Гриппозная диагностическая сыворотка типа 2

Содержит аттенуированные эпидемически актуальные штаммы вируса гриппов типа А (Н1N1и Н3N2) и В, полученные их вируссодержащей аллантоисной жидкости инфицированных куриных эмбрионов, стабилизатор – пептон, мономицин не более 500 мкг/мл и нистатин не более 20 мкг/мл. Применяется для профилактики гриппа в период повышенной заболеваемости.

Вакцина гриппозная инактивированная жидкая центрифужная А (Н1N1и Н3N2) и В (Россия)

Содержит инактивированные формалином вирионы вируса нриппа типов А (Н1N1и Н3N2) и В, стабилизатор – альбумин человеческий. Применяется для профилактики гриппа в период повышенной заболеваемости.

Вакцина гриппозная тривалентная полимер-субъединичная жидкая – Гриппол (Россия)

Содержит очищенные от балластных веществ поверхностные белки (гемагглютинин и нейраминидазу) вируса гриппа типов А (Н1N1и Н3N2) и В, связанные с полимерным носителем – иммуномодулятором полиоксидонием, консервант – мертиолят. Применяется по эпидемическим показаниям с 6 месяцев.

Инфлювак (Solvay Pharmaceuticals B.V., Нидерланды)

Содержит очищенные от балластных веществ гемагглютинин вируса гриппа типов А (Н1N1и Н3N2) и В, консервант – мертиолят. Применяют для профилактики гриппа в период повышенной заболеваемости.

Вакцина паротитная культуральная живая сухая (Россия)

Содержит аттенуированный штамм вируса паротита Ленинград-3, не более 25 мкг/мл гентамицина сульфата, стабилизатор – ЛС-18 и желатин.. Применяют для плановой (с 12-15 месяцев) и экстренной профилактики.

Вакцина коревая культуральная живая сухая (Россия)

Содержит аттенуированный штамм вируса Ленинград-16 или его клонированный вариант – штамм Москва-5, стабилизатор – ЛС-18 сорбит или желатин, не более 20 мкг/мл гентамицина сульфата. Применяется для плановой и экстренной профилактики кори.

Диагностические препараты

Сыворотки и иммуноглобулины

Типоспецифические гриппозные сыворотки А, А1, А2, В, С

Содержат антитела к приведенным типам вируса гриппа. Применяются для типирования вирусов гриппа по антигенной структуре в РТГА и РСК.

Диагностические типоспецифические парагриппозные сыворотки 1,2,3,4 типов

Содержит антитела к вирусам парагриппа различных типов. Применяют для идентификации парагриппозных вирусов в РСК, РТГА, реакции торможения гемадсорбции.

Иммунофлюоресцирующие гриппозные и парагриппознные сыворотки

Содержат меченые антитела к вирусам гриппа и парагриппа. Применяют для диагностики гриппа и парагриппа методом иммунофлюоресцентной риноцитоскопии.

Типоспецифические риновирусные сыворотки

Содержит антитела к риновирусам. Применяются для типирования риновирусов по антигенной структуре.

Типоспецифические аденовирусные сыворотки

Содержат антитела к соответствующим типам аденовирусам, получают от гипериммунизированных животных. Применяют в РСК для определения принадлежности выделенного цитопатогенного агента к аденовирусам и для типирования его в РН, ЦПД, РТГА.

Иммунофлюоресцирующая аденовирусная сыворотка

Содержит меченые флюорохромом антитела к аденовирусам. Используют для диагностики аденовирусной инфекции методом иммунофлюоресцентной риноцитоскопии.

Диагностикумы

Сухой типоспецифический диагностикум гриппозный

Содержит вирусы гриппа различных типов. Готовят из аллантоисной жидкости зараженных вирусом эмбрионов. Применяются для серологической диагностики гриппа в РСК и РТГА с парными сыворотками больных.

Сухой диагностикум риновирусный

Содержит антигены различных серотипов риновирусов. Применяются для выявления антител при серологической диагностике риновирусных инфекций

Сухой диагностикум аденовирусный

Содержат антигены различных серотипов рино- и аденовирусов. Готовят путем разрушения культур клеток, зараженных лабораторными штаммами аденовирусов. Применяются для выявления антител при серологической диагностике в РСК и РН с парными сыворотками больных.

Вирусные кишечные инфекции и гепатиты

Лечебно-профилактические препараты

Вакцины

Вакцина полиомиелитная пероральная типов 1,2 и 3 – вакцина Сэбина (Россия)

Содержит живой аттенуированные штаммы Сэбинавируса полиомиелита типов 1, 2, 3, консервант – канамицина сульфат, стабилизатор – магния хлорид. Применяется для плановой вакцинации против полиомиелита.

Аналог: Полио Сэбин ВЕРО. Вакцина для профилактики полиомиелита живая трехвалентная.

Определение серовара Диагн. Ат получают в 2 этапа. На 1-м этапе берут S.paratyphi (чистую культуру микроба) . А О-1,2,12 на обработку формалином. Происходит разрушение О-Аг , второй этап гипериммунизация кролика оставшимся Аг и вырабатывается Ат. . Полученная сыворотка используется для сероидентификации сальмонел в РА на 3 этапе бакт. анализа.

Сухая агглютинирующая адсорбированная поливалентная сыворотка к шигеллам.

Ат содержащий препарат инактивир.Шигеллы нескольких видов. Диагн. Ат, полученное путем гипериммунизацией кролика убитыми шигеллами с опред. антигенной структурой. Используется для сероидентификации шигелл в РА на стекле.

Сибиреязвенная сыворотка лошадиная, меченная ФИТЦ

АТ,диагностический;Получают гипериммунизацией лошадей возбудителем сибирской язвы, применяют в РИФ (прямой метод)

Кроличий античеловеческий глобулин, меченный ФИТЦ

АТ,диагностический. Получают гипериммунизацией кролика гамма-глобулинами человека, применяют в РИФ (непрямой метод)

Гриппозная диагностическая сыворотка

Диагн. Ат,которая используется в РТГА или РСК для идентификации вируса гриппа опр.серотипа, при вирусологическом методе диагностики. При образовании пуговки серотип сыворотки соответствует серотипу вируса гриппа. При образовании зонтика НЕ соответствует.

Туляремийный диагностикум

АГ содержащий препарат из туляримийных бактерий Fransicella tularensis,получается путем инактивирования бактерий. Используется для – экспресс-диагностики туляримии в кровяно-капельной РА на стекле. На стекло: 1 капля крови, 1 капля дист.воды, 1 капля диагностикума. Если реация мгновенна, то титр 1:200, если через 30 минут 1:100.

Бруцеллезный диагностикум

АГ-содержащий препарат, содержит убитые нагреванием бруцеллы нескольких видов: abortus, melitensis, suis, ovis, canis.

Препарат подкрашен синькой или негциан-виолетом. Используется для РА на стекле в реакции Хаддилсона для серодиагностики бруцеллеза. Ели аглютинация происходит мгновенно, то человек болен бруцеллезом (титр АТ 1:200). Если раекция произошла через 30 сек. И позже,то надо повторить,титр 1:100, если агл-и нет, то человек здоров!

Парагриппозный диагностикум

Аг-содержащий препарат, содержит варианты 1,2,3 серотипов,обрабатываются эфиром. Использ. в РТГА и РСК для серодиагностики парагриппа.

Эритроцитарный туберкулезный диагностикум для РНГА.

Аг-содержащий препарат, в котором туберкулезные палочки Mycobacterium tuberculosis адсорбированы на поверхности эритроцитов барана, взятых из яремной вены, ляфильно высушен. Препарат стабилизируют формалином. Используется для серодиагностики в РНГА с парными сыворотками. Р-я положительная-при наличии зонтика, при пуговице р-я отрицательная.

Гонококковый антиген

Представляет собой диагностический препарат полученный из гонококков Neisseria gonorrhaea, путем инактивирования нагревание. Используется для серодиагностики гонореи в РСК.

Кардиолипиновый антиген

Ультраозвученный трепонемный антиген

Кардиолипиновый антиген для реакции микропреципитации (микрореакции)

Холерный монофаг Эль-Тор

Тулярин

Бруцеллин

Препараты содержащие фракции микробов, вызывают аллергичесике реакции в организме. Аллергены извлеченные из бактериальной клетки вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечья.

Туберкулин очищенный (PPD)

АГ,диагностическийю Получают: выращивают микобактерии, выделяют белки, применяют для внутрикожной аллергической пробы Манту; учитывают через 48-72 часа, измеряют диаметр папулы в мм (допустимые 5-22 мм), больше реакция положительная!

B. Профилактические и лечебные иммунобиологические препараты

Стафилококковый анатоксин

Дифтерийный анатоксин

Лечебно-профилактический препарат, полученный из экзотоксинов дифтерии по правилу Рамона. Используют для лечения легких форм дифтерии и для профилактики лиц, находящихся в контакте с больными дифтерией.

Входит в состав вакцин АКДС, АДС. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, напряженный иммунитет.

Столбнячный анатоксин

Профилактический препарат, получаемый из экзотоксина столбняка по правилу Рамона. Используется в составе АКДС, АДС, а также для профилактики столбняка людям с порезами (ножевой) гвоздевой, при ожогах, обморожении, а так же роженицам и их детям,в случае родов не в стационаре. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, ненапряженный иммунитет.

Брюшнотифозная вакцина (Vi-анвак)

Представляет собой профилактическую вакцину против брюшного тифа, содержит Salmonellae typhi , штамм Ту-2, из которой химическим путем выделили Аг-Vi и инактивировали, т.о. вакцина содержит 2 поверхностных исходных Аг. Применяется по эпид. показаниям. С 2-х летнего возраста: Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет. RV каждые 5 лет.

?: ?? ? . E? ?? ?т микобактерии, выделяют белки, применяют для внутрикожной аллергической пробы Манту; учитывают через 48-72 часа, измеряют диаметр папулы в мм (допустимые 5-22 мм), больше реакция положительная!

Холероген-анатоксин

Комбинированная вакцина, содержит извлеченный химическим путем О1-АГ возбудитель холеры и инактивируется температурой, а так же холероген-анатоксин получают по принципу Рамона, из холерного экзотоксина. Применяется по эпид. Показаниям у взрослух и детей после 7 лет. Иммунитет приобретенный, искуственный,активный.

tyle='fM? sz?E? ?? font-family:"Times New Roman","serif"'> , штамм Ту-2, из которой химическим путем выделили Аг-Vi и инактивировали, т.о. вакцина содержит 2 поверхностных исходных Аг. Применяется по эпид. показаниям. С 2-х летнего возраста: Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет. RV каждые 5 лет.

Анатоксин Дифтерийно-столбнячный (АДС и АДСм)

Адсорбированный. Представляет собой 2 анатоксина: дифтерийный и столбнячный, полученых по методу Рамона. Используется: 1) как обязательная вакцина вместо АКДС, если ребенок к моменты вакцинации V переболел коклюшом. 2) либо при RV в 7 лет и 17 лет после АКДС. Эта вакцина так же может исп.для проф.дифтерии и столбняка в другом возрасте, делается внутримышечно. Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический, напряженный иммунитет.

Коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС и Инфанрикс)

Ассоциированная вакцина. Содержит 2 анатоксина: дифтерийный и столбнячный, и убитые формалином коклюшные Ат. Исп.как обязательная вакцина. По схеме 3-4,5-6 мес. RV в 18 мес., а далее RV АДС в 7 и 14 лет. . Приобретённый, активный, искусственный, антитоксический и антимикробный, ненапряженный иммунитет.

Инфанрикс (ацеллюлярная (бесклеточная) вакцина) Содержит 2 анатоксина: дифтерийный и столбнячный и 3 очищенных коклюшных Аг (коклюшный анатоксин, вместо убитых коклюшных бактерий), ФГА, пертакин. По схеме 3-4,5-6 мес. RV в 13 мес.

Сибиреязвенная вакцина

Вакцина БЦЖ.

В 1921 году Аг. Представляет собой профилактический препарат, содерж. Живые ослабленные туберкулезные палочки бычьего типа (Mycobacterium bocsis). Ослабление путем культивирования в течении 13 лет, 230 пассажей на картофельно-глицериновую среду солей жирных кислот.

При получении вакцины легли 2 принципа: 1) Дженер использовал возбудителя родственного патогенному, но не опасного для человека. 2) Пастер (аттенуация) –снижение вирулентности. Вакцина является обязательной, вводится всем детям в род.доме на 4-6 день жизни, внутрикожно в область плеча! RV через 7 лет, или в 14, при отрицательной пробе Манту. Приобретённый, активный, искусственный, антимикробный, напряженный иммунитет.

Коколюшная моновакцина

Коревая вакцина

Последнее изменение этой страницы: 2016-08-01; Нарушение авторского права страницы

Современные препараты для лабораторной диагностики гриппа и ОРВИ

И. В. Амосова, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ НИИ гриппа МЗ РФ, “Научно-исследовательский институт гриппа” Минздрава России (ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ), ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”), Санкт-Петербург, Россия

На сегодняшний день грипп и другие острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) остаются серьезной медицинской и социальной проблемой, о чём свидетельствуют высокие показатели заболеваемости и смертности, особенно среди детей, пожилых людей и пациентов с хроническими заболеваниями. Для организации эффективных процессов лечения, профилактики и надзора за гриппом необходимо своевременное проведение лабораторной диагностики, позволяющей выявить возбудителя инфекции. Всемирная организации здравоохранения (ВОЗ) рекомендует использовать для идентификации возбудителей ОРВИ методы иммунофлуоресценции (ИФ) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА) наряду с выделением вирусов в культуре клеток или полимеразной цепной реакцией (ПЦР)1.

ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”) организовано в 2013 году с целью обеспечения учреждений здравоохранения препаратами для диагностики вирусов гриппа А, В и других ОРВИ: вирусов парагриппа 1, 2 и 3 типов, РС-вируса

и аденовирусов. Основной учредитель Предприятия – ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России, выполняющий в качестве Федерального центра по гриппу одну из ключевых функций в системе надзора за заболеваемостью гриппом в России и являющийся признанным Национальным центром по гриппу ВОЗ в рамках глобального контроля этой инфекции.

В основе производства – научные разработки и многолетний опыт лаборатории биотехнологии диагностических препаратов НИИ гриппа, а также современные методы накопления, очистки и концентрации вирусов, иммунохроматографии, иммуноблоттинга, иммуноферментного и ИФ- анализа и методы гибридомной технологии, позволяющие создавать новые препараты моноклонального типа.

Предприятие выпускает и реализует следующие диагностические препараты:

Наименование препарата

Ед. изм.

Кол-во анализов

Назначение

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие гриппозные сухие (ИФ-Г):

грипп А (Н1N1)pdm 09

грипп В

анализов

Ранняя диагностика ОРВИ по выявлению антигенов: вирусов гриппа А или В; адено- или РС-вирусов; вирусов парагриппа 1, 2 или 3 типа, вирусов герпеса 1 или 2 типов в клетках цилиндрического эпителия носа от больных с симптомами ОРВИ; обнаружение вирусных антигенов в препаратах клеточных культур, инфицированных материалами от больных.

Материалом для исследования служат мазки из носа, взятые от больных ОРВИ, содержащие клетки цилиндрического эпителия слизистой оболочки глубоких отделов носовой полости.

Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновыйсухой (ИДФАГ)

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие парагриппозные сухие (ИФ-ПГ):

парагрипп 1 типа

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие

РС-вирусные сухие (ИФ-РС)

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие герпетические сухие (ИФ-Герпес):

герпес 2 типа

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИГ):

грипп А (Н1N1)pdm09

грипп В (Викторианская линия)

грипп В (Ямагатская линия)

50
анализов

Диагностика гриппозной инфекции по выявлению прироста антител в сыворотках реконвалесцентов, оценка коллективного иммунитета, оценка иммуногенности гриппозных вакцин, научные исследования.

Диагностикумы парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИ-ПГ):

парагрипп 1 типa

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Наименование препарата

Ед. изм.

Кол-во анализов

Назначение

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СДГ):

грипп А(Н1N1)pdm 09

грипп В (Викторианская линия)

грипп В (Ямагатская линия)

50
анализов

Идентификация типов/ субтипов вирусов гриппа А и В, выделенных из материалов от больных, изучение антигенной структуры вирусного гемагглютинина, контроль специфичности штаммов вирусов гриппа.

Сыворотка диагностическая парагриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СД-ПГ):

парагрипп 1 типа

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Иммуноферментная тест-система для определения антител класса IgG

к вирусу гриппа А (H1N1)pdm 09

к вирусу гриппа А (H3N2)

к вирусу гриппа B

к вирусу парагриппа 1 типа

к вирусу парагриппа 3 типа

набор

90
анализов

Определение антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРВИ по приросту уровня специфических антител (IgG).

Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятые в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.

Набор реагентов для культивирования клеток и выделения вирусов гриппа в культуре клеток

набор

Выделение вирусов гриппа, надзор и быстрая расшифровки эпидемий гриппа.

Флуоресцирующие иммуноглобулины обеспечивают быструю (в течение 1,5-2-х часов) возможность непосредственной детекции вирусных антигенов в клинических материалах или в клеточных культурах, инфицированных материалами от больных.

Препараты зарегистрированы в Росздравнадзоре и допущены к обращению на территории РФ

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие гриппозные сухие

РУ № ФСР 2009/05255 от 09.07.2009 г.

Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновый сухой

РУ № ФСР 2008/03940 от 26.12.2008 г.

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие парагриппозные сухие

РУ № ФСР 2009/05254 от 09.07.2009 г.

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие РС-вирусные сухие

РУ № ФСР 2009/05256 от 09.07.2009 г.

В лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ разработаны и широко используются в практике здравоохранения Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие сухие, которые представляют собой коньюгат очищенных противовирусных антител с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ). Препараты имеют красящий титр не ниже 1:16, содержат консервант – мертиолат 1:10000, лиофилизированы, выпускаются во флаконах по 0,5 или 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5.В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Диагностикумы гриппозные/парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие

Гриппозные диагностикумы для реакции торможения гемагглютинации (РТГА) используют в качестве подтверждающего теста при поступлении больных в стационар на 6-10 сутки заболевания, когда другие тесты (ИФЛ, ПЦР, выделение вируса) оказываются уже мало чувствительными.

Диагностикумы предназначены для субтиповой серодиагностики гриппа (по 4-х кратному приросту титров антител в сыворотках реконвалесцентов); контроля популяционного иммунитета населения; оценки иммуногенности живых и инактивированных гриппозных вакцин.

Препараты готовятся по оригинальным технологиям из антигенно актуальных штаммов, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, не содержат инфекционного вируса, включают наполнитель, препятствующий сорбции антигенов на полистироловых планшетах. 1 мл препарата достаточно для тестирования 100 сывороток микрометодом РТГА.

Диагностикумы выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие зарегистрированы в Росздравнадзоре и допущены к обращению на территории РФ

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие РУ № ФСР 2009/05253 от 09.07.2009 г.

Специфические сыворотки для идентификации возбудителей ОРВИ

Высокоспецифичные диагностические сыворотки предназначены для идентификации вирусов гриппа А (субтипов H1, H2, H3, H5, Н7, H9) и В (обеих современных эволюционных ветвей), а также других возбудителей ОРВИ в ИФА, реакциях торможения гемагглютинации и микронейтрализации.

Сыворотки выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая зарегистрирована в Росздравнадзоре и допущена к обращению на территории РФ

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая РУ № ФСР 2009/05257 от 09.07.2009 г.

Иммуноферментные тест-системы (ИФТС) для определения антител класса IgG к ОРВИ и гриппу

Современные методы иммунодиагностики с определением классов и субклассов IgG открывают новые возможности в исследовании структуры иммунитета и формирования иммунопатологических состояний.

Характерными особенностями разработанных ИФТС являются:

• высокая чувствительность анализа;

• возможность использования микроколичеств сывороток (0,5 – 1 мкл);

• снижение трудоемкости анализа за счет исключения операций титрования сывороток;

• возможность индикации класс-специфических противовирусных антител;

• сокращение сроков проведения анализов.

Иммуноферментные тест-системы представляет собой 13-компонентный набор, основными реагентами которого являются очищенные вирусные антигены, позитивные и негативные контрольные образцы сывороток, а также конъюгаты моноклональных антител к IgG человека.

Тест-системы предназначены для детекции антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРЗ, рассчитаны на проведение 96 анализов, включая контрольные пробы. Предназначены для серодиагностики инфекций по определению достоверного прироста уровня специфических IgG.

Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятыми в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.

Парные сыворотки от одного больного исследуют одновременно, в одной постановке реакции. Постановку реакций осуществляют в соответствии с прилагаемыми Инструкциями по применению. Срок годности ИФТС – 6 месяцев.

Предприятие является единственным в России производителем препаратов для иммунодиагностики ОРВИ и полностью обеспечивает организации здравоохранениявсем необходимым для осуществления лабораторного надзора за гриппом и ОРВИ на территории России и стран СНГ. Штаммовый состав выпускаемых препаратов постоянно обновляется в соответствии с рекомендациями ВОЗ. Диагностические препараты, выпускаемые ООО “ППДП”, зарегистрированы в федеральной службе по надзору в сфере здравоохранения (Росздравнадзор).

ООО “ППДП” оказывает информационную поддержку и консультационные услуги по всему ассортименту своей продукции, а также принимает участие в организации и проведении конференций, семинаров, и других научно-практических мероприятий на базе ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России.

ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ППДП)

197376, Санкт-Петербург, ул. профессора Попова, д. 15/17

аденовирусы серотипов 1—39 ОРВИ, пневмония, отит, конъ-

юнктивит; гепатит и другие системные инфекции при им-мунодефицитах

ПОДСЕМЕЙСТВО Alphaherpesvirinae Фарингит, тонзиллит, трахео-

вирус простого герпеса 1-го типа бронхит; пневмония при имму-

(HSV-1) нодефицитах и др. (см. главу 21)

Тема 18.1. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

1. Биологические свойства возбудителей респираторных вирусных инфекций, их патогенность, экология, осо­бенность инфекций и эпидемиология вызываемых за­болеваний.

2. Микробиологическая диагностика.

3. Диагностические и лечебно-профилактические пре­параты.

1. Иммунофлюоресцентный метод экспресс-диагности­ки гриппа и ОРВИ.

2. Риноцитоскопия при гриппе и аденовирусной инфек­ции.

3. Диагностические и лечебно-профилактические пре­параты.

1. Ознакомиться с бланками-направлениями на исследо­вание в вирусологическую лабораторию.

2. Указать материал для исследования, необходимый для диагностики ОРВИ.

3. Оценить результаты реакции гемагглютинации с ма­териалом зараженного куриного эмбриона (амниоти-ческой и аллантоисной жидкостью), поставленной с целью индикации вируса гриппа.

4. Учесть результаты идентификации выделенного виру­са гриппа в РТГА. Сделать заключение.

5. Учесть результаты идентификации аденовирусов, вы­деленных в культуре клеток, в РСК.

6. Учесть результаты серодиагностики респираторных вирусных инфекций в РСК.

7. Ознакомиться с диагностическими и лечебно-профи­лактическими препаратами. Указать механизм их дей­ствия.

• Микробиологическая диагностика гриппа и других респираторных вирусных инфекций

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: отделяемое из респи­раторного тракта, мазки и смывы со слизистой оболочки верх­них дыхательных путей, промывные воды бронхов, мокрота.

Цитологическое исследование. Мазки, приготовленные из исследуемого материала, окрашивают по методу Романовско­го—Гимзы или другими методами и микроскопируют. В поло­жительном случае наблюдаются признаки ЦПД вирусов. По­скольку большинство респираторных вирусов оказывают не­специфическое ЦПД (дегенерация и лизис зараженных кле­ток), метод является малоспецифичным и имеет ориентиро­вочное значение.

Цитологическое (риноцитоскопическое) исследование при­меняют как ориентировочный экспресс-метод лабораторной диагностики гриппа. С поверхности нижней носовой раковины

берут мазки-отпечатки. Препараты окрашивают смесью основ­ного фуксина и метиленового синего. В цитоплазме цилинд­рического эпителия, а также в цитоплазме дегенерированных макрофагов и лейкоцитов располагаются широко контуриро-ванные включения, окрашенные в красный цвет. Данный ме­тод позволяет дифференцировать грипп от аденовирусной ин­фекции, при которой наблюдаются деструкция клеток, вакуо­лизация ядер и образование внутриядерных включений.

Вирусологическое исследование. Исследуемый материал по­мещают в транспортную среду, содержащую антимикробные препараты широкого спектра действия для уничтожения сопут­ствующей бактериальной флоры. Затем материал центрифуги­руют. Для выделения чистой культуры производят заражение культур клеток надосадочной жидкостью. В зависимости от предполагаемого возбудителя используют разные типы клеточ­ных культур: клетки человека (первичные культуры эмбрио­нальных клеток, диплоидные линии фибробластов, перевивае­мые клеточные линии HeLa, НЕр-2 и др.) или животных (пер­вичные культуры клеток почки обезьян, линии мышиных фиб­робластов и др.). Культивирование респираторных вирусов мо­жет занимать от 2—3 до 20 сут и более в зависимости от природы возбудителя. Так, выделение аденовирусов занимает в среднем 6 сут, риновирусов — 4—5 сут, вируса гриппа — 3—4 сут, реовирусов — около 3 нед. Индикацию вирусов про­изводят по ЦПД. Для индикации гемагглютинирующих виру­сов (грипп, парагрипп) может быть использована реакция гем-адсорбции (см. тему 5.2), которая становится положительной еще до появления ЦПД. Идентификацию респираторных ви­русов осуществляют по их антигенной структуре с помощью иммунологических методов [иммунофлюоресценция, РТГА, РСК, реакция нейтрализации (РН), ИФА и др.]. Эти же реак­ции используют для типирования выделенных вирусов. При­меняют также биохимические (анализ фрагментов вирусных НК методом электрофореза) и молекулярно-биологические ме­тоды идентификации (ПЦР, метод нуклеиновых зондов).

Вирусологическое исследование не применяется для диа­гностики заболеваний, вызванных коронавирусами и РСВ, в связи со сложностью их культивирования.

