Препараты для диагностики гриппа

Грипп — широко распространенное инфекционное заболевание, протекающее в острой форме с поражением дыхательных путей. Возбудителями являются микроорганизмы семейства ортомиксовирусов. По статистике, гриппом ежегодно заболевают свыше 27 миллионов человек, 5 миллионов заболевших переносят инфекцию тяжело.

Почему так часто возникают эпидемии гриппа, несмотря на массовую вакцинацию и профилактические меры? Ответ прост: вирусы склонны к антигенному полиморфизму. Эта особенность приводит к регулярному появлению новых штаммов, что делает невозможным создание единой вакцины. Сегодня в основе борьбы с болезнью — своевременная диагностика и лечение гриппа.

Как происходит заражение гриппом?

Источником инфекции в большинстве случаев является больной человек. Максимальное количество вирусных частиц выделяется в первые 5-6 дней болезни. Вероятность заболеть зависит от нескольких факторов:

состояния иммунной системы,
продолжительности контакта с вирусоносителем,
наличия других заболеваний — острых и хронических инфекций,
возраста — люди пожилого возраста более восприимчивы к болезни, чем молодые.

Механизм передачи гриппа — воздушно-капельный. Возбудитель проникает в организм с частицами мокроты и слюны, вдыхаемыми с воздухом. Реже инфицирование происходит контактно-бытовым путем через предметы общего пользования — игрушки или посуду.

Дольше всего вирусы гриппа сохраняют жизнеспособность при температуре 4 градуса Цельсия. Поэтому пик заболеваемости приходится на осенне-весенний период. Зимой и летом вероятность подхватить инфекцию существенно ниже.

Попадая в организм, возбудитель гриппа встраивается в здоровые клетки и повреждает их, заставляя производить новые вирусные частицы. Размножение патогенных микроорганизмов происходит с очень высокой скоростью. Всего нескольких часов достаточно для полного поражения дыхательных путей.

Как распознать болезнь?

Инкубационный период гриппа имеет разную продолжительность — от нескольких часов до 3 суток. Как правило, болезнь начинается остро и сопровождается симптомами интоксикации:

повышением температуры тела до 38-40 градусов,
ознобом,
болью в мышцах и суставах,
общей слабостью и высокой утомляемостью.

Катаральные явления развиваются позже. Иногда к насморку, кашлю, боли в горле и слезотечению присоединяются геморрагические симптомы — точечные кровоизлияния в слизистую ротоглотки и глаз, носовые кровотечения.

При первых признаках гриппа необходимо сразу обратиться к врачу, чтобы пройти диагностику и лечение. Не принимайте лекарственные препараты без рекомендации специалиста — это может спровоцировать осложнения.

Методы диагностики

Для подбора эффективного метода лечения гриппа требуется диагностика. Она включает:

осмотр слизистых оболочек и кожи,
аускультацию,
перкуссию легких,
пальпацию лимфоузлов,
определение антител к вирусу гриппа методом ИФА,
общий анализ крови — при инфицировании гриппом наблюдается повышение СОЭ, уровня лейкоцитов, моноцитов и лимфоцитов.

Главная цель диагностики — дифференцировать грипп с респираторно-синцитиальной, риновирусной и аденовирусной инфекцией. Это очень важно, поскольку методики лечения этих заболеваний отличаются друг от друга.

Принципы лечения гриппа

После диагностики назначают лечение гриппа. Главные принципы терапии — это:

борьба с возбудителями инфекции,
укрепление иммунитета и повышение защитных сил организма,
снятие симптоматики,
восстановление барьерной функции слизистой носоглотки.

Препараты для лечения гриппа врач назначает по результатам диагностики. Чаще всего в терапии используют лекарственные средства комбинированного действия, такие как Деринат. Он выполняет несколько задач:

способствует уничтожению вирусных частиц,
укрепляет естественную иммунную защиту,
восстанавливает целостность слизистой носоглотки, препятствуя присоединению вторичной инфекции и развитию осложнений.

Дополнительно назначают жаропонижающие и антигистаминные средства, витаминно-минеральные комплексы. Для уменьшения симптомов и нормализации самочувствия необходимо:

Своевременная диагностика и правильное лечение гриппа — залог успешного выздоровления. Следуйте советам специалиста, чтобы болезнь как можно скорее осталась в прошлом. Будьте здоровы!

Общая информация о гриппе

Грипп – это острое вирусное заболевание, вызываемое вирусами гриппа А и В. Вспышки и эпидемии гриппа наблюдаются ежегодно в осенне-зимний период. Считается, что от 15 до 42 процентов детей дошкольного и школьного возраста заражаются гриппом каждый год.

Механизм передачи - вирусы гриппа передаются от человека к человеку, главным образом, за счет дыхательных путей (при чихании, кашле, речи, прикосновении)

Пик концентрации вируса – 24-48 часов болезни, а затем она быстро снижается – через 5 до 10 дней вирус уже не обнаруживается в дыхательных путях.

Инкубационный период обычно длится одного до четырех дней (в среднем два дня) Инкубационный период гриппа 2009 H1N1 составляет примерно от 1,5 до 3 дней (максимум – до 7 дней)

Факторы риска - маленькие дети, дети с сопутствующими заболеваниями.

Классические симптомы неосложненного гриппа

Простуда (острая респираторная вирусная инфекция, ОРВИ) яв.

В случаях неосложненного гриппа лихорадка и недомогание могут быть единственным признаком гриппа в условиях сезона гриппа.

Основные симптомы гриппа у детей:

Лихорадка - 95 процентов (50 процентов были лихорадка> 39 º C)
Кашель - 77 процентов
Ринит - 78 процентов
Головная боль - 26 процентов (среди детей от 3 до 13 лет)
Боль в мышцах - 7 процентов (среди детей от 3 до 13 лет)

У детей старшего возраста и взрослых, грипп A (H3N2), как правило, связан с более тяжелым течением болезни.

Симптомы могут включать тахипноэ, конъюнктивит, инъекцию сосудов слизистой носа, шейный лимфаденит. Жалобы на боли в горле довольно редки.

Течение гриппа

Осложнения гриппа

Наиболее частыми осложнениями гриппа у детей являются отит (от 10 до 50% детей, развивается через 3-4 дня после начала гриппа) и пневмония, бронхит, бронхиолит, ларинготрахеит.

Грипп также может вызвать обострение хронического заболевания, особенно бронхиальной астмы

Правы ли были наши мамы и бабушки, когда в детстве закрывали.

Осложнения гриппа со стороны нервной системы:

асептический менингит, острая мозжечковая атаксия, поперечный миелит, синдром Гийена-Барре, острый некротический энцефалит, энцефалопатии, фебрильные судороги, острый психоз.

Миозит - острый миозит является редким и тяжелым осложнением гриппа. Отличительным признаком острого миозита является крайняя болезненность пораженных мышц, чаще всего в икрах. В тяжелых случаях можно отметить отек и пастозность мышц.

Бактериальные инфекции при гриппе:

Вторичная бактериальная инфекцией (пневмония или бактериемия), чаще всего вызваназолотистым стафилококком или пневмококком.

Другие осложнения - Другие осложнений гриппозной инфекции включают миокардит, перикардит, а также синдром токсического шока.

Диагностика гриппа

Во время сезона гриппа он должен быть заподозрен в следующих случаях:

Лихорадка у младенцев
Дети с лихорадкой и острым началом респираторных заболеваний (даже если эти симптомы развиваются во время госпитализации)
Дети с высокой температурой и обострением основного хронического заболевания легких
Дети с внебольничной пневмонией и высокой лихорадкой

Инфекции вируса гриппа также следует рассматривать в любое время года у детей с лихорадочным респираторным заболеванием. Грипп возможен в любое время года, но чаще выявляется во время вспышек и эпидемий.

Лабораторная диагностика - подтверждение диагноза грипп у детей требует выделения вируса или выявления вирусных белков или РНК вируса в дыхательных путей выделения или другие образцы (например, спинномозговой жидкости, мышечной или биопсия тканей и т.д.). В амбулаторных условиях лабораторная диагностика гриппа не всегда оправдана ввиду ее стоимости. Хорошим подспорьем здесь может быть использование экспресс-тестов.

Лечение гриппа

ВНИМАНИЕ! Не занимайтесь самолечением! Обсудите необходимость назначения препаратов с Вашим врачом!

Во время пика сезона гриппа, среди детей, обращающихся к пед.

1. Неспецифическое лечение

жаропонижающие при высокой температуре (парацетамол 15 мг/кг до 4 раз в сутки, нурофен 10 мг/кг до 4 раз в сутки)
обильное питье
физическое охлаждение (прохладные напитки, подтаявшее мороженое, прикладывание холода к крупным сосудам – в паховые складки и под мышки)

2. Противовирусные препараты - используется два класса антивирусных препаратов для профилактики и лечения гриппа у детей: ингибиторы нейраминидазы и препараты адамантана (ингибиторам М2). Ингибиторы нейраминидазы и препараты адамантана не должны быть использованы для лечения заболеваний, вызванных другими респираторными вирусами!

Ингибиторы нейраминидазы - осельтамивир , занамивир , laninamivir, и перамивир. Ингибиторы нейраминидазы препятствуют освобождению вирионов из клетки-хозяина . Ингибиторы нейраминидазы активны в отношении вирусов гриппа А (включая пандемию 2009-2010 штамм H1N1) и гриппа В.

Рекомендуемые дозировки для лечения

Грипп – это тяжёлое заболевание, которое необходимо лечить с момента проявления первых его симптомов. Грипп может иметь типичную симптоматику, на основе которой можно установить диагноз. В случаях, когда клиника гриппа атипическая, необходимо проводить лабораторные методы диагностики. Лечение гриппа проводится только узким спектром препаратов, остальная терапия – симптоматическая.

Лабораторная диагностика

Помимо того, что грипп имеет острое начало, высокую интоксикацию и катаральные явления, подтвердить грипп без лабораторных методов невозможно. Диагностировать грипп очень важно, поскольку это поможет подобрать нужный спектр препаратов и провести профилактические меры с контактирующими людьми.

В общем анализе крови для гриппа характерные такие изменения:

уменьшение количества лейкоцитов,
увеличение лимфоцитов,
ускоренное ШОЭ.

В случаях присоединения бактериальных осложнений в крови будет возрастать количество лейкоцитов за счет юных форм и нейтрофилов.

Для уточнения диагноза проводят вирусологические и серологические методики исследований. Материал для исследования больного гриппом необходимо брать на первых этапах заболевания. Транспортировать материал исключительно в охлажденном состоянии с температурой ниже ноля. Предметом изучения могут быть смывы из носоглотки, носа, конъюнктивы глаз и кровь. Иногда можно использовать мокроту.

ВАЖНО! Забор материала производят стерильным тампоном, который предварительно был увлажнен изотоническим раствором.

Существуют методики экспресс-диагностики, к которым относят иммунофлюресценцию. Смывы больного обрабатывают специальной сывороткой против гриппа, на которой есть специальные светящиеся элементы. При связывании антител с вирусом гриппа они начинают светиться в люминесцентном микроскопе. Это дорогостоящий анализ.

Подробней о причинах гриппа смотрите в этой статье.

Одним из быстрых методов диагностики гриппа является исследование, которое проводится при помощи специальных реагентов, находящихся в пластиковой ёмкости. У больного берут мазок из носа и смешивают его с реактивами в ёмкости. Если началась реакция, появляется специальный индикатор, свидетельствующий о наличии антигенов к вирусу гриппа. Такие экспресс-тесты можно провести самостоятельно, купив индикаторные полоски в аптеке.

Анализ крови для серологических исследований берут в 1-2 второй день и повторяют на 10-14 день. Метод считается не очень точным. Диагностически важным считