Пцр на 9 основных инфекций входит

Расшифровку итогового анализа проводит ваш лечащий врач. Окончательные результаты будут готовы в течение 1-2 суток, в крайних случаях - в день сдачи анализов.

Где сделать ПЦР диагностику скрытых инфекций в Москве?

Главный врач.
Врач дерматовенеролог, уролог, андролог
Уролог - андролог первой категории.
Стаж работы: более 25 лет.

Ведет прием дерматовенерологических и урологических пациентов с различной патологией. Обследование, диагностика, консультация и лечение ИППП ,простатитов, уретритов ,циститов и т.д. Удаление кожных новообразований различными способами (Сургитрон,лазер,крио).

За звучной аббревиатурой ПЦР скрывается сложная и не слишком понятная для рядового пациента расшифровка — полимеразная цепная реакция. Что же такое ПЦР-диагностика, на чем она основана и почему в последнее время ее стали считать самой перспективной технологией в постановке диагнозов, касающихся инфекционных и вирусных заболеваний? Мы расскажем о преимуществах ПЦР-метода, его особенностях и этапах проведения.

ПЦР-диагностика: что это такое?

Диагностика методом ПЦР существует чуть более 30 лет. Значительно эволюционировав за это время, она зарекомендовала себя как один из наиболее точных способов выявления инфекций. В основе метода лежит принцип многократного увеличения микроскопических концентраций фрагментов ДНК возбудителя в биологической пробе пациента в искусственных условиях. В результате сложного процесса, называемого амплификацией, под воздействием ферментов и изменения температуры (от 50 до 95°С) из одной молекулы ДНК образуется две. При этом происходит копирование участка ДНК, который присутствует только у того вида патогенного микроорганизма, который интересует врача.

Цикл образования новой молекулы ДНК занимает всего около 3 минут, а тридцати-сорока циклов вполне достаточно, чтобы получить количество молекул, необходимое для достоверного визуального определения методом электрофореза.

Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т.д. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов.

ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. На сегодня существует множество различных модификаций ПЦР, включая технологии с использованием не только ДНК, но и фрагментов рибонуклеиновой кислоты (РНК). В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется.

Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация (МПА), которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР.

В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах:

• Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ (ИФА), выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
• Высокая специфичность метода . Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов.
• Высокая чувствительность . При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно. ПРЦ определяет наличие всего 10–100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103–105.
• Универсальность . Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы.
• Скорость получения результатов . Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4–5 часов.
• Диагностика латентных инфекций . ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания.

Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода:

• Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма . При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени (1–2 месяца), за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме.
• Возможность возникновения перекрестной реакции . Подбор фрагментов ДНК (праймеров) осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа.
• Изменчивость микроорганизмов . Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа.

Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.

ПЦР-диагностика проводится в специальной лаборатории в несколько этапов.

1. Забор биоматериала . Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть:
   • Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови.
   • Моча . Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций.
   • Мокрота . Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту собирают в стерильный флакон в количестве 15–20 мг.
   • Кровь, сыворотка, плазма . С их помощью диагностируются гепатиты, герпес, ВИЧ-инфекция. Для анализа используется венозная кровь (1–1,5 мл), собранная у пациента натощак в стерильную пробирку. Хранить биоматериал можно не более суток при температуре 4°С. Замораживать кровь категорически запрещается.
   • Биологические жидкости . К ним относятся слюна, сок простаты, околоплодная, плевральная, спинномозговая, суставная жидкости. Собираются при помощи пункции с использованием стерильного инструментария в количестве 0,1–1,5 мл в стерильные пробирки.
   • Биоптаты , т.е. материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2–3 мм 3 .
2. Хранение и транспортировка биоматериала . Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Если необходимо длительное хранение, то пробы помещают в холодильник с температурой 2–8°С на срок не более одних суток. Допустимо хранение некоторых биоматериалов в течение двух недель в замороженном виде при температуре -20°С. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
3. Выделение ДНК из образца . Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором.
4. Проведение ПЦР . Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2–3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные , включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные , не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе.
5. Регистрация результатов . Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35–40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате.
6. Интерпретация результатов исследования . Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.

Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.

Таблица 1 . Примерные цены на анализы ПЦР в Москве

• Артикул 1838
• Срок выполнения до 2 р.д.
• Вид используемого биоматериала Мазок
• Подготовка к исследованию ДЛЯ ЖЕНЩИН: 1. Женщинам - не мочиться в течение 1,5-2 часов до взятия гинекологического мазка из влагалища. 2. Исследование (процедуру взятия мазка) рекомендуется производить до менструации или через 2 дня после её окончания. 3. Не проводить туалет половых органов и спринцевание, не использовать тампоны в день обследования. 5. Не вступать в незащищенный половой контакт за 48-72 часа до обследования. 6. Воздержаться от защищенного полового контакта накануне обследования. 7. Сдавать анализ, не ранее, чем через 2 недели после применения антибактериальных препаратов. 8. Сдавать анализ не ранее, чем через 2 недели после применения пробиотиков и эубиотиков, содержащих микроорганизмы. 9. После применения препаратов - ингибиторов ПЦР (ультразвуковой контактный гель, гепарин, хлоргесадин и другие хлорсодержащие препараты), свечей, мазей - сдавать анализ, не ранее чем через 24 часа после применения препарата. ДЛЯ МУЖЧИН: ОБЩЕЕ КО ВСЕМ БИОМАТЕРИАЛАМ: 1. Мужчинам - не мочиться в течение 1,5-2 часов до взятия урогенитального мазка (и др. биоматериалов) - ИСКЛЮЧЕНИЕ ЭЯКУЛЯТ! 2. После проведения Трузи предстательной железы, не ранее чем через 24 часа. 3. Не проводить туалет полового органа и спринцевание в день обследования. 4. Не вступать в незащищенный половой контакт за 48-72 часа до обследования. 5. Воздержаться от защищенного полового контакта накануне обследования. 6. Сдавать анализ, не ранее, чем через 2 недели после применения антибактериальных препаратов. 7. Сдавать анализ не ранее, чем через 2 недели после применения пробиотиков и эубиотиков, содержащих микроорганизмы. 8. После применения препаратов - ингибиторов ПЦР (ультразвуковой контактный гель, гепарин, хлоргесадин и другие хлорсодержащие препараты), сдавать анализ, не ранее чем через 24 часа после применения препарата. ОСОБЕННОСТИ (дополнение к общим требованиячм: УРЕТРА: При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 минут после мочеиспускания. МОЧА: 1. Для анализа исползуется первая (средняя) порция утреней мочи. 2. Возможно исследование средней порции мочи, получееной через два и более часов после предшествующего мочеиспускания; СЕКРЕТ ПРОСТАТЫ: Сбор производится только после массажа простаты (уролог и т.п., на пункте невозможно собирать). ЭЯКУЛЯТА: Перед сбором эякулята пацциент мочится полностью, опражняя мочевой пузырь.
• Cодержит исследования
  1. Количество флоры
  2. Кокки
  3. Бактерии, морфологически схожие с Gardnerella vaginalis
  4. "Ключевые" клетки
  5. Палочки
  6. Бактерии, морфологически схожие с Bacteroides spp.
  7. Дрожжеподобные грибы
  8. Бактерии, морфологически схожие с Mobiluncus spp.
  9. Лептротрихи
  10. Бактерии, морфологически схожие с Neisseria gonorrhoae
  11. Эпителий
  12. Простейшие, морфологически схожие с Trichomonas vaginalis
  13. Лейкоциты
  14. Лецитиновые зерна (у мужчин)
  15. Слизь
  16. Эритроциты
  17. Примечание
  18. Фрагменты ДНК Chlamydia trachomatis
  19. Фрагменты ДНК Ureaplasma parvum
  20. Фрагменты ДНК Mycoplasma hominis
  21. Фрагменты ДНК Mycoplasma genitalium
  22. Фрагменты ДНК Gardnerella vaginalis
  23. Фрагменты ДНК Trichomonas vaginalis
  24. Фрагменты ДНК Neisseria gonorrhoae
  25. Фрагменты ДНК Mobiluncus curtisii
  26. Фрагменты ДНК папилломавируса 16 (ВПЧ, HPV 16)
  27. Фрагменты ДНК папилломавируса 18 (ВПЧ, HPV 18)

Заболевания, передающиеся половым путём (ЗППП), или инфекции, передаваемые половым путём (ИППП) — под этими терминами понимают инфекционные заболевания,
наиболее частым путём заражения которых является половой контакт.

Инфекции, преимущественно передающиеся половым путём, в отечественной медицине принято выделять в группу венерических заболеваний (сифилис, гонорея, донованоз, трихомониаз, ВПЧ, генитальный герпес,
мягкий шанкр).

Другие ИППП часто передаются и иными путями: парентеральным (через кровь) (ВИЧ, гепатит B, гепатит C), прямым контактным (чесотка), вертикальным (от матери к ребенку внутриутробно) хламидиоз).

К инфекционным заболеваниям, передающимся половым путём относятся:

бактериальные инфекции: паховая гранулёма (донованоз), мягкий шанкр, сифилис, венерическая лимфогранулёма, хламидиоз, гонорея, микоплазмоз, уреаплазмоз;

вирусные инфекции: ВИЧ, генитальный герпес, остроконечные кондиломы, вызываемые папилломавирусом человека, гепатит B, цитомегаловирус (герпесвирус человека тип 5), контагиозный моллюск,
Саркома Капоши (герпес тип 8);

протозойные инфекции: трихомониаз; грибковая инфекция: кандидоз (молочница);

паразитарные заболевания: фтириаз, чесотка;