В ряде случаев для выделения вируса гриппа используют куриные эмбрионы. Наличие вирусов гриппа в амниотической или аллантоисной жидкости устанавливают с помощью РГА (см. тему 5.2). Вирусы гриппа А хорошо агглютинируют эрит­роциты курицы, морской свинки, человека с группой крови 1(0), вирусы гриппа В — эритроциты курицы. Этот метод по­зволяет также установить титр вируса.

Идентификацию и типирование выделенной чистой культу­ры вируса гриппа осуществляют на основании антигенной структуры с помощью серологических реакций. Тип вируса

(А, В или С) определяют в РСК. Подтипы вируса гриппа А по Н- и N-антигенам (H0N1, H1N1, H2N2, H3N2 и др.) - в реакциях с набором типоспецифических сывороток к гемаг-глютинину и нейраминидазе (см. табл. 10.1.2 и 10.1.3). Иден­тификацию по Н-антигену проводят в РТГА, результаты реак­ции учитывают по отсутствию гемаготатинации. Для опреде­ления N-антигена применяют реакцию ингибиции нейрамини-дазы и реакцию иммунопреципитации в геле. Результаты РТГА (рис. 18.1.1; на вклейке), приведенные в табл. 10.1.3, свиде­тельствуют, что гемагглютинирующая активность исследуемого вируса нейтрализуется типоспецифической сывороткой N3H2 в разведениях 1:10—1:160 (до ее титра), т.е. исследуемый вирус относится к подтипу N3H2.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования.Иммуно­химические исследования. Метод ИФ является высо­коспецифичным, универсальным в отношении разных возбу­дителей методом экспресс-диагностики (схема 18.1.1). Он поз­воляет обнаружить антигены вируса-возбудителя заболевания непосредственно в инфицированных клетках, присутствующих в исследуемом материале. Используют прямой и непрямой методы ИФ (см. тему 10.1). Из исследуемого материала готовят мазки на нескольких предметных стеклах. Носоглоточные смы­вы предварительно центрифугируют и из осадка, содержащего зараженные клетки, готовят мазки. Препараты обрабатывают различными флюоресцирующими антителами (против вирусов гриппа А, В, против вирусов парагриппа II и III типов, против РСВ, поливалентной противоаденовирусной сывороткой и др.) и изучают методом люминесцентной микроскопии. В положи­тельном случае внутри клеток обнаруживают светящиеся ви­русные включения и обращают внимание на их внутриклеточ­ную локализацию. Так, при аденовирусной инфекции включе­ния располагаются преимущественно в ядре зараженных кле­ток, при гриппе и парагриппе — в цитоплазме.

Присутствие вирусных антигенов в исследуемом материале может быть выявлено с помощью чувствительных серологичес­ких реакций: ИФА, РИА и др.

Молекулярно-биологические исследования. Вирус­ные НК в исследуемом материале обнаруживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Серодиагностика. Диагностика респираторных вирусных ин­фекций осуществляется методом парных сывороток. Кровь бе­рут на 1-й и 3-й неделе от начала заболевания. Диагностичес­кое значение имеет нарастание титра специфических противо­вирусных антител в поздней сыворотке не менее чем в 4 раза. Серодиагностика при ОРВИ носит ретроспективный характер, поскольку накопление антител происходит в период реконва-лесценции — через 2—3 нед после начала заболевания. Метод

не позволяет своевременно установить диагноз, в связи с чем применяется преимущественно с целью ретроспективного под­тверждения диагноза и для эпидемиологического анализа.

Для обнаружения антител используют различные серологи­ческие реакции: РСК, РТГА, РН, непрямой ИФ, ИФА и др. В крови больных в ходе заболевания появляются антитела к различным антигенам возбудителя, для выявления которых применяют разные серологические реакции. Так, антитела к антигенам нуклеопротеида вируса парагриппа выявляют в РСК, а к антигенам суперкапсида — в РТГА. Вирус-нейтрали-зующие антитела обычно появляются в период реконвалесцен-ции и могут длительно сохраняться после перенесенного забо­левания. Для их обнаружения применяют РН.

Серодиагностика при риновирусных инфекциях не прово­дится в связи с большим числом серотипов (более 130) и отсутствием общих антигенов.

Серодиагностика гриппа. Наличие антител определя­ют с помощью РСК и РТГА со стандартными диагностикума-ми, представляющими собой наборы эталонных штаммов раз­личных серотипов вируса гриппа (табл. 18.1.1).

Таблица 18.1.1. Результаты РСК с парными сыворотками крови боль­ного (1 и 2) при серодиагностике гриппа и других ОРВИ

Диагностикум	Сыво­ротка №	Разведения сыворотки	Конт­роль сыво­ротки
1:10	1:20	1:40	1:80	1:160

Вирус гриппа А (H3N2)	+ +
Вирус гриппа В	1 2	+ +
Аденовирус (поливалентный)	1 2	+ +
РСВ	+
+

РСК более чувствительна, чем РТГА, и позволяет выявить антитела к любому штамму одного и того же серотипа вируса. Диагностическое значение имеет четырехкратное увеличение титра антител в парных сыворотках (в период эпидемии грип­па) и двукратное нарастание в сыворотках крови больных при характерной клинической картине. Отсутствие нарастания тит­ра антител не исключает гриппозной инфекции.

• Микробиологическая диагностика респираторных инфекций, вызванных герпесвирусами (см. главу 21)

• Диагностические, профилактические и лечебные препараты

Тест-системы для выявления антигенов респираторных ви­русов (гриппа, парагриппа, респираторно-синцитиального) ме­тодом ИФ.

Типоспецифические гриппозные сыворотки H0N1, H1N1, H2N2, H3N3, В и С. Применяют для серотипирования вирусов гриппа в РТГА и РСК.

Типоспецифические парагргагаозные сыворотки. Используют для идентификации и серотипирования вирусов парагриппа.

Типоспецифические аденовирусные сыворотки. Применяют для серотипирования аденовирусов в реакции нейтрализации.

Сухие типоспецифические диагностикумы (гриппозный и парагриппозный). Используют для серодиагностики соответст­вующих инфекций.

Аденовирусные диагностикумы. Применяют для серодиагнос­тики аденовирусной инфекции.

Живая гриппозная вакцина. Готовят из аллантоисной жид­кости куриных эмбрионов, зараженных вакцинными штамма­ми вируса гриппа основных серотипов. Применяют для про­филактики гриппа (создание активного иммунитета). Вакцину вводят через нос или рот.

Убитая гриппозная вакцина. Инактивированные формалином цельные вирионы вакцинного штамма вируса гриппа, выра­щенного в культуре клеток. Вакцинный штамм получают еже­годно на основании данных эпидемиологического анализа с учетом предполагаемого направления антигенной изменчивос­ти вируса. Применяют для профилактики гриппа (создание активного иммунитета).

Расщепленные гриппозные вакцины. Получают путем инак­тивации цельных вирионов вируса гриппа вакцинного штам­ма (см. выше) с последующим разрушением и очисткой ком­понентов. Вакцина содержит основные протективные анти­гены вируса гриппа — гемагглютинин, нейраминидазу, а также ряд дополнительных белков (Ml, NP). Применяют для создания активного иммунитета с целью профилактики гриппа.

Субъединичные гриппозные вакцины. Содержит основные протективные антигены вируса гриппа (гемагглютинин и ней­раминидазу), полученные методом генной инженерии. Состав антигенов ежегодно обновляется с учетом предполагаемого на­правления антигенной изменчивости вируса.

Лечебно-профилактическая поливалентная гриппозная сыво­ротка. Получена путем гипериммунизации лошадей вирусами гриппа разных серотипов. Выпускают в сухом виде в смеси с антибиотиками и сульфаниламидами. Применяют интраназаль-но с целью экстренной профилактики гриппа и для лечения

больных в начале заболевания (создание пассивного иммуни­тета).

Противогриппозный донорский иммуноглобулин.Готовят из сыворотки крови доноров, иммунизированных живой гриппоз­ной вакциной типов А и В. Применяют для экстренной профи­лактики и лечения гриппа в эпидемических очагах.

Иммуноглобулин нормальный человеческий.Получают путем фракционирования крови здоровых доноров. Неспецифичес­кий препарат, содержащий антитела различной специфичнос­ти. Применяют для профилактики ОРВИ (пассивный иммуни­тет).

Противовирусные препараты:

Интерферончеловеческий лейкоцитарный (получают из куль­туры лейкоцитов человека, обработанных интерфероногеном); интерферон рекомбинантный; неовир и другие индукторы ин­терферона. Применяют для профилактики и лечения гриппа и других вирусных респираторных заболеваний.

Ремантадин.Назначают для профилактики и лечения гриппа в первые дни заболевания.

Рибавирин.Применяют для лечения пневмонии, вызванной РСВ.

Арилдон и другие производные 3-метил-изоксазола.Применя­ют для лечения риновирусных инфекций.