Вакцины из убитых бактерий и вирусов

1. По назначению вакцины делятся на профилактические и лечебные.

По характеру микроорганизмов, из которых они созданы, вакии­ны бывают:

Существуют моно- и поливакцины — приготовленные соответст­венно из одного или нескольких возбудителей.

По способу приготовления различают вакцины:

Для повышения иммуногенности к вакцинам иногда добавляют различного рода адъюванты (алюмо-калиевые квасцы, гидроксид или фосфат алюминия, масляную эмульсию), создающие депо антигенов или стимулирующие фагоцитоз и таким обра­зом повышающие чужеродность антигена для реципиента.

2. Живые вакцины содержат живые аттенуированные штаммы возбудителей с резко сниженной вирулентностью или штаммы непатогенных для человека микроорганизмов, близкородственных возбудителю в антигенном отношении (дивергентные штаммы). К ним относят и рекомбинантные (генно-инженерные) вакци­ны, содержащие векторные штаммы непатогенных бакте­рий/вирусов (в них методами генной инженерии введены ге­ны, ответственные за синтез протективных антигенов тех или иных возбудителей).

Примерами генно-инженерных вакцин могут служить вакцина против гепатита В - Энджерикс В и вакцина против коревой краснухи - Ре-комбивакс НВ.

Поскольку живые вакцины содержат штаммы микроорганиз­мов-возбудителей с резко сниженной вирулентностью, то, по существу, они воспроизводят в организме человека легко проте­кающую инфекцию, но не инфекционную болезнь, в ходе которой формируются и активируются те же механизмы защиты, что и при развитии постинфекционного иммунитета. В связи с этим живые вакцины, как правило, создают достаточно на­пряженный и длительный иммунитет.

С другой стороны, по этой же причине применение живых вакцин на фоне иммунодефицитных состояний (особенно у детей) может вызвать тяжелые инфекционные осложнения.

Например, заболевание, определяемое клиницистами как БЦЖит после введения вакцины БЦЖ.

Живые вакиины применяют для профилактики:

• особо опасных инфекций (чумы, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза);

• гриппа, кори, бешенства (антирабическая);

• паротита, оспы, полиомиелита (вакцина Сейбина-Смородинцева-Чумакова);

• желтой лихорадки, коревой краснухи;

Между введениями живых вакцин рекомендован интервал не менее 1 мес, в противном случае возможны тяжелые побочные реакции, иммунный ответ может быть пониженным.

3. Убитые вакцины содержат убитые культуры возбудителей (цельноклеточные, цельновирионные). Их готовят из микроор­ганизмов, инактивированных прогреванием (гретые), ультрафио­летовыми лучами,, химическими веществами (формалином — формоловые, фенолом — карболовые, спиртом — спиртовые и др.) в условиях, исключающих денатурацию антигенов. Иммунногенность убитых вакцин ниже, чем у живых. Поэтому вызываемый ими иммунитет кратковременный и сравнительно менее напряженный. Убитые вакиины применяют для профилактики:

• брюшного тифа, паратифа А и В,

• холеры, клещевого энцефалита,

К убитым вакцинам относят и химические вакцины, содержащие определенные химические компоненты возбудителей, обла­дающие иммуногенностью (субклеточные, субвирионные). Поскольку они содержат только отдельные компоненты бактери­альных клеток или вирионов, непосредственно обладающих иммуногенностью, то химические вакцины менее реактогенны и могут использоваться даже у детей дошкольного возраста. Известны еще и антиидиотипические вакцины, которые также относят к убитым вакцинам. Это антитела к тому или иному идиотипу антител человека (анти-антитела). Их активный центр аналогичен детерминантной группе антигена, вызвавше­го образование соответствующего идиотипа.

4. К комбинированным вакцинам относят искусственные вакцины.

Они представляют собой препараты, состоящие из микробного антигенного компонента (обычно выделенного и очищенного или искусственно синтезированного антигена возбудителя) и синтетических полиионов (полиакриловая кислота и др.) — мощных стимуляторов иммунного ответа. Содержанием этих веществ они и отличаются от химических убитых вакцин. Первая такая отечественная вакцина — гриппозная полимер-субъединичная ("Гриппол"), разработанная в Институте иммуно­логии, уже внедрена в практику российского здравоохранения. Для специфической профилактики инфекционных заболева­ний, возбудители которых продуцируют экзотоксин, применя­ют анатоксины.

Анатоксин — это экзотоксин, лишенный токсических свойств, но сохранивший антигенные свойства. В отличие от вакцин, при использовании которых у человека формируется антимик­робный иммунитет, при введении анатоксинов формируется антитоксический иммунитет, так как они индуцируют синтез антитоксических антител — антитоксинов.

В настоящее время применяются:

Вакцины, содержащие антигены бактерий и анатоксины, на­зываются ассоциированными.

Примерами ассоциированных вак­цин являются:

- вакцина АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина), в которой коклюшный компонент представлен убитой коклюшной вакциной, а дифтерийный и столбняч­ный — соответствующими анатоксинами;

- вакцина ТАВТе, содержащая О-антигены брюшнотифозных, паратифозных А- и В-бактерий и столбнячный анатоксин; брюшнотифозная химическая вакцина с секстаанатоксином (смесь анатоксинов клостридий ботулизма типов А, В, Е, клостридий столбняка, клостридий перфрингенс типа А и эдематиенс — 2 последних микроорганизма — наиболее частые воз­будители газовой гангрены) и др.

В то же время АДС (дифтерийно-столбнячный анатоксин), часто используемый вместо АКДС при вакцинации детей, яв­ляется просто комбинированным препаратом, а не ассоцииро­ванной вакциной, так как содержит только анатоксины.

ВНИМАНИЕ! САЙТ ЛЕКЦИИ.ОРГ проводит недельный опрос. ПРИМИТЕ УЧАСТИЕ. ВСЕГО 1 МИНУТА.

Убитые вакцины готовятся из инактивированных культур вирулентных штаммов бактерий и вирусов, в результате инактивации бактерии и вирусы полностью теряют жизнеспособность, но сохраняют антигенные и иммуногенные свойства.

Убитые вакцины, действующим началом которых являются целые клетки бактерий и вирусы, называют еще цельноклеточные и цельновирионные соответственно.

§ физические (нагревание, УФО, ионизирующая радиация);

§ химические (обработка ацетоном, спиртом, формалином, фенолом, мертиолятом).

Требования к убитым вакцинам – надежность инактивации и минимальное повреждающее воздействие на антигены бактерий и вирусов.

Преимущества убитых вакцин:

§ хорошо комбинируются и дозируются;

§ не вызывают вакциноассоциированных заболеваний;

§ можно применять людям, страдающим иммунодефицитами;

§ можно использовать с антибиотиками;

§ более простые условия хранения.

Недостатки убитых вакцин:

§ более низкая эффективность – индуцируемый иммунный ответ часто бывает непродолжительный;

§ более высокая реактогенность;

§ наиболее частый способ применения – парентеральный;

В РФ применяют убитые вакцины против брюшного тифа, холеры, бешенства, гриппа, клещевого энцефалита, лептоспироза, коклюша.

Субъединичные (химические) и расщепленные (сплит) вакцины.

Химические вакцины содержат наиболее активные по иммунологическим свойствам специфические компоненты – антигены, которые извлекают из микробных клеток химическими методами.

Основной принцип получения химических вакцин – выделение протективных антигенов, обеспечивающих развитие надежного иммунитета, и очистка этих антигенов от балластных веществ.

Расщепленные (сплит-вакцины) состоят из частичек разрушенных вирионов.

Методы выделения из бактерий или вирусов протективных антигенов:

* осаждением спиртами, высаливанием нейтральными солями;

* очистка ультрафильтрацией, хроматографией, центрифугированием.

Преимущества химических вакцин:

§ низкая реактогенность, что позволяет вводить человеку большие дозы антигена и многократно;

§ достаточная иммуногенная активность, обеспечивающая развитие надежного иммунитета;

§ могут применяться в различных ассоциациях, направленных одновременно против ряда инфекций;

§ устойчивы к факторам внешней среды, хорошо хранятся.

§ быстро рассасываются, поэтому для усиления эффективности химических вакцин их используют с адъювантами.

В РФ выпускают химические вакцины против гриппа, менингококковой инфекции, холеры, брюшного тифа.

Анатоксины.

Иммунитет при ряде заболеваний (дифтерия, столбняк, ботулизм) носит преимущественно антитоксический характер. Поэтому для профилактики этих заболеваний вызывают образование не антимикробного, а антитоксического иммунитета.

Анатоксины (от лат. ana – обратно) – иммунобиологические препараты, полученные из экзотоксинов различных видов микробов, выращенных на питательных средах, лишенные токсичных, но сохранившие иммуногенные свойства.

экзотоксин обезвреживают формалином (0,3-0,4%) при t=37-40ºC в течение 3-4 недель, затем очищают от балластных веществ, концентрируют и сорбируют на адъюванте (гидроокись алюминия).

Применяют анатоксины для выработки активного антитоксического иммунитета.

В РФ выпускают анатоксины против дифтерии, столбняка, газовой гангрены, ботулизма, холеры, стафилококковой и синегнойной инфекций.

Рекомбинантные вакцины (генно-инженерные) – это препараты, полученные биосинтезом при культивировании рекомбинантных штаммов бактерий и вирусов с использованием методов генной инженерии и молекулярной иммунологии.

Получениерекомбинантных вакцин включает следующие этапы:

§ клонирование генов, обеспечивающих синтез необходимых антигенов;

§ введение этих генов в вектор (бактериофаг);

§ введение векторов в клетки-продуценты (вирусы, бактерии, дрожжи);

§ культивирование клеток in vitro;

§ отделение антигена и его очистка.

Из вакцин календаря прививок рекомбинантная вакцина против гепатита В заняла твердое положение в прививочной практике. Для получения этой вакцины используют рекомбинантный штамм дрожжей со встроенным в него геномом HBs-антигена вируса гепатита В, в связи с чем вакцину называют дрожжевой.

Рекомбинантные вакцины безопасны, достаточно иммуногенны, могут быть использованы для разработки комплексных вакцин, создающих иммунитет одновременно против нескольких инфекций.

Перспективные вакцины.

К вакцинам четвертого поколения, еще не внедренным в практику здравоохранения, относятся пептидные синтетические, антиидиотипические вакцины, ДНК-вакцины, растительные, мукозальные, вакцины, содержащие продукты генов HLA.

В ближайшие годы следует ожидать появление российской комплексной вакцины против кори, паротита и краснухи, бесклеточной коклюшной вакцины, а также вакцин для профилактики цитомегаловирусной инфекции, гемофильной и пневмококковой инфекций.

Синтетические (искусственные) пептидные вакцины – препараты нового типа с известным антигенным составом и полученные искусственным путем.

Использование пептидов создает возможность полученная антигенов, которые трудно воспроизвести в достаточном количестве из природных источников сырья. Для получения хорошего иммунного ответа необходимо, чтобы синтетический антиген содержал не менее 8 аминокислотных остатков.

Экспериментальные синтетические вакцины получены против дифтерии, холеры, стрептококковой инфекции, гепатита В, ящура, клещевого энцефалита, сальмонеллезов и пневмококковой инфекции.

Пептидные вакцины, будучи целиком синтетическими, не имеют недостатков характерных для традиционных вакцин (реверсия вирулентных свойств, неполная инактивация и др.). Они отличаются высокой степенью стандартности, безопасны, обладают слабой реактогенностью.

ДНК-вакцины – это препараты из плазмидных ДНК, кодирующих протективные антигены возбудителей инфекционных болезней. При парентеральном введении в организм животного ДНК-вакцина проникает в ядро клетки и экспрессирует соответствующие антигены, вызывающие в организме привитого формирование иммунитета.

Проходят экспериментальное изучение ДНК-вакцины, изготовленные из вирусов иммунодефицита человека, гриппа, бешенства, гепатита В и С, простого герпеса, туберкулеза. Однако сегодня остаются нерешенными проблемы безопасности для человека вакцин из плазмидной ДНК (риск мутагенных эффектов и иммунопатологических реакций в ответ на введение ДНК-вакцин).

Получены экспериментальные вакцины на основе идиотипов против многих заболеваний вирусной, бактериальной и паразитарной природы.

Растительные вакцины– вакцины на основе трансгенных растений, полученные при внедрении генов в сельскохозяйственные культуры.

Например, был получен HBsAg из листьев трансгенного табака. Полученный из растений и частично очищенный антиген, введенный мышам, вызывает иммунный ответ подобно вакцине против гепатита В.

В настоящее время проходят испытания вакцина против холеры, полученная при использовании трансгенного картофеля, а также против кори и бешенства – при использовании табака и помидоров.

Мукозальные вакцины препятствуют адгезии возбудителя инфекционной болезни на слизистых оболочках. Основу таких вакцин составляет белок-адгезин, с помощью которого бактерии прикрепляются к поверхности слизистой. Введение такого адгезина сопровождается образованием антител, которые препятствуют колонизации бактерий и развитию инфекционного процесса.

Получены положительные результаты испытаний на животных мукозальных вакцин с антигенами стрептококка, вируса простого герпеса и других вирусов.

Вакцины, содержащие продукты генов HLAповышают иммуногенность антигенов. На этой основе разрабатываются и проходят клинические испытания вакцины для лечения больных гепатитом В, цитомегаловирусной инфекцией и людей, страдающих онкологическими заболеваниями.

Национальный календарь профилактических прививок – нормативный правовой акт, устанавливающий сроки и порядок проведения гражданам профилактических прививок (иммунопрофилактика). Каждая страна пользуется своим национальным календарём профилактических прививок. Календари прививок разных стран отличаются друг от друга и регулярно пересматриваются. В России новый календарь профилактических прививок введён в 2002г. Вакцинацию в рамках календаря прививок проводят в плановом порядке.

Национальный календарь профилактических прививок 2002г. 1

Возраст	Наименование прививки
12 часов	Первая вакцина – гепатит В 2
3-7 дней	Вакцинация – туберкулёз
1 месяц	Вторая вакцинация – гепатит В
3 месяца	Первая вакцинация – дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит
4,5 месяца	Вторая вакцинация – дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит
6 месяцев	Третья вакцинация – дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит Третья вакцинация – гепатит В
12 месяцев	Первая вакцинация – корь, эпидемический паротит, краснуха
18 месяцев	Первая ревакцинация – дифтерия, коклюш, столбняк, полиомиелит
20 месяцев	Вторая ревакцинация –полиомиелит
6 лет	Вторая вакцинация – корь, эпидемический паротит, краснуха
7 лет	Вторая ревакцинация – дифтерия и столбняк Первая ревакцинация – туберкулёз 3
13 лет	Вакцинация против вирусного гепатита В 4 Вакцинация против краснухи (девочки) 5
14 лет	Третья ревакцинация – дифтерия и столбняк Ревакцинация – туберкулез 6 . Третья ревакцинация – полиомиелит
Взрослые	Ревакцинация – дифтерия и столбняк каждые 10 лет после последней вакцинации

Примечания.

1. Иммунизация в рамках Национального календаря проводиться вакцинами отечественного и зарубежного производства, зарегистрированными и разрешёнными к применению в установленном порядке. Применяемые в рамках Национального календаря профилактических прививок вакцины, кроме БЦЖ, можно вводить одновременно (или с интервалом 1 месяц) разными шприцами в разные участки тела.

2. Детей, родившихся от матерей-носителей вируса гепатита В или больных гепатитом В в 3-м триместре беременности, прививают по схеме: 0-1-2-12 месяцев.

3. Ревакцинация против туберкулёза в 7 лет проводится туберкулиноотрицательным детям, не инфицированным микобактериями туберкулёза.

4. Вакцинация против гепатита В в 13 лет проводится ранее не привитым или получившим только одну прививку.

5. Вакцинацию против краснухи проводят девочкам в 13 лет, ранее не привитым или получившим только одну прививку.

6. Ревакцинация против туберкулёза в 14 лет проводится туберкулиноотрицательным детям, не инфицированным туберкулёзом и не получившим прививку в 7 лет.

Лечебные вакцины.

Наряду с вакцинами, которые используются для профилактики инфекционных заболеваний, существуют и лечебные вакцины.

Применение лечебных вакцин в медицинской практике:

§ иммунотерапия инфекционных заболеваний (длительное хроническое течение инфекции, бактерионосительство и вирусоносительство в случаях безуспешной антибиотикотерапии – стафилококковая и герпес инфекция, бруцеллез, гонорея);

§ лечение аллерги­ческих и аутоиммунных заболеваний;

Сыворотка– это жидкая часть крови, лишенная форменных (клеточных) элементов и фибриногена.

Иммуноглобулины– это γ-глобулиновая фракция сывороточных белков.

Вакцины (лат. vaccinus коровий) — препараты, получаемые из бактерий, вирусов и других микроорганизмов или продуктов их жизнедеятельности и применяемые для активной иммунизации людей и животных с целью специфической профилактики и лечения инфекционных болезней.

Содержание

История

Еще в древние времена было установлено, что перенесенная однажды заразная болезнь, напр, оспа, бубонная чума, предохраняет человека от повторного заболевания. В последующем эти наблюдения развились в учение о постинфекционном иммунитете (см.), т. е. о повышенной специфической устойчивости против возбудителя, наступающей после перенесения вызванной им инфекции.

Давно было замечено, что люди, перенесшие болезнь в легкой форме, становятся невосприимчивыми к ней. На основе этих наблюдений у многих народов применялось искусственное заражение здоровых людей инфекционным материалом в надежде на легкое течение болезни. Например, с этой целью китайцы вкладывали в нос здоровым людям высушенные и размельченные оспенные струпья от больных. В Индии размельченные оспенные струпья прикладывали к коже, предварительно натертой до ссадин. В Грузии с той же целью делали уколы кожи иглами, смоченными оспенным гноем. Искусственную прививку оспы (вариоляцию) стали применять и в Европе, в частности в России, в 18 в., когда эпидемии оспы приняли угрожающие размеры. Однако этот метод предохранительных прививок не оправдался: наряду с легкими формами заболевания у многих привитая оспа вызывала тяжелое заболевание, а сами привитые становились источниками заражения окружающих. Поэтому в начале 19 в. вариоляция в европейских странах была запрещена. Африканские народы продолжали применять ее и в середине 19 в.

В связи с распространением вариоляции искусственные прививки заразного материала предпринимались и при некоторых других инфекциях: кори, скарлатине, дифтерии, холере, ветряной оспе. В России в 18 в. Д. С. Самойлович предлагал прививать гной из чумных бубонов лицам, непосредственно соприкасающимся с больными. Указанные попытки предохранения людей от инфекционных болезней сохраняют теперь лишь исторический интерес.

Введение в организм человека или домашних животных современных В. имеет целью добиться выработки прививочного иммунитета, аналогичного постинфекционному иммунитету, но с исключением опасности развития инфекционной болезни в результате прививок (см. Вакцинация). Впервые такая Вакцина для иммунизации людей против оспы была получена английским врачом Э. Дженнером с использованием инфекционного материала от коров (см. Оспопрививание). Дата публикации труда Э. Дженнера (1798) считается началом развития вакцинопрофилактики, к-рая в течение первой половины 19 в. получила широкое распространение в большинстве стран мира.

На последующих этапах развития учения о вакцинах большое значение имели работы Η. Ф. Гамалеи (1888), Р. Пфейффера и В. Колле (1898), показавшие возможность создания иммунитета не только прививками ослабленных живых микробов, но и убитыми культурами возбудителей болезней. Η. Ф. Гамалеи показал также принципиальную возможность иммунизации химическими В., получаемыми извлечением из убитых микробов иммунизирующих фракций. Большое значение имело открытие Г. Рамоном в 1923 г. нового вида вакцинирующих препаратов — анатоксинов.

Виды вакцин

С целью повышения иммуногенности В., особенно химических и анатоксинов, их применяют в форме препаратов, адсорбированных на минеральных коллоидах, чаще всего на геле гидроокиси алюминия или фосфата алюминия. Применение адсорбированных В. удлиняет период воздействия антигенов (см.) на организм привитого; кроме того, адсорбенты проявляют неспецифическое стимулирующее действие на иммуногенез (см. Адъюванты). Адсорбирование некоторых химических В. (напр., брюшнотифозной) способствует снижению их высокой реактогенности.

Каждый из указанных выше видов В. имеет свои особенности, положительные и отрицательные свойства.

Живые вакцины

Для приготовления живых Вакцин применяют наследственно измененные штаммы (мутанты) патогенных микробов, лишенные способности вызывать специфическое заболевание у вакцинируемого, но сохранившие свойство размножаться в привитом организме, заселять в большей или меньшей степени лимфатический аппарат и внутренние органы, вызывая скрытый, без клинического заболевания, инфекционный процесс — вакцинную инфекцию. Привитой организм может реагировать на вакцинную инфекцию местным воспалительным процессом (преимущественно при накожном способе вакцинации против оспы, туляремии и других инфекций), а иногда и общей непродолжительной температурной реакцией. Некоторые реактивные явления при этом могут быть обнаружены при лабораторных исследованиях крови привитых. Вакцинная инфекция, даже если она протекает без видимых проявлений, влечет за собой общую перестройку реактивности организма, выражающуюся в выработке специфического иммунитета против заболевания, вызываемого патогенными формами того же вида микроба.

Выраженность и продолжительность поствакцинального иммунитета различны и зависят не только от качества живой вакцины, но и от иммунологических особенностей отдельных инфекционных болезней. Так, напр., оспа, туляремия, желтая лихорадка ведут к развитию практически пожизненной невосприимчивости у переболевших. В соответствии с этим высокими иммунизирующими свойствами обладают и живые В. против названных болезней. В отличие от этого, трудно рассчитывать на получение высокоиммуногенных В., напр, против гриппа или дизентерии, когда сами эти заболевания не создают достаточно длительного и напряженного постинфекционного иммунитета.

Среди других видов вакцинных препаратов живые В. способны создавать у привитых наиболее выраженный поствакцинальный иммунитет, приближающийся по напряженности к постинфекционному иммунитету, но продолжительность его все же меньше. Напр., высокоэффективные В. против оспы и туляремии способны обеспечить устойчивость привитого человека против заражения на протяжении 5—7 лет, но не пожизненно. После прививок против гриппа лучшими образцами живых В. выраженный иммунитет сохраняется в ближайшие 6—8 мес.; постинфекционный иммунитет против гриппа резко падает к полутора — двум годам после болезни.

Вакцинные штаммы для приготовления живых В. получают различными путями. Э. Дженнер отобрал для вакцинации против оспы людей субстрат, содержащий вирус коровьей оспы, обладающий полным антигенным сходством с вирусом оспы человека, но маловирулентный для людей. Подобным образом отобран бруцеллезный вакцинный штамм № 19, относящийся к слабопатогенному виду Br. abortus, вызывающий бессимптомную инфекцию у привитых с последующим развитием иммунитета ко всем видам бруцелл, в т. ч. и к наиболее опасному для человека виду Br. melitensis. Однако отбор гетерогенных штаммов относительно редко позволяет найти вакцинные штаммы нужного качества. Чаще приходится прибегать к экспериментальному изменению свойств патогенных микробов, добиваясь лишения их патогенности для человека или вакцинируемых домашних животных при сохранении иммуногенности, связанной с антигенной полноценностью вакцинного штамма и с его способностью размножаться в привитом организме и вызывать бессимптомную вакцинную инфекцию.

Методы направленного изменения биол, свойств микробов для получения вакцинных штаммов разнообразны, но общей чертой этих методов является более или менее длительное культивирование возбудителя вне организма животного, чувствительного к данной инфекции. Для ускорения процесса изменчивости экспериментаторы применяют те или иные воздействия на культуры микробов. Так, Л. Пастер и Л. С. Ценковский для получения сибиреязвенных вакцинных штаммов культивировали возбудителя в питательной среде при повышенной против оптимума температуре;

Спонтанной утрате патогенности микробных культур предшествует появление в их популяции отдельных мутантов с качеством вакцинных штаммов. Поэтому вполне оправдан и перспективен метод селекции вакцинных клонов из лабораторных культур возбудителей, популяции которых в целом еще сохраняют патогенность. Такая селекция позволила H. Н. Гинсбургу получить сибиреязвенный вакцинный штамм — мутант СТИ-1, пригодный для вакцинации не только животных, но и людей. Аналогичный вакцинный штамм № 3 был получен А. Л. Тамариным, а Р. А. Салтыков селекционировал из патогенной культуры возбудителя туляремии вакцинный штамм № 53.

Для получения вакцинных штаммов вирусов применяется длительное пассирование их в организме одного и того же вида животных, иногда не являющихся естественными хозяевами данного вируса. Так, антирабическая вакцина готовится из штамма фиксированного вируса (virus fixe) Л. Пастера, полученного из вируса уличного бешенства, многократно пассированного через мозг кролика (см. Антирабические прививки). В результате этого резко возросла вирулентность вируса для кролика и снизилась вирулентность для других животных, а также для человека. Таким же путем вирус желтой лихорадки был превращен в вакцинный штамм путем длительных внутримозговых пассажей на мышах (штаммы Дакар и 17Д).

Заражение животных в течение длительного периода оставалось единственным методом культивирования вирусов. Это имело место до разработки новых методов их культивирования. Одним из таких методов явился метод культивирования вирусов на куриных эмбрионах. Использование данного метода позволило адаптировать к куриным эмбрионам высокоаттенуированный штамм 17Д вируса желтой лихорадки и начать широкое изготовление В. против этого заболевания. Метод культивирования на куриных эмбрионах позволил также получать вакцинные штаммы вирусов гриппа, паротита и других вирусов, патогенных для человека и животных.

Еще более существенные достижения в деле получения вакцинных штаммов вирусов стали возможны после открытия Эндерса, Уэллера и Роббинса (J. Enders, Т. Weller, F. Robbins, 1949), предложивших выращивать вирус полиомиелита в тканевых культурах, и введения в вирусологию однослойных клеточных культур и метода бляшек [Дульбекко и Фогт (R. Dulbecco, М. Vogt, 1954)]. Эти открытия позволили осуществить селекцию вариантов вирусов и получать чистые клоны — потомства одной или немногих вирусных частиц, обладающих определенными, наследственно закрепленными биол, свойствами. Сейбину (A. Sabin, 1954), использовавшему указанные методы, удалось получить мутанты вируса полиомиелита, характеризующиеся пониженной вирулентностью, и вывести вакцинные штаммы, пригодные для массового производства живой полиомиелитной вакцины. В 1954 г. те же методы были использованы для культивирования вируса кори, для получения вакцинного штамма этого вируса и затем для производства живой коревой В.

Метод клеточных культур с успехом используется как для получения новых вакцинных штаммов различных вирусов, так и для усовершенствования существующих.

Еще одним методом получения вакцинных штаммов вирусов является метод, основанный на применении рекомбинации (генетического скрещивания).

Так, напр., оказалось возможным получить рекомбинант, используемый как вакцинный штамм вируса гриппа А при взаимодействии авирулентного мутанта вируса гриппа, содержащего гемагглютинин H2 и нейраминидазу N2, и вирулентного штамма Гонконг, содержащего гемагглютинин H3 и нейраминидазу N2. Полученный рекомбинант содержал гемагглютинин H3 вирулентного вируса Гонконг и сохранил авирулентность мутанта.

Живые бактерийные, вирусные и риккетсиозные В. в последние 20— 25 лет наиболее широко изучаются и внедрены в противоэпидемическую практику в Советском Союзе. Применяются в практике живые В. против туберкулеза, бруцеллеза, туляремии, сибирской язвы, чумы, оспы, полиомиелита, кори, желтой лихорадки, гриппа, клещевого энцефалита, Ку-лихорадки, сыпного тифа. Изучаются живые В. против дизентерии, эпидемического паротита, холеры, брюшного тифа и некоторых других инфекционных болезней.

Методы применения живых В. разнообразны: подкожный (большинство В.), накожный или внутрикожный (В. против оспы, туляремии, чумы, бруцеллеза, сибирской язвы, БЦЖ), интраназальный (вакцина против гриппа); ингаляционный (вакцина против чумы); оральный или энтеральный (вакцина против полиомиелита, в стадии разработки — против дизентерии, брюшного тифа, чумы, некоторых вирусных инфекций). Живые В. при первичной иммунизации вводят однократно, за исключением В. против полиомиелита, где повторная вакцинация связана с введением вакцинных штаммов разных типов. В последние годы все шире изучается метод массовой вакцинации с помощью безыгольных (струйных) инъекторов (см. Инъектор безыгольный).

Основной ценностью живых В. является их высокая иммуногенность. При ряде инфекций, в первую очередь особо опасных (оспа, желтая лихорадка, чума, туляремия), живые В. являются единственным эффективным видом В., т. к. убитыми микробными телами или химическими В. не удается воспроизвести достаточно напряженного иммунитета против этих заболеваний. Реактогенность живых В. в целом не превышает реактогенности других прививочных препаратов. За время многолетнего широкого применения живых В. в СССР не наблюдалось случаев реверсии вирулентных свойств апробированных вакцинных штаммов.

К числу положительных качеств живых В. относятся также однократность их применения и возможность использования разнообразных способов аппликации.

К недостаткам живых Вакцин следует отнести их относительно малую устойчивость при нарушении режима хранения. Эффективность живых В. определяется наличием в них живых вакцинных микробов, а естественное отмирание последних снижает активность В. Однако выпускаемые сухие живые В. при соблюдении температурного режима их хранения (не выше 8°) по срокам годности практически не уступают другим видам В. Недостатком некоторых живых В. (оспенная В., антирабическая) является возможность появления у отдельных привитых индивидуумов неврологических осложнений (см. Поствакцинальные осложнения). Эти поствакцинальные осложнения весьма редки, и их удается в значительной мере избежать при строгом соблюдении технологии приготовления и правил применения названных В.

Убитые вакцины

Убитые В. получают инактивацией патогенных бактерий и вирусов, применяя для этого различные воздействия на культуры физ. или хим. характера. Соответственно фактору, обеспечивающему инактивацию живых микробов, готовят гретые В., формалиновые, ацетоновые, спиртовые, феноловые. Изучаются также другие способы инактивации, напр, ультрафиолетовыми лучами, гамма-излучением, воздействием перекиси водорода и другими хим. агентами. Для получения убитых В. применяют высокопатогенные, полноценные в антигенном отношении штаммы соответствующих видов возбудителей.

По своей эффективности убитые В., как правило, уступают живым, однако некоторые из них имеют достаточно высокую иммуногенность, предохраняя привитых от заболевания или уменьшая тяжесть течения последнего.

Т. к. инактивация микробов упомянутыми выше воздействиями нередко сопровождается значительным снижением иммуногенности В. в связи с денатурацией антигенов, предпринимались многочисленные попытки применения щадящих способов инактивации с прогреванием микробных культур в присутствии сахарозы, молока, коллоидных сред. Однако полученные такими способами АД-вакцины, гала-вакцины и др., не показав существенных преимуществ, не вошли в практику.

В отличие от живых В., большинство которых применяется путем однократной прививки, убитые В. требуют двух или трех прививок. Так, напр., убитую брюшнотифозную В. вводят подкожно дважды с интервалом 25— 30 дней и третью, ревакцинирующую, инъекцию проводят через 6—9 мес. Вакцинацию против коклюша убитой В. проводят трехкратно, внутримышечно, с интервалом 30— 40 дней. Холерную В. вводят дважды.

В СССР применяют убитые В. против брюшного тифа и паратифа В, против холеры, коклюша, лептоспирозов и клещевого энцефалита. В зарубежной практике применяют также убитые В. против гриппа, полиомиелита.

Основным способом введения убитых В. являются подкожные или внутримышечные инъекции препарата. Изучаются методы энтеральной вакцинации против брюшного тифа и холеры.

Преимуществом убитых В. является относительная простота их приготовления, поскольку для этого не требуются специально и длительно изученные вакцинные штаммы, а также сравнительно большая стабильность при хранении. Существенным недостатком этих препаратов является слабая иммуногенность, необходимость повторных инъекций в курсе вакцинации, ограниченность способов аппликации В.

Химические вакцины

Из числа химических В. в СССР применяется брюшнотифозная В. в сочетании с хим. паратифозной В вакциной или со столбнячным анатоксином. Для вакцинации детских контингентов применяют другую хим. вакцину — Vi-антиген брюшнотифозных микробов (см. Vi-антиген).

В зарубежной практике имеет ограниченное применение для иммунизации некоторых профессиональных контингентов хим. сибиреязвенная В., представляющая собой протективный антиген сибиреязвенных бацилл, получаемый в специальных условиях культивирования и сорбированный на геле гидроокиси алюминия. Двукратное введение этой В. создает у привитых иммунитет длительностью 6—7 мес. Повторные ревакцинации приводят к выраженным аллергическим реакциям на прививки.

Применяют перечисленные В. для профилактики, т. е. для иммунизации здоровых людей с целью выработки ими иммунитета против того или иного заболевания (см. табл.). Некоторые В. применяют также при терапии хронических инфекционных болезней с целью стимуляции выработки организмом более выраженного специфического иммунитета (см. Вакцинотерапия). Напр., при лечении хрон, бруцеллеза применяют убитую В. (в отличие от живой профилактической В.). М. С. Маргулис, в. д. Соловьев и А. К. Шубладзе предложили лечебную В. против множественного (рассеянного) склероза. Промежуточное положение между профилактическими и лечебными В. занимает антирабическая В., которую применяют для предупреждения заболевания бешенством лиц, зараженных и находящихся в инкубационном периоде. С лечебной целью применяют также аутовакцину (см.), приготовляемую путем инактивации культур микробов, выделенных от больного.