Среды для получения стафилококкового экзотоксина
Роды: Staphylococcys (типовой),
Род Staphylococcys включает около 30 видов. Доминируют 3 вида:
Морфология и биологические свойства
Staphyle— виноградная гроздь. Шарообразной формы, диаметр 0,6-1 мкм, неподвижный, спор не имеет, капсула формируется лишь в условиях организма (индуцибельный фактор). Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грамположительны.
Хемоорганотроф, по типу дыхания — факультативный анаэроб, не прихотлив к питательным средам и условиям культивирования. Растет на простых питательных средах: МПБ — диффузное помутнение, МПА — колонии диаметром 2-4 мм, пигментированные (золотистого, лимонно-желтого или белого цвета). Пигмент — каротиноид, не растворим в воде, растворим в спирту, бензине, хлороформе. Синтезируется лучше на свету, при комнатной температуре, дополнительной аэрации на плотных питательных средах с молоком, картофелем или глицерином.
Пигментообразование: у S. aureus пигмент золотистый, у S. saprophyticus — лимонно-желтый, S. epidermidis — лимонно-желтый или белый.
Температурный диапазон роста 6-46° С, оптимальная 35-37°С, рН 4,2-9,3, оптимум 7,2.
Галотолерантный(устойчив к высоким концентрациям солей), большинство штаммов растет в присутствии 15% NaCl, сахарозы — до 40%, желчных кислот — до 40%.
Питательные среды для культивирования стафилококков:
2. Кровяной МПА с 5% бараньих или кроличьих эритроцитов — альфа-гемолиз;
3. Солевой МПБ — накопительная среда ( МПБ+ 7-10 % NaCl);
4. Желточно-солевой агар (ЖСА) — дополнительно содержит суспензию желтка куриного яйца (для определения лецитовителазы).
Семейство Micrococcaceae оксидаза(-), каталаза(+) — признак дифференциации от семейства Streptococcaceae; последнее оксидаза(-), каталаза(-).
Сахаролитические гидролазы: лактоза, глюкоза, маннит, мальтоза, сахароза — ферментация до кислоты без газа.
Примечание: стафилококк глюкозу и маннит ферментирует как в аэробных, так и в анаэробных условиях (отличие от стрептококка); NH3+, H2S-, индол +, восстанавливает нитраты в нитриты, разжижает желатин воронкообразно.
Липолитические ферменты: фосфотаза, лецитовителаза.
Факторы вирулентности стафилококков
1. Структурные компоненты: микрокапсула, компоненты клеточной стенки — протеин А, тейхоевые кислоты, пептидогликан.
2. Ферменты агрессии: плазмокоагулаза, лецитиназа, гиалуронидаза, муромидаза, фибринолизин и др.
3. Токсины: гемолизины, лейкоцидин, эксфолиативный токсин, токсин синдрома токсического шока, энтеротоксин.
Возникновение пищевых отравлений стафилококковой природы связано с действием термостабильных энтеротоксинов (100°С — 30 мин.), продуцируемых золотистыми стафилококками.
Экология и распространение
Стафилококки являются представителями микрофлоры кожи, слизистых полости рта, носоглотки, кишечника. Они постоянно выделяются из организма человека и могут быть обнаружены на предметах обихода, в воде, воздухе, почве. Особую опасность представляет S. aureus как потенциально патогенный для человека микроорганизм.
Источник стафилококковой инфекции: больной человек, носитель.
Механизмы и пути передачи: воздушно-капельный, контактный, алиментарный, инъекционный.
Стафилококки способны поражать практически все ткани организма и вызывать гнойно-воспалительные процессы различной локализации, раневую инфекцию, пищевые интоксикации.
При генерализации местных процессов возникает сепсис, септицемия (септикопиемия).
S. aureus может быть возбудителем внутрибольничных инфекций.
Исследуемый материал: гной, слизь, мокрота, кровь, моча, ликвор и др.
I. Бактериоскопический метод.
Микроскопия мазков, окрашенных по Граму — грамположительные кокки, в виде виноградных гроздей.
II. Бактериологический метод.
1. Посев на солевой бульон (среда накопления).
2. Посев на кровяной МПА — золотистые колонии с зоной α-гемолиза; ЖСА — колонии с радужным ореолом (положительная проба на лецитовиттеллазу).
3. Откол подозрительных колоний на косячок МПА с целью выделения чистой культуры.
4. Проверка чистоты выделенной культуры — микроскопия мазков, окрашенных по Граму (однородная популяция грамположительных гроздевидных кокков).
5. Постановка диагностических тестов: оксидаза (-), каталаза (+) — семейство Micrococcaceae; аэробное и анаэробное сбраживание глюкозы — род Staphylococcus; реакция на плазмокоагулазу (+/-), лецитовиттеллазу (+) — только у S. aureus.
6. Дифференцировка видов
Дифференцировка видов стафилоккоков
| Признак | виды | ||
| S. aureus | S. epidermidis | S. saprophyticus | |
| Плазмокоагулаза | + | - | - |
| Анаэробное сбраживание маннита | + | - | - |
| Окисление маннита | + | - | + |
| Чувствительность к новобиоцину | чувств. | нет | нет |
7. Внутривидовая дифференцировка. Определение антибиотикограммы и фаготипирование.
Иммунитет.Антимикробный, антитоксический, ненапряженный, непродолжительный, связан как с клеточными, так и гуморальными факторами.
Специфическая профилактика и терапия.Профилактика стафилоккоковых инфекций направлена на выявление микробоносителей золотистых стафилоккоков, главным образом, среди персонала хирургических отделений больниц и родовспомогательных учреждений и их санации. Для профилактики стафилоккоковых осложнений проводят активную иммунизацию стафилоккоковым анатоксином больных, накануне плановых хирургических операций, или беременных в конце беременности.
Для специфической терапии септических инфекци используют донорский антистафилоккоковый иммуноглобулин или антистафилоккоковую плазму.
При хронических инфекциях применяют стафилоккоковый анатоксин и/или стафилоккоковую аутовакцину с целью создания антитоксического и антимикробного иммунета.
Антибиотикотерапия стафилоккоковых инфекций проводится под контролем антибиотикограммы.
| | | следующая лекция ==> | |
| ОСНОВНЫЕ ВОЗБУДИТЕЛИ ГСИ | | | СТРЕПТОКОККИ |
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
Номер патента: 618958
Текст
. П. Ефимова, М. А, Каменева М, Николае ермский ордена Трудовог исследовательский инсти расного Знамени нау вакцин и сывороток ахните 54 СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАфИЛОКОККО А НАТОКСИ Н 2еживание токсина фо исутствии Ь -лизина звреживание токсина 1 м раствором форма 0125 М-лизина. ляют следующим обра еф декса, а обеэв ном ведут в пр роме того, обе т 0,05-0,1%-нь присутствии 0 пособ осущест ду Цел ой акт Этосина о натрии три Изобретение относится к области микробиологии и может быть использовано в медицине при получении очищенного сорбированного стафилококкового анатоксина.Известен способ получения стафилококкового анатоксина путем выращивания 5 1 продуцента токсина на питательной среде с последующим отделением культуральной жидкости, содержащей токсин, обезвреживанием его формалином и сорбцией целевого продукта на гель гидрата окиси алю миния Ц.Однако известный способ не позволяет получить препарат с высокой удельной активностью. 15 изобретения - повышение удельивности анатоксина.достигается тем, что культуральдкость перед обезвреживанием токрабатывают. солями хлористого И и цинка, полученный осадок алюиствором двузамещенного фосфата затем элюат фильтруют через гель К центрифугату культуры стафилококка добавляют 20% сухого химически чистого хлористого натрия при непрерывном перемешивании раствора. После полного растворения соли добавляют хлористый цинк в виде насыщенного раствора с тем, что бы конечная концентрация хлористого цинка в центрифугате составляла 0,4-1%, Осажденный токсин оставляют на 16-8 чопри 4-10 С. Образовавшийся осадок отделяют сепарированием от маточного раствора и алюируют 3-4% ным раствором двузамешенного фосфата натрия. Смесь снова сепарируют, нерастворившуюся часть отбрасывают и алюат фильтруют через колонки с гелем сефадекса 8-75, уравновешенного борно-боратным буфером,. г Ь618958 у Ю,рй 7,1, алюцию активного белка с колонок проводят етим же буфером, После йетого активные фракции обьединяют, йокбавлчют Ь лизин в количестве 0,0125 М нформалин в концентрацин 0,05-0,1%, в 5 гзависимости от специфической активностиочищенного токсинакоррес ируют рН до ч7,2-7,4 и провойят обезвреживание при37 С в течение 10=20 суток. кПосле обезвреживания анатоксин сор- "й обпруют на гийроокись алюминия и исноль- изуют по известным схемам. рИспользование предлагаемого способаобеспечивает получение высокоиммуногенных препаратов, обладающих высокойудельной активностью. Полученные препараты имеют среднюю удельную активность240,8 ЙС на 3 мг белкового азота, сред сний титр антитоксина в сыворотках имму- фниэированных кроликов составляет 7,75 ййф л Составитель С. МалютинаТехред Н. БабуркаКорректор Л. Василина Редактор Т, Колодцева Заказ 1115/60 Тираж 527 Подписное ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж, Раушская набд. 4/5Филиал ППП Патентф, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 Формула изобретения 1. Способ получения стафилококковогоанатоксина путем выращивания продуцена токсина на питательной среде с послеуюшим отделением культуральной жидости, содержащей токсин, обезвреживаием его формалином и сорбцией целевоо продукта на гель гидрата окиси алюминия, о т л и ч а ю ш и й с я тем,то, с целью повышения удельной активностианатоксина, культуральную жидость перед обезвреживанием токсинабрабатывают солями хлористого натрияцинка, полученный осадок алюируютаствором йвузамещенного фосфата патия, затем алюат фильтруют через гельефайекса, а обезвреживание токсина формалином ведут в присутствии Ь -лизина.2. Способ по п. 1, о т л и ч а ющ ий с я тем, что обезвреживание токина ведут 0,05-0,1% ным растворомормалина в присутствии 0,0125 М 1,изина,Источники информации, принятые вовнимание при экспертизе1. Справочник по применению бактьрийных и вирусных препаратов. Под ред.С. Г. Йзагурова и Ф. Ф. Резепоча М.,Медицина, 1975, с. 161-163.
Заявка
ПЕРМСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВАКЦИН И СЫВОРОТОК
ЕФИМОВА Н. П, КАМЕНЕВА М. А, НИКОЛАЕВА А. М
МПК / Метки
Код ссылки
Номер патента: 1600633
. из колонны.Содержашие действующее начало фракции, т.е. обладающие сильной ге 5 16006магглютинатной, не ингибируемой ходестеролом активностью, объединяют.Токсин регйцвв 1 в затем осаждаютна сульфате аммония с конечной концентрацией, соответствующей 703-номунасыщению.Таким образом, очищенный токсинрегцвв 1 з вызывает сильный лимфоцитоэ и делает восприимчивыми (сенсибилизирует) мышей СРУ к гистамину в дозе 0,04 мкг/мьппь. Способность токсина регйцвв 1 в к образованиюкластеров на клетках СНО характеризуется удельной активностью порядка65000-260000 СРЛмкг.Результаты физико-химических анализов и биологических активностей(колориметрически определяют возможное содержание загрязнений, ДНК, ДНК, 20сахара, определяют содержание эндотоксина.
Номер патента: 986100
. к нетоксигенным особям иммунной сывороткой.Авторы установили, что нетоксигенные особи внутри популяции существенно влияют на токсинообраэующую 65 Функцию токсигенных особей и резкоснижают содержание токсинов и энзимов в конечйом продукте, Это явление снижает возможность быстро ичетко проводить лабораторную диагностику клостридий, а также мешает впроизводственной практике получатьвысокоактивные анатоксины и антитоксические сыворотки. Низкий выходтоксинов, получаемых известным способом, является следствием того, чтоизвестный способ че устраняет угнетающего влияния нетоксигенныхособей на продукцию токсина токсигенными особями в гетерогенной популяции маточной культуры.П р и м е р 1. Во Флаконы или бутыли с мартеновским или.
Номер патента: 1745768
. использовании его в реакции агглютинации, проводимой по предлагаемой технологии.Предлагаемая технология постановкиреакции коагглютинации при выявлениитоксина С 1. рзгИпдепз в исследуемом материале заключается в следующем, На пред, метное стекло наносят 0,05 мл ( 1 каплю)исследуемого материала (например, копрофильтрата), затем добавляют 0,05 мл (1 каплю) СНСР и 0,05 мл глицин-НО буферногорастворе, Плавным покачиванием предметного стекла капли перемешивают. Реакциюучитывают в течение от 30 с до 3 мин. Приналичии токсинов О. ребг 1 пдепз в исследуемом материале на стекле наблюдается четкая агглютинация с полным просветлениемкапли. Реакцию оценивают по общепринятой четырехкрестовой шкале:- полная коагглютинация. полное.
Номер патента: 121909
. лл, а на рыбо-казеиновой среде от 1 до 4 млн. в 1 лл. Максимальная сила столбнячного токсина на этих средах наблюдается на 6 - 10 день культивирования. Возраст посевного материала от одних суток до 2 лет. Выращивание производится при 35 С.Полученные токсины переводят в анатоксины путем добавления 4% формалина и выдерживания в термостате при 38. Полное обезвреживапие анатоксинов на 40% гидролизата казеина и рыбо-казеиновой среде происходит за 10 - 13 дней.Столбнячные анатоксины, приготовленные на безмясных средах, подвергались концентрации и адсорбции. Для концентрации столбнячного анатоксина применен метод осаждения анатоксина однонормальным раствором в изоэлектрической точке. Непосредственно перед осаждением нативный анатоксин.
Номер патента: 538564
. то)каляна низкий.Цель изобретения - повышение токсичности культуры. Эта цель достигается тем, что осуществляют посев синхронизированных 5 и Я форм при их соотношении 1:3 - 1:4.П р и м е,р, Производственный штамм - продуцент С 1. рег 1 ппдепз типа А 28 (ВК) высевают на плотную питательную среду (3% кровяной агар), инкубируют при 37 С в анаэробных условиях 18 - 24 час, Отбирают 5 и Я формы с помощью трипафлавинового теста в полужидкий агар (0,7%), а затем выращивают в жидких питательных средах в течение 12 - 16 час при 37 С. Выращенные культуры синхронизируют при 4 - 8 С в течение 48 - 72 час и используют в качестве маточ ной посевной культуры, Производственный посев осуществляют смесью синхронизированных 5 и Р форм в соотношении.
Стафилококки, в частности S. aureus продуцируют ряд токсинов, которые классифицируются на три группы : 1) Цитолитические - гемолизины и лейкоцидины; 2) Энтеротоксины и 3) Эксфолиативный токсин.
Гемолизины - 4 антигенно- различных токсина: a, b, g, d. Из всех них альфа- лизин, или альфа- токсин наиболее клинически важен. В культуре он продуцируется только в аэробных условиях, и его продукция усиливается высокой концентрацией диоксида углерода. Это протеин, который инактивируется при 60 о С, но имеет парадоксальное свойства восстанавливать свою активность при дальнейшем нагревании между 80 о и 100 о С. Это связано с тем, что токсин комбинирован с термолабильным ингибитором. При повышении температуры ингибитор инактивируется, высвобождая токсин. Сам ингибитор инактивируется при 60 градусах. В большей степени активен по отношению к эритроцитам барана, в меньшей человека. Он разрушает лизосомы, при этом повреждаются макрофаги и тромбоциты. Это является причиной повреждения циркуляторной системы, мышечной ткани и коры надпочечников. Он является токсоидом и благодаря этому стимулирует иммунитет к стафилококкам.
Альфа-токсин S.aureus может рассматриваться в качестве прототипа олигомеризующих порообразующих цитотоксинов. Ген, кодирующий альфа-токсин, находится в виде единичной копии в хромосоме большинства патогенных штаммов S.aureus, и его экспрессия регулируется внешними факторами на уровне транскрипции дополнительным геном регулятором (agr). Токсин синтезируется в виде молекулы-предшественника, состоящей из 319 аминокислот и имеющей на N-конце сигнальную последовательность из 26 аминокислотных остатков. Выделяемый готовый токсин (протомер) представляет собой гидрофильную молекулу молекулярной массой около 33 кДа, в которой отсутствуют остатки цистеина.
В настоящее время изучена кристаллографическая структура завершенной поры, образованной альфа-токсином. На поверхности плазматической мембраны 7 протомеров токсина образуют грибовидный гептамер (232 кДа), содержащий 3 различных домена. Домены, формирующие "шляпку" и "край", расположены на внешней поверхности плазматической мембраны, а домен "ножки" служит трансмембранным каналом.
Альфа-токсин обладает цитолитическими свойствами в отношении различных типов клеток, включая моноциты, лимфоциты, эритроциты, тромбоциты и эндотелиоциты человека. Различают три последовательные стадии повреждения клеточной мембраны под действием альфа-токсина. Протомеры токсина сначала связываются с мембраной клетки-мишени при помощи не установленных рецепторов или не специфически абсорбируются фосфатидилхолином или холестеролом, входящими в состав билипидного слоя мембраны. Во-вторых, связанные с мембраной протомеры олигомеризуются в нелитический гептамерный комплекс. И в заключение, гептамер претерпевает ряд конформационных изменений, конечным результатом которых является формирование "ножки", которая проникает сквозь цитоплазматическую мембрану. Через образовавшуюся пору происходит вход и выход небольших молекул и ионов, что ведет к набуханию и гибели клеток, имеющих ядро, или осмотическому лизису эритроцитов.
Кроме того, отмечено, что при образовании пор запускаются вторичные процессы, которые также могут обусловить развитие патологических последствий. Эти процессы включают активацию эндонуклеаз, увеличение экзоцитоза тромбоцитов, высвобождение цитокинов и медиаторов воспаления. На примере нескольких экспериментальных моделей на животных было показано, что альфа-токсин является фактором вирулентности S.aureus, однако его точная роль в развитии стафилококковых заболеваний у человека остается неясной.
[Другими порообразующими токсинами являются RTX-токсины грамотрицательных бактерий (гемолизины E. coli) и стрептолизин O, выделяемый S.pyogenes].
Бетта-лизин S. aureus гемолитичен для бараньих эритроцитов, но не для человеческих и кроличьих. Он является сфингомиелиназой и разрушает клеточные мембраны. Продуцируется в аэробных и анаэробных условиях.
Гамма-лизины - наиболее слабые токсины, но действует на все типы эритроцитов от различных млекопитающих.
Дельта-лизин - литичен только для человеческих и нелитичен для бараньих и кроличьих эритроцитов. Действует как детергент, растворяя структурные липиды ЦПМ.
Альфа- и дельта- лизины найдены только у штаммов из клинического материала от человека, тогда как бета- лизины найдены и у штаммов других животных.
Лейкоцидины - токсины состоящие из двух фракций S и F, токсичны только в присутствии обеих фракций, но не по одиночке. Являются летальнымы для лейкоцитов многих животных. Мишенью для них является трифосфоинозитид в мембранах лейкоцитов.
Стафилококковые энтеротоксины (SEA, SEB, SECn, SED, SEE, SEG, SEH, и SEI) отвечают за манифестацию стафилококковой пищевой токсикоинфекции, проявляющейся в рвоте, тошноте, диарее в течение 6 часов после употребления контаминированной пищи. Токсин резистентен к пищеварительным ферментам, термостабилен. Инактивируется медленно (10-40 минут) только при 100 о , что зависит от его концентрации или источника (среды) нахождения. Молоко и молочные продукты наиболее частые источники отравления. Идентифицировано 8 типов токсинов A, B, C1, C2, D, E, G, H и I. Тип, который ранее назывался F типом, в настоящее время называется TSST-1 (токсин синдрома токсического шока).
Энтеротоксины могут иметь другие биологические эффекты - пирогенный, митогенный, тромбоцитопенический, гипотензивный и цитотоксический.
Пищевые токсикоинфекции, вызванные приемом пищи, которая была ранее контаминирована Staphytlococcus aureus, являются одной из форм гастроэнтеритов, клинически проявляющихся рвотой /с/ или /без/ диареи. Это состояние называется стафилококковым пищевым отравлением (СПО) и следует за приемом пищи, которая была предварительно загрязнена S. aureus, и в которой таким образом произошло накопление SЕs (стафилококковые энтеротоксины). Признаки системной токсичности (лихорадка и низкое давление) редко наблюдаются в случаях СПО. Кроме того, СПО – обычно разрешается за короткое время (в пределах от 24 до 48 часов от появления первых симптомов). Не ясно, развивается ли долговременная устойчивость к СПО у людей. Однако, антитела к одному типу SE не обязательно обуславливают устойчивость к СПО вызванными другими серотипами токсинов. В некоторых случаях, антитела, против одного SE могут перекрестно реагировать против другого SE. Например, антитела к SEB могут защищать против SEC, потому что эти два SEs имеют перекрестные антитело-связывающее эпитопы.
Все SEs вызывают рвоту у приматов при оральном введении. Проникшие с пищей SEs не приводят к выраженной энтеротоксэмии, если не использованы чрезвычайно высокие дозы токсинов. В отличие от SEs, оральное введение TSST-1 не вызывает рвоты у обезьян, но с другой стороны возникают системные признаки TSS (стафилококкового токсического шока) когда токсин вводится per or кроликам. Несмотря на его оральную токсичность, TSST-1 не был признан с медицинской точки зрения энтеротоксином. Это связано с тем что TSST-1 восприимчив к действию пепсина и может поэтому быть менее устойчив в кишке по сравнению с SEs. С другой стороны в кишечнике рецепторы для SEs и TSST различаются. Альтернативная гипотеза заключается в том, что весь орально вводимый TSST-1 быстро входит в системное кровообращение не достигая таким образом нижних отделов пищеварительного тракта.
Гастроэнтериты, спровоцированные SEs, ассоциированы с характерными гистологическими нарушениями в различных областях гастроинтестинального трактата, но наиболее серьезные повреждения появляются в желудке и верхней части тонкой кишки. В этих областях наблюдается гиперемия слизистой с проникновением нейтрофилов в эпителиальный слой и lamina propria. В просвете 12-перстной кишки наблюдается накопление слизистогнойного экссудата. В тощей кишке наблюдается расширение крипт и разрушение или исчезновение границы щеточной каймы. В lamina propria тощей кишки появляются обширные нейтрофильные и макрофагальные инфильтраты.
Известно, что цель для SЕs, связь с которой токсинов приводит к появлению рвотного эффекта расположена в брюшной полости, где существуют предполагаемые клеточные рецепторы для SEs. Так как эти рецепторы еще не идентифицированы, остается много неясного относительно ранних событий в патогенезе СПО. Ведущая гипотеза – заключается в том, что рвота возникает в ответ на SE-обусловленное воспаление. Признаки СПО высоко коррелируют с генерированием множества провоспалительных медиаторов, включая простагландин E2, лейкотриен B4, и 5-гидроксиэйкозатетраеноевой кислоты. Цистеиниловые лейкотриены, типа лейкотриена E4, также вовлечены как критические посредники в СПО. Неясно, синтезируются ли эти посредники непосредственно или косвенно в ответ на SEs. В конечном счете, рвотная реакция в ответ на SEs зависит от активации медуллярного рвотного центра, который стимулируется импульсами, переданными через блуждающий нерв (n. vagus) и симпатическую нервную систему.
Несколько групп исследователей считают, что первичными источниками воспалительных медиаторов, синтезируемых и секретируемых в течение СПО, являются тучные клетки. Одна текущая гипотеза заключается в том, что SEs вызывают дегрануляцию тучных клеток после прямой адгезии токсина на рецепторах этих клеток, а не через типичный IgE - опосредованный процесс активации тучных клеток. С другой стороны есть результаты, которые указывают, на то что активация тучных клеток in vivo требует, совместной адгезии на них SEs в комплексе с некими костимулирующими сигналами. Альтернативно, существует нейрогенная модель, в которой тучные клетки стимулируются нейропептидами, которые секретируются сенсорными нервами. Одним из предполагаемых пептидов активирующий тучные клетки и который, как показано, вовлечен в SEB-обусловленную токсичность, была субстанция P. Однако в других исследованиях не было обнаружено адгезии SEA к нервной ткани в гастроинтестинальном тракте у крыс. Этот результат подвергает сомнению теорию о нейропептидном механизме действия SEs. В заключении можно отметить, что роль тучных клеток в СПО подтверждена, однако механизмы, через которые SEs вызывают дегрануляцию тучных клеток, остаются пока не выясненными. Однако понятно, что механизмы действия энтеротоксинов у S. aureus значительно отличается от механизма действия экзоэнтеротоксинов, например, у энтеротоксигенных кишечных палочек и у холерного вибриона.
Эксфолиативные токсины (ETA и ETB) - вызывают эксфолиативные повреждения, при которых внешний слой эпидермиса отделяется от ниже лежащих тканей. Разрушает межклеточные связи (десмосомы) и способствует инвазии ткани без повреждения клетки. При этом образуются межтканевые щели, заполненные жидкостью. Проявляется образованием пузырей. (Болезнь новорожденных или детей младше 5 лет - болезнь Ritter). В настоящее время известно два типа токсинов - термостабильный, синтез которого контролируется хромосомными генами и термолабильный - плазмидами.
TSST (токсин синдрома токсического шока у S. aureus) - синдром токсического шока - мультисистемное заболевание, которое проявляется лихорадкой, гипотензией, миалгией, рвотой, диареей, гиперемией слизистых и эритематозной сыпью с отшелушиванием (десквамацией). Все эти симптомы ассоциированы с инфекцией слизистой, вызванной штаммами S.aureus. В основном возникает у молодых женщин детородного периода при использовании определенного типа высоко адсорбирующих тампонов. TSST член семейства суперантигенов, которые обладают способностью стимулировать Т-клетки, фактор некроза опухоли и кроме этого индуцируют цитокин интерлейкин-1.
Некоторые бактериальные токсины действуют непосредственно на Т-клетки и антигенпрезентирующие клетки иммунной системы. При нарушении функций этих клеток, вызванных токсином, развиваются заболевания. Одна из больших групп этой категории токсинов - пирогенные токсины, обладающие свойствами суперантигенов (PTSAg). Их отличительная особенность - мощное стимулирующее действие на клетки иммунной системы, пирогенность и усиление эндотоксического шока. Эти термостабильные токсины с молекулярной массой от 22 до 30 кДа включают стафилококковые энтеротоксины серотипов от A до E, G и H, стафилококковый TSST-1, пирогенные экзотоксины стрептококков группы А (серотипы от А до C и F), суперантиген стрептококков группы А.
Все токсины, относящиеся к PTSAg, имеют сходную биологическую активность, при этом среди членов данного семейства выделяется TSST-1, имеющий менее 30% гомологии по аминокислотному составу с другими токсинами данного семейства. Ген, кодирующий TSST-1, локализован на хромосоме и в тоже время у штаммов S.aureus ген tst входит в состав различных мобильных генетических элементов. Токсин синтезируется в виде молекулы-предшественника, состоящей из 234 аминокислотных остатков, причем первые 40 остатков являются сигнальной последовательностью, которая отщепляется в процессе образования зрелого токсина массой 22 кДа.
Экспрессия TSST-1 зависит от концентрации кислорода, температуры, pH и уровня глюкозы и регулируется agp локусом S.aureus. По данным кристаллографического анализа, TSST-1 так же, как и ряд других токсинов, относящихся к PTSAg, состоит из двух различных доменов, но в отличие от других членов семейства TSST-1 не нуждается в ионах цинка в качестве кофактора.
В целом мощное иммуностимулирующее свойство PSTAg является прямым результатом связывания токсина с различными участками снаружи от пептидсвязывающего участка молекул главного комплекса гистосовместимости второго класса (расположенных на поверхности антигенпрезентирующих клеток) и специфических участков на рецепторах Т-клеток. В частности, В домен TSST-1 сначала связывается с a-цепью молекул человеческого лейкоцитарного антигена DR1, в то время как А домен специфически связывается с V-b2-элементами рецепторов Т клеток.
Связывание TSST-1 с V-b-2 элементами рецепторов Т-клеток приводит к массивной пролиферации (до 20%) периферических Т-клеток - явление, которое радикально изменяет набор V-b- у Т-клеток. Т-клетки, образовавшиеся в результате пролиферации, могут существовать в состоянии анергии или подвергаются апоптозу. Пролиферация Т-клеток сопровождается массивным высвобождением лимфоцитарных (интерлейкин [ИЛ]-2, a-фактор некроза опухолей, g-интерферон) и моноцитарных (ИЛ-1, ИЛ-6, a-фактор некроза опухолей) цитокинов. Они вызывают гипотензию, высокую температуру тела и диффузную эритематозную сыпь, которые характерны для синдрома токсического шока. На протяжении длительного времени TSST-1 рассматривают как ключевую субстанцию в развитии синдрома стафилококкового токсического шока, однако в последние годы его стали связывать и с развитием синдрома Кавасаки - ведущей причины приобретенных пороков сердца у детей в США.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
| Классы МПК: | A61K39/116 поливалентные бактериальные антигены A61K39/085 стафилококки A61K39/09 стрептококки |
| Автор(ы): | Евглевский Анатолий Алексеевич (RU) , Евглевский Дмитрий Анатольевич (RU) , Майстренко Лариса Анатольевна (RU) |
| Патентообладатель(и): | ФГОУ ВПО Курская государственная сельскохозяйственная академия им. профессора И.И. Иванова (RU) |
| Приоритеты: |
