодифтерийных и противостолбнячных сывороток. И вряд ли он мог предполагать, что указанные принципы останутся в сущности неизменными до конца XX века, во всяком случае, в научной и производственной деятельности подавляющего большинства микробиологов и вирусологов России. Между тем уже с 1900 г. целой плеядой известных исследователей, начиная с ученика и ближайшего сотрудника Л. Пас-тера - Э. Ру, отмечалось, что лечебную силу сывороток нельзя учитывать лишь по количеству содержания в них антител. В ряде случаев сыворотки с меньшим содержанием антител обладали большей лечебной силой, чем сыворотки с высоким их содержанием. Была предложена гипотеза о том, что разные сыворотки обладают различным сродством к токсину, в силу чего реакции между ними и токсином протекают с различной интенсивностью.

Именно эти исследования, вначале чисто эмпирические, выдвинули новый вопрос в учении об иммунитете, вопрос о качественной стороне реакции между антигеном и антителом, вопрос об авидитете. Еще П. Мюллером (1909) установлено, что эта реакция может происходить с различной быстротой, причем полнота и прочность образующегося комплекса также могут быть различными. Эти принципы реакции - скорость, полнота и прочность - характеризуют ее качественную сторону. В.А. Барыкин [2], разделяя точку Ж. Борде об адсорбционном характере соединения антигена и антитела, полагал вместе с тем, что течение и исход иммунной реакции зависят от прочности адсорбции, от возможных реакций замещения и от чисто химического взаимодействия между антигеном и антителом. Специфичность иммунологических реакций он считал примером избирательной адсорбции. Идея В.А. Барыкина, что антитела - это те же белки сыворотки, состояние которых изменилось под влиянием антигена, оказалась связанной с современными представлениями об антителе, как модифицированном глобулине. Авидитет алексина был изучен В.В. Фризе и Л.А. Зильбером [9], причем было обнаружено несовпадение авидитета с гемолитическим титром. Авидитет агглютининов исследовал П.И. Зарницын (1914), в реакции преципитации с синтетическими антигенами явление авидитета было продемонстрировано Д. Маррэком и Ф. Смитом (1932), М. Гейдельбергом и Ф. Кендел-лом (1937). По П.Мюллеру (1910), при иммунизации наряду с титром повышается и авидитет, причем снижение того и другого совершается одновременно. П.И. Зарницыным и В.В. Фризе (1920) эти данные не были под-

тверждены. Можно было утверждать, что между авидитетом и титром нет прямой пропорциональности, однако для отрицания всякой связи между ними нужны были дополнительные исследования. Следует заметить, что по вопросу о значении авидитета сывороток при их лечебном применении мнения исследователей были крайне противоречивы, что объяснялось, прежде всего, отсутствием общепринятых методов определения уровня авидитета. Одним из первых методику определения авидитета антитоксических сывороток (по скорости реакции) предложил В.А. Барыкин [1], ряд методов был предложен Т. Мад-сеном (1931), В. Джерне (1951), А. Гленни с сотр. (1932), Ю.Н. Макаровой-Тарасевич и E.H. Левкович (1933), однако ни один из них не был внедрен в практику. Отсутствие метода определения авидитета не давало возможности сравнить данные о лечебном действии сывороток, различных по авидности, и сделать окончательное заключение о терапевтическом значении авидитета таких препаратов. Полагали, что авидность антитоксических сывороток обусловлена тем типом сывороточного белка, с которым связана функция антитоксина. Было выявлено, что при осаждении белков сыворотки сернокислым аммонием первые осаждающиеся фракции обладали большей авидностью, чем последующие (А. Гленни, 1932). Электрофоретическое разделение глобул иновых фракций антитоксических сывороток также обнаружило различную авидность отдельных фракций глобулина (Кеквик с соавт., 1940). Полученные данные свидетельствовали, что кроме известных вариаций антител они различались также и по авидности, однако механизм, обусловливающий это свойство антител, оставался да и во многом до сих пор остается неизвестным.

В работе В.Б. Фреймана была показана зависимость авидитета сывороток от способа иммунизации животных, периода иммунизации, очистки сывороточного препарата от

балластных белков, концентрации иммуноглобулинов, добавления консервантов, условий хранения сывороточных препаратов. Исследования автора были направлены, в основном, на изучение зависимости между авидитетом и терапевтическим воздействием сывороток. При этом он отмечал, что эта зависимость не абсолютна. В некоторых случаях высокоавидные сыворотки не оказывали того высокого лечебного эффекта, которого можно было бы от них ожидать, судя по показателям авидитета, а низкоавидные сыворотки оказывались эффективными в небольших дозах. Нельзя исключить, что эти результаты могли быть следствием несовершенной методики определения авидитета антимикробных сывороток, хотя весьма убедительным представляются суждения автора по этому вопросу, в частности о различной чувствительности к токсину у разных животных. Кроме того, показано, что в результате введения токсина и сыворотки в организме животного возникает множество сложнейших реакций, и тот или иной лечебный эффект - результат всех возникающих при этом воздействий на организм. Своеобразным подтверждением этому является тот факт, что (как свидетельствуют наши наблюдения) авидитет диагностических препаратов может быть полностью нивелирован при несоблюдении технологии их производства, неправильном хранении и применении в исследованиях (качество реактивов, оборудования, условия постановки опыта, профессиональная подготовка персонала и т. д.).

Как отмечал М.И. Леви [6], измерение аффинности антител в широкой исследовательской практике существенно тормозится из-за методических трудностей, а также невозможности математического описания спектра и частных характеристик аффинитета антител, особенно при выраженной его гетерогенности. Предложенные до сих пор методы изучения взаимодействия антигена с антителами, отмечал автор, можно разделить на две

группы: 1) методы, использующие жидкую фазу (антиген и антитела представлены в виде растворов); 2) методы, в которых один из компонентов представлен твердой фазой, а другой - раствором. Удобство последних в том, что после взаимодействия можно отделить растворенный компонент и измерить его концентрацию. Автор показал возможность применения антительных и антигенных им-муносорбентов дня определения аффинитета антител и разработал принципы графического анализа результатов взаимодействия антигена с антителами (на модели возбудителя чумы). В результате стало возможным определить не только концентрацию эффективных активных центров РаЬ-фрагментов антител на сорбенте, но и все известные показатели, характеризующие спектр аффинитета и его частные особенности. Следует отметить, что характеристики авидитета и (или) аффинитета получены многими авторами на модели гомологичных реакций, т. е. без перекрестных реакций с различными штаммами или вариантами одного и того же возбудителя и соответствующих специфических сывороток, что необходимо для углубленного всестороннего изучения вопросов авидитета и его материальных основ.

Если раньше проблема авидитета изучалась, в основном, в плане оценки эффективности лечебных сывороточных препаратов, то в последующие годы - во второй половине XX века - особое место заняли исследования авидитета диагностических сывороточных и антигенных препаратов. При этом имелось в виду, что интенсивность реакции между антителом и антигеном зависит не только от качественных различий иммунных сывороток, но и от подобных же различий применяемых антигенов. Теоретические и прикладные вопросы проблемы авидитета, несмотря на довольно интенсивные разработки отечественных ученых в последние годы, во многом остаются не изученными. В частности, не ясны

молекулярные механизмы, обусловливающие это свойство антител и антигенов.

Наши исследования, выполненные на модели вирусных диагностических препаратов, явились, мы полагаем, продолжением и развитием работ по проблеме авидитета [3]. Однако феномен авидности вирусных антигенов впервые в 1943 г. отметил Д. Хирст [ 10] при изучении штаммов вируса гриппа А1. В дальнейшем (в 1949-1984 гг.) различия в функциональной активности антигенов были выявлены у вирусов, относящихся к различным таксонометрическим группам: пикорно-вирусы, тогавирусы, ортомиксовирусы.

Было показано, что авидностъ вирусных антигенов является генетическим маркером, коррелирующим с некоторыми другими генетическими маркерами, фенотипическое про-

явление которых связано с особенностями суперкапсидной оболочки вирионов [5].

В ряде работ, посвященных изучению авидности антигенов, авторы наряду с описанием самого феномена предлагали различные методы определения степени функциональной активности антигенов в серологических тестах.

АН СССР - Уральский научный центр, Свердловск, 1986 г.) впервые были представлены вместе методы, разработанные авторами в предыдущие годы, которые позволяли дать объективную оценку авидности вирусных антигенов и, в то же время, не являются сложными в исполнении.

В 2006 г. было опубликовано руководство по количественной оценке показателей авиди-тета антигенных и сывороточных препаратов, утвержденное Минздравсоцразвития России [4], в котором предложены для практического использования вирусологами, микробиологами, иммунологами и биотехнологами методы определения унифицированных показателей авидитета, наиболее полно отражающих интенсивность взаимодействия антигенов и антител в серологических реакциях и основанных на объективных критериях. Методы просты и надежны в работе. Весьма важно, что они основаны на математическом анализе процессов связывания антигена с антителами и диссоциации нейтрального комплекса. Кроме того, показана возможность использования суспензионных адсорбционных методов для оценки авидитета антигенов и иммунохими-ческих методов для количественной оценки авидитета антител. Суспензионные адсорбционные методы дают возможность при необходимости исключить влияние на результаты опытов авидитета специфической иммунной сыворотки, заменить постановку сравнительно трудоемких кинетических РТГА или, тем более, кинетических РБН на доступные и легко воспроизводимые реакции адсорбции. Иммунохимические тесты на авидность антител дают возможность провести ускоренную диагностику многих инфекционных и неинфекционных заболеваний.

Решение вопросов специфической активности вирусных антигенов и противовирусных антител связано с разработкой и совершенствованием методов разносторонней и более эффективной оценки их биологических

функций. Проблема авидитета охватывает не только оценку функциональной активности в серологических реакциях антигенов и антител, но и неразрывно связана с вопросами иммуногенеза - с особенностями реакции иммуно-компетентных систем на внедрение патогенного возбудителя и особенностями репродукции вируса в чувствительных клетках, где непосредственно протекает патологический процесс.

Изучение проблемы авидитета антигенов и антител как фенотипического проявления генетических свойств возбудителей вирусных и бактериальных инфекций, характеризующих их функциональную активность при взаимной (антиген + антитело) нейтрализации, весьма важно для оценки качества конструируемых антигенных и сывороточных препаратов, вакцин, иммуноглобулинов, используемых в практическом здравоохранении. Эта проблема была и остается актуальной до настоящего времени.

Научные основы оценки качества медицинских биологических препаратов (МБП), несмотря на большой фактический материал, накопленный в этой области на международном и национальном уровнях, только начинают формироваться. Основная цель стандартизации - обеспечение своевременного повышения уровня производства и качества продукции - может быть достигнута, как известно, только на основе современных научных достижений. Экономический эффект стандартизации диагностикумов, вакцин, иммуноглобулинов, основанный на разработке и оперативном внедрении новых принципов и методов взамен устаревших, может быть получен как непосредственно на производстве, так и при практическом использовании антигенных препаратов. Залог этому - сокращение производственных отходов и повышение эффективности серовирусологической разведки, диагностики, профилактики и лечения вирусных инфекций.

Сложность измерения свойств МБП и оценки качества их связана с тем, что кроме относительно простых инструментальных методов для этой цели используют громоздкие системы, состоящие из ряда последовательных операций. Из-за сложности биологических систем измерения на всех этапах могут быть значительные погрешности в точности и оценке. Вместе с тем роль биологических методов контроля готовой продукции остается пока одной из главных, и никакие самые совершенные и современные физико-хими-ческие методы контроля не могут считаться, как отмечал еще С.Г. Дзагуров с соавт. (1982), достаточно надежными для прогноза качества вакцин и диагностических препаратов.

В связи с этим предлагаемое руководство служит делу внедрения в практику новых и более совершенных унифицированных методов контроля, повышения точности измерений функциональной активности (специфичности и чувствительности) антигенных и сывороточных препаратов, выпускаемых профильными предприятиями Российской Федерации для нужд здравоохранения.

1. Барыкин В.А. // Zeitsch r.f. Immunitats forsch, u. expcr. Thcrap. 1912. № 15.

2. Барыкин В.А. // Журн. эксперимент, биологии и медицины. 1927. № 16. 55 с,

3. Кокорев B.C. Методология повышения диагностической эффективности вирусных препаратов. Екатеринбург, 2000. 350 с.

4. Кокорев B.C. Количественная оценка показателей авидитста антигенных и сывороточных препаратов: Руководство. Екатеринбург, 2006. 35 с.

5. Колотвинов C.B. Материалы по структурному анализу вирусной популяции (на модели вируса клещевого энцефалита и компьютерная модель): Дис. . кан. мед. наук. Свердловск, 1979. 220 с.

6. Леви М.И. // Журн. микробиологии. 1982. № 10. С, 97-105.

7. Фрсйман В.Б. Исследования авидитста иммунных сывороток: Дис. . док, мед. наук. Пермь, J 957. 405 с.

8. Фризе В.В. // Журн. эксперимент, биологии и медицины. 1927. Т. 8. № 20. С. 360-368.

9. Фризе В.В. // Журн. эксперимент, биологии и медицины. 1927. Т. 8. № 20. С. 318.

10. Hirst G. //J. Exp. Med. 1943. № 78. P. 407-411.