Вирус ящура азия 1

Участники заседания обсуждали необходимость ввести режим повышенной готовности на территории всего региона, но сделали вывод, что ситуация контролируемая, поэтому достаточно усилить меры в тех районах, где заболели животные. Кроме того, бешенство у коров ещё не подтверждено – патологический материал направлен на лабораторные исследования в Федеральный центр охраны здоровья животных во Владимир, результаты поступят в Забайкалье 8 декабря.

За всё время исследований в Забайкалье фиксировали три типа ящура, от которых и прививали животных. В 2016 году коровы подхватили новый для Забайкалья вирус. В ноябре в Молодёжном от ящура слегли свыше 100 голов крупного рогатого скота, в Среднеаргунске Краснокаменского района заболели около двухсот коров.

Ящур – болезнь парнокопытных, проявляющаяся лихорадкой, поражением слизистых оболочек рта, кожи венчика и вымени, у молодых животных – поражением миокарда и скелетных мышц. В настоящее время известны семь антигенных типов вируса ящура: А, О, С, Сат-1, Сат-2, Сат-3 и Азия-1. Для профилактики ящура на каждый тип вируса должна быть вакцина.

По информации Россельхознадзора, все вспышки ящура в России с 2010 года связаны с заносом возбудителя с территорий сопредельных стран, особенно из Китая, и происходили в противоящурной буферной зоне, в которую входят 32 региона, в том числе Забайкальский край. Ежегодно в этих субъектах проводится иммунизация животных вакциной трёх типов – А, О, Азия-1.

В посёлке Молодёжный Приаргунского района ситуация, по мнению Монсонова, также контролируемая – около 60 коров выздоровели, ещё 40 идут на поправку. Отчуждать животных не планируется.

Руководитель департамента по гражданской обороне и пожарной безопасности Забайкальского края Фёдор Кургузкин попросил разъяснить, как в Забайкалье попадает вирус.

Он уточнил, что носителями вируса могут быть дикие козы, а также дзерены, которые мигрируют в Забайкалье из Монголии. Однако эту версию не поддержали участники заседания, напомнив, что перемещение краснокнижных антилоп вдоль Аргуни не зафиксировано.

Ящур – болезнь для людей, к счастью, не особо опасная. По крайней мере, в Забайкалье случаи заражения человека не зафиксированы. Другое дело — бешенство, которое легко передаётся при контакте с больным животным, поэтому после сообщений о падеже шести коров в Александрово-Заводском районе засуетились все отвечающие за безопасность и здоровье населения ведомства. В частности, краевой минздрав на заседании комиссии по ЧС отчитался о наличии свыше 700 вакцин в районной больнице и запасах препаратов в Чите.

Бешенство – смертельное инфекционное заболевание. Вирус бешенства вызывает специфический энцефалит (воспаление головного мозга) у животных и человека. Передаётся со слюной при укусе больным животным. Затем, распространяясь по нервным путям, вирус достигает слюнных желёз, нервных клеток коры головного мозга и, поражая их, вызывает тяжёлые нарушения.

Руководитель краевого Роспотребнадзора Владимир Пинтусов попытался выяснить у главы района Сергея Безъязыкова, сколько человек контактировали с больными животными, но ответа не получил – такой информации на сегодня нет, источник заражения не установлен. Известно лишь, что в хозяйстве содержатся 43 коровы, две собаки, кошка и лошадь.

Участники заседания согласились, что к вспышке бешенства регион должен быть готов в любом случае, но нагнетать ситуацию не стали, решив дождаться результатов лабораторных исследований. Возможно, коров всего лишь отравили.

Болеют животные, а страдают фермеры – только в Приаргунском районе в случае, если всех коров пришлось бы уничтожить, ущерб, по предварительным данным, составил бы 7 миллионов рублей. В такой ситуации есть вероятность, что найдутся недобросовестные люди, которые решат продать мясо или молоко больных животных.

Тем не менее, случаи, когда жители деревень продают мясо без документов, в Забайкалье есть. Так, 26 ноября специалисты краевого Россельхознадзора выявили в торговых точках Приаргунска продавцов, которые реализовывали говядину, свинину и баранину без ветеринарных сопроводительных документов. Мясная продукция снята с продажи.

Сейчас все животные в хозяйствах, где циркулируют вирусы ящура и, возможно, бешенства, контролируют ветеринары. Населению запрещено перемещать животных в другие населённые пункты. Коров заново прививают, ежедневно осматривают. Сдавать на убой переболевший ящуром крупный рогатый скот хозяева смогут только через 3 месяца после отмены карантина.

ЯЩУР (aphthae epizooticae; синоним: афтозная лихорадка, febris aphthosa stomatitis epidemica)— инфекционная болезнь вирусной этиологии, характеризующаяся язвенным поражением слизистой оболочки ротовой полости, а также кожи между пальцами рук, ног и у ногтей.

Содержание

История

Ящур животных известен с 16 века. Заболевания ящуром людей впервые описал норвежский врач Сагар (М. Sagar) в 1764 году. Возможность заражения человека при употреблении молока от больной коровы была экспериментально доказана в опытах самозаражения Гертвигом, Манном и Вилленом (Hertwig, Mann, Villain) в 1834 г. В 1898 году Ф. Леффлер и Фрош (P. Frosch) открыли возбудителя болезни и установили его способность проходить через бактериальный фильтр.

Географическое распространение

В большинстве стран мира, особенно сельскохозяйственных, ящур является одной из самых распространенных инфекционных болезней животных. Лишь в Новой Зеландии он не зарегистрирован вовсе, а в Австралии последние случаи отмечались в 1872 году, что связано в основном с географической обособленностью этих стран. В прошлом нередко возникали эпизоотии (см.) ящура, охватывавшие несколько континентов; в 20 века заболевания ящуром животных регистрируются в виде энзоотий (см.) или эпизоотий, повторяющихся обычно через 10—12 лет. До настоящего времени весьма значительна заболеваемость животных ящуром в Южной Америке, Азии и большинстве стран Африки. Постоянно неблагополучными по этой болезни являются некоторые страны, граничащие с СССР, напр. Иран, Турция, Афганистан.

Несмотря на распространенность ящура среди животных, у людей он регистрируется крайне редко в виде спорадических случаев.

Этиология

Возбудитель ящура — вирус, относящийся к семейству Picor-naviridae, роду Aphthovirus. Существует семь серотипов вируса ящура — А, О, С, Азия 1, SAT 1, SAT 2 и SAT 3, обладающие различными иммунологическими свойствами; кроме того, известно более 60 серовариантов. Все типы и варианты вируса вызывают заболевание с одинаковой клин, картиной. Серотипы А, О и С широко распространены во всем мире, серотип Азия-1 — в странах Азии, а серотипы SAT 1, SAT 2 и SAT 3 — в странах Африки. Животные, переболевшие ящуром, вызванным вирусом одного типа, могут повторно заболеть при заражении вирусом другого типа.

В окружающей среде вирус может сохраняться до нескольких недель, а при низких температурах — до нескольких месяцев. В высушенном состоянии выживаемость вируса повышается. Он устойчив к действию многих хим. веществ, но инактивируется при воздействии щелочей, кислот, формальдегида; быстро погибает при пастеризации и кипячении.

Эпидемиология

Патогенез

Патогенез в значительной степени связан с дерматотропностью возбудителя. Вирус размножается в клетках эпителия слизистой оболочки или эпидермальных клетках кожи, что сопровождается воспалительной реакцией с развитием первичного аффекта — сначала в виде пузырьков, а затем поверхностных изъязвлений. В процессе репродукции вируса в серозном содержимом пузырьков накапливается большое количество возбудителя, который затем проникает в кровь, и происходит генерализация процесса. Диссеминация вируса сопровождается образованием вторичных афт на слизистой оболочке губ, носа, языка, конъюнктиве. Кроме того, вирус задерживается в кожных капиллярах, что приводит к образованию изъязвлений в межпальцевых складках кистей и стоп. Специфические афты возможны также на слизистой оболочке желудка, кишечника и половых органах.

Патологическая анатомия

Морфологические изменения при ящуре у человека изучены недостаточно. Типичные для ящура изменения — пузырьки и афты — развиваются в эпителии слизистых оболочек и эпидермисе кожи. В эпителиальных клетках слизистых оболочек возникают тяжелые дистрофические изменения, главным образом по типу вакуольной дистрофии (см.). Наряду с этим описано сморщивание клеток с пикнозом ядер. В подлежащем участке сосочкового слоя дермы развивается гиперемия и скапливается серозный экссудат. Благодаря частичному сохранению клеток базального слоя на сосочковом слое происходит заживление пузырьков и язв без образования рубца. В единичных случаях ящур у людей может принять тяжелое течение. В этих случаях наблюдается значительное распространение везикулярных высыпаний, эрозий, язв не только в полости рта и зева, но и в пищеводе. При этом везикулы образуются в эпителиальном слое, экссудат скапливается под эпителием, и дно язв представлено подслизистой основой, поверхность которой некротизируется. Иногда наблюдается такое выраженное отслоение экссудатом эпидермиса, что на вскрытии последний снимается с кистей вместе с ногтями, как перчатка. По данным С. И. Ратнера и сотрудники (1956), при затяжном течении ящура под эпителием слизистых оболочек в области подсохшей эрозии обнаруживаются лимфоплазмоцитарные инфильтраты. Эндотелий сосудов набухший, соединительнотканный слой гиалинизирован. На вскрытии обычно обнаруживается увеличение размеров сердца за счет расширения его полостей. Миокард дряблый, глинистого вида на разрезе. Микроскопически выявляется серозный миокардит.

Иммунитет

Перенесенное заболевание оставляет прочный, но непродолжительный (на 1 —1,5 года) иммунитет строго типоспецифического характера.

Клиническая картина

Общепринятой клинической классификации ящура не существует. Можно выделить следующие клинические формы заболевания: кожную, слизистую и кожно-слизистую. При кожной форме немногочисленные изъязвления обнаруживаются только на коже, как правило, в области входных ворот инфекции; эта форма встречается чаще при профессиональном заражении. При слизистой форме основное проявление болезни — афтозный стоматит. Наиболее часто встречается кожно-слизистая форма, которая характеризуется поражением слизистой оболочки ротовой полости и глаз, а также кожи, преимущественно в области пальцев.

Инкубационный период — 2-12 дней (редко до 15), чаще 3—5 дней. Ящур, как правило, начинается остро с озноба, головной боли, слабости, недомогания, ломоты в мышцах, костях, пояснице, повышения температуры до 38—39,5°; описаны случаи постепенного развития болезни. Через 1—2 дня присоединяется сухость и ощущение жжения во рту, у некоторых больных, кроме того, светобоязнь, а иногда жжение при мочеиспускании. На губах, языке, твердом и мягком небе, слизистой оболочке щек на фоне резкой гиперемии и отека появляются мелкие (диам. 2—4 мм) овальные пузырьки , заполненные светлым прозрачным содержимым, которое быстро становится мутновато-желтым. Высыпания особенно многочисленны по краям языка и на его кончике. Через 1—2 суток пузырьки лопаются, а на их месте образуются болезненные, неправильной формы, ярко-красные поверхностные изъязвления, иногда сливающиеся между собой (см. Афты). После вскрытия пузырьков температура тела, как правило, снижается, однако самочувствие больных ухудшается. Они испытывают боль при глотании, появляется обильное слюноотделение (до 4—5 л в сутки), язык значительно увеличивается в размерах, речь становится невнятной, припухают и становятся болезненными регионарные лимфатические узлы. Изъязвления на слизистой оболочке ротовой полости, губ, языке заживают обычно через 3—5 дней, не оставляя рубцов. Пузырьки, также впоследствии изъязвляющиеся, могут появляться на слизистой оболочке носа, влагалища, уретры, на конъюнктиве, задней стенке глотки. Кроме поражения слизистых оболочек, у большинства больных появляются пузырьки на коже. Наиболее характерная их локализация — кожа между пальцами рук и ног, а также у основания ногтей. В области кистей и стоп иногда отмечаются отек, жжение, ощущение ползания мурашек, зуд. В ряде случаев ногти впоследствии сходят. Одновременно у большинства больных нормализуется температура, улучшается самочувствие и наступает период реконвалесценции, продолжающийся 10—15 дней. Однако у некоторых больных возможно повторное высыпание пузырьков на слизистых оболочках и коже, и болезнь приобретает затяжной характер. В случаях тяжелого течения ящура появляется пятнисто-папулезная (иногда геморрагическая) сыпь на шее, груди, спине. У взрослых поражение внутренних органов клинически проявляется очень редко, у детей при ящуре, протекающем обычно тяжелее, чем у взрослых, нередко отмечаются диспептические явления — рвота, частый жидкий стул (иногда с примесью крови).

Кроме острого течения ящура, описаны случаи с затяжным (хроническим) течением (до 1-2 лет). Причем в более поздние сроки болезни высыпания на коже имеют вид не пузырьков, а бугорков, которые рассасываются с последующим шелушением кожи над ними.

Присоединение вторичной инфекции (наблюдается чаще у детей и лиц пожилого возраста, ослабленных предшествующими заболеваниями) может сопровождаться развитием пневмонии, сепсиса. В редких случаях ящур осложняется миокардитом.

Диагноз

Диагноз устанавливают на основании данных эпидемиол. анамнеза (контакт с больными животными, употребление сырого молока) и клин, картины (сочетание острого начала болезни, лихорадки, интоксикации с афтозным поражением слизистой оболочки ротовой полости и изъязвлением кожи в области межпальцевых складок и ногтевых фаланг). В крови в разгаре болезни отмечается эозинофилия, у части больных — лейкопения.

Лабораторная диагностика

Для выделения вируса ящура от больных исследуют отделяемое афт, кровь или мочу и проводят биологическую пробу на восприимчивых лабораторных животных (морские свинки, крольчата, мышата) либо в культуре клеток. Морские свинки легко заражаются при внутрикожном введении вируссодержащего материала в плантарную поверхность задних лапок; на которых первичные поражения в виде афт появляются через 24—48 часов. Мышат-сосунов и крольчат заражают подкожно или интраперитонеально. Через 2—5 суток после инокуляции у них развиваются парезы и параличи, и животные погибают.

Для выделения вируса ящура используют первично-трипсинизированные культуры клеток почек телят или поросят, которые заражают содержимым афт и выдерживают в термостате при t° 37°. Цитопатическое действие наступает через 20—24 часа. С помощью специфических сывороток обнаруживают и идентифицируют типы и варианты вируса ящура в реакции связывания комплемента (см.) и реакции преципитации в агаровом геле (см. Серологические исследования).

В последнее время для диагностики ящура стали применять иммуноферментный метод и иммуносорбентный метод меченных энзимом антител (см. Энзим-иммунологический метод). Эти методы позволяют обнаруживать и проводить количественное определение антител и антигенов.

Дифференциальный диагноз проводят с афтозным стоматитом (см.). Последний чаще встречается у маленьких детей, не сопровождается высокой температурой, характеризуется поражением только слизистой оболочки ротовой полости, другие слизистые оболочки и кожа остаются интактными. При афтозном стоматите, в отличие от ящура, не бывает повышенной саливации, изъязвления более глубокие, язвы никогда не сливаются между собой, дно их покрыто беловатым налетом; эозинофилии в крови не бывает.

В ряде случаев приходится проводить дифференциальный диагноз с ветряной оспой (см.), однако при ней пузырьки располагаются главным образом на туловище, иногда на волосистой части головы, но никогда не бывают на кистях и стопах. Пузырьки на слизистой оболочке ротовой полости и в зеве при ветряной оспе почти никогда не изъязвляются, отсутствует повышенная саливация.

Ящур дифференцируют с многоформной экссудативной эритемой (см. Эритема экссудативная многоформная), для которой характерно появление резко ограниченных, довольно больших (до 3—5 см) ярко-красных пятен или папул (узелков) не только на кистях и стопах, но и на разгибательных поверхностях предплечий и голеней, вокруг крупных суставов, на лице. Поражения слизистых оболочек может не быть, иногда же появляются пузырьки на слизистой оболочке полости рта и губ, но они более крупные, чем при ящуре, а после их вскрытия образуются кровоточащие эрозии.

Иногда возникает необходимость проведения дифференциального диагноза между ящуром и синдромом Бехчета (см. Бехчета болезнь). Следует иметь в виду, что сходные с ящуром поражения слизистых оболочек и кожи вызывает вирус Коксаки А1б (см. Коксаки-вирусные болезни).

Лечение

Больных ящуром необходимо госпитализировать и изолировать до прекращения острых проявлений заболевания, но не менее чем на 14 дней (считая с его начала). Этиотропная терапия не разработана. Большое значение имеет тщательный уход за больными и соответствующая диета (дробное питание жидкой пищей 5—6 раз в день). Местно применяют полоскание полости рта одним из следующих растворов: 3% раствор перекиси водорода, 0,01—0,1% перманганата калия, 0,1% этакридина лактата (риванола); используют также настой ромашки. Афты обрабатывают 2—5% раствором нитрата серебра или концентрированным (1—3%) раствором перманганата калия. В период заживления афт рекомендуется смазывать их винилином, каротолином, маслом шиповника или облепихи. При поражении конъюнктивы назначают промывания глаз 2% раствором борной кислоты и закапывание 5—6 раз в сутки в оба глаза 30% раствора сульфацил-натрия. При тяжелом течении болезни, особенно у детей, при присоединении вторичной инфекции целесообразно назначение антибиотиков и дезинтоксикационной терапии.

Прогноз

Ящур, как правило, протекает доброкачественно и заканчивается полным выздоровлением через 2—3 недели.

Профилактика

Наиболее эффективным методом профилактики ящура у людей является ликвидация его среди животных. С этой целью осуществляется комплекс санитарно-ветеринарных мероприятий (ветеринарный надзор за ввозимыми животными, иммунизация здоровых животных, карантин и т. д.). Лица, ухаживающие за больными животными, должны быть обучены правилам личной и производственной гигиены, обеспечены спецодеждой. С целью предупреждения заражения через молоко и мясо больных и подозрительных на заболевание животных запрещается продажа этих продуктов; mhgo направляется на промышленную переработку, молоко пастеризуется при температуре 85° в течение 30 минут или кипятится в течение 5 минут. Важна санитарно-просветительная, работа среди населения районов, неблагополучных по ящуру, в частности разъяснение необходимости обязательного кипячения молока не менее 5 минут.

Г. Н. Кареткина; В. Н. Сюрин (этиол., лаб.), И. А. Чалисов (пат. ан.).

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Фомина Светлана Николаевна. Иммунобиологические свойства вируса ящура типа Азия-1, штамм ь 1987/амурский/2005, и усовершенствование диагностических тест - систем : диссертация. кандидата ветеринарных наук : 16.00.03 Владимир, 2007 135 с. РГБ ОД, 61:07-16/184

Содержание к диссертации

2. Обзор литературы 14

2.1. Общие сведения о ящуре 14

2.2. Эпизоотическая ситуация по ящуру 15

2.3. Вирус ящура 16

2.4. Биологические особенности вируса ящура типа Азия-1. 18

2.5. Антигенная вариабельность и родство вируса ящура. 19

2.6. Основные методы лабораторной диагностики ящура. 25

2.7. Профилактика. 37

2.8. Заключение по обзору литературы. 41

3. Собственные исследования 44

3.1. Материалы и методы 44

3.1.1. Материалы 44

3.1.1.1. Вирусный материал 44

3.1.1.2. Вакцина 44

3.1.1.3. Подопытные животные 44

3.1.1.4. Культуры клеток и питательные среды 45

3.1.1.5. Сыворотки крови 46

3.1.1 .б.Оборудование, химические реактивы, растворы 46

3.2. Методы исследования 48

3.2.1. Выделение вируса ящура 48

3.2.2. Культивирование вируса ящура в клеточных культурах 48

3.2.3. Серологические реакции 49

3.2.4. Титрование вируса ящура 50

3.2.5. Подготовка контрольных штаммов вируса ящура для определения иммуногенной активности противоящурной вакцины на морских свинках 50

3.2.6. Определение иммуногенной активности противоящурных вакцин 52

3.2.7. Получение штаммоспецифических препаратов. 52

3.2.8. Статистическая обработка результатов. 54

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 55

4.1. Изучение иммунобиологческих свойств штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005 55

4.1.1. Выделение и идентификация вируса ящура из патологического материала. 57

4.1.2. Выделение вируса ящура в культурах клеток. 59

4.1.3. Биологические свойства вируса ящура штамма Азия-1 №1987/Амурский/2005. 59

4.1.3.1. Адаптация и культивирование вируса ящура клеточных культурах. 59

4.1.3.2. Адаптация и титрование вируса ящура на морских свинках. 62

4.1.4. Получение штаммоспецифических диагностических компонентов для РСК. 64

4.1.5. Получение диагностических компонентов для ИФА. 67

4.1.6. Изучение антигенного родства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005. 68

4.1.6.1. Изучение антигенного родства с помощью РСК. 68

4.1.6.2. Изучение одностороннего антигенного родства в РМНиИФА. 70

4.1.7. Сравнительная оценка иммуногенной активности противоящурных вакцин. 74

4.1.8. Результаты изучения иммуногенной активности вакцины противящура сорбированной трехвалентной типов А, О, Азия-1. 77

4.2. Разработка метода выявления антигена вируса ящура в ИФА. 80

4.2.1. Получение специфических реагентов для ИФА. 82

4.2.2 Оптимизация условий постановки ИФА. 87

4.2.3 Непрямой сэндвич вариант. 90

4.2.4 Сравнительная оценка сэндвич-варианта ИФА и РСК. 92

4.2.5 Испытания набора для выявления антигена вируса ящура иммуноферментным анализом. 93

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИСЛЕДОВАНИИ 95

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 109

8. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 110

Введение к работе

Актуальность темы. Эпизоотии ящура, вызванные вирусом типа Азия-1, наблюдались в странах Азии, Европы, Среднего и Ближнего Востока. Вирус этого типа и в настоящее время представляет угрозу для этих регионов, так как вспышки ящура периодически возникают в различных государствах, в том числе и граничащих с нашей страной. Следовательно, угроза возникновения болезни в России существует постоянно, в особенности в регионах на границе с Китаем, Монголией, странами Средней Азии и Закавказья (27, 28 ,63, 88, 106, 119,128).

Принимая во внимание опасность возникновения ящура в нашей стране и возможность больших экономических потерь, особое значение приобретает проблема профилактики этой болезни. Согласно Международному ветеринарно-санитарному кодексу, ящур относится к особо опасным инфекционным болезням (43). Поэтому защита государства от ящура и разработка мер быстрой диагностики, ликвидации и профилактики является первостепенной задачей.

Возбудитель ящура по своим биологическим свойствам отличается высокой контагиозностью, широком кругом восприимчивых животных множеством типов и подтипов, длительной сохраняемостью в организме переболевших естественно восприимчивых животных и во внешней среде (8, 92, 130).

Вирус ящура обладает высокой антигенной вариабельностью. Такой уровень генетической вариабельности вируса в пределах одного генотипа приводит к возникновению новых изолятов, которые отличаются по степени вирулентности и иммуногенности от ранее выделенных штаммов вируса ящура (7, 45, 65, 76,96,98, 112).

Опасность, которую представляет ящур, диктует необходимость постоянного усовершенствования методов и средств его диагностики, глубокого изучения свойств вновь выделенных в полевых условиях штаммов возбудителя, определения их эпизоотической опасности и степени соответствия производственным и ранее выделенным штаммам (111, 117). В настоящее время одним из основных методов профилактики ящура в нашей стране является систематическая иммунизация сельскохозяйственных животных инактивированными моно- и поливалентными вакцинами в зонах, угрожаемых по данной болезни (пограничные районы, регионы, где в последние годы регистрировали вспышки ящура, территории вокруг биопредприятий), а, в случае вспышки ящура - экстренная вакцинация всех восприимчивых к ящуру животных в неблагополучном очаге и в угрожаемой зоне (13,17, 18, 19).

Особую опасность представляют эпизоотии ящура, вызванные вирусом, отличающимся в антигеном отношении от производственных штаммов. Этот факт может свести на нет, или значительно снизить эффективность профилактических прививок моно - и поливалентными противоящурными препаратами (54, 79, 83, 89).

Непременным условием противоэпизоотической эффективности противоящурных вакцин является соответствие антигенных свойств производственного (вакцинного) штамма вируса ящура эпизоотическому.

Следует отметить, что при отборе производственных штаммов вируса ящура учитывается широта их антигенного спектра (способность защищать привитых животных от заражения гетерологичными штаммами вируса того же типа), но не все производственные штаммы вируса ящура создают достаточно напряженный иммунитет против других вариантов того же типа (42, 50, 54, 72, 93,311,).

В особенности это относится к вирусу типа Азия-1. Вакцина, изготовленная из вируса производственного штамма Азия-1 №48, оказалась недостаточно эффективной при ее использовании против эпизоотических штаммов вируса ящура этого типа (14,52,89),

Это обуславливает необходимость постоянного изучения свойств выделенных штаммов вирусов.

Систематическое изучение эпизоотических штаммов необходимо не только для классификации вирусов, что имеет важное теоретическое значение, но и в плане сравнительного исследования антигенных свойств эпизоотических и производственных штаммов, из которых готовятся вакцины.

Систематическая угроза заноса и распространение ящура на территории Российской Федерации заставляют внимательно следить за эпизоотической обстановкой по ящуру в мире, а также своевременно проводить диагностику и изучение иммунобиологических свойств штаммов для выбора лучших, при изготовлении специфических препаратов (15, 41,42, 72, 102, 133).

Традиционными методами идентификации вируса ящура долгие годы были реакции связывания комплемента (7, 12, 34, 48, 77) и вируснейтрализации (77). В качестве биологического метода использовали выделение вируса на лабораторных тест-системах (34, 77). Включение этих методов в схему лабораторной диагностики ящура было обусловлено рядом важных преимуществ. Так РСК, при наличии соответствующих по специфичности диагностикумов, возможно в течение 1,5-2,5 часов идентификацию не только типовой, но и вариантной принадлежности возбудителей, вызывающих болезни, протекающие с везикулярным синдромом (ящур, везикулярный стоматит, везикулярная экзантема и везикулярная болезнь свиней) (8, 92). Однако на специфичность этой реакции могут оказывать влияние многие факторы. В этом отношении более специфичной можно считать реакцию нейтрализации, с помощью которой можно определять антитела, ответственные за иммунитет. Но для ее выполнения необходимы особые условия ветеринарно-санитарного порядка, наличие биологической тест-системы, а для получения информации требуется от 3 до 10 дней . Кроме того, имеются данные о том, что не всегда результаты серологических методов соответствуют биологическим. На этом основании предпринимались попытки разработать другие более объективные иммунохимические реакции. Однако большинство из этих методов оказались менее пригодны для лабораторной диагностики ящура из-за недостаточной чувствительности (реакция диффузной преципитации), или не способности дифференцирования типов возбудителя (метод флюоресцирующих антител, радиоиммунный анализ) (38, 92) и его вариантов (реакция пассивной гемагглютинации) (7).

В этом отношении совершенно уникальными возможностями обладают некоторые новые методы, такие как, иммуноферментный анализ (22, 34, 35, 98, 116, 117, 140). Для него характерна высокая чувствительность, простота постановки и быстрота получения результата. По специфичности его результаты коррелируют с общепринятыми вирусологическими и серологическими методами, а по чувствительности имеют явные преимущества. Они позволяют получить больше информации об антигенной структуре и происхождении вирусов по сравнению с традиционными серологическими реакциями. Недостаточная типоспецифичность ИФА на начальном этапе использования успешно преодолевается с помощью двойного сандвич-варианта (152). Благодаря этому открылись перспективы совершенствования схемы лабораторной диагностики ящура за счет применения ИФА не только для типирования, но и субтипирования эпизоотических штаммов возбудителя (102, 110).

В связи с появлением на территории России вируса ящура типа Азия-1, возникла необходимость изучения свойств данного вируса.

Цель и задачи исследований. Главной целью наших исследований было изучение иммунобиологических свойств вируса ящура Азчя-1 №1987/Амурский/2005 и усовершенствование диагностического набора для выявления и идентификации вируса ящура методом иммуноферментного анализа.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить иммунобиологические свойства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005, выделенного на территории Российской Федерации в 2005 г.;

- подготовить предложения по использованию штамма вируса ящура №1987/Амурский/2005 для изготовления диагностических и вакцинных препаратов;

- получить диагностические препараты на актуальные эпизоотические штаммы вируса ящура для иммуноферментного анализа;

- усовершенствовать набор для идентификации в ИФА производственных и эпизоотических штаммов вируса ящура типов А, О, Азия-1.

Научная новизна состоит в том, что в результате проведенных исследований:

Изучены иммунобиологические свойства штамма вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005, выделенного на территории Российской Федерации г 2005 году, который отличается от вакцинных и ранее изученных эпизоотических штаммов вируса ящура типа Азия-1 (R% от 13 до 42);

Изучены основные биологические свойства антигена вируса ящура типа Азия-1 №1987/Амурский/2005, используемого для изготовления экспериментальной вакцины;

Показаны антигенные взаимоотношения между производственными и эпизоотическими штаммами вируса ящура типа Азия-1;

Получены штаммоспецифические компоненты для иммуноферментного анализа и реакции связывания комплемента на штамм вируса ящура Азия-1 №1987/Амурский/2005;

Усовершенствован диагностический набор для определения антигена вируса ящура типов А, О, Азия-1;

Определены оптимальные варианты постановки ИФА при выявлении и идентификации штаммов вируса ящура;

Получены диагностические препараты на основании изученного штамма Азия-1 №1987/Амурский/2005.

Усовершенствован и внедрен в производство набор для выявления антигена вируса ящура иммуноферментным анализом, ТУ 9388-138-00495527-2005 от 30.06.2006 г.

Основные положения, выносимые на защиту.

- Адаптационные свойства эпизоотического штамма вируса ящура типа Азия-1 №1987/Амурский/2005.

- Результаты комплексного изучения антигенного родства штамма вируса ящура Азия-1 №1987 /Амурский/2005.

- Получение штаммоспецифических диагностических препаратов на основе штамма Азия-1 №1987 /Амурский/2005.

- Результаты практического применения эпизоотического штамма вируса ящура типа Азия-1 №1987 /Амурский/2005.

- Диагностический набор для определения антигена вируса ящура методом иммуноферментного анализа и его практическое применение.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 1 работа в издании, рекомендованной ВАК РФ для публикации материалов кандидатской диссертации.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 135 страницах, включает: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение, выводы, список использованной литературы, практические предложения и приложения. Список литературы включает 156 источников, из них 63 источника иностранных авторов. Работа иллюстрирована 20 таблицами, 3 рисунками. В приложении к диссертации имеется 4 документа, подтверждающих результаты исследований и их внедрение.