Инфекционный скрининг базовый что это

Перед тем, как чего-нибудь пугаться, нужно сначала посмотреть – действительно ли оно такое страшное, а то - зачем зря стараться…

Актуальность проблемы диагностики и лечения бесплодного брака объясняется высокой частотой этой патологии среди супружеских пар репродуктивного возраста. Частота бесплодных браков, согласно данным зарубежных и отечественных авторов, составляет 8-17% и не имеет тенденции к снижению. Ежегодно в мире регистрируется 2-2,5 млн. новых случаев мужского и женского бесплодия. Бесплодный брак, значительно влияя на демографические показатели, приобретает не только медико-биологическое, но и социальное значение. Характер изменения демографических показателей ставит проблему бесплодного брака в ряд наиболее важных в современной медицине практически на всех территориях РФ.

Бесплодный брак – отсутствие беременности у супругов детородного возраста в течение одного года регулярной половой жизни без каких либо методов контрацепции.

Снижение эффективности лечения бесплодия в РФ зависит от следующих факторов:

отсутствие у врачей, занимающихся проблемой бесплодного брака, достаточной информации о программах и современных методах лечения;
недостаточное количество квалифицированных специалистов;
отсутствия взаимодействия между врачами женских консультаций, центров планирования семьи и гинекологических стационаров, занимающихся лечением бесплодия – с одной стороны, и специалистами центров вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) – с другой.

Кроме того, важным параметром, влияющим на эффективность лечения бесплодия, является возраст женщины и длительность бесплодного брака.

Многочисленные эпидемиологические и клинические исследования убедительно свидетельствуют о том, что репродуктивный возраст женщины ограничен. Так, если в популяции у женщин до 30 лет в течение одного года регулярной половой жизни без предохранения спонтанная беременность наступает в 80% случаев; До 40 лет – в 25%, то после 40 лет - не более, чем в 10%

Группы риска в отношении возможного бесплодия при обращении женщин для обследования к гинекологу представляют собой пациентки:

старше 35;
при длительности бесплодия в этом и предыдущих браках более 5 лет;
с невынашиванием беременности; с нейроэндокринными нарушениями менструального цикла;
с инфекциями передающимися половым путем (ИППП), перенесенными до брака и в этом браке;
с генитальным эндометриозом;
после оперативных вмешательств на женских половых органах, особенно проведенных лапаротомическим доступом (удаление кист яичников, тубоовариальных воспалительных образований, пластика маточных труб, внематочная беременность, миомэктомия).

Представленные группы пациенток нуждаются в углубленном обследовании, даже если при обращении в лечебное учреждение женщина не ставит вопрос о лечении бесплодия (активное выявление потенциально бесплодных супружеских пар).

Проводя обследования и лечения бесплодной супружеской пары, следует учитывать следующие основные положения:

при соблюдении алгоритма диагностики бесплодия (ВОЗ, 1998), причину бесплодия следует устанавливать в течение 3-4 месяцев с момента обращения супружеской пары;
гинеколог и уролог-андролог работает в тесном контакте, проводя одновременное обследование обоих супругов постоянно сравнивая результаты обследования;
после уточнения диагноза длительность непрерывного лечения бесплодия до применения вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) не должна превышать 1-1,5 лет.

В зависимости от причины бесплодия в браке, средняя частота наступления беременности при применении традиционных методов терапии (без использования ВРТ) составляет 30-35% (от 0-90% в зависимости от факторов бесплодного брака);

В случае неэффективности проводимой традиционной терапии в течение 1-1,5 лет, решается вопрос о направлении супружеской пары в клинику ЭКО.

1. Алгоритм обследования женщин, состоящих в бесплодном брак:

Анамнез: сведения о количестве браков, характере бесплодия (первичное/вторичное), длительности бесплодия в количестве беременностей в браках, их исходах и осложнениях. Особенности менструальной функции, нарушения менструального цикла вероятные причины и длительность. Анализ предидущего обследования и лечения, применения противозачаточных средств и лекарственных препаратов, влияющих на фертильность. Экстрагенитальные заболевания и оперативные вмешательства, в т.ч. гинекологические; восполительные заболевания органов малого таза (ВЗОТ, этиологические факторы, особенности клинического течения, количество эпизодов. Особенности влияния факторов окружающей среды, профессиональных вредностей, вредные привычки (алкоголь, наркотики).

Клиническое обследование: определение индекса массы тела; наличие гирсутизма; степень развития молочных желез/галакторея; состоянии щитовидной железы, кожных покровов и слизистых; оценка общего состояния, гинекологический статус.

Инфекционный скрининг: ПЦР, посевы на хламидии, уреаплазму, микоплазму, гонорею, трихомонады, определение флоры влагалища и чувствительности её к антибиотикам, мазок на степень чистоты. Антитела в крови к хламидиям, микоплазме и уреоплазме.

TORCH-комплекс: определение антител IgG и IgM к краснухе, токсоплазмозу, вирусу простого герпеса 1 и 2 типов, цитомегаловирусной инфекции.

Гормональный скрининг: определение уровня пролактина, ЛГ, ФСГ, эстрадиола, тестостерона, кортизола, 17-ОП, ДЭАС, ТТГ, Т4-своб., АТ-ТГ и АТ-ПО (на второй – третий день цикла при регулярных менструациях и на любой день при нарушениях менструального цикла).

Ультразвуковое исследование: органов малого таза, молочных желез у женщин до 45 лет и при наличии показаний щитовидной железы.

Рентгенологические методы: краниограмма, КТ, МРТ, ГСГ (гистеросальпингография) или эхогистеросальпингография (ЭХО-ГСГ ультразвуковое исследование проходимости маточных труб), маммография (женщинам старше 45 лет).

Иммунологические методы: определения антител IgG и IgM, IgA цервикальной слизи, посткоитальный тест.

Эндоскопические методы обследования: лапароскопия и гистероскопия с последующим раздельным диагностическим выскабливанием (или биопсия эндометрия) и гистологическим исследованием соскобов (биоптатов). В случае невыполнения всей программы обследования, диагноз бесплодия у женщины не может считаться уточненным и лечение начинать не рекомендуется, т.к. оно может стать заведомо безуспешным.

2. Алгоритм обследования мужчин, состоящих в бесплодном браке:

Анамнез: количество браков первичное/вторичное бесплодие; длительность бесплодия; предыдущие обследования и лечение по поводу бесплодия.; системные заболевания (сахарный диабет, нервные и психические заболевания и туберкулез); лекарственные и другие методы терапии, влияющие на фертильность; оперативные вмешательства на органах урогенитального тракта; инфекции передающиеся половым путем (ИППП); врожденная и приобретенная патология репродуктивной системы; сексуальная и эякуляторная дисфункция; экологические факторы, профессиональные вредности и вредные привычки (курение, алкоголь, наркотики).

Клиническое обследование: измерение роста и веса; определение наличия признаков гипоандрогении; гинекомастии; андрологическое обследование гениталий; паховой области и предстательной железы.

Инфекционный скрининг: проводит уролог-андролог, забирает материал на исследование: ПЦР, посевы, антитела на хронические инфекции.

Другие лабораторные методы: исследования эякулята (развернутая спермограмма), МАR-тест, клинические анализы крови и мочи (по показаниям), анализ секрета простаты.

Ультразвуковое исследование: органов мошонки, простаты (трансректальное ультразвуковое исследование, ТРУЗИ).

Дополнительные методы исследования: определение уровней пролактина, ФСГ, тестостерона, термография мошонки; краниограмма и КТ (при подозрении на аденому гипофиза); тестикулярная биопсия (по показаниям).

В результате комлпексного обследования бесплодной супружеской пары установлено что женское бесплодие составляет 70-75%, мужское – 35-40%.

Сочетание женского и мужского бесплодия встречается у 30-35% супружеских пар.

3. Этапы терапии бесплодного брака в зависимости от фактов бесплодия:

Трубно-перитонеальный фактор:

Консервативному лечению в течение 6-12 месяцев подлежат пациентки после лапароскопической коррекции выявленной патологии: сальпингостомия, фимбриопластика, сальпингоовариолизис при I-II степени спаечного процесса по классификации Hulka. В случае отсутствия беременности, повторное оперативное лечение не показано и супружеская пара направляется в клинику ЭКО.

Пациентки с III—IV степенью спаечного процесса и пато гией маточных труб, после уточнения диагноза сразу направляютс клинику ЭКО.

Генитальный эндометриоз:

После лапароскопического удаления очагов эндометриоза, эндометриоидных кист яичников и сальпингоовариолизиса (в случае наличия спаечного процесса в малом тазу) в течение 3-6 циклов в зависимости от стадии эндометриоза проводится терапия агонистами гонадотропин-релизинг-гормона, данолом, неместраном, эстроген-гестагенными препаратами.

В случае отсутствия беременности в течение 12 месяцев по завершения комплексной терапии, решается вопрос о направлении супружеской пары в клинику ЭКО.

Пациентки с генитальным эндометриозом при III-IV степени спаечного процесса с нарушением проходимости маточных направляются в клинику ЭКО на фоне проводимой медикаментозной терапии или сразу после ее окончания.

Миома матки и доброкачественные кисты яичников:

Лапароскопическаялапаротомическая миомэктомия (с/без подготовки агонистами РГ), при необходимости – стимуляция овуляции. Наблюдение не более 1-1,5 лет, и в случае отсутствия беременности лечение методом ЭКО.

После удаления кист яичников, при отсутствии патологии маточных труб, наблюдение и стимуляция овуляции по показаниям не более 1-1,5 лет.

Мужской и иммунный факторы бесплодия:

В зависимости от показателей спермограммы и результатов обследования мужа, возможно проведение инсеминации спермой мужа или донора в течение 3-6 циклов. При неэффективной терапии показано ЭКО, нередко с проведением процедуры ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида).

При сочетанном женском и мужском бесплодии, учитывая ранее проводимое длительное и безуспешное лечение, а также возраст пациентки (старше 35 лет), сразу после уточнения факторов бесплодия показано проведение ЭКО.

Эндокринные формы бесплодия:

При отсутствии патологии маточных труб и спаечного процесса в малом тазу, учитывая характер гормональных нарушений (классификация ановуляции ВОЗ, 1998 год), показана терапия аДа (бромэргокриптин), стимуляция овуляции по стандартным протоколам в течение 1-1,5 лет. В случае отсутствия адекватного стимулирующего эффекта в течение 3-6 циклов и подозрение на снижение фолликулярного запаса яичников пациентка направляется в клинику ЭКО.

При сочетании эндокринных форм бесплодия с трубно-перитонеальным (непроходимость труб) фактором, вопрос о терапии решается в зависимости от характера органической патологии.

В клинику ЭКО без обследования по предложенным алгоритмам, рекомендуется направлять супружеские пары:

после хирургического удаления обеих маточных труб;
при нарушениях проходимости маточных труб по данным ГСГ;
при синдроме резистентных или истощенных яичников (СРЯ, СИЯ);
при мужском и иммунном факторах бесплодия;
пациенток старше 35 лет, независимо от выявленной патологии;
при длительности бесплодного брака более 5 лет и неэффективной ранее проводимой терапии;
при настоятельном желании пациентки лечиться методами ВРТ.

В этих случаях, гинеколог назначает следующее предварительное обследование, необходимое для первичной консультации в клинике ЭКО.

Женщины:

инфекционный скрининг (см. алгоритм обследования женщины);
мазок на онкоцитологию;
TORCH-комплекс (см. алгоритм обследования женщины);
гормональный скрининг: пролактин, ЛГ, ФСГ, эстрадиол, тестостерон, кортизол, ДЭАС (дегидроэпиандростерон-сульфат), 17-ОП (оксипрогестерон), ТТГ (тиреотропный рилизинг гормон), Т4своб., АТ-ТГ (антитела к тиреоглобулину), АТ-ПО (антитела к пероксидазе) на 2-3 день менструального цикла при регулярном ритме или на любой день – при нарушениях менструального цикла, прогестерон на 21—23 день менструального цикла;
УЗИ органов малого таза;
УЗИ молочных желез или маммография (в зависимости от возраста пациентки);
Эхо-ГСГ (ультразвуковое исследования проходимости маточных труб) или ГСГ;
кровь на ВИЧ, реакцию Вассермана, гепатит В и С;
группа крови и резус фактор.

Мужчины:

кровь на ВИЧ, реакцию Вассермана, гепатит В и С;
группа крови и резус фактор;
спермограмма.

Супружеская пара предупреждается о возможном дополнительном обследовании после консультации специалиста клиники ЭКО, которое может быть проведено по месту жительства или в клинике.

Смотрите краткую схему обследования: Ссылка.

Репродуктивное здоровье – это состояние полного физического, умственного и социального благополучия, а не просто отсутствие болезней во всех сферах касающихся репродуктивной системы, её процессов и функций.

Бесплодный брак (бесплодие) – это отсутствие беременности у супругов детородного возраста в течение одного года при регулярной половой жизни без применения средств контрацепции. Для женщин старше 35 лет – в течение 6 месяцев. Частота бесплодного брака в России составляет 15-17% , это притом, что показатель равный 15%, является критическим и проблема бесплодия приобретает государственное значение. Откладывание рождения ребенка на более поздний период жизни приводит к тому, что к моменту, когда женщина решается на этот шаг, ее возможности в реализации репродуктивной функции весьма ограничены. Эта проблема имеет социальную обусловленность, так как все большее число женщин позднего репродуктивного возраста обращаются по поводу лечения бесплодия, и эта тенденция растет.

Для выявления причин бесплодия необходимо одновременное обследование пары.

Структура женского бесплодия

Трубно-перитониальное бесплодие
Эндокринное бесплодие
Шеечный фактор
Маточный фактор
Эндометриоз
Иммунологическое бесплодие
Психогенное бесплодие
Идиопатическое бесплодие

Клиническое обследование

гормональный скрининг
УЗИ органов малого таза
проверка проходимости маточных труб
инфекционный скрининг
спермограмма

Гормональный скрининг
На 2-3 день м.ц. – ФСГ, ЛГ, пролактин, тестостерон, свободный Т3, свободный Т4, ТТГ, антимюллеровый гормон, ингибин В
при аменорее – в любой день
Прогестерон – середина лютеиновой фазы

исключение патологии органов малого таза (миома матки, кисты яичников и др.);
размеры и объем яичников;
количество антральных фолликулов в яичнике;
оценка состояния эндометрия;
оценка доминантного фолликула, овуляции, желтого тела (в соответствующие дни цикла);

Обследование функции маточных труб

гистеросальпингография
контрастная ультразвуковая гистеросальпингоскопия
гистероскопия
лапароскопия

хронический эндометрит
внутриматочные синехии
аномалии развития матки
гиперплазия эндометрия
миома матки, субмукозная форма

Инфекционный скрининг

Хламидиоз – ПЦР, культуральный метод;
Уреаплазмоз, микоплазмоз - посев с титром и чувствительностью к антибиотикам;
Вирус простого герпеса - IgG, Ig М, ПЦР
Цитомегаловирус - IgG, Ig М, ПЦР
Токсоплазмоз - IgG, Ig М
Краснуха - IgG, Ig М

Обследование мужчины

Спермограмма
Морфологическое исследование сперматозоидов по Крюгеру.
MAR- тест (исследование спермы на антиспермальные антитела)
Инфекционный скрининг:
при необходимости – бактериологическое исследование эякулята.
Консультация уролога, андролога.

Овариальный резерв, прогностические маркеры:
- ФСГ;
- Ингибин В;
- Антимюллеров гормон (АМГ);‏

Морфометрические маркеры яичников:
- объем яичников
- количество антральных фолликулов

Антимюллеровый гормон (АМГ) является представителем семейства трансформирующих факторов роста-b и во внутриутробном периоде у плодов мужского пола вызывает регрессию мюллеровых протоков.
АМГ секретируется гранулезными клетками яичниковых фолликулов и несет ответственность за переход покоящихся примордиальных фолликулов в фазу активного роста
Не подвергается влиянию ФСГ, поэтому АМГ является более независимым и надежным маркером овариального резерва, чем ингибин В и Е2(эстрадиол)

Более подробно о лечении бесплодия узнайте у врача-гинеколога.

Данный сайт носит исключительно информационный характер и не является публичной офертой, определяемой положениями ст.437 ГК РФ.

Для получения информации о стоимости услуг, пожалуйста, обращайтесь к администраторам.

Лицензия серия Н 0007472 №ЛО-66-01-006067 от 26.07.2019, выдана Министерством здравоохранения Свердловской области

О медицинском центре
Юридическим лицам
Новости и акции
Пациентам
Наши специалисты
Статьи и заметки

За звучной аббревиатурой ПЦР скрывается сложная и не слишком понятная для рядового пациента расшифровка — полимеразная цепная реакция. Что же такое ПЦР-диагностика, на чем она основана и почему в последнее время ее стали считать самой перспективной технологией в постановке диагнозов, касающихся инфекционных и вирусных заболеваний? Мы расскажем о преимуществах ПЦР-метода, его особенностях и этапах проведения.

ПЦР-диагностика: что это такое?

Диагностика методом ПЦР существует чуть более 30 лет. Значительно эволюционировав за это время, она зарекомендовала себя как один из наиболее точных способов выявления инфекций. В основе метода лежит принцип многократного увеличения микроскопических концентраций фрагментов ДНК возбудителя в биологической пробе пациента в искусственных условиях. В результате сложного процесса, называемого амплификацией, под воздействием ферментов и изменения температуры (от 50 до 95°С) из одной молекулы ДНК образуется две. При этом происходит копирование участка ДНК, который присутствует только у того вида патогенного микроорганизма, который интересует врача.

Цикл образования новой молекулы ДНК занимает всего около 3 минут, а тридцати-сорока циклов вполне достаточно, чтобы получить количество молекул, необходимое для достоверного визуального определения методом электрофореза.

Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т.д. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов.

ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. На сегодня существует множество различных модификаций ПЦР, включая технологии с использованием не только ДНК, но и фрагментов рибонуклеиновой кислоты (РНК). В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется.

Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация (МПА), которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР.

В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах:

Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ (ИФА), выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
Высокая специфичность метода . Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов.
Высокая чувствительность . При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно. ПРЦ определяет наличие всего 10–100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103–105.
Универсальность . Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы.
Скорость получения результатов . Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4–5 часов.
Диагностика латентных инфекций . ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания.

Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода:

Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма . При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени (1–2 месяца), за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме.
Возможность возникновения перекрестной реакции . Подбор фрагментов ДНК (праймеров) осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа.
Изменчивость микроорганизмов . Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа.

Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.

ПЦР-диагностика проводится в специальной лаборатории в несколько этапов.

Забор биоматериала . Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть:
- Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови.
- Моча . Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций.
- Мокрота . Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту собирают в стерильный флакон в количестве 15–20 мг.
- Кровь, сыворотка, плазма . С их помощью диагностируются гепатиты, герпес, ВИЧ-инфекция. Для анализа используется венозная кровь (1–1,5 мл), собранная у пациента натощак в стерильную пробирку. Хранить биоматериал можно не более суток при температуре 4°С. Замораживать кровь категорически запрещается.
- Биологические жидкости . К ним относятся слюна, сок простаты, околоплодная, плевральная, спинномозговая, суставная жидкости. Собираются при помощи пункции с использованием стерильного инструментария в количестве 0,1–1,5 мл в стерильные пробирки.
- Биоптаты , т.е. материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2–3 мм 3 .
Хранение и транспортировка биоматериала . Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Если необходимо длительное хранение, то пробы помещают в холодильник с температурой 2–8°С на срок не более одних суток. Допустимо хранение некоторых биоматериалов в течение двух недель в замороженном виде при температуре -20°С. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
Выделение ДНК из образца . Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором.
Проведение ПЦР . Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2–3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные , включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные , не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе.
Регистрация результатов . Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35–40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате.
Интерпретация результатов исследования . Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.

Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.

Таблица 1 . Примерные цены на анализы ПЦР в Москве

Название анализа	Цена, руб.
Определение ДНК хламидия	750
Определение ДНК микоплазмы хоминис	540
Определение микоплазмы гениталиум	350
Определение ДНК уреаплазмы	350
Гонококк, определение ДНК	350
Определение ДНК герпеса (разные типы)	350–600
Определение ДНК кандиды	570
Вирус краснухи, определение РНК	800
Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (разные типы)	350–1900 [1]

Читайте также: