Вирус гепатит а имеет рнк

Из-за использования специфических методов диагностики часть людей ошибочно считает гепатит С ДНК-содержащим вирусом. На самом деле в состав возбудителя входит рибонуклеиновая кислота (РНК). Она наделена специфическими особенностями, затрудняющими лечение болезни. ДНК содержится в составе вирусов гепатитов B и D. В то же время A, E, G, как и С-тип, содержат только РНК.

ДНК или РНК у гепатита С

Вирус гепатита С содержит рибонуклеиновую кислоту (РНК, RNA). Именно ее присутствие в крови больного провоцирует выработку антител. Помимо HCV-RNA, антигенный комплекс вируса содержит пять неструктурных белков HCV-NS. Три из них обнаруживают при взятии печеночных тканей на биопсию при хроническом течении болезни (NS3, NS4 и NS5).

Действие современных противовирусных препаратов-ингибиторов направлено на разрушение одного из структурных белков (чаще всего HCV-NS5). После его уничтожения вирус не может размножаться.

РНК гепатита С очень изменчива, что проявляется частыми мутациями вируса. Из-за них невозможна разработка вакцины от гепатита С, а также насчитывается более 11 его генотипов.

У каких вирусов гепатита есть ДНК

К ДНК-содержащим вирусам относятся возбудители гепатитов B и D. Второй тип (дельта-вирус) никогда не выявляется в одиночку. Заражение им происходит только у носителей Б-инфекции.

Гепатит В не подвержен мутациям, поэтому от него разработана вакцина. Первую вакцинацию человек проходит в течение года после рождения (три прививки по схеме 0-6-12) – она дает иммунитет к гепатиту Б до 20-25 лет. В дальнейшем необходима ревакцинация.

Как выявляют вирусные нуклеиновые кислоты

При подозрении на острый и хронический гепатит человека направляют на два анализа – ПЦР и ИФА, выявляющий антитела. Первый анализ – метод полимеразной цепной реакции – направлен на обнаружение в крови частичек вирусной РНК. По этому методу определяют:

Наличие или отсутствие гепатита. Для точного результата кровь нужно сдавать дважды с интервалом в 2 недели. Современное оборудование выявляет вирус в крови при условии, что его уровень превышает 10-50 МЕ/мл (международных единиц в 1 миллилитре крови).
Степень активности гепатита – так называемая вирусная нагрузка. При низкой активности болезни количество вирусных частиц меньше 180 тыс. МЕ/мл. У пациентов с высокой нагрузкой эта цифра может достигать 25 млн. МЕ/мл.
Генотип. От разновидности вируса зависит специфика лечения. Например, 3 генотип болезни устойчив к стандартной противовирусной терапии интерфероном. Для его лечения требуются ингибиторы прямого действия – Даклатасвир, Софосбувир, Ледипасвир.

Также с помощью полимеразной цепной реакции выявляются неструктурные вирусные белки HCV-NS. Только для этого анализа потребуется не кровь, а несколько клеток печени, взятые с помощью биопсии.

Перед сдачей крови на полимеразно-цепную реакцию человек должен за 3 дня до назначенного анализа отказаться от алкоголя, не употреблять жирную и жареную пищу, избегать физического и нервного напряжения. Рекомендуется исключить употребление любых лекарственных препаратов. Если их отмена невозможна, обязательно уведомить врача об этих препаратах. Женщинам лучше не сдавать кровь для анализа во время менструации, поскольку изменившийся гормональный баланс может повлиять на уровень вирусной нагрузки.

Гепатит С провоцируется специфическим РНК-содержащим вирусом, который можно обнаружить при лабораторной диагностике. Определить болезнь иными способами нельзя из-за скрытого протекания, поэтому профилактические осмотры – единственная возможная мера выявления HCV на ранних стадиях. При несвоевременном лечении процесс становится хроническим, избавиться от гепатита после хронизации невозможно.

Ежегодно в мире регистрируется около 1,4 млн. случаев заболевания, которое наиболее распространено среди детей 4 — 15 лет. Среди всех вирусов HAV считается одним из самых устойчивых к воздействию факторов внешней среды. Основным источником инфицирования является больной в острой фазе заболевания. Опасность представляют больные со стертыми и безжелтушными формами гепатита. В организм человека вирусы попадают с загрязненной водой и продуктами питания, существуют так же контактно-бытовой и половой механизмы заражения. Способствуют распространению гепатита А антисанитария и ненадлежащая личная гигиена. Заболевание широко распространено в странах Азии, Южной Америки, Средиземноморья и Африки. Безопасное водоснабжение, безопасность пищевых продуктов, соблюдение правил личной гигиены и вакцинация — основные меры профилактики гепатита А.

Рис. 1. Вирусы гепатита А.

Вирус гепатита А

Вирус гепатита А является гепатотропным. Он способен размножаться только в клетках печени. Обладает слабым повреждающим действием. На его долю приходится до 50% всех вирусных гепатитов.

Возбудитель гепатита А относится к семейству Picornaviridae (пикорнавирусы), роду Hepatovirus. По морфологии близок к энтеровирусам. HAV — это РНК-содержащий вирус 72-го типа, организован просто, имеет один вирусоспецифический антиген.

HAV — просто организованный вирус.

Зрелые вирионы имеют сферическую форму с кубическим типом симметрии (икосаэдр), размером 25 — 27 нм.
Геном представлен однонитчатой несегментированной молекулой +РНК, находящейся в центре вириона. Имеет белок VPg.
Поверхность капсида не имеет выступов, состоит из 32 капсомеров. Суперкапсид отсутствует.
В составе вирусов находятся структурные белки в количестве 4-х: VP1, VP2, VP3, VP4.

Рис. 2. Схема строения HAV (вируса гепатита А).

Репродукция вирусов гепатита А происходит в цитоплазме печеночных клеток. Прямое повреждающее воздействие усиливается иммунными механизмами. Геномная +РНК на рибосомах печеночных клеток связывается и транслируется в полипептид-предшественник, который в последствии нарезается протеазами (ферментами) на отдельные фрагменты Р1 — Р3, являющиеся предшественниками структурных белков VР1 — VР4. Из фрагмента Р3 образуются неструктурные белки РНК: зависимая РНК-полимераза и протеаза. Под воздействием РНК-полимеразы нить +РНК подвергается транскрипции (переписыванию) в комплементарную -РНК, которая будет служить матрицей для синтеза +РНК — точной копии вирусного генома. Далее происходит сборка вирусных частиц и выход вирионов из клетки.

Вирус гепатита А имеет один антиген (НА-антиген), по которому проводится его идентификация. Вирусспецифический антиген имеет, как и все антигены, белковую природу.

Вирусы HAV не культивируются на обычных питательных средах, так как они репродуцируются в цитоплазме печеночных клеток. В культурах клеток репродуцируются с трудом. В основном, это перевиваемые линии клеток почек обезьян (зеленых мартышек) и человека. В эксперименте инфекция воспроизводится только на обезьянах павианах, мармозетах, шимпанзе и гамадрилах. НAV не обладают выраженным цитопатическим эффектом.

Вирусы гепатита А обладают повышенной устойчивостью к факторам внешней среды:

воздействию детергентов и растворителей;
низким температурам;
устойчивы в средах с низким рН (кислые среды);
долгое время сохраняются в водопроводной воде, сточных водах, на пищевых продуктах и объектах внешней среды;
в культурах клеток вирусы сохраняют инфекционность 4 — 12 часов при температуре +60 0 С.

HAV проявляют чувствительность к хлору, формалину и УФО;
в течение 5 минут погибают при кипячении;
при автоклавировании (120 0 С) погибают в течение 20 минут, при воздействии сухого жара при 180 0 С погибают в течение часа.

Рис. 3. На фото возбудители гепатита А — HAV.

Как передается гепатит А. Эпидемиология заболевания

Болезнь Боткина является классическим антропонозом. Человек является единственным резервуаром (источником) инфекции. HAV интенсивно выделяются с калом во внешнюю среду в конце инкубационного периода и до развития желтухи. Заразными являются больные с безжелтушными и стертыми формами заболевания, что особенно часто встречается среди детей. С появлением желтухи заразность больных уменьшается.

Способствует распространению заболевания высокая устойчивость HAV во внешней среде. В России пик заболеваемости гепатитом А приходится на октябрь-январь месяцы.

Рис. 5. На фото вирусы гепатита А (вид в электронном микроскопе).

Механизм заражения и факторы передачи инфекции

Механизм заражения гепатитом А фекально-оральный. Пищевые продукты, в том числе те, которые не подвергаются до продажи термической обработке (замороженные фрукты и овощи, морепродукты и др.), загрязненная фекалиями вода, грязные руки и обсемененные предметы быта, в том числе детские игрушки — основные факторы передачи инфекции. Вирусы могут передаваться при употреблении инъекционных наркотиков и половых контактах.

Рис. 6. В экономически и социально неразвитых странах с низким уровнем санитарной гигиены инфицирование вирусами происходит уже в раннем детстве.

Случаи гепатита А и эпидемии заболевания регистрируются во всех странах мира. В Европейских странах 80% населения до 40 лет имеет сывороточные антитела против HAV. В экономически и социально неразвитых странах с низким уровнем санитарной гигиены инфицирование вирусами происходит уже в раннем детстве. В ряде стран до 100% населения имеют в крови защитные антитела. Широкое распространение HAV регистрируется в странах Африки, Латинской Америки и Юго-Восточной Азии. Способствуют распространению заболевания массовая миграция, туризм, дефицит воды, плохое системное водоснабжение и канализация, низкий уровень гигиены населения.

В РФ распространению инфекции способствует высокий уровень организации детей (детские ясли и сады, школы-интернаты, спортивные лагеря) и миграционные процессы.

Рис. 7. Географическое распространение гепатита А.

Патогенез гепатита А

Гепатит А протекает поэтапно:

В организм человека вирусы гепатита А попадают, в основном, с пищей или водой. Размножаются в эпителиальных клетках кишечника и лимфоидной ткани.
Далее возбудители попадают в кровь, вызывая кратковременную вирусемию. Их максимальное количество в крови регистрируется в конце инкубационного периода и начальном периоде заболевания.
Из крови HAV проникают в клетки печени, где интенсивно размножаются, вызывая острый диффузный гепатит. Цитопатогенный эффект при этом выражен слабо. Не исключается возможность повреждения клеток печени натуральными киллерами — NK-клетками. У больных развивается желтуха и повышается уровень трансаминаз. До появления желтухи вирусы в огромном количестве выделяются с желчью в 12-и перстную кишку и далее с калом наружу. При появлении желтухи интенсивность выделения HAV снижается (эпидемический парадокс).
В большинстве случаев под воздействием иммунной системы (антител) репликация вирусов прекращается и наступает выздоровление. Тяжелые (молниеносные) формы и летальный эффект регистрируются крайне редко.
Иммунитет после перенесенного заболевания стойкий, пожизненный, связан с IgG. IgM появляются в сыворотке крови вначале заболевания и исчезают через 3 — 4 месяца. Параллельно развитию гуморального, в кишечнике развивается местный иммунитет (синтезируются секреторные иммуноглобулины SIgA.

Стоимость услуги:

750 руб.* Заказать

Срок исполнения: 1 - 3 к.д. Заказать Указанный срок не включает день взятия биоматериала

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: ПЦР.

Острый гепатит А — острое вирусное инфекционное заболевание с преимущественно фекально-оральным механизмом передачи возбудителя — РНК-содержащего вируса семейства Picornaviridae. Источник инфекции — человек. Инкубационный период 7-50 дней (в среднем 30 дней). Заболевание проявляется в типичных случаях общим недомоганием, утомляемостью, тошнотой, рвотой, желтухой. Хроническое течение заболевания не установлено. После перенесенного заболевания сохраняется длительный иммунитет.

РНК вируса гепатита А (ВГА) — маркер острого вирусного гепатита А, появляется в крови в середине инкубационного периода. Исследование высокоинформативно для обследования контактных лиц. Определение РНК ВГА для обследования контактных лиц целесообразнее, чем anti-HAV IgM.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

Пациенты с признаками ВГА;
Лица, контактировавшие с больным ВГА (контактные*).

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения	Единицы измерения
РНК Вируса гепатита А (качественное исследование)	Не обнаружено

Выявление РНК ВГА вне зависимости от наличия/отсутствия anti-HAV IgG свидетельствует о заболевании острым гепатитом А. Отсутствие в сыворотке крови anti-HAV IgG и РНК ВГА свидетельствует о восприимчивости к вирусу гепатита А и является показанием для вакцинопрофилактики. Выявление в сыворотке anti-HAV IgG при отсутствии РНК ВГА свидетельствует о наличии иммунитета к вирусу гепатита А.

Отрицательные результаты РНК ВГА возможны при обследовании в ранний инкубационный период и период реконвалесценции.

" ["serv_cost"]=> string(3) "750" ["cito_price"]=> NULL ["parent"]=> string(2) "25" [10]=> string(1) "1" ["limit"]=> NULL ["bmats"]=> array(1) < [0]=>array(3) < ["cito"]=>string(1) "N" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(22) "Кровь с ЭДТА" > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:

Тип	В офисе
Кровь с ЭДТА

Подготовка к исследованию:

Не менее 3 часов после последнего приема пищи. Можно пить воду без газа.

Метод исследования: ПЦР.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

Пациенты с признаками ВГА;
Лица, контактировавшие с больным ВГА (контактные*).

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения	Единицы измерения
РНК Вируса гепатита А (качественное исследование)	Не обнаружено

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Медицинский эксперт статьи

Вирусный гепатит А - инфекционная болезнь человека, характеризующаяся преимущественным поражением печени и проявляющаяся клинически интоксикацией и желтухой. Вирус гепатита А был обнаружен в 1973 г. С. Фейнстоном (и др.) с помощью метода иммунной электронной микроскопии и путем заражения обезьян - шимпанзе и мармозеток. Суть метода иммунной электронной микроскопии состоит в том, что к фильтрату испражнений больного гепатитом А добавляют специфические антитела (сыворотку реконвалесцента) и осадок подвергают электронной микроскопии. Благодаря взаимодействию вирусов со специфическими антителами они подвергаются специфической агрегации. Их в этом случае легче обнаружить, а агрегация под влиянием антител подтверждает специфичность возбудителя. Открытие С. Фейнстона было подтверждено в опытах на добровольцах.

Вирус гепатита А имеет сферическую форму, диаметр вириона - 27 нм. Геном представлен однонитевой позитивной РНК с м. м. 2,6 МД. Суперкапсид отсутствует. Тип симметрии кубический - икосаэдр. Капсид имеет 32 капсомера, он образован четырьмя полипептидами (VP1-VP4). По своим свойствам вирус гепатита А отнеси к роду Heparnovirus, семейству Picornaviridae. В антигенном отношении вирус гепатита A (HAV - hepatitis A virus) является однородным. HAV хорошо размножается в организме шимпанзе, павианов, гамадрилов и игрунковых обезьян (мармозеток). Длительное время вирус не умели культивировать. Лишь в 1980-х гг. удалось получить культуры клеток, в которых HAV размножается. Вначале для этих Целей использовали перевиваемые линии клеток почки эмбриона макака-резус (культура FRhK-4), а сейчас - перевиваемую линию клеток почек зеленых мартышек (культура 4647).

Согласно рекомендациям экспертов ВОЗ, принята следующая номенклатура маркеров вируса гепатита А: вирус гепатита А - НАУ антитела к вирусу гепатита А: анти-НАV IgМ и анти-НАV IgG.

НАV представляет собой мелкие частицы диаметром 27-30 нм, имеющие икосаэдральную симметрию и обладающие гомогенностью. На электронограмме, полученной с помощью метода иммунной агрегации, обнаруживаются электронно-плотные частицы с поверхностно расположенными симметрично уложенными капсомерами. При негативном контрастировании в препаратах выявляются как полные, так и пустые частицы. Нуклеокапсид НАV, в отличие от такового при гриппе, не имеет поверхностных выступов и оболочки. Важно также, что вирион НАV не имеет сердцевидной структуры.

Как и все вирусы семейства Рicornaviridае, вирус гепатита А содержит рибонуклеиновую кислоту. В некоторых лабораториях показана возможность клонирования генома вируса гепатита А, что открывает перспективу получения вакцинных препаратов.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11], [12], [13], [14]

Резистентность вируса гепатита А

Вирус относительно устойчив к высокой температуре, кислотам, жирорастворителям (отсутствуют липиды), дезинфицирующим средствам, хорошо переносит низкую температуру. Все это способствует длительному сохранению его во внешней среде. При комнатной температуре он выживает несколько недель, при 60 °С частично утрачивает инфекциозность через 4-12 ч, полностью - через несколько минут при 85 °С. Высокорезистентен к хлору, благодаря чему способен проникать в водопроводную воду через барьеры водоочистных сооружений.

Суммируя все данные, можно следующим образом охарактеризовать вирус гепатита А:

естественный хозяин - человек;
экспериментальные животные - мармозеты, шимпанзе;
источник инфицирования - фекалии;
заболевание - эпидемично и эндемично;
путь передачи - фекально-оральный;
инкубационный период - 14-40 сут;
переход в хронический гепатит - не отмечается.

Иммунологические свойства НАV таковы:

Прототииные штаммы - Ms-l, СR-326, GВG. Все иммунологически подобны или идентичны;
Антитела - IgМ и IgG, продуцируются в ответ на введение структурных белков вируса и протективны;
I Тротективное действие человеческого сывороточного у-глобулина - предохраняет или аттенуирует заболевание при условии введения до заражения или в течение инкубационного периода.

Физико-химическая характеристика НАУ следующая:

Морфология - безоболочечная сферическая частица с кубической симметрией, капсид состоит из 32 капсомеров;
Диаметр - 27-30 нм;
Плотность в СsС1 (г/см3) - 1,38-1,46 (открытые частицы), 1,33-1,34 (зрелый вирион), 1,29-1,31 (незрелые вирионы, пустые частицы);
Коэффициент седиментации - 156-160 зрелых вирионов;
Нуклеиновая кислота - однонитевая, линейная РНК;
Относительная молекулярная масса - 2,25 106-2,8 106КД;
Число нуклеотидов - 6,500-8,100.

Стабильность НАV при физико-химических воздействиях следующая:

Хлороформ, эфир - стабилен;
Хлор, 0,5-1,5 мг/л, 5 °С,15 мин - частичная инактивация;
Хлорамин, 1 г/л, 20 °С.,15 мин - полная инактивация;
Формалин, 1:4000, 35-37 °С, 72 ч - полная инактивация, 1:350, 20 °С, 60 мин - частичная инактивация.

20-70 °С - стабилен;
56 °С, 30 мин - стабилен;
60 °С, 12 ч - частичная инактивация;
85 °С, 1 мин - полная инактивация;
Автоклавирование, 120 °С. 20 мин - полная инактивация;
Сухой жар, 180 °С, 1ч - полная инактивация;
УФО, 1,1 Вт, 1 мин - полная инактивация.

Представленные данные показывают, что по своим физико-химическим свойствам вирус гепатита А ближе всего стоит к энтеровирусам. Подобно другим энтеровирусам, HAV устойчив к воздействию многих дезинфицирующих растворов, полностью инактивируется в течение нескольких минут при 85 °С и автоклавировании.

Доказано, что вирус гепатита А может репродуцироваться в первичных и перевиваемых монослойных линиях культур клеток человека и обезьян. Особенно активная репродукция вируса гепатита А в культурах in vitro наблюдается при использовании в качестве исходного материала экстрактов печени больных обезьян. Следует, однако, отметить, что во всех опытах по репродукции вируса гепатита А на культурах in vitro обращает на себя внимание длительный инкубационный период при первичных пассажах (до 4 -10 нед), в дальнейшем накопление вирусного генетического материала нарастает, но абсолютные величины остаются весьма незначительными, что дает основание многим исследователям говорить о неполной репликации вируса гепатита А в тканевых культурах.

Резюмируя данные литературы по репродукции вируса гепатита А внетканевых культурах, можно сказать, что факт длительного переживания HAV in vitro не подлежит сомнению. Оптимальные условия для стабильного высокого уровня репликации вируса окончательно не выявлены, а это сдерживает изучение его биологических свойств, получение источника реагентов для производства диагностику адов и конструирования вакцин.

Вместе с тем в литературе можно найти и более оптимистические суждения о данной проблеме. Решение всех вопросов, связанных с культивированием вируса гепатита А, - дело ближайшего будущего. При изучении оптимальных условий размножения HAV в культуре клеток почки эмбриона макаки-резус выявлены две фазы: фаза продукции инфекционного вируса (до 6-8 сут на уровне 5-го пассажа) и фаза интенсивного накопления вирусного антигена. Показано также, что наиболее существенное накопление вирусного антигена происходит в условиях так называемого роллерного культивирования (вращающиеся флаконы). Этот путь открывает широкие возможности получения культурального антигена в больших количествах, а следовательно, появится исходный материал для приготовления диагностических систем и изготовления вакцинальных препаратов.

Эпидемиология гепатита А

Вирус гепатита А обладает высокой патогенностью для человека. По заключению ВОЗ (1987 г.), для возникновения болезни достаточно заражения всего одним вирионом. Однако практическая заражающая доза, вероятно, значительно выше. Источником инфекции является только инфицированный человек. Вирус выделяется в большом количестве с испражнениями за 12-14 дней до появления желтухи и в течение 3 нед. желтушного периода. Существенных различий в выделении возбудителя у больных желтушными, безжелтушными и бессимптомными формами гепатита А не выявлено. Способ заражения - фекально-оральный, главным образом водный, а также бытовым и пищевым путем. Способ заражения - фекально-оральный, главным образом водный, а также бытовым и пищевым путем. Основной (первичный) путь передачи вируса - водный. Возможно также заражение воздушно-капельным путем. Восприимчивость населения всеобщая. Болеют преимущественно дети в возрасте до 14 лет. Болезнь имеет выраженную осенне-зимнюю сезонность.

[15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22]

Симптомы гепатита А

Инкубационный период варьирует от 15 до 50 дней, что зависит от величины заражающей дозы вируса, но в среднем составляет 28-30 дней. Попав в организм, вирус гепатита А размножается в регионарных лимфатических узлах, проникает в кровь, а затем в клетки печени и вызывает острый диффузный гепатит, который сопровождается поражением гепатоцитов и ретикулоэндотелиальных элементов печени и снижением ее дезинтоксикационной и барьерной функций. Повреждение гепатоцитов возникает не за счет прямого действия вируса, а в результате иммунопатологических механизмов. Наиболее типичной картиной гепатита А является острая желтушная циклическая форма: инкубационный период, продромальный (преджелтушный), желтушный период и реконвалесценция. Однако в очагах инфекции выявляется большое количество больных с безжелтушными и бессимптомными формами инфекции, число которых значительно преобладает над желтушными ("феномен айсберга").

Постинфекционный иммунитет прочный и длительный, обусловлен вируснейтрализующими антителами и клетками иммунной памяти.

Микробиологическая диагностика гепатита А

Диагностика гепатита А (кроме заражения животных - шимпанзе, мармозет, павианов, которых у нас нет) основана на различных иммунологических методах: РСК, иммунофлуоресцентный метод, гемагглютинация иммунного прилипания (комплекс вирусный антиген + антитело в присутствии комплемента адсорбируется на эритроцитах и вызывает их склеивание). Однако возможности применения этих методов ограничены из-за отсутствия специфических вирусных антигенов, а реакция иммунофлуоресценции требует биоптатов печени, что нежелательно. Надежным и специфическим является метод иммунной электронной микроскопии, однако он очень трудоемкий. Поэтому пока единственной приемлемой иммунологической реакцией является метод иммуносорбентного анализа твердой фазы в виде ИФМ или РИМ, особенно в модификации "захвата" иммуноглобулинов класса М. В нашей стране для этой цели предложена тест-система - "ДИАГН-А-ГЕП". Принцип работы этой тест-системы следующий. На стенках полистироловых луночек сорбируются вначале антитела к иммуноглобулинам класса М (антииммуноглобулины М), затем добавляется исследуемая сыворотка больного. Если в ней есть антитела класса IgM, они будут связываться ан-ти-антителами М, затем добавляется специфический вирусный антиген (вирус гепатита А), который получают путем выращивания в культуре клеток. Система промывается, и к ней добавляются противовирусные антитела, меченные пероксидазой хрена. Если произошло взаимодействие всех четырех компонентов системы, возникает четырехслойный "сэндвич":

антииммуноглобулины М,
иммуноглобулины М (против вируса гепатита А - в исследуемой сыворотке больного),
вирусный антиген,
антивирусные антитела, меченные ферментом.

Для обнаружения этого комплекса в луночки добавляют субстрат для фермента. Под влиянием фермента он разрушается, и образуется окрашенный продукт. Интенсивность окраски можно измерить количественно с помощью спектрофотометра или фотоколориметра.

Преимущество метода "захвата" IgM состоит в том, что антитела этого класса иммуноглобулинов появляются при первичном иммунном ответе и свидетельствуют об активной стадии инфекции, они исчезают после перенесенного заболевания. Противовирусные антитела, относящиеся к классу IgG, напротив, длительное время сохраняются после перенесенного заболевания, обеспечивая приобретенный иммунитет. Для обнаружения вируса гепатита А предложен метод ДНК-зонда: используют в качестве зонда ДНК комплементарную вРНК.

Лечение гепатита А

В связи с тем что при вирусных гепатитах нарушена продукция интерферонов, лечение гепатита А основано на применении интерферона и индуктора его эндогенного синтеза амиксин.

Специфическая профилактика гепатита А

Ранее широко применявшаяся серопрофилактика гепатита А с помощью гаммаглобулина себя не оправдала, поэтому основной упор был сделан на проведение вакцинопрофилактики, проводится прививка от гепатита А. С этой целью разрабатываются и уже используются различные варианты вакцин. В России эффективная вакцина против гепатита А была получена еще в 1995 г., и сейчас она успешно применяется.

Читайте также: