Лабораторной диагностики инфекционных заболеваний бактериальной этиологии
Бактериальные заболевания – это группа заболеваний, вызываемых проникновением в организм патогенных (болезнетворных) микроорганизмов.
Ранняя и точная диагностика бактериальных заболеваний имеет большое значение для назначения и проведения адекватной терапии. Нередко бактериальные заболевания выявляются на фоне хронических болезней. С течением времени меняется патоморфоз и клиническая картина бактериальной патологии. Некоторые симптомы становятся более выраженными, другие ослабевают.
Диагностика бактериальных заболеваний.
Диагноз устанавливается комплексно, на основании клинических симптомов, эпидемиологических данных, результатов лабораторных, инструментальных и визуальных методов исследования.
Клинический метод диагностики
Течение бактериальных заболеваний представляет собой ряд сменяющих друг друга периодов, что обусловлено определенными взаимоотношениями микрои макроорганизма. Происходит накопление и размножение возбудителя, проникновение в органы и ткани. Инкубационный период продолжается от момента проникновения возбудителя в организм до появления первых признаков болезни. Начальный период заболевания наблюдается не при всех бактериальных болезнях и характеризуется развитием общих интоксикационных симптомов. Период разгара болезни характеризуется максимальным развитием типичных для данного заболевания симптомов. Поставить правильный диагноз на основании одного симптома удаётся довольно редко, лишь в том случае, если этот симптом присущ только данной болезни.
Рентгенологический метод исследования
Чаще проводят с целью дифференциальной диагностики специфических процессов, например, в лёгких (септическая пневмония, эндокардит).
Инструментальные методы исследования
Позволяют выявить специфические поражения внутренних органов. К подобным методам исследования относятся УЗИ, лапароскопия и т.д.
Лабораторная диагностика бактериальных заболеваний
Очень важную роль в постановке диагноза играет лабораторная диагностика бактериальных заболеваний. Из лабораторных методов используется.
1) Клинический анализ крови. Для ряда бактериальных болезней характерен лейкоцитоз. При некоторых бактериальных болезнях развивается выраженная анемия, но может быть и наоборот: увеличение числа эритроцитов за счёт сгущения крови (например, из-за обезвоживания при поносе и рвоте, которые могут сопровождать воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта). Анализ лейкоцитарной формулы помогает определить стадию, характер, иногда тяжесть воспаления.
2) Клинический анализ мочи. Отражает степень выраженности интоксикации, поражения мочевыделительной системы (воспаления почек, мочевого пузыря, нижних отделов).
3) Биохимические исследования. Результаты биохимических исследований отражают состояние многих органов и систем. Особое значение в бактериальной патологии придаётся функции печени. В печени происходит синтез и распад белков, что отражается в показателях белковых фракций. Чем сильнее выражено поражение печени при бактериологических заболеваниях, тем значительнее снижается содержание белка в плазме крови, в основном за счёт альбуминов. В клинической практике нашло широкое применение одновременное определение в крови активности ферментов АСТ и АЛТ. При заболеваниях печени в первую очередь и наиболее активно изменяется активность АЛТ.
4) Исследование методом ПЦР. Целью этого метода является обнаружение в исследуемом материале фрагментов ДНК или РНК микроорганизмов. ПЦР включает в себя качественные и количественные методы. Качественный метод позволяет определить наличие ДНК или РНК возбудителя и генотип возбудителя. Этот метод имеет большое значение для ранней диагностики заболеваний, когда антитела ещё не появились или их концентрация мала и недоступна для определения. Количественный метод исследования позволяет определить вирусную нагрузку. Этот метод, в том числе, удобен для контроля проводимого лечения.
5) Бактериологический метод. Основан на возможности возбудителя продолжать свою жизнедеятельность вне организма, для чего используют различные субстраты, где возбудитель может размножаться и проявлять свои биохимические свойства. Этот метод заключается в посеве биологического материала больного животного на питательные среды, с последующей идентификацией возбудителя и изучением его морфологических признаков и ферментативной активности. Также возможно провести определение чувствительности к антибиотикам для подбора специфического лечения. Сбор материала для бактериологических исследований необходимо производить до начала лечения антибиотикотерапии, так как под их воздействием микробы изменяются и теряют способность к росту на искусственных питательных средах. Посев на искусственные питательные среды лучше всего производить немедленно после забора материала. Результат микробиологической диагностики также зависит от правильности выбора исследуемого материала, достаточного количества биологического материала, стерильности инструментов, правильного забора материала.
6) Серологический метод исследования (иммунологический) основан на специфическом взаимодействии антигенов и антител. Этиология (причина) инфекционного заболевания может быть установлена как путём обнаружения возбудителя в организме, так и путём выявления антител, образующихся в ходе развития заболевания. Антигены – это любые чужеродные организму животного вещества (в том числе белки бактерий). Антитела – это образующиеся в организме белки, которые уничтожают чужеродные организму агенты. Выявление результатов серологических реакций может проводиться в различных материалах организма: сыворотке, плазме, спинномозговой жидкости, моче и т.д. Особую ценность серологические методы имеют в тех случаях, когда невозможно выделить возбудитель. В зависимости от вида серологического исследования выявляют или антигены, или антитела. Часто метод обнаружения антител используют в случае хронической инфекции.
7) Биологический метод используют для идентификации возбудителя путем заражения лабораторных животных. В широкой практике не применяется.
Соблюдение клинических требований к забору материала, его хранению в конечном итоге приведёт к уменьшению ошибок в диагностике и исключению получения ложных результатов.
Лишай (дерматомикозы) – группа заболеваний кожи и ее производных, вызываемая патогенными грибами. У собак и кошек выделяют три основных вида возбудителя дерматофитии: Microsporum canis, Microsporum gypseum и Trichophyton mentagrophytes.Microsporum canis считают наиболее распространенным кожным заболеванием среди дерматомикозов. Microsporum gypseum обитает в почве. Они очень устойчивы и могут сохраняться во внешней среде до нескольких лет. Trichophyton mentagrophytes встречается значительно реже, переносчиками считаются грызуны.
Наши любимые четвероногие, пернатые, маленькие и пушистые друзья, живя рядом с нами долгие годы, становятся полноправными членами наших семей. Они разделяют наши радости и наши печали, проживают вместе с хозяевами все значимые жизненные события, они дарят тепло и любовь, ничего не требуя взамен; они верны и преданны, никогда не обманут и не предадут. Но, как ни больно, как ни горько это осознавать – наши питомцы не могут жить вечно, а еще горче тот факт, что их век, увы, короче века нашего, человеческого.
1. Принципы и методы лабораторной диагностики инфекционных заболеваний бактериальной этиологии.
2. Виды стафилококков. Морфологические, культуральные, биохимические, серологические свойства стафилококков, их резистентность во внешней среде. Факторы патогенности стафилококков. Стафилококковые инфекции: источник и механизмы передачи, роль стафилококков в патологии человека. Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций. Роль в патологии человека S.epidermidis и S.saprophyticus.
3. Стрептококки: классификация, виды, морфологические, культуральные, биохимические свойства, резистентность во внешней среде, факторы патогенности. Стрептококковые инфекции: источник и механизмы передачи, взаимодействие стрептококков с организмом человека, общая характеристика болезней, вызываемых стрептококками, микробиологическая диагностика.
4. Энтерококки (общая характеристика и роль в патологии человека).
5. Пневмококк: морфологические, культуральные, биохимические, серологические свойства, факторы патогенности. Пневмококковые инфекции: источник и механизмы передачи, роль пневмококка в патологии человека, взаимодействие пневмококка с организмом человека, микробиологическая диагностика.
6. Менингококк и гонококк: сравнительная характеристика морфологических, культуральных, биохимических, серологических свойств, факторов патогенности и резистентности во внешней среде.
7. Менингококковая инфекция: источник и механизм передачи, роль менингококка в патологии человека, взаимодействие менингококка с организмом человека, микробиологическая диагностика.
8. Гонококковая инфекция: источник и механизм передачи, роль гонококка в патологии человека, взаимодействие гонококка с организмом человека, микробиологическая диагностика.
9. Систематика и сравнительная характеристика биологических свойств различных родов энтеробактерий. Признаки дифференциации.
10. Методы забора материала и общие принципы лабораторной диагностики кишечных инфекций. Дифференциально-диагностические среды. Состав, практическое использование.
11. Эшерихии. Таксономия. Морфологические, культурально-биохимические свойства. Антигенная структура. Физиологическая роль эшерихий в кишечнике. Кишечная палочка как санитарно-показательный микроб. Условно-патогенные эшерихии - возбудители эндогенных неконтагиозных эшерихиозов. Классификация патогенных эшерихий: энтеропатогенные (ЭПКП), энтероинвазионные (ЭИКП), энтеротоксигенные (ЭТКП), энтерогеморрагические (ЭГКП). Факторы патогенности. Роль в этиологии острых кишечных заболеваний. Методы микробиологической диагностики эшерихиозов. Профилактика и лечение эшерихиозов.
12. Шигеллы. Биологические свойства, принципы классификации. Особенности клиники и эпидемиологии шигеллезов. Роль шигелл Зонне при токсикоинфекции. Методы лабораторной диагностики бактериальной дизентерии. Меры профилактики и лечение шигеллезов.
13. Клебсиеллы: классификация рода, серологические свойства, биохимические свойства, факторы патогенности. Принцип микробиологической диагностики клебсиеллезов. Роль клебсиелл в патологии человека.
14. Протеи: классификация, отличительные особенности. Роль протеев в патологии человека. Взаимодействие протеев с организмом человека при поражении мочевыводящей системы. Принцип микробиологической диагностики заболеваний, вызываемых протеями.
15. Морганеллы, цитробактеры, эдвардсиеллы, энтеробактеры, гафнии, провиденции, серрации: классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
16. Сальмонеллы. Таксономия. Биологические особенности сальмонелл. Антигенная структура и принципы серологической классификации сальмонелл по Кауффману-Уайту.
17. Брюшной тиф и паратифы: источник и механизм передачи инфекции, общая характеристика болезней. Взаимодействие возбудителей брюшного тифа и паратифов с организмом человека.
18. Методы лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифов на различных стадиях заболевания. Бактериологическая диагностика брюшного тифа. Лабораторная диагностика бактерионосительства. Серологическая диагностика брюшного тифа и паратифов. РА, РНГА в серодиагностике сальмонеллезных инфекций и бактерионосительства, их постановка, учет, оценка результатов. Специфическая профилактика и терапия брюшного тифа и паратифов.
19. Возбудители сальмонеллезов. Внутрибольничный антропонозный сальмонеллез. Факторы патогенности и множественная устойчивость к антибиотикам и антисептикам возбудителей. Методы лабораторной диагностики сальмонеллезных инфекций. Патогенез, иммунитет, диагностика, профилактика.
20. Иерсинии: классификация рода и роль в патологии человека.
21. Yersinia enterocolitica: биохимические свойства, серологические свойства, факторы вирулентности. Кишечный иерсиниоз: источники и пути передачи инфекции, общая характеристика болезни, взаимодействие Yersinia enterocolitica с организмом человека, микробиологическая диагностика. Понятие о псевдотуберкулезном иерсиниозе человека.
22. Особо опасные инфекции. Таксономия и биологические свойства возбудителей. Особенности микробиологической диагностики. Противоэпидемический режим в лабораториях.
23. Патогенные вибрионы. Таксономия. Антигенная структура. Принципы серологической классификации. Биовары. Ферментовары. Факторы патогенности. Токсины холерного вибриона, свойства. Эпидемиология, патогенез и клинические проявления холеры.
24. Методы лабораторной диагностики холеры: бактериологическая диагностика (классическое исследование); экспресс-диагностика больных и контактировавших; методы массового обследования на носительство и обнаружение холерного вибриона во внешней среде. Серологические методы диагностики холеры. Иммунитет. Общая и специфическая профилактика и лечение холеры.
25. Парагемолитический вибрион. Роль нехолерных вибрионов в этиологии пищевых токсикоинфекций.
26. Бруцеллы. Таксономия. Виды бруцелл и признаки их дифференциации. Патогенность бруцелл для человека и животных. Факторы патогенности. Локализация возбудителя в организме. Методы лабораторной диагностики: а)бактериологический; б)биологический; в)серологический; г)аллергодиагностика. Особенности иммунитета при бруцеллезе. Специфическая профилактика и терапия. Антибиотикотерапия.
27. Франциселлы. Классификация, свойства, роль в патологии человека. Возбудитель туляремии. Биологические особенности. Географические варианты. Эпидемиология, клиника и методы лабораторной диагностики туляремии. Иммунитет, специфическая профилактика и терапия заболевания.
28. Возбудитель чумы: классификация, морфологические свойства, культуральные свойства, биохимические свойства. Возбудитель чумы: серологические свойства, факторы патогенности, резистентность во внешней среде.
29. Чума: источник инфекции и механизм (пути) передачи, общая характеристика болезни, взаимодействие возбудителя с организмом человека. Микробиологическая диагностика чумы.
30. Возбудитель сибирской язвы. Таксономия. Биологические свойства. Отличие от антракоидов. Факторы патогенности. Сибирская язва у человека. Микробиологические методы диагностики. Реакция термопреципитации по Асколи. Иммунопрофилактика. Препараты для химиотерапии.
31. Бордетеллы. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
32. Гемофилы. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
33. Легионеллы. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
34. Гарднереллы. Классификация, свойства, роль в патологии человека.
35. Псевдомонады: классификация. Синегнойная палочка: морфологические свойства, культуральные свойства, биохимические свойства. Роль в патологии человека бактерий рода Burkholderia. Синегнойная палочка: серологические свойства, внутривидовое типирование, факторы патогенности, резистентность во внешней среде. Синегнойная инфекция: источник инфекции и механизм передачи, роль синегнойной палочки в патологии человека, микробиологическая диагностика.
36. Ацинетобактеры. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
37. Стенотрофомонады. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
38. Буркхольдерии. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
39. Микобактерии. Общая характеристика. Кислотоустойчивость. Возбудители туберкулеза. Видовой состав. Морфология. Питательные среды. Темпы и характер роста на питательных средах. Чувствительность к факторам внешней среды и химиопрепаратам. Факторы патогенности. Патогенез туберкулеза. Иммунитет. Методы микробиологической диагностики. Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулеза и методы ее определения. Химиопрепараты. Иммунопрофилактика.
40. Условно-патогенные для человека микобактерии. Микобактериозы.
41. Микобактерии проказы (лепры). Свойства. Распространение. Патогенез, микробиологическая диагностика лепры.
42. Актиномицеты. Систематическое положение. Общая характеристика. Распространение. Этиология, патогенез, микробиологическая диагностика актиномикоза.
43. Листерии: классификация, морфологические свойства, факторы патогенности, культуральные свойства, серологические свойства, селективные питательные среды для выделения листерий, резистентность во внешней среде.
44. Листериоз: источник инфекции, передача инфекции, общая характеристика болезни, взаимодействие листерий с организмом человека, микробиологическая диагностика листериоза.
45. Коринебактерии дифтерии. Биовары. Свойства. Факторы патогенности. Методы определения токсигенности. Распространение дифтерии. Патогенез. Клиника. Иммунитет. Микробиологическая диагностика заболевания и носительства. Иммунопрофилактика. Определение иммунной прослойки. Препараты для иммуно- и химиотерапии.
46. Нокардии. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
47. Клостридии. Классификация. Среда обитания. Факторы патогенности. Клостридии столбняка. Таксономия. Свойства. Столбнячный экзотоксин. Структура, фракции. Патогенез столбняка. Иммунитет. Пассивная и активная иммунопрофилактика. Методы установления иммунной прослойки. Иммунотерапия.
48. Клостридии анаэробной газовой инфекции. Таксономия. Свойства. Токсины. Патогенез заболевания. Препараты для иммунопрофилактики и серотерапии.
49. Клостридии диффициле и их роль в патологии человека.
50. Клостридии ботулизма. Таксономия. Свойства. Патогенез ботулизма. Токсин: серотипы, свойства (термо-, кислото- и ферментоустойчивость). Признаки отравления. Серотерапия.
51. Микробиологическая диагностика клостридиальных инфекций.
52. Аспорогенные анаэробы: бактероиды, порфиромонады, превотеллы, фузобактерии, лептотрихии, пептококки, пептострептококки; их роль в патологии человека. Принципы микробиологической диагностики болезней, вызываемых аспорогенными анаэробами.
53. Спирохеты. Классификация.
54. Боррелии. Свойства. Антигенная структура. Этиология, патогенез, микробиологическая диагностика эпидемического возвратного тифа.
55. Клещевые спирохетозы. Эндемические очаги, возбудители. Болезнь Лайма. Этиология, патогенез, микробиологическая диагностика Лайм-боррелиоза.
56. Лептоспиры. Таксономия. Свойства. Серогруппы и серовары. Факторы патогенности. Лептоспироз. Распространение. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Препараты для иммунопрофилактика.
57. Трепонемы. Общая характеристика. Классификация. Трепонема сифилиса. Таксономия. Морфология. Антигенная структура. Чувствительность к факторам внешней среды. Факторы патогенности. Патогенез венерического сифилиса. Микробиологическая диагностика в разные периоды болезни. Препараты для химиотерапии. Бытовые трепонематозы: пинта, фрамбезия, беджель.
58. Кампилобактеры: классификация, морфологические свойства, культуральные свойства, биохимические свойства, факторы патогенности. Кампилобактериоз: источник инфекции и механизмы человека, роль кампилобактеров в патологии человека, микробиологическая диагностика.
59. Хеликобактерии: классификация. Helicobacter pylori: свойства, факторы патогенности. Хеликобактериозы: роль Helicobacter pylori в патологии человека, способы передачи (инфицирования), лабораторная диагностика.
60. Спириллы. Классификация, свойства, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика.
61. Особенности морфологии и культивирования риккетсий.
62. Возбудитель эпидемического сыпного тифа. Биологические свойства. Антигены и токсины. Патогенез первичного сыпного тифа и болезни Брилла. Методы лабораторной диагностики, серологическая дифференциация первичного сыпного тифа и болезни Брилла. Иммунитет, специфическая профилактика и лечение сыпного тифа.
63. Возбудители эндемических риккетсиозов. Особенности патогенеза, клиники и лабораторной диагностики. Меры общей профилактики.
64. Ку-лихорадка: возбудитель, его взаимодействие возбудителя с организмом человека, микробиологическая диагностика.
65. Хламидии. Морфология элементарных и ретикулярных телец. Размножение. Внутриклеточные включения. Виды и серовары хламидий. Этиология и патогенез трахомы, иммунитет. Профилактика трахомы и хламидиальных конъюнктивитов у новорожденных. Этиология и патогенез венерической лимфогранулемы и урогенитальных хламидиозов. Возбудитель орнитоза и его роль в патологии человека. Микробиологическая диагностика хламидийных инфекций.
66. Микоплазмы. Таксономия. Биологические свойства. Этиология и клинико-эпидемиологические особенности микоплазмозов. Методы лабораторной диагностики.
67. Методы лабораторной диагностики микозов и их характеристика. Общая классификация микозов и общая характеристика групп.
68. Возбудители поверхностных микозов (кератомикозов): пестрого лишая, черного лишая, черной пьедры, белой пьедры. Микробиологическая диагностика. Возбудители эпидермофитий (дерматомикозов): эпидермофитии стоп и ногтей, микроспории, трихофитии, фавуса, руброфитии. Микробиологическая диагностика.
69. Возбудители подкожных или субкутанных микозов: споротрихоза, хромобластомикоза, мицетомы, феогифомикоза. Микробиологическая диагностика.
70. Возбудители системных или глубоких микозов: гистоплазмоза, бластомикоза, паракокцидиодомикоза, кокцидиоидомикоза, криптококкоза. Микробиологическая диагностика.
71. Возбудители оппортунистических микозов: кандидоза, зигомикоза, аспергиллеза, пенициллиоза, фузариоза, пневмоцистоза. Микробиологическая диагностика.
[youtube.player]Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний проводится в трех основных направлениях:
1) поиски возбудителя заболевания в материале, взятом у больного (испражнения, моча, мокрота, кровь, гнойное отделяемое и др.);
2) обнаружение специфических антител в сыворотке крови — серологическая диагностика;
3) выявление повышенной чувствительности организма человека к возбудителям инфекционных заболеваний — аллергический метод.
Для выявления возбудителя инфекционного заболевания и его идентификации (определения вида возбудителя) используют три метода: микроскопический, микробиологический (бактериологический) и биологический.
Микроскопический метод позволяет обнаружить возбудителя непосредственно в материале, взятом у больного. Этот метод имеет решающее значение при диагностике гонореи, туберкулеза, заболеваний, вызываемых простейшими: малярии, лейшманиозов, балантидиаза, амебиаза. Возможности микроскопического метода при этих инфекциях обусловлены значительными морфологическими различиями возбудителей данных заболеваний. Особенности морфологии возбудителей играют основную роль в постановке диагноза. Однако микроскопический метод не позволяет поставить диагноз при таких инфекциях, как, например, брюшной тиф и паратифы, дизентерия, потому что различить их возбудителей по морфологическим признакам невозможно (все они грамотрицательные палочки). Для того чтобы различить сходные между собой по морфологии микроорганизмы, их надо получить в чистой культуре и идентифицировать, что можно сделать с помощью микробиологического (бактериологического) метода исследования.
Микробиологический метод заключается в посеве исследуемого материала на питательные среды, выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации. Определение вида и типа возбудителя производят по ряду признаков: морфологии, способности окрашиваться различными красителями (тинкториальные свойства), характеру роста на искусственных питательных средах (культуральные свойства), ферментации углеводов и белков (биохимические свойства). Окончательную принадлежность выделенной культуры к определенному виду (типу) микроорганизмов устанавливают после изучения антигенной структуры, используя различные иммунологические реакции (агглютинации, преципитации, нейтрализации и др.).
Если возбудители инфекционных заболеваний (риккетсии, вирусы, некоторые простейшие) не растут на искусственных питательных средах или необходимо выделить возбудителя из микробных ассоциаций, то используют метод заражения восприимчивых животных биологический.
Биологический метод осуществляют путем выделения возбудителя заболевания или его токсина при заражении лабораторных животных, восприимчивых к данному заболеванию. Диагноз устанавливают по воспроизведению у животного типичной картины заболевания и по выделению чистой культуры возбудителя из различных органов путем посева на питательные среды в случае заражения животного микробными ассоциациями. Идентификацию выделенного возбудителя проводят до вида (типа), используя бактериологический метод. Биологический метод используют также при определении вирулентности возбудителей.
Серологические методы диагностики инфекционных заболеваний основаны на выявлении специфических иммунных антител в сыворотке крови больного. Для этого используют различные иммунологические реакции: реакцию агглютинации при брюшном тифе (Видаля), реакцию Райта при бруцеллезе, реакцию связывания комплемента (Вассермана) при сифилисе, реакцию непрямой гемагглютинации при многих инфекционных заболеваниях, реакцию нейтрализации и торможения гемагглютинации при вирусных заболеваниях.
Аллергический метод позволяет поставить диагноз инфекционного заболевания с помощью аллергических проб — накожных и внутрикожных. Метод выявляет повышенную чувствительность замедленного типа, возникающую в организме при многих инфекционных заболеваниях. Введение аллергена накожно или внутрикожно используют для диагностики бруцеллеза, туляремии, токсоплазмоза и других заболеваний.
Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.
Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.
Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.
[youtube.player]Методы лабораторной диагностики бактериальных инфекций
Методы лабораторной диагностики инфекций делят на прямые (определение антигенов или нуклеиновых кислот возбудителя) и непрямые (определение антител к возбудителю).
Основные методы, используемые для лабораторной диагностики бактериальных инфекций, – это прямая микроскопия, культуральный метод, иммуноферментный анализ (ИФА), реакция иммунофлюоресценции (РИФ) и полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Материалом для исследования являются биологические жидкости организма – чаще кровь, моча, ликвор, слизь из зева или носа, вагинальный или шеечный соскоб, соскоб из уретры, реже синовиальная жидкость, слюна.
Прямая микроскопия (на стекле приготавливают мазок из материала и рассматривают его под микроскопом) предварительно позволяет быстро сориентироваться в этиологии патологического процесса.
Культуральный метод (посев материала на среды с последующей идентификацией возбудителя в подросших колониях) является одним из самых точных методов лабораторной диагностики, но для его выполнения требуется значительное время (несколько дней, для выделения туберкулезной палочки – недели). Возможна полуколичественная оценка содержания возбудителя в материале, а также определение его антибиотикорезистентности.
При ИФА определяют находящиеся в биологической жидкости суммарные антитела и/или антигены бактерий путем связывания их со специфическими антигеном/антителом, сорбированными на твердой фазе и меченными ферментом, с последующим расщеплением хромогена и регистрацией результата. Выявляются как суммарные антитела, так и антитела различных классов (IgM, IgG, IgA). Возможно установление титра антител к возбудителю.
При проведении РИФ определяют антигены возбудителя путем связывания их со специфическим антителом, меченным флюоресцентным агентом с последующей детекцией свечения под микроскопом.
Из быстрых тестов для определения бактериальных возбудителей наиболее часто используют реакцию латекс-агглютинации.
ПЦР подразумевает определение нуклеиновых кислот (РНК или ДНК) возбудителя в биологических жидкостях. Возможна полуколичественная оценка содержания возбудителя в материале и определение его генетических характеристик (например, антибиотикорезистентности).
Факторы, влияющие на результаты лабораторных анализов
На результат лабораторного анализа влияют многие факторы, связанные как непосредственно с качеством лабораторной диагностики (диагностическая чувствительность и специфичность метода и используемых тест-систем), так и с правильным выбором метода лабораторной диагностики (исходя из представлений о биологии возбудителя и течения инфекции) и с правильными забором, хранением и транспортировкой материала в лабораторию.
Ошибки
Суть ошибки
Чувствительность – вероятность получения положительного результата теста у больных пациентов (истинно положительного результата). Рассчитывается как отношение количества людей с истинно положительной реакцией на этот тест при наличии у них какого-либо заболевания к общему числу больных этим заболеванием людей (имеющих и истинно положительные, и ложноотрицательные ответы).
Специфичность – вероятность получения отрицательного результата теста у здоровых пациентов (истинно отрицательного результата). Рассчитывается как отношение количества здоровых людей, у которых имеет место отрицательная реакция на тест к общему числу здоровых людей (имеющих и истинно отрицательные, и ложно положительные ответы).
Положительная предсказующая ценность – вероятность заболевания в процентах при положительном результате теста.
Отрицательная предсказующая ценность – вероятность отсутствия заболевания при отрицательном результате теста.
Интегральная оценка эффективности диагностики (диагностической чувствительности и специфичности) проводится по ROC-кривой (с вычислением AU ROC и 95% доверительных интервалов к ней).
Особое значение имеет осуществление правильного забора, хранения и транспортировки материала. Наиболее требовательным является культуральный метод – необходима быстрая доставка материала в лабораторию и обязательное сохранение жизнеспособности возбудителя. Для постановки ИФА, ПЦР возможно хранение замороженной плазмы крови. В фиксированном препарате можно проводить микроскопию, в т.ч. флюоресцентную (РИФ).
наименование ошибки
причина ошибки
следствие ошибки
предотвращения
Достоинства и недостатки различных методов лабораторной диагностики бактериальных инфекций
Каждый из используемых методов лабораторной диагностики обладает определенными достоинствами и недостатками, и занимает свою нишу в диагностическом процессе. Зачастую для диагностики требуется комбинированное использование нескольких лабораторных методов.
[youtube.player]Читайте также:
