Туляремия материал для микробиологических исследований

Глава 28. Возбудитель туляремии

Возбудитель туляремии впервые был выделен в 1911 г. Мак-Коем и Чепином при изучении заболевания сусликов в США (штат Калифорния, округ Туляре). В 1921 г. американский исследователь Э. Френсис выяснил, что эта болезнь свойственна также людям и описал ее. Поэтому возбудитель получил название Francisella tularensis.

Морфология. Возбудители туляремии мелкие коккобактерии. Средняя величина их 0,3-0,6 × 0,1-0,2 мкм. Они очень полиморфны: в мазках обнаруживают шарообразные, нитевидные и другие формы. Встречаются культуры, которые проходят через бактериальные фильтры. Бактерии туляремии неподвижны, спор не образуют. Обладают нежной капсулой, грамотрицательны. В мазках-отпечатках, сделанных из органов и окрашенных по Романовскому, бактерии имеют нежно-фиолетовую окраску.

Культивирование. Возбудители туляремии - факультативные анаэробы. Растут они на средах, богатых питательными веществами: свернутой желточной среде, на агаровых мясных или рыбных средах с добавлением цистина, глюкозы и крови. Размножаются лучше на плотных питательных средах, но рост может быть и на жидких и полужидких средах. На плотных питательных средах бактерии туляремии растут медленно, 4-14 дней при температуре 36-37° С и рН 6,8-7,2. Они образуют мелкие, беловатого цвета, выпуклые, блестящие с ровными краями колонии диаметром в 1-3 мм. Вирулентные штаммы в S-форме. Вакцинные штаммы в SR-форме. R-форма бактерий - авирулентна (при длительном культивировании в лабораторных условиях они переходят в R-форму).

Ферментативные свойства. У бактерий туляремии ферментативные свойства мало выражены и выявляются только на специальных средах. Они могут ферментировать глюкозу, мальтозу, маннозу, левулезу с образованием кислоты без газа. Некоторые штаммы расщепляют глицерин, иногда образуют сероводород.

Токсинообразование. Экзотоксин у бактерий туляремии не обнаружен. Болезнетворное действие микробов связано, по-видимому, с эндотоксином.

Антигенная структура. S-форма туляремийных бактерий содержит два антигенных комплекса: О- и Vi-антигены. С Vi-антигеном связаны вирулентность и иммуногенность. R-формы теряют Vi-антиген. О-антиген имеет общий антиген С бруцеллезными бактериями.

Устойчивость к факторам окружающей среды. При температуре 100° С бактерии туляремии гибнут мгновенно, при температуре 60° С - сохраняются 20 мин. При низких температурах и во влажной почве возбудители сохраняются до 4-5 мес. При 1° С в воде они сохраняются до 9 мес, зерне и соломе при 0° С - до 150 дней, хлебе - до 14 дней, мясе - до 30 дней и т. д. Обычные растворы дезинфицирующих веществ убивают их в течение 10-15 мин. Бактерии туляремии чувствительны ко многим антибиотикам.

Восприимчивость животных. Возбудители туляремии патогенны для многих видов животных. Естественная зараженность туляремией известна у 145 видов позвоночных и более 100 видов беспозвоночных животных. Наиболее восприимчивыми к туляремии являются многие виды грызунов и некоторые насекомоядные.

Из экспериментальных животных чувствительны морские свинки и белые мыши.

Источники инфекции - грызуны, преимущественно водяные крысы, полевки, домовые мыши, ондатры, хомяки и зайцы. Источником заражения может быть вода, пищевые продукты, солома и другие субстраты, загрязненные выделениями больных животных.

Пути передачи. Трансмиссивный, воздушно-пылевой, пищевой, контактно-бытовой.

Патогенез. Бактерии туляремии обладают высокой инвазивной способностью. Они проникают через поврежденную и неповрежденную кожу и слизистые оболочки.

В зависимости от пути проникновения в организм возбудители могут локализоваться в коже, слизистых оболочках кишечного тракта, дыхательных путей, глаз и других органах. Из входных ворот по лимфатическим путям они попадают в ближайшие лимфатические узлы, где размножаются и поступают в кровь. В очагах скопления возбудителей туляремии образуются специфические туляремийные гранулемы - первичные бубоны. При дальнейшем распространении микробов могут возникнуть вторичные бубоны. Размеры бубонов колеблются от лесного ореха до куриного яйца.

Различают следующие клинические формы заболевания: бубонную, ангинозно-бубонную, глазобубонную, легочную, абдоминальную и генерализованную. По тяжести течения - легкую и тяжелую формы. По длительности течения - острую и затяжную формы.

Иммунитет. Напряженный и длительный. Определяется гуморальными и клеточными факторами. Характерным для туляремии является аллергическое состояние, возникающее с первых дней заболевания.

Профилактика. Борьба с грызунами и насекомыми. Общесанитарные мероприятия.

Специфическая профилактика. Иммунизируют людей, проживающих в зоне природных очагов. Иммунизацию проводят живой вакциной Гайского - Эльберта. Вакцинируют однократно, накожно. Продолжительность иммунитета 3-6 лет.

Лечение. Бактерии туляремии чувствительны ко многим антибиотикам: стрептомицину, биомицину, тетрациклину, мономицину, канамицину. К пенициллину и сульфамидам они не чувствительны.

1. Каковы морфологические и культуральные особенности возбудителей туляремии?

2. Антигенная структура. С каким антигеном связана вирулентность и какая форма S или R является более вирулентной?

3. Какова устойчивость бактерий туляремии во внешней среде?

4. Какие животные восприимчивы к туляремии? Основные источники заражения.

5. Входные ворота инфекции. Патогенез. Основные формы заболевания.

6. Специфическая профилактика.

Цель исследования: выявление возбудителя туляремии.

Сбор материала и исследование проводят в строго режимных условиях!

1. Содержимое бубона (бубонная, язвенно-бубонная и ангинозно-бубонная формы).

2. Отделяемое слизистой глаз (глазобубонная форма).

3. Мокрота (легочная форма).

4. Испражнения (абдоминальная форма).

5. Кровь (генерализованная форма).

В специальных лабораториях исследуются грызуны и их выделения, членистоногие (клещи, блохи, комары, слепни), вода, пищевые продукты и т. д.



Способы сбора материала

5. Бактериологический (не нашел широкого применения, так как непосредственный посев исследуемого материала на искусственные питательные среды роста бактерий не дает).



Ход исследования

1. Перечислите, какой материал для исследования используют при разных клинических формах заболеваний туляремией.

2. Перечислите основные методы исследования.

3. Какие серологические методы применяют для диагностики туляремии?

4. На каких животных ставят биологическую пробу?

5. Почему бактериологический метод не нашел широкого применения?

Составьте таблицу морфологических, культуральных и ферментативных свойств бактерий туляремии.

Желточная среда. Желтки свежих яиц смешивают с изотоническим раствором натрия хлорида в соотношении 3:2. Смесь разливают по 4-5 мл в пробирки и в скошенном положении стерилизуют при температуре 80° С в течение часа. Проверяют среду на стерильность (в термостате при 37° С) и сохраняют на холоде до 1 мес.

1. БАКТЕРИИ, ВЫЗЫВАЮЩИЕ ЧУМУ, ОТНОСИТСЯ К РОДУ

Правильный ответ 4

2. БАКТЕРИИ ЧУМЫ

1) окрашиваются биполярно

2) образую споры

5) не окрашиваются по Граму

Правильный ответ 1

3. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА ЧУМНЫХ БАКТЕРИЙ

1) строгий анаэроб

2) растут только в бульоне

3) оптимум Т +45°С

5) требуют значительного защелачивания среды

Правильный ответ 4

4. КОЛОНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ

2) прозрачные S-формы

3) слизистые, выпуклые

Правильный ответ 5

5. ЧУМНЫЕ БАКТЕРИИ РАСТУТ НА МПБ В ВИДЕ

3) тонкой, нежной пленки на поверхности

4) плотного придонного осадка

Правильный ответ 2

6. ИДЕНТИФИКАЦИЮ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ ПРОВОДЯТ С УЧЕТОМ

1) биохимических свойств

2) антигенных свойств

3) вирулентности для лабораторных животных

4) морфо-тинкториальных свойств

5) всего вышеперечисленного

Правильный ответ 5

7. НАИБОЛЬШУЮ ОПАСНОСТЬ ПРЕДСТАВЛЯЮТ БОЛЬНЫЕ ЧУМОЙ ПРИ КЛИНИЧЕСКОЙ ФОРМЕ

Правильный ответ 2

8. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ЧУМЫ

1) отказ от внутривенного введения наркотиков

2) соблюдение вегетарианской диеты

3) вакцинирование живой вакциной EV

4) дератизация и десинсекция в очаге

5) ношение противочумного костюма

Правильный ответ 3

9. ДОСТАВЛЯТЬ ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ НА ЧУМУ КАТЕГОРИЧЕСКИ ЗАПРЕЩЕНО

1) в стерильной посуде

2) в герметичной банке, обернутой марлей, смоченной дез. раствором и помещенной в металлический бикс

3) в сопровождении врача или ответственного лица

4) в почтовом конверте или бандероли

5) с соблюдением режима работы с ООИ

Правильный ответ 4

10. МАРКЕРЫ ВОЗБУДИТЕЛЯ ПРИ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКЕ ЧУМЫ

1) специфические антитела

4) cпецифические антигены, ДНК

5) мышиный токсин

Правильный ответ 4

11. ПАНДЕМИИ ЧУМЫ ОТМЕЧАЛИСЬ В ЕВРОПЕ И АФРИКЕ

1) более чем 2 тыс. лет назад

3) только с позднего средневековья

4) с середины XIX века

5) не регистрировались

Правильный ответ 1

12. ПЕРЕНОСЧИКАМИ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ ЯВЛЯЮТСЯ

Правильный ответ 4

13. ДЛЯ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ ЧУМЫ ПРИМЕНЯЮТ

1) РИФ с исследуемым материалом

2) кожно-аллергическую пробу

3) выделение гемокультуры

4) определение специфических антител

5) биологическую пробу

Правильный ответ 1

14. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ ЧУМЫ

4) противочумный иммуноглобулин

5) чумной бактериофаг

Правильный ответ 4

15. УНИКАЛЬНОЕ СВОЙСТВО ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ, ОПРЕДЕЛЯЮЩЕЕ НЕОБХОДИМОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРОТИВОЧУМНОГО КОСТЮМА I ТИПА

1) заражение при вдыхании аэрозоли

2) проникновение через слизистые оболочки дыхательных путей

3) заражение при укусе блох

4) заражение при разделке тушек грызунов

5) способность проникать через неповрежденную кожу

Правильный ответ 5

16. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ ПРИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ БУБОННОЙ ФОРМЫ ЧУМЫ

2) мокрота, кровь

3) пунктат бубонов, кровь

4) пунктат бубонов, сыворотка

5) пунктаты бубонов, селезенки

Правильный ответ 3

17. ОСНОВНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ ФОРМА ЧУМЫ В ЭНДЕМИЧНОМ ОЧАГЕ

Правильный ответ 4

18. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ЧУМЫ

1) использование репелентов

2) дератизация в эндемичных очагах

3) вакцинирование живой вакциной EV

4) запрет на посещение эндемичных очагов

5) ношение противочумного костюма

Правильный ответ 3

19. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ ОТНОСИТСЯ К

Правильный ответ 3

20. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ

1) хорошо растет в обычных питательных средах

2) работа с возбудителем проводится в обычных баклабораториях

3) требует сложных питательных сред с яичным желтком

4) оптимум Т +20-25°С

5) растет чрезвычайно быстро

Правильный ответ 3

21. ТУЛЯРИН – ЭТО

Правильный ответ 3

22. ВЫДЕЛЕНИЕ КУЛЬТУРЫ ПРИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ НА ТУЛЯРЕМИЮ В ЛАБОРАТОРИИ ОСОБО ОПАСНЫХ ИНФЕКЦИЙ ВОЗМОЖНО ТОЛЬКО ПРИ

1) заражении мышей

2) прямом посеве на специальную среду Мак-Коя

3) заражении обезьян

4) заражении волонтеров

5) заражении культуры клеток ткани

Правильный ответ 1

23. КРАСНОЯРСКИЙ КРАЙ ЭНДЕМИЧЕН ПО

4) лихорадке Эбола

Правильный ответ 3

Правильный ответ 1

25. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ НА ТУЛЯРЕМИЮ В ЛАБОРАТОРИЯХ ЛПУ

1) пунктат бубона

2) сыворотка крови

5) отделяемое конъюнктивы

Правильный ответ 2

26. С ВОЗБУДИТЕЛЕМ ТУЛЯРЕМИИ РАБОТАЮТ

1) в лабораториях противочумных институтов и станций

2) в лабораториях крупных лечебных учреждений

3) в лабораториях районных центров Госсанэпиднадзора России

4) в лабораториях медицинских ВУЗов

5) в лабораториях медицинских училищ

Правильный ответ 1

27. В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ТУЛЯРЕМИЕЙ ВЕДУЩАЯ РОЛЬ ПРИНАДЛЕЖИТ

1) плазмозаменяющим препаратам

2) дезинтоксикационным препаратам

4) солевым растворам

Правильный ответ 5

28. ОСНОВНОЙ СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ТУЛЯРЕМИИ В ЭНДЕМИЧНЫХ ОЧАГАХ

4) запрет на посещение леса

5) приём антибиотиков

Правильный ответ 3

29. С ВОЗБУДИТЕЛЕМ ТУЛЯРЕМИИ РАБОТАЮТ

1) в противогазах

3) в противочумных костюмах II типа

4) в обычных медицинских халатах

5) только в перчатках

Правильный ответ 3

30. ПОСТИНФЕКЦИОННЫЙ ИММУНИТЕТ ПРИ ТУЛЯРЕМИИ

1) малонапряженный, непродолжительный

2) напряженный, продолжительный

Правильный ответ 2

31. ОСОБЕННОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ

1) быстро растет

2) не дает роста при прямом посеве материала от больного человека

3) культивируется на обычных питательных средах

4) оптимум Т +28°С

5) микроаэрофил, капнофил

Правильный ответ 2

32. ЧУМА И ТУЛЯРЕМИЯ - ИНФЕКЦИИ

1) особо опасные

5) всё выше перечисленное

Правильный ответ 5

33. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ ОТНОСИТСЯ К РОДУ

Правильный ответ 4

34. ТУЛЯРИН – ЭТО

2) протективный антиген

3) взвесь убитых микроорганизмов

4) ДНК возбудителя туляремии

5) моноклональные антитела

Правильный ответ 3

35. УНИКАЛЬНОЕ ОТЛИЧИЕ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ СОСТОИТ В СПОСОБНОСТИ ПРОНИКАТЬ В ОРГАНИЗМ

2) через слизистые оболочки

3) через неповрежденную кожу

4) через конъюнктиву глаза

5) при сексуальных поцелуях

Правильный ответ 3

36. ВОЗБУДИТЕЛЬ ТУЛЯРЕМИИ

3) окрашивается биполярно

4) в организме образует споры

Правильный ответ 2

37. ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ ИСПОЛЬЗУЮТ

1) холодовое обогащение

2) заражение лабораторных животных

3) первичный посев в среду накопления

4) первичный посев методом секторных посевов

5) заражение культуры клеток ткани

Правильный ответ 2

38. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ТУЛЯРЕМИИ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ

1) живой вакциной EV

2) убитой вакциной

3) живой вакциной СТИ

4) соблюдением личной гигиены

5) живой вакциной Гайского-Эльберта

Правильный ответ 5

Последнее изменение этой страницы: 2019-08-18; Нарушение авторского права страницы

Резервуаром возбудителя туляремии (Francisella tularensis) являются грызуны, человек заражается от них всеми известными способами (при прямом и непрямом контакте, алиментарным, аэрогенным, трансмиссивным путем). По клиническим проявлениям тулерямия напоминает чуму, однако летальность при этой инфекции не высока (1-2%). Выделяют язвенно-железистую (бубонную), глазо-бубонную, ангинозно-буббонную, кишечную и легочную формы туляремии.

Методы микробиологической диагностики туляремии отражены в схеме 5. Для лабораторной диагностики туляремии широко используются иммунологические методы (серологическая диагностика, аллергические пробы), осуществляемые в обычных клинических условиях. Биопробы с выделением чистой культуры возбудителя проводятся в специализированных лабораториях особо-опасных инфекций.

Серологический метод.В сыворотке крови больных специфические антитела появляются с 10-12 дня болезни. В диагностических целях используют развернутую РА (диагностический титр 1:100 и выше), РНГА (диагностический титр 1:1280 и выше), ИФА.

Аллергическая проба.Выпускается 2 вида аллергена– туляринадля постановки соответственно накожной и внутрикожной аллергической пробы – раннего (положительная реакция ГЗТ с 5 дня болезни) и специфического метода диагностики туляремии. Наличие инфильтрата и гиперемии диаметром 1 см и более через 24-48 часов после введения тулярина расценивается как положительная реакция.

Биологический и бактериологический методы. Выделить культуры возбудителя от больного путем непосред­ственного посева материала на питательные среды не удается. Для выделения чистой культуры возбудителя туляремии применяется биопроба. С этой целью исследуемый материал (см. схему 5) вводят мышам или морским свинкам подкожно, накожно, внутрибрюшинно и/или через рот. Если эксперименталь­ные животные в течение 7-15 дней не погибают, их умерщвляют и трупы подвергают бактериоскопическому и бактериологическому исследованию. Для этого готовят мазки-отпечатки из внутренних органов и окрашивают их по Романовскому-Гимзе. Возбудите­ль туляремии - мелкие (0,2-0,7 мкм) кокковидные и палочковидные бактерии, располагающиеся в мазках-отпечатках из органов внутриклеточно и в виде скоплений с образованием нежной капсулы (рис. 8). Применяют также методы экспресс- диагностики (обнаружение возбудителя в материале с помощью ИФМ и ИФА). Параллельно с микроскопическим исследованием кровь, костный мозг, участки внут­ренних органов и лимфатических узлов трупа животного засевают на одну из плотных питательных сред (желточная среда, среда МакКоя, глюкозо-цистиновый агар с кроличьей кровью и антибиотиками), которую культивируют при 37 0 С. Рост туляремийного микроба в виде нежных мелких колоний (рис. 10) появляется на 3-5-20 день, иногда позже. Возбудитель туляремии хорошо размножается также в желточном меш­ке 12-дневного куриного эмбриона.

Выделенную чистую культуру идентифицируют по морфоло­гическим, антигенным (РА с туляремийной агглютинирующей сывороткой) и биологическим свойствам, определяют ее чувствительность к антибиотикам. В биохими­ческом отношении возбудитель туляремии мало активен (ферментация глюкозы, продукция сероводорода).

Схема 5. Микробиологическая диагностика туляремии

Материал: кровь, пунктат из бубона, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы, налет из зева, мокрота и др., органы павших и больных животных, переносчики (слеп­ни, клещи, комары), объекты внешней среды (вода, пищевые продукты, воздух).

Генодиагностика. ПЦР




а б

Рис. 9. Возбудитель туляремии(Francisella tularensis) в мазках из чистой культуры (а) и в мазках-отпечатках органов белой мыши (б), погибшей в результате биопробы. х630.


Рис. 10. Колонии возбудителя туляремии на глюкозо-цистеиновом агаре. х56

Генодиагностика.Для обнаружения ДНК возбудителя туляремии разработана ПЦР.



Туляремия – острое природно-очаговое зоонозное заболевание, характеризующееся лихорадкой, образованием лимфаденитов и поражением различных органов (глаз, легких, кожных покровов, ЖКТ и др.)

Впервые возбудителя туляремии выделили Г. Мак-Кой и Ш. Чепин в 1911 г. от больных белок в районе озера Туляре (штат Калифорния). Подробно изучил свойства F. tularensis американский бактериолог Э. Френсиса.

Мелкие кокковидные палочки размерами 0,2-0,7×0,2 мкм, грамотрицательные, в мазках располагаются беспорядочно, неподвижные, спор не образуют, некоторые имеют капсулу.

Строгие аэробы. Оптимальные условия культивирования: температура – 37 0 С, рН – 6,8-7,2. Рост на питательных средах замедленный – 3-5 суток. Требовательны к питательным средам: культивируются на средах с добавлением яичного желтка (среда Мак-Коя) или крови, цистина и глюкозы (среда Френсиса). В жидких питательных средах – рост в виде пленки. На плотных питательных средах вырастают крупные молочно-белые колонии с ровным краем.

Слабо выражена. Ферментируют глюкозу, мальтозу и некоторые другие сахара до кислоты.

По отношению к глицерину и распространению в природе выделяют 3 географические расы (подвиды) Francisella tularensis:

Голарктическая – не ферментирует глицерин, умеренно патогенна для человека и домашних крыс, распространена в Европе и Азии;

- Среднеазиатская – ферментирует глицерин, умеренно патогенна для человека, встречается на территории нашей страны и Средней Азии;

- Неарктическая – ферментирует глицерин, высоко патогенна для человека, распространена в Северной Америке.

Образуют аммиак, Н 2 S, индол не образуют.

1. О-антиген – соматический, ЛПС КС.

2. Vi-антиген – разновидность капсульного антигена, обладает вирулентными и иммуногенными свойствами.

Ферменты – гиалуронидаза, нейроминидаза, фибринолизин.

Структурные и химические компоненты клетки: пили I порядка, белки клеточной стенки, капсула.

Хорошо сохраняется во внешней среде, особенно при низких температурах:

- В воде, почве при +4 0 С – сохраняют жизнеспособность до 4 месяцев;

- На зерне при +1 0 С – 9 месяцев, при 20-25 0 С 1-2 мес;

- В шкурах животных, погибших от туляремии – до 1 месяца.

Чувствительны к повышенной температуре (до 60С – погибают за 20 минут, кипячение – 1-2 минуты), УФ лучам, действию дезинфиктантов (5% формалин убивают за 2-5 минут), антибиотикам (стрептомицину, тетрациклину, гентамицину, канамицину).

Резервуар и источник инфекции – многочисленные виды грызунов и другие животные (всего 82 вида).

- Трансмиссивный (при укусе кровососущими насекомыми – иксодовыми клещами, комарами, слепнями);

- Фекально-оральный (путь – алиментарный и водный – через инфицированные продукты и воду);

- Контактный (путь – прямой контактный –попадание возбудителя на поврежденные кожные или слизистые покровы при снятии шкур, сборе павших грызунов);

- Аэрогенный (путь – воздушно-пылевой – описан при вдыхании содержащей возбудителей пыли от зерна, соломы).

Инкубационный период – 2-8 дней.

Патогенез и клинические особенности.

Возбудители проникают в организм человека через кожу, слизистые оболочки глаз, дыхательных путей или ЖКТ. В области входных ворот развивается первичный аффект в виде последовательно сменяющих друг друга пятна, папулы, везикулы, пустулы и язвочки. Затем возбудитель попадает в лимфоузлы, где поглощаются фагоцитами, внутри которых активно размножается. Из лимфоузлов F. tularensis попадает в кровь (бактериемия), при этом часть бактерий погибает, что обуславливает интоксикацию. Затем наступает стадия очаговых поражений с образованием гранулем в селезенке, печени, легких, костном мозге.

Клиническое течение инфекции зависит от входных ворот, в соответствии с чем выделяют формы заболевания:

- Бубонную;
- Легочную;
- Желудочно-кишечную;
- Септическая.

Постинфекционный иммунитет – гуморальный и клеточный, стойкий, пожизненный.



Наиболее распространенный метод - постановка кожно-аллергической пробы с тулярином, полученным из бактерий туляремии. Бактериологическое исследование проводится только в режимных лабораториях из-за опасности самозараження

По эпидпоказаниям живой аттенуированной туляремийной вакциной.

Специфическое лечение – не разработано

I. Бактериологический метод:

Материал для исследования:содержимое бубона, отделяемое кожной язвы, конъюнктивы, зева, кровь, мокрота, ткани и органы трупа человека, грызунов, животных, объекты внешней среды.

1 день: Обработка Мазки-отпечатки Заражение

иммунолюминесцентной Окраска по Граму морской свинки

сывороткой (РИФ, РНИФ)

3-5 дни: Патанатомическое мазки-отпечатки Посев на среду Посев на МПА

исследование органов Окраска по Граму Мак-Коя (нет роста).

6-7 дни: Мазок Реакция агглютинации Изучение биохимической

Окраска с туляремийной активности проводят редко

по Граму диагностической (среды Гисса непригодны.

сывороткой Используют монометрический

Бактерии туляремии расщепляют до кислоты гл, мл

II. Биологический метод:

подкожное или внутрибрюшинное заражение мышей, морских свинок:

- патанатомическое исследование (увеличение миндалин, органов РЭС и т.д.);

- мазки – отпечатки, микроскопия;

- посев на питательные среды.

III. Серологический метод:

чаще используют для ретроспективной диагностики реакции:

- агглютинации (диагностический титр у детей 1:100),

- гемагглютинации (титры 1:1280 – 1:1560),

- кровяно-капельную реакцию Минкевича,

IV. Аллергологический метод:

0,1 мл тулярина вводится строго внутрикожно.

Для контроля – 0,1 мл 0,9% физиологического раствора.

Учет результатов через 24-48 часов.

Лабораторная диагностика чумы

1. Материал для исследования

Содержимое бубонов, язв,кровь, СМЖ, мокрота, испражнения, трупный материал(грызунов, людей), блохи.

2. Методы исследования

1. Микроскопический (окраска по Граму, РИФ).

2. Микробиологический с выделением культуры и её идентификацией.

3. Биологический с заражением чувствительных животных (мыши, крысы).

4. Иммунологический: РА, РНГА, РИФ, ИФА.

5. Аллергологический метод применяется invivo,invitro

а) Используется при ДСЛ в виде внутрикожной пробы с аллергеном, полученным из псевдотуберкулезного микроба. Это специфический аутолизат или препарат из его клеточной стенки. Положительная реакция начинает проявляться с 4-7 дня болезни и сохраняется до 5 месяцев. Это реакция in vivo на больных.

б) Аллергеном – псевдотуберкулином пользуются так же для реакции повреждаемости нейтрофилов больного invitro.

Схема бактериологического выделения возбудителя чумы



I этап. Бактериоскопия Отделяемое язвы, бубона,

(грамотрицательные мокрота, кровь, кал, грызуны,

коккобациллы и палочки) насекомые, трупы



Биопроба

Иммунофлюоресценция (втирание)

РИФ (АТ) МПБ





II этапБактериоскопия Среда Туманского-






Биопроба










По Граму Подвижность Бактериоскопия РНГА


III этапБактериоскопия ИФА










РИФ Иммуно-



флюоросценция






РА РНГА





а)Чувствительность к б)Определение

в) Биохимическая активность (углеводов)

+ Глюкоза + Левулеза ± Сорбит

+ Мальтоза - Сахароза ± Декстрин

+ Галактоза - Рафиноза ± Лактоза

+ Маннит - Инулин ± Глицерин

+ Маноза - Дульцит ± Рамноза

IV этап. Анализ полученных результатов и заключение.

Примечание: В связи с высокой энергией роста Y. pestis все этапы могут пройти в течение суток. Поэтому учет результатов следует проводить многократно, каждые 4-8 часов. Заключение дается на основе совокупности всех признаков.

Питательные среды для иерсиний

Среда Клиглера содержит три сахара: глюкозу, сахарозу, лактозу, МПА, индикатор-феноловый красный.

Среда Эндо – МПА, глюкоза, лактоза, индикатор – фуксин.

Среда Левина – МПА, лактоза, индикатор – эозин с метиленовым синим.

Среда Серова Г.Д. – глюкоза, мочевина, желчь, конго красный, генциановый фиолетовый, МПА, молибденовокислый аммоний.

Среда обогащения – фосфатно-буферный раствор.

Реакция Фогес-Проскауэра – В среду Кларка засевают культуру, затем добавляют креатинин / альфа-нафтол с КОН/ В положительном случае бульон окрашивается в розовый цвет.

Среда Кларка – МПБ, 1% глюкозы, К2НРО4.

Среда Бессоновой жидкая голодная с рамнозой.

Среда Бессоновой плотная – 3% голоднокислый агар.

Среда Туманского-Коробковой с рамнозой.

Схема бактериологического выделения возбудителей иерсиниозов




I этап Испражнения, кровь,





рвотные массы, желчь,

По Граму Подвижность дуоденальное содержимое, моча, секционный материал.


Среда обогащения



Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.