Руководство по микробиологической диагностике инфекционных болезней

Микроскопический. С помощью микроскопии нативного патологического материала определяют вид возбудителя заболевания по форме, взаиморасположению и способности окрашиваться определенными красителями.

Бактериологический. Этот метод основан на выделении чистой культуры возбудителя заболевания и его идентификации (определение вида микроба).

Серологический. Метод основан на определении специфических антител в крови больных или переболевших инфекционными заболеваниями к соответствующим возбудителям с помощью различных реакций (агглютинации, пассивной гемагглютинации, связывания комплемента, преципитации и других).

Биологический. В основе этого метода лежит заражение лабораторных животных исследуемым материалом от больного с целью воспроизведения у них инфекционного заболевания или последующего выделения возбудителя.

Аллергический. С помощью этого метода обнаруживают повышенную чувствительность макроорганизма к определенным возбудителям инфекционных заболеваний или продуктам их жизнедеятельности. Для аллергических проб используют препараты, которые называются аллергенами.

Молекулярно-генетический. С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяют в исследуемом материале наличие возбудителя инфекционного заболевания по специфичным для него последовательностям нуклеотидов.

ПРИЗНАКИ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ (для определения вида микроба)

Морфологические - форма, величина и характер расположения микробов друг к другу.

Тинкториалные - способность микробов окрашиваться различными красителями.

Культуральные - особенности роста микробов на жидких и плотных питательных средах.

Биохимические - способность микроорганизмов потреблять различные вещества (углеводы, белки и другие) с образованием характерных конечных продуктов, или наличие у микроорганизмов различных ферментов (уреаза, цистиназа и другие).

Антигенные - особенности химического состава микробных клеток (антигенной структуры), выявляемые с помощью специфических диагностических иммунных сывороток,

Чувствительность к специфическим фагам - способность бактерий лизироваться эталонными специфическими фагами.

Биологические свойства. Токсигенность - способность продуцировать экзотоксин. Чувствительность к определенным колицинам или тип синтезируемых колицинов.

Определение понятий "микроорганизмы" и "вид"

Микроорганизмы - это невидимые простым глазом живые существа, включающие в себя представителей всех царств жизни - плазмиды, вирусы, прокариоты (эубактерии и архебактерии) и эукариоты. Они стоят на низших ступенях эволюции и играют важную роль как в общей экономике природы, так и в патологии человека, животных и растений.

Вид - совокупность микроорганизмов, имевших общий корень происхождения, сходный генотип (более 80% гомологии ДНК) и максимально близкие фенотипические признаки и свойства.

Метод люминесцентной микроскопии.

Люминесцентная микроскопия основана на способности некоторых веществ светиться под действием коротковолновых лучей света. При этом длина волны излучаемого при люминесценции света всегда будет больше, чем длина волны света, возбуждающего люминесценцию. Так, если освещать объект синим светом, то он будет испускать лучи красного, оранжевого, желтого или зеленого цветов.

Препараты для люминесцентной микроскопии окрашивают специальными (светящимися) люминесцентными красителями - флуорохромами (например, раствор акридинового оранжевого 1:5000 - 1:10000). Лучи света от сильного источника (обычно ртутной лампы сверхвысокого давления) пропускаются через сине-фиолетовый фильтр. Под действием этого коротковолнового излучения окрашенные акридиновым оранжевым бактерии начинают светиться красным или зеленым светом. Для того, чтобы синий свет, вызывающий люминесценцию, не мешал наблюдению, над окуляром микроскопа ставят "запирающий" желтый светофильтр, задерживающий синие, но пропускающие желтые, зеленые и красные лучи.

В результате при наблюдении в микроскопе на темном фоне будут видны микробные клетки, светящиеся желтым, зеленым или красным цветом. При окраске акридиновым оранжевым дезоксирибонуклеиновая кислота (ядерное вещество) будет светиться ярко-зеленым цветом, а находящаяся в цитоплазме рибонуклеиновая кислота - красным цветом.

Метод люминесцентной микроскопии позволяет изучать живые нефиксированные бактерии, окрашенные сильно разведенными растворами красителей, не причиняющих вреда микробным клеткам. По характеру свечения могут быть дифференцированы отдельные химические вещества, входящие в состав микробной клетки. Метод с большим эффектом может -быть использован для ускорения диагностики ряда заболеваний.

Флуоресцирующими красителями можно обрабатывать диагностические сыворотки, содержащие антитела к определенным бактериям. Краситель, например, изотиоцианат флуоресцеина, химически соединяется с глобулинами иммунной сыворотки и таким образом как бы избирательно метит антитела.

Люминесцирующие сыворотки могут быть использованы для идентификации выделенных культур бактерии и для ускоренной индикации патогенных микробов во внешней среде и в выделениях больных.

Сущность иммунофлуоресцентного метода исследования заключается в том, что из исследуемого материала готовят мазок и после высушивания и фиксации обрабатывают его люминесцирующей сывороткой. При наличии в исследуемом мазке гомологичных бактерий, вследствие адсорбции на них меченных флуоресцирующим красителем антител, в люминесцентном микроскопе на темном фоне препарата обнаруживается специфическое яркое желто-зеленое свечение по периферии бактериальных клеток. Центральная часть клеток не светится. Присутствующие в препарате посторонние микробные клетки не светятся.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

[youtube.player]

Лабораторная диагностика инфекционных болезней человека основана на обнаружении в организме больного микроба, вызвавшего болезнь, микробных антигенов или продуктов жизнедеятельности (токсинов и др.).

Материалом для исследования служат кровь, гной, моча, мокрота, ликвор, кал, рвотные массы, промывные воды и ткань (биопсия от живого организма или аутопсия от трупа). В некоторых случаях на исследование берут объекты окружающей среды: воздух, воду, пищевые продукты, смывы.

При взятии материала для микробиологического исследования необходимо соблюдать следующие правила:

Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования и при необходимости его повторения.
Материал берут по возможности в начальном периоде болезни, именно в этот период возбудители выделяются чаще, их больше, они имеют более типичную локализацию.
Материал должен быть взят до начала антимикробной химиотерапии или через определенный промежуток времени после введения антибактериального препарата, необходимый для его выведения из организма.
Материал берут непосредственно из очага инфекции или исследуют, соответствующее отделяемое (гной, мочу, желчь и др.) в момент наибольшего содержания в нем возбудителя.
Необходимо исключить возможность контаминации материала нормальной флорой больного и микробами окружающей среды.
Любой клинический материал рассматриваться как потенциально опасный для человека.

Транспортировку материала в лабораторию следует проводить в максимально короткие сроки, соблюдая температурный режим, чтобы исключить гибель неустойчивых видов микроорганизмов, или помещать его в специальные транспортные среды. К материалу прилагают сопроводительный документ, содержащий основные сведения, необходимые для проведения микробиологического исследования (фамилия, имя и отчество больного, номер истории болезни, клинический диагноз и т. д.).

В процессе транспортировки материал следует оберегать от действия света, тепла, холода, от механических повреждений, чтобы исключить гибель микробов и контаминацию материала посторонней микрофлорой. Лучше всего доставлять материал в специальных металлических контейнерах.

Микробиологическая диагностика включает в себя пять методов:

микроскопический, микробиологический (культуральный), биологический, серологический и аллергический.

¨ Микроскопический метод - приготовление микроскопических препаратов (нативных или окрашенных) из исследуемого материала и их изучение с применением различных видов микроскопической техники (световая, темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная, электронная и др.). В бактериологии этот метод называют бактериоскопическим, в вирусологии - вирусоскопическим.

¨ Микробиологический (кулътуралъный) метод - посев исследуемого материала на питательные среды с целью выделения и идентификации чистой культуры возбудителя. В бактериологии культуральный метод называется - бактериологический в микологии - микологический, в протозоологии – протозоологический.

¨ Биологический метод (экспериментальный, или биопроба) - заражение исследуемым материалом чувствительных лабораторных животных. Его используют для выделения чистой культуры возбудителя, определения типа токсина и активности антимикробных химиотерапевтических препаратов.

¨ Серологический метод - определение специфических антител в сыворотке крови больного. С этой целью используют серологические реакции

¨ Аллергологический метод заключается в выявлении инфекционной аллергии (ГЗТ) на диагностический микробный препарат-аллерген. С этой целью ставят кожные аллергические пробы с соответствующими аллергенами.

В вирусологии методы лабораторной диагностики вирусных инфекций имеют свою специфику, учитывая особенности биологии вирусов. Используют три метода лабораторной диагностики:

вирусоскопический, вирусологический и серологический.

• Вирусоскопический метод заключается в обнаружении вируса в исследуемом материале под микроскопом. Чаще всего используют электронный микроскоп, реже люминесцентный.

• Вирусологический метод заключается в заражении исследуемым материалом лабораторных животных, куриных эмбрионов или культуры клеток, индикации вируса и его последующей идентификации.

Особенностью серологического метода в вирусологии является исследование парных сывороток. Первую сыворотку берут у больного в начале болезни, хранят при температуре 4-8 °С, а вторую сыворотку берут через 10-14 дней. Сыворотки исследуют одномоментно. О болезни свидетельствует сероконверсия, т.е. нарастание титра антител во второй сыворотке по сравнению с первой. Диагностически значимой является сероконверсия в 4 раза и выше.

Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет

[youtube.player]

Обзор

Данный документ является обновлением предыдущего документа от 2013 г. и позволит помочь врачам в решении какие необходимы микробиологические тесты для диагностики инфекционных заболеваний.

94-страничный документ содержит информацию по сбору, маркировке и транспортировке проб для анализа, а также новые достижения по диагностике, такие как тесты амплификации нуклеиновой кислоты (NAAT), которые способны достаточно быстро и относительно недорого классифицировать инфекционные патогены. Информация представлена в форме таблиц, удобных для поиска нужной информации.

1. Общие вопросы транспортировки проб.

2. Лабораторная диагностика посевов крови по возбудителям.

3. Рекомендуемые объемы крови для посева у детей.

4. Лабораторные методы диагностики инфицированных аневризм и сосудистых трансплантатов.

5. Лабораторная диагностика перикардита и миокардита.

6. Лабораторная диагностика менингита.

7. Лабораторная диагностика энцефалита.

8. Лабораторная диагностика фокальных инфекций паренхимы головного мозга.

9. Лабораторная диагностика инфекций шунтов ЦНС.

10. Лабораторная диагностика субдуральной эмпиемы, эпидурального абсцесса и гнойного интракраниального тромбофлебита.

11. Лабораторная диагностика инфекций около-глазных структур / коньюктивита, орбитальной и периорбитальной флегмоны, лакримальные инфекции и инфекции век.

12. Лабораторная диагностика инфекций около-глазных структур / кератита.

13. Лабораторная диагностика эндофтальмита.

14. Лабораторная диагностика инфекций ротовой полости и прилежащих структур и тканей, вызванных одонтогенной и орофарингеальной флорой.

15. Лабораторная диагностика мастоидита и злокачественного наружного отита, вызванных орофарингеальными и экзогенными патогенами.

16. Лабораторная диагностика среднего отита.

17. Лабораторная диагностика синусита.

18. Лабораторная диагностика фарингита.

19. Лабораторная диагностика бронхиолита, бронхита и коклюша.

20. Лабораторная диагностика внебольничной пневмонии.

21. Лабораторная диагностика внутрибольничной и ИВЛ-ассоциированной пневмоний.

22. Лабораторная диагностика инфекций плевральной полости.

23. Лабораторная диагностика легочных инфекций у пациентов с муковисцидозом.

24. Лабораторная диагностика пневмонии у пациентов с иммунодефицитом.

25. Лабораторная диагностика эзофагита.

26. Лабораторная диагностика гастрита.

27. Лабораторная диагностика гастроэнтерита, инфекционной и токсин-индуцированной диареи.

28. Лабораторная диагностика проктита.

29. Этиологические возбудители при интра-абдоминальных инфекциях.

30. Забор и транспортировка проб при интра-абдоминальных инфекциях.

31. Лабораторная диагностика остеомиелита.

32. Лабораторная диагностика нативной инфекции суставов и бурситов.

33. Лабораторная диагностика инфекций протезированных суставов.

34. Лабораторная диагностика цистита и пиелонефрита.

35. Лабораторная диагностика простатита.

36. Лабораторная диагностика эпидидимита и орхита.

37. Лабораторная диагностика генитальных поражений.

38. Лабораторная диагностика бактериального вагиноза, грибкового вагинита и трихомониаза.

39. Лабораторная диагностика патогенов при цервиците / уретрите.

40. Лабораторная диагностика патогенов при воспалительных заболеваниях органов малого таза и эндометрите.

41. Лабораторная диагностика инфекций ожоговых ран.

42. Лабораторная диагностика ран от укусов человеком.

43. Лабораторная диагностика ран от укусов животных.

44. Лабораторная диагностика кожных инфекций, связанных с травмой.

45. Лабораторная диагностика инфекций операционных ран.

46. Лабораторная диагностика грибковых инфекций кожи и подкожной клетчатки.

47. Лабораторная диагностика клещевых инфекций.

48. Лабораторная диагностика ВИЧ инфекции.

49. Лабораторная диагностика инфекции вируса Эпштейна-Барра.

50. Лабораторная диагностика цитомегаловирусной инфекции.

51. Лабораторная диагностика инфекции вируса варицеллы зостер.

52. Лабораторная диагностика инфекции вируса простого герпеса.

53. Лабораторная диагностика инфекции человеческого герпесвируса Типа 6.

54. Лабораторная диагностика инфекции парвовируса В19.

55. Лабораторная диагностика коревой инфекции.

56. Лабораторная диагностика паротита.

57. Лабораторная диагностика краснухи.

58. Лабораторная диагностика вируса ВК.

59. Лабораторная диагностика инфекции вирусом JC.

60. Лабораторная диагностика инфекции вирусом денге.

61. Лабораторная диагностика гепатита А и Е.

62. Лабораторная диагностика гепатита В и Д.

63. Лабораторная диагностика вируса гепатита С.

64. Лабораторная диагностика энтеровирусной и парэховирусной инфекции.

65. Лабораторная диагностика респираторно-синцитиальной инфекции.

66. Лабораторная диагностика гриппа А и В.

67. Лабораторная диагностика инфекции вируса западного нила и других эндемических арбовирусов.

68. Лабораторная диагностика аденовирусных инфекций.

69. Лабораторная диагностика инекции вирусом бешенства.

70. Лабораторная диагностика инфекции вируса лимфоцитарного хориоменингита.

71. Лабораторная диагностика инфекции вируса Зика.

72. Подход к диагностике паразитарных инфекций крови и тканей.

73. Обобщение лабораторных методов обнаружения бабезиоза и малярии.

[youtube.player]

В руководстве представлены современные методы микробиологической и серологической диагностики инфекционных болезней, вызываемых патогенными бактериями, грибами и простейшими организмами. Книга содержит необходимые данные по технике световой, фазово-контрастной и люминесцентной микроскопии, применяемой для диагностических целей. Подробно освещены методы приготовления и применения питательных сред, новых и наиболее широко применяемых методов серодиагностики, способов концентрации возбудителей и их обнаружения во внешней среде. Руководство предназначено для врачей-микробиологов, работающих в санитарно-эпидемиологических станциях, клинических лабораториях и других учреждениях, занимающихся лабораторной диагностикой инфекционных заболеваний. Руководство представляет интерес также для микробиологов, эпидемиологов и инфекционистов, занимающихся практической и научной работой. Книга может служить настольным руководством по лабораторной диагностике инфекционных болезней.

Издательство: "Медицина" (1964)

Формат: 70x108/16, 684 стр.

Автор	Книга	Описание	Год	Цена	Тип книги
Березкина Надежда Евгеньевна, Бондаренко Виктор Михайлович, Быков Анатолий Сергеевич	Руководство по медицинской микробиологии. Общая и санитарная микробиология. Книга 1	"Руководство по медицинской микробиологии", написанное коллективом известных ученых и практических врачей, издается в трех книгах. В книге 1 представлены материалы по общей и санитарной… — @Бином, @ @ @ @ Подробнее.	2008	1649	бумажная книга
Белов Л.Г.	Руководство по микробиологии и иммунологии. Учебное пособие	Учебное пособие включает вопросы общей микробиологии, иммунологии, диагностики инфекционных болезней, клинической микробиологии, ветеринарной санитарной микробиологии, микологии и микотоксикологии… — @Инфра-М, @ @ Бакалавриат @ @ Подробнее.	2018	1238	бумажная книга
Руководство по микробиологии и иммунологии. Учебное пособие	Учебное пособие включает вопросы обшей микробиологии, иммунологии, диагностики инфекционных болезней, клинической микробиологии, ветеринарной санитарной микробиологии, микологии и микотоксикологии… — @Инфра-М, @(формат: 60x90/8, 230 стр.) @ Высшее образование @ @ Подробнее.	2016	597	бумажная книга
Рауис Госманов,Виктор Кисленко,Ольга Колесникова,Николай Колычев,Валентина Плешакова,Л. Белов	Руководство по микробиологии и иммунологии. Учебное пособие	Учебное пособие включает вопросы обшей микробиологии, иммунологии, диагностики инфекционных болезней, клинической микробиологии, ветеринарной санитарной микробиологии, микологии и микотоксикологии… — @ИНФРА-М, @(формат: 60x90/8, 230 стр.) @ Бакалавриат @ @ Подробнее.	2016	1601	бумажная книга

ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ ( — от позднелат. identifico отождествляю), определение видовой или типовой принадлежности микроорганизма на основании изучения культурально морфологич., биохимич., серологич. и патогенных свойств. Культуральные свойства микроорганизмов определяют… … Ветеринарный энциклопедический словарь

КИШЕЧНАЯ ПАЛОЧКА — Кишечная палочка. Кишечная палочка: 1 мазок из культуры; 2 колонии на плотных питательных средах. кишечная палочка (Escherichiacoli), условно патогенный микроорганизм рода Escherichia семейства Enterobacteriaceae. К. п. широко… … Ветеринарный энциклопедический словарь

идентификация микробов — (от позднелат. identifico отождествляю), определение видовой или типовой принадлежности микроорганизма на основании изучения культурально морфологических, биохимических, серологических и патогенных свойств.Культуральные свойства… … Ветеринарный энциклопедический словарь

Медицина — I Медицина Медицина система научных знаний и практической деятельности, целями которой являются укрепление и сохранение здоровья, продление жизни людей, предупреждение и лечение болезней человека. Для выполнения этих задач М. изучает строение и… … Медицинская энциклопедия

СССР. Естественные науки — Математика Научные исследования в области математики начали проводиться в России с 18 в., когда членами Петербургской АН стали Л. Эйлер, Д. Бернулли и другие западноевропейские учёные. По замыслу Петра I академики иностранцы… … Большая советская энциклопедия

БАКТЕРИОЛОГИЯ — БАКТЕРИОЛОГИЯ. Содержание: I. Отделы бактериологии. 696 II. История бактериологии, главнейшие этапы ее развития. 697 III. Методы разработка, преподавание и прак тическое значение. 703 IV. Институты и лаборатории … Большая медицинская энциклопедия

[youtube.player]

Увеличение удельного числа пожилых лиц, ослабленных детей и пациентов с хроническими, в том числе инфекционными, заболеваниями, широкое применение инвазивных диагностических и лечебных манипуляций, длительное применение иммунодепрессантов и антибиотиков широкого спектра действия, определяют в настоящее время тенденцию роста числа и форм проявления ОИ. Степень выраженности ответа макроорганизма при развитии ОИ в этих случаях зависит от источников (экзогенных или эндогенных), входных ворот инфекции, вирулентности и количества внедрившихся микроорганизмов, путей их распространения и реактивности организма. Наибольшую опасность представляет проникновение микроорганизмов в общий кровоток, где происходит накопление токсических продуктов их жизнедеятельности и распада. Происходит запуск каскада патологических реакций с выделением про-воспалительных цитокинов, формирующих синдром системного воспалительного ответа и полиорганной недостаточности.

Полиэтиологичность ОИ и многообразие источников возбудителей предопределяют существование разных механизмов, путей и факторов передачи, имеющих свою специфику, как в стационарах различного профиля, так и вне их.

Клинической особенностью этих инфекций является медленное вялотекущее Развитие, хроническое со скудной симптоматикой течение процесса, частое возникновение рецидивов, поражение различных органов и функциональных систем (желудочно-кишечного тракта, бронхолегочной системы, урогенитального тракта, нервной системы и др.). Отмечена тенденция к генерализации в периоды обострения в сочетании с аутоиммунными и иммунокомплексными реакциями.

В процессе длительного течения возможно развитие сенсибилизации организме последующим формированием аллергических болезней. Так, например, очаги хронической инфекции ЖКТ могут быть одной из главных причин развития ато-пического дерматита и рецидивирующей крапивницы. Хронические инфекции дыхательной системы способствуют развитию бронхиальной астмы, поллиноза.

Продукты жизнедеятельности микроорганизмов и паразитов могут быть причиной хронической интоксикации с развитием неврологических нарушений (нарушений сна, аппетита, эмоциональной лабильности, повышенной раздражительности, агрессивности), нарушения обмена веществ.

В практическом плане чрезвычайно важно как можно раньше выявить предрасположенность лиц групп риска к развитию ОИ. Это даст возможность своевременно и адекватно провести профилактические и лечебные мероприятия, обеспечить эпидемиологический надзор за динамикой распространения, изучить этиологию и структуру нозологических форм, выявить источники инфекции.

Среди факторов риска, действующих на макроорганизм, способствующих развитию иммунодефицитного состояния, не связанного с наличием генетических дефектов, и формирующих фон для развития ОИ, следует выделить:

наличие локальных очагов хронической инфекции (хр. тонзиллита, гайморита,! пиелонефрита, остеомиелита и др.) или хронических системных инфекционных болезней (хр. гепатита, ВИЧ-инфекции и др.);
нарушение микроэкологии ЖКТ в результате длительного приема антимикробных препаратов;
состояния, приводящие к потере иммунокомпетентных клеток и иммуноглобулинов (бытовой и производственный травматизм, сложные и обширные хирургические вмешательства, связанные с кровопотерей и лимфореей);
наличие онкологических заболеваний;
ожирение, сахарный диабет;
перенесенные хирургические вмешательства с применением искусственного кровообращения, искусственной вентиляции легких;
длительная иммуносупрессивная терапия (кортикостероидами, цитостатиками и др.);
послерадиационные состояния;
воздействия экстремальных условий внешней среды (температуры, давления, невесомости, биоизоляции, барокамеры и др.).

Существенна роль антропогенной трансформации внешней среды постоянного психоэмоционального стресса и низкого социально-экономического уровня жизни.

Необходимость динамического наблюдения за пациентами групп риска и исследования иммунного статуса, характеризующего функциональное состояние иммунной системы их организма, даже не подлежит обсуждению.

В рамках рассматриваемой проблемы иммунодефицитные состояния определяют как существенное снижение функциональной активности основных компонентов системы иммунитета, ведущее к нарушению защитных механизмов организма в борьбе с возбудителями инфекционных болезней. Нарушается функция различных звеньев иммунной системы — фагоцитарного, Т- и В-клеточного, системы комплемента, цитокинового статуса и др.

На рис. 3.1 представлен алгоритм оценки предрасположенности пациентов к развитию О И.

[youtube.player]

ПРИЗНАКИ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ (для определения вида микроба)

Морфологические - форма, величина и характер расположения микробов друг к другу.

Тинкториалные - способность микробов окрашиваться различными красителями.

Культуральные - особенности роста микробов на жидких и плотных питательных средах.

Определение понятий "микроорганизмы" и "вид"

Метод люминесцентной микроскопии.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

[youtube.player]

Читайте также: