Рекомбинантные антигены гепатита с

Среди всего населения планеты у 2 млрд человек в крови выявлен поверхностный антиген вируса гепатита В. Каждый год регистрируются десятки тысяч новых случаев заражения. Поэтому для профилактики распространения инфекции серологический скрининг назначают всем обратившимся за медицинской помощью и группе лиц, находящихся в зоне риска.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое антигены вируса гепатита В?

Иммунитет здорового человека активизируется при появлении в организме чужеродных агентов. В ответ на антигенные свойства возбудителей болезней вырабатываются защитные антитела. Причиной инфицирования HBV-инфекцией становится проникновение в кровь инфицирующей дозы ДНК-вируса.

Вирусный штамм обладает чрезвычайно высокой вирулентностью, инфицирующая доза содержится в 0,0000001 мл сыворотки.

От начала инфицирования в серологических тестах можно обнаружить разные типы антигенов и соответствующих им антител, по которым судят о стадии инфекционного процесса. В составе вирусной частицы ВГВ различают 4 типа антегенов:

поверхностный HBSAg находится среди молекул суперкапсида (внешней фосфолипидной мембраны вириона);
сердцевинный HBCoreAg содержится в ядре (core);
HBeAg совместно с геномом включен во внутреннюю ядерную часть (нуклеокапсид). Положительное значение в анализе свидетельствует об активной репликации вирусного ДНК.
HBxAg до конца не изучен. В начале инфекции обнаружить нельзя, появляется при хронизации процесса. По мнению ученых влияет на развитие первичного рака печени — гепатоцеллюлярной карциномы.

Поверхностный антиген вируса гепатита В отвечает за проникновение возбудителя в гепатоциты. Это первый серологический маркер, который появляется в крови. Достигает максимального титра к четвертой недели и циркулирует в сыворотке до 6 месяцев.

Из-за постоянной генетической изменчивости HBSAg возбудителю свойственна неоднородность в разных регионах планеты. Мутации S-гена приводят к формированию генотипов инфекции, на сегодня их зарегистрировано восемь. В России до 93% случаев инфицирования числятся с генотипом D.

Мутационные штаммы являются причиной неэффективности вакцинации против ВГВ.

Тестирование сыворотки для выявления HBeAg проводится только в случае положительного поверхностного HBSAg для подтверждения диагноза. Наличие в крови антигена доказывает инфицированность человека. Подтверждается почти у 95% зараженных лиц в начале желтушного периода. При благоприятном течении болезни АГ исчезает при прогрессировании симптомов и к нему появляются АТ.

Обнаружить HBCAg при проведении ИФА нельзя, так как он локализуется внутри гепатоцитов. Подтвердить его можно только при биопсии печеночной ткани, что не оправдано из-за сложности инвазивной процедуры. Наиболее информативны антитела: anti-HBCAg IgM и IgG.

Среди четырех антигенов именно HBCAg обладает максимальной иммуногенностью, как чужеродный агент, он первым активизирует иммунитет на ответную реакцию.

Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В

В ответ на появление в крови поверхностного антигена, указывающего на положительный гепатит В, иммунная система начинает продуцировать anti-HBS двух видов:

Выявление АТ к поверхностному антигену помогает в составлении прогноза болезни:

благоприятный прогностический признак отмечается при появлении anti-HBS на фоне клинических улучшений;
неблагоприятный формируется при исчезновении anti-HBS в преджелтушном и желтушном периоде. В таких случаях быстро развивается паренхиматозная дистрофия.

Для формирования иммунитета к болезни вакцинацию проводят рекомбинантным HBSAg. В ответ на введение количество антител anti-HBS нарастает и колеблется на уровне 10 МЕ/мл в течение 10 лет.

Антигены вирусы гепатита В и взаимодействие с ними антител

Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В

В серологических анализах на гепатит В особая диагностическая ценность принадлежит антителам к вирусу, так как самого HBCORAg в крови нет. Иммуноглобулины класса М (anti-HBCOR IgM) присутствуют в плазме до 18 месяцев.

Доноров тестируют на наличие anti-HBCOR (total). Для выбраковки донорского биоматериала достаточно присутствия суммарного количества иммуноглобулинов без учета их класса.

Маркер anti-HBCOR IgG у лиц переболевших HBV, носителей HBSAg и больных с хронизацией процесса присутствует в крови пожизненно. Поэтому для диагноста это более информативный показатель, чем anti-HBS.

Поверхностный антиген вируса гепатита В положительный: что это значит?

Тестирование на выявление HBSAg назначают отдельно или в комплексе с анализами на другие маркеры инфекции. Поверхностный антиген сохраняется в крови на протяжении начального периода заболевания. Наибольшее значение отмечается за 1—2 недели до окончания инкубационного периода.

Появление положительного результата свидетельствует о:

Всегда существует вероятность ложноположительных результатов к вирусу гепатита, при выявлении поверхностного АГ исказить ответ может:

некачественная или нечувствительная тест-система;
онкология;
аутоиммунные заболевания и другие инфекции.

Что делать при обнаружении антител к антигенам вируса гепатита Б?

Точный диагноз HBV-инфекции по одному положительному ИФА не устанавливают. Врач-инфекционист дополнительно назначает:

повторную серодиагностику;
ПЦР для выявления генетического материала;
биохимический анализ;
УЗИ печени.

Носителям HBV-инфекции сдавать биоматериалы для донорства запрещено.

Своевременная диагностика факта инфицирования улучшает прогноз для больного, так как клинические формы многообразны: от бессимптомного течения до быстропрогрессирующего цирроза.

Массовые обследования людей на выявление поверхностного антигена HBV необходимы, так как только 15% случаев инфицирования заканчиваются выздоровлением.

При хронизации процесса современные препараты поддерживают качество жизни больного человека, но не исключается риск возникновения фиброзных изменений в печени, печеночной недостаточности и гепатокарциномы.

Сегодня известно минимум 10 структурных и неструктурных белков, кодируемых геномом HCV. К структурным белкам относят core, envelop 1 и envelop 2. Белок core является белком нуклеокапсида, тогда как envelop 1 и envelop 2 — гликопротеины внешней оболочки вируса. В структурной зоне кодируется также белок р7, функция которого не ясна, однако аналогия с другими представителями семейства Flaviviridae позволяет предположить, что его функция связана с высвобождением вириона из инфицированной клетки.
Этот белок отщепляется клеточной пептидазой от envelop 2, но не во всех случаях, что обусловливает существование envelop 2 в виде двух форм более и менее протяженной.

Неструктурная область генома HCV кодирует 6 белков — NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A и NS5B. Белок NS2 является вирусной металлозависимой протеиназой. Белок NS4A действует как эффектор или кофактор для NSЗ-протеолитической активности в NS4A/NS4B, NS4B/NS5A, NS5A/NS5B сайтах нарезания полипротеина вируса.

В настоящее время фрагменты структурных и неструктурных белков, полученных генноинженерным путем (рекомбинантные белки) или с помощью химического синтеза, используют в качестве антигенов при конструировании иммуноферментных тест-систем. Первое поколение иммуноферментных тест-систем появилось на рынке в 1989 году и было основано на прямом ИФА. В качестве иммуносорбента были использованы фрагменты двух белков, NS3 и NS4, обозначаемых как 5-1-1 и С100-3.

Одновременно были разработаны и подтверждающие тесты на основе иммуноблота с рекомбинантными белками (RIBA). Чувствительность этих тест-систем первого поколения составляла только 64% для ИФА и 55% для иммуноблота. Тест-системы второго поколения появились на рынке в 1991 году. В качестве антигенов, сорбированных на твердой фазе, в этих тест-системах использовали капсидные белки (фрагмент с22-3) и антигены неструктурных регионов NS3 (фрагменты с200 и сЗЗс) и NS4, что позволило повысить чувствительность и специфичность исследований. Поскольку гуморальный иммунный ответ на капсидные антигены (структурные белки) нагинается быстрее, гем на неструктурные белки, период от инфицирования до выявляемой сероконверсии удалось уменьшить до двух месяцев.

Подтверждающие тест-системы на основе иммуноблота позволяли идентифицировать участвующие в реакции антигены. Результаты, полученные при помощи этих тест-систем, интерпретировали как положительные лишь при реакции антител, находящихся в исследуемом субстрате, по крайней мере, с двумя антигенами, тогда как при наличии реакции лишь с одним из антигенов результат считали неопределенным. Было установлено, что специфичность второго поколения тест-систем зависела от источника антигенов. В 1993 году на рынке появилось третье поколение тест-систем. В дополнение к вышеупомянутым антигенам в этих тест-системах используются также антигены, аминокислотная последовательность которых соответствует иммунодоминантным участкам NS5 белков.

В тест-системах первого, второго и третьего поколений в качестве антигенов использовались или рекомбинантные, или синтетические пептиды. В настоящее время можно выделить также тест-системы четвертого поколения, в которых в качестве иммуносорбента используют сочетания рекомбинантных и синтетических пептидов.

Опыт применения тест-систем различных поколений в мире очень большой. Было установлено, что если с помощью тест-систем первого или второго поколения у больных с острым вирусным гепатитом С антитела выявляли на 10-16, а в ряде случаев и 25-30 неделе от начала заболевания, то диагностикумы третьего поколения позволяли сократить этот срок до 2-3 недель. Согласно обобщенным данным чувствительность тест-систем первого, второго и третьего поколений составляет соответственно 70-80%, 92-95% и 97%.

В то же время, по данным С. Colin, 2001, чувствительность тест-систем третьего поколения составила 98,9% у пациентов с хроническими заболеваниями печени и 97,2% на специальных контрольных панелях сывороток. Достижение высокой чувствительности иммуноферментных тест-систем 3 и 4 поколения сопряжено с некоторыми проблемами в обеспечении специфичности исследований, что в ряде случаев может приводить к появлению ложноположительных результатов. В литературе имеются данные о возможных погрешностях в специфичности ELISA 3 тест-систем. Они являются общими для всех ELISA тест-систем, включая тест-системы для диагностики СПИДа.

Ложнопозитивные результаты могут быть следствием повышенного содержания в образцах гамма-глобулинов (сыворотки пациентов африканской расы, миеломная болезнь, ревматоидные факторы), заболеваний печени (цирроз, рак), аутоиммунных заболеваний (коллагенозы, аутоиммунные гепатиты), других вирусных инфекций (ВИЧ, гепатит В) и длительного хранения сывороток в меняющихся температурных условиях. Проведение какой-либо иммунизации также может сопровождаться повышением частоты ложнопозитивных реакций. Рекомендуемые в настоящее время меры по устранению этой проблемы следующие: а) повторная постановка образца в этой же ИФТС; б) повторная детекция anti-HCV в другой ИФТС; в) использование подтверждающих тестов на основе ИФА и иммуноблота.

Однако использование предлагаемых способов подтверждения результатов зачастую приводят к расхождениям в их итоговой трактовке, что показано исследованиями российских и зарубежных исследователей.

В настоящее время производители ИФТС для детекции anti-HCV достигают высокой чувствительности или за счет более полного выявления антител к NS3 или антител к антигенам core. Сравнительные исследования, выполненные на различных группах риска и специальных контрольных панелях показали, что тест-системы, лучше выявлявшие антитела к NS3, оказались несколько более чувствительными, чем тест-системы, лучше выявлявшие антитела к антигенам core. Их чувствительность составляла, соответственно 99,9% и 98,6%.

Гепатит В (Б) был и остается одной из важнейших проблем мирового здравоохранения. По примерным оценкам заболеванием страдает около 350 миллионов человек.

Оно выражается в массовой гибели гепатоцитов (клеток печени) на фоне воспалительного процесса и последующим развитием печеночной недостаточности.

Заражение происходит вследствие контакта с биологическими жидкостями инфицированного человека — кровью, слюной, мочой, желчью и т.д. При проникновении вируса организм синтезирует специальные белковые соединения — антитела к гепатиту В (Б, B).

Что такое маркеры гепатита В

Для борьбы с вирусами в ответ на антигены иммунная система продуцирует антитела, индивидуальные для каждого заболевания. Они представляют собой особые белки, действие которых направлено на защиту организма от возбудителя заболевания.

Если в крови обнаружены антитела гепатита В (Б), то в зависимости от их типа это может свидетельствовать:

о болезни пациента на начальных стадиях (до проявления первых внешних признаков);
о болезни на стадии затухания;
о хроническом течении гепатита В;
о поражении печени вследствие заболевания;
о сформировавшемся после выздоровления иммунитете;
о здоровом носительстве (пациент сам не болен, но заразен).

Антитела в крови не всегда говорят о наличии гепатита В или о заболевании, вылеченном ранее. Их продуцирование также является следствием сделанной прививки.

Кроме того, выявление маркеров гепатита В может быть связано с:

нарушениями работы иммунной системы (в том числе прогрессированием аутоиммунных заболеваний);
злокачественными опухолями в организме;
другими инфекционными заболеваниями.

Такие результаты называются ложноположительными, так как присутствие антител не сопровождается развитием гепатита В.

Антитела вырабатываются к вирусу и его элементам (антигенам). Исходя из этого выделяют:

поверхностные антитела anti-HBs (антитела к антигенам HBs, формирующим вирусную оболочку гепатита В);
ядерные антитела anti-HBc (антитела к антигену HBc, находящемуся в ядерном белке вируса гепатита В).

Дополнительную информацию об анализах на гепатит В можно узнать из этой статьи .

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg, anti-HBs)

Поверхностный антиген HBsAg входит в состав вируса гепатита В (Б, B) в качестве компонента капсида (оболочки). Отличается поразительной стойкостью.

Сохраняет свои свойства даже в кислой и щелочной средах, переносит обработку фенолом и формалином, заморозку и кипячение. Именно он обеспечивает проникновение HBV в клетки печени и его дальнейшее продуцирование.

Антиген поступает в кровоток еще до первых проявлений заболевания и обнаруживается посредством анализа спустя 2-5 недель после заражения. Антитела к поверхностному антигену HBsAg вируса гепатита В носят название anti-HBs.

Они играют ведущую роль в формировании иммунитета HBV. Количественное исследование крови на антитела проводится с целью контроля формирования иммунитета после вакцинации. Антиген при этом в крови не регистрируется.

Ядерный антиген вируса гепатита В (HBcAg, anti-HBc)

Антиген HBcAg является составляющей ядерных белков. Обнаруживается при биопсии печеночной ткани, в крови в свободном виде не присутствует. Так как сама процедура исследования на этот антиген вируса гепатита В достаточно трудоемкая, то проводят ее редко.

Обнаруживаются следующие антитела anti-HBc:

В крови обнаружены антитела: что это значит

Anti-HBs в крови отражает положительную динамику. Они появляются:

при выздоровлении и формировании иммунитета у пациента (HBsAg при этом отсутствуют);
обнаруживаются у выздоровевших пациентов, которые остаются носителями вируса (антиген гепатита В HBsAg не обнаруживается);
регистрируются у некоторых людей, перенесших переливание крови или ее компонентов от носителя антител.

Если поверхностный антиген гепатита В (Б, B) при пробе крови положительный, то можно сделать вывод о:

остром течении заболевания (постепенное повышение уровня в крови, также обнаруживаются HbcAg, Anti-HBc);
хроническом течении (антиген s вируса гепатита В имеет стабильный высокий уровень более 6 месяцев, также присутствует HBcAg,Anti-HBc);
здоровом носительстве (сочетается с Anti-HBc);
у маленьких детей возможно обнаружение в крови антигенов матери.

Положительные ядерные антитела IgM к гепатиту В (Б, B) обнаруживаются при поражении печени в желтушной и преджелтушной стадии. Пациент при этом крайне заразен для окружающих.

Наличие anti-HBc IgM в сочетании с HBsAg говорит об остром течении заболевания.

Исчезновение IgM говорит о затухании болезни и выздоровлении пациента.

Проявляющиеся затем IgG сохраняются длительный период после выздоровления. IgG — показатель, возникающий при развитии стойкого иммунитета к болезни или ее переходе в хроническую форму.

Название	У инфицированного человека	В норме у здорового человека
АНТИТЕЛА
Anti-HBs	+ (благоприятный прогноз)	(перенесенное ранее заболевание, вакцинация) / –
Anti-НВс IgM	(стадия обострения, больной крайне заразен)/ – (хроническое течение заболевания)	–
Anti-НВс IgG	(хроническое течение заболевания)/ – (стадия обострения)	+ (стойкий иммунитет) /-
Anti-HBc	+ (благоприятный прогноз)/ –	+ (стойкий иммунитет) / –
АНТИГЕНЫ
HBsAg	+	–
HBcAg	+ (острое или хроническое течение)	–

Таблица: расшифровка анализов на маркеры гепатита В (Б, B)

Что делать, если поверхностный антиген вируса гепатита В положительный

Поверхностный антиген вируса гепатита В (Б, B), обнаруженный в крови, не является поводом для паники. Прежде всего, исследования всегда проводятся комплексно.

Рассмотрение пробы только на один маркер не дает внятных и точных результатов.

Если диагноз подтверждается совокупностью показателей в крови пациента, то назначается соответствующая терапия.

Современная медицина способна вылечить человека достаточно быстро.

Производство вакцины основано на новейших технологиях генной инженерии. Рекомбинантным продуцентом антигена гепатита В являются трансформированные дрожжевые штаммы hansenula polymorpha. Их использование позволяет не применять компоненты крови при создании вакцины и обеспечивает высокую безопасность.

Заключение

Гепатит В — опасное заболевание. При заражении взрослого человека оно редко переходит в хроническую стадию. Для выявления на ранних стадиях применяют исследования на маркеры. Они способны дать наиболее полную информацию о стадии развития болезни и состоянии пациента.

Безопасный секс, стерилизация медицинских и стоматологических инструментов, тщательная гигиена маникюрных и парикмахерских принадлежностей станут отличной профилактикой заражения. При повышенных рисках инфицирования рекомендуется применять вакцину.

Гепатит и HBsAg

Итак, антиген HBsAg – один из компонентов оболочки вируса гепатита В (HBV). В контексте лабораторных исследований он является маркёром (индикатором) вируса.

Если говорить о составе капсида (внешняя оболочка вируса) гепатита В подробнее, то это сложная комбинация белков, гликопротеинов, липопротеидов и липидов клеточного происхождения. HBsAg в данном случае отвечает за процесс адсорбции вируса клеткой, то есть обеспечивает поглощение HBV гепатоцитами – клетками печени. Как и любой другой вирус, после внедрения в благоприятную среду, он начинает реплицировать (продуцировать) новые ДНК и протеины, необходимые для дальнейшего размножения (копирования) вируса. Фрагменты вируса, в нашем случае – HbsAg, поступают в кровоток, по которому распространяются дальше.

Возбудитель гепатита В относится к гепаднавирусам ( Hepadnaviridae ), само название которых указывает на их отношение к печени ( hepa ) и к ДНК ( DNA ). Таким образом, HBV – это гепатотропный вирус, при этом единственный среди всех вирусов гепатита, содержащий ДНК. Его активность (контагиозность и вирулентность) зависит от многих факторов:

возраста (например, до 1 года – ≈90%, до 5 лет – ≈20–50%, старше 13 лет – ≈5%);
индивидуальной восприимчивости;
штамма вируса;
инфицирующей дозы;
гигиенических условий жизни и труда;
эпидемиологической обстановки.

Но в целом контагиозность вируса гепатита B невысокая, ниже средней, если только полностью не пренебрегать всеми правилами безопасной половой жизни и гигиены.

Но как же передается вирус гепатита B? Процесс инфицирования происходит посредством крови и биологических жидкостей следующими путями:

Парентеральным , то есть при попадании напрямую в кровь или слизистую оболочку, минуя защитные барьеры организма, такие как кожный покров или желудочно-кишечный тракт. Примерами такого инфицирования может служить нестерильный шприц или любой хирургический инструмент.
Вертикальным – трансплацентарным, то есть внутриутробно от матери к ребенку, во время родов, после них.
Половым (во всех его формах).
Бытовым , то есть через предметы личной гигиены (бритвы, расчески, зубные щетки), при нанесении татуировок, пирсинге и др.

По окончании инкубационного периода наступает так называемая продромальная фаза заболевания, предшествующая острому периоду и предвещающая его. Тогда проявляются первые признаки болезни в виде общего недомогания, слабости, усталости, лихорадки с температурой на грани 37°C, понижения аппетита, тошноты, нарушений стула, суставно-мышечных болей, чувства сдавленности и тяжести в правом подреберье, раздражительности и апатии, кожных высыпаний в области суставов и зуда. Здесь следует отметить, что все эти симптомы могут быть выражены в разной степени у различных людей, вовсе отсутствовать или оставаться незамеченными. Продромальный, или преджелтушный, период может длиться от 1 до 30 дней. О его окончании свидетельствуют увеличенная печень и селезенка (30–50% случаев), повышенный уробилиноген в моче, обесцвечивание кала, а в сыворотки крови можно обнаружить рост концентраций АлАт и АсАт, пониженное содержание лейкоцитов, хотя в целом лейкоцитарная формула в норме.

Желтушность кожного покрова и иктеричность склер (желтая пигментация белковой оболочки глаз) знаменуют вступление в острую фазу , или в период разгара гепатита B. Повышение содержания общего и прямого билирубина в сыворотке крови нарастает первую неделю-две желтушного периода заболевания, достигая своего максимума, после чего происходит стагнация и постепенный спад в пигментации кожи вплоть до полного исчезновения желтой окраски, на что может уйти до 180 дней и даже более.

В пиковых точках болезни в большинстве случаев фиксируют брадикардию, пониженное артериальное давление, ослабление сердечных тонов. Кроме того, если гепатит протекает в тяжелой форме, обнаруживаются:

угнетение центральной нервной системы;
выраженные нарушения в работе ЖКТ;
склонность к кровотечениям в слизистых оболочках (сильно понижен протромбиновый индекс);
концентрация АлАт выше АсАт;
пониженная сулемовая проба, реакция СОЭ – 2–4 мм/час, лейкопения;
лимфоцитоз.

После острого периода (не путать с тяжелой формой!) болезнь развивается по одному из следующих сценариев (см. рис . 1 и 2):

наступает период реконвалесценции (выздоровления) , с постепенным снижением (исчезновением) признаков гепатита B на клиническом, биохимическом и морфологическом уровнях;
присоединяется суперинфекция в виде гепатита D и/или заболевание переходит в фульминантную форму, в так называемый молниеносный тяжелый гепатит (менее 1% случаев);
болезнь переходит в активную хроническую форму :
- a. выздоровление;
- b. цирроз печени (20%), карцинома (1%);
болезнь переходит в состояние устойчивой ремиссии ( стабильная хроническая форма ):
- a. излечение;
- b. внепеченочные патологии.

Рис. 1. Прогноз развития гепатита B

С точки зрения нагрузки на организм, врачи определяют три основных формы протекания острого гепатита B: легкая, средняя и тяжелая. С позиций выраженности симптомов заболевания, выделяют его желтушную (типичную), безжелтушную и субклиническую (атипичные) формы. В типичном варианте болезнь протекает в точности, как описано выше, однако это только 35% от всех случаев. Примерно 65% приходится на атипичные формы, когда не происходит пигментации кожных покровов и слизистой, а другие симптомы выражены слабо (безжелтушный вариант), или когда любые клинические проявления отсутствуют вовсе (субклиническая форма).

Рис. 2. Исход болезней при инфецировании HBV

Диагностические критерии бессимптомного носительства следующие:

антиген HBsAg определяется в крови после 180 дней;
маркёр HBeAg ( см. таблицу ) в сыворотке не обнаруживается;
анти- HBe ( см. таблицу ) – присутствует;
уровень HBV ДНК в сыворотке крови менее 105 копий/мл;
концентрации АлАт/АсАт показывают норму при повторных анализах;
при биопсии печени гистологический индекс активности (МГА) воспалительно-некротического процесса в печени обычно ниже 4.

Как можно увидеть, серологический маркер HBsAg является первым, основным, самым надежным, но далеко не единственным показателем инфекции гепатита B, кроме него требуют определения в сыворотке крови следующие антигены, антитела и молекулы ДНК вируса:

HBeAg

указывает на репликацию HBV в гепатоцитах, высокую активность вируса в крови и высокий риск перинатальной передачи вируса

HBcAg

маркирует репликацию HBV в гепатоцитах, обнаруживается только при морфологическом исследовании биоптатов печени и на аутопсии, в крови в свободном виде не выявляется

анти-НВс (total) (НВсАb)

суммарные антитела к HBcAg, выявляются через 7–14 дней после HBsAg

важный диагностический маркер, особенно при отрицательных результатах индикации HBsAg, используется для ретроспективной диагностики гепатита B и при неверифицированных гепатитах, определяют НВсАg без разделения на классы

IgM анти-НВс (НВсАb IgM)

антитела класса М к ядерному антигену , присутствуют в крови от 60 до 540 дней

один из наиболее ранних сывороточных маркеров гепатита В, наличие его в крови указывает на острую инфекцию (фазу болезни), при хроническом ГВ маркирует репликацию HBV и активность процесса в печени

анти-НВе (HBeAb)

может указывать на начало стадии реконвалесценции (исключение – мутантная форма HBV)

анти-HBs (HBsАb)

защитные антитела к поверхностному антигену HBV

указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител (их защитный титр от HBV-инфекции >10 МЕ/л); обнаружение же антител в первые недели гепатита В прогнозирует развитие гипериммунного варианта фульминантного гепатита В

HBV-DNA

ДНК вируса ГВ

маркер наличия и репликации HBV

Вышеуказанные маркёры появляются и исчезают в определенной последовательности в соответствии с этапами прохождения заболевания. Некоторые из них, такие как IgG анти-НВс, остаются на всю жизнь. Полную и достоверную диагностическую картину дает только весь набор маркёров. Кроме того, для острого, хронического, фульминантного и смешанного гепатитов существуют свои серологические профили (об этом ниже).

Нельзя не затронуть такое редкое, но чрезвычайно опасное явление, как параллельное инфицирование гепатитом D (HDV), оно может возникнуть в двух вариантах:

HDV – это своеобразный паразит вируса гепатита B, его сателлит, он не может реплицироваться в отсутствие HBV , поскольку синтез белков его внешней оболочки невозможен без наличия в гепатоцитах вируса гепатита B. Таким образом, переболеть гепатитом B можно и без дельта-инфекции, а вот наоборот не получится. Присоединение HDV вызывает в 30% случаев молниеносный (фульминантный) гепатит с развитием острой печеночной недостаточности и печеночной энцефалопатии, которые нарастают стремительно, в 60% случаев приводя к летальному исходу. Однако общий исход гепатита B в фульминантную форму находится в пределах 0,4–1% случаев. Поэтому при положительном результате на антиген HBsAg в обязательном порядке следует проводить диагностику дельта-инфекции. Для этого используются серологические маркеры:

IgM анти-HDV

антитела класса М к вирусу гепатита D

маркируют репликацию HDV в организме

IgG анти-HDV

антитела класса G к вирусу гепатита D

свидетельствуют о возможной инфицированности HDV или перенесенной инфекции

HDAg

антиген вируса гепатита D

маркер наличия HDV в организме

HDV-RNA

РНК вируса гепатита D

маркер наличия и репликации HDV

Анализ может быть сдан любым желающим, но есть определенные категории лиц, у которых подобное тестирование проводится обязательно:

сотрудники медицинских учреждений, в особенности те, которые работают с кровью пациентов: медицинские сестры манипуляционных кабинетов, гинекологи, хирурги, фельдшеры, стоматологи;
лица с повышенным уровнем ферментов АсАт и АлАт;
больные, которым предстоит хирургическое вмешательство;
потенциальные доноры крови;
лица, являющиеся носителями вируса гепатита B, больные с хронической формой данного заболевания;
беременные женщины.

Кроме того, исследование рекомендуется делать при наличии таких симптомов, как тошнота, рвота, потеря аппетита, изменение цвета мочи и кала, желтушность – то есть всех тех признаков гепатита B, которые были описаны в начале статьи. Но в целом каждый человек, если подходит к своему здоровью ответственно, должен делать серологическое исследование на HBsAg один раз в год.

Сегодня существует уже три поколения методов серологической диагностики HBsAg , и самые информативные и чувствительные из них, способные выявлять концентрации до 0,05 нг/мл, постепенно вытеснили своих предшественников.

Реакция преципитации в геле, РПГ (Gel precipitation test)

Встречный иммуноэлектрофорез, ВИЭФ (Counter immunoelectrophoresis),

Реакция связывания комплемента, РСК (Complement fixation test)

Реакция латекс-агглютинации, РЛА (Latex agglutination test)

Метод флюоресцирующих антител, МФА (Immunofluorescence)

Иммуноэлектронная микроскопия, ИЭМ (Immune electron microscopy)

III

Реакция обратной пассивной гемагглютинации, РНГА (Indirect hemagglutination test)

Радиоиммунный анализ, РИА (Radioimmunoassay)

Иммуноферментный анализ, ИФА (Enzyme immunoassay)

Почему ИФА и РИА более информативны в сравнении с предшественниками? Дело в том, что они способны выявлять IgM и IgG по отдельности, что позволяет делать определенные выводы о динамике инфекционного процесса или о состоянии реконвалесценции.

Качественные и количественные варианты ДНК-зондирования методом ПЦР имеют 100% точность и могут использоваться на самых ранних сроках после заражения. С помощью ПЦР выявляют персистирующие вирусы, которые находятся в клетке, продолжающей выполнять свои функции, а потому они с трудом обнаруживаются или не обнаруживаются другими методами.

Подобную диагностику можно проводить уже через 1–3 недели с момента предполагаемого заражения. Для такого тестирования используется венозная кровь (5–10 мл), которая берется натощак. Для получения ответа требуется один день.

НВsAg -качественный тест указывает лишь на наличие либо отсутствие заболевания. Очевидно, что отрицательный результат означает отсутствие заболевания, а положительный – наличие патологии. Последнее также может свидетельствовать о ранее перенесенном заболевании или носительстве. Любые сомнения подобного рода снимаются проведением количественного исследования на определение HBV-DNA методом ПЦР. Таблицы с трактовками маркеров острого и хронического гепатита B мы приводим ниже:

Читайте также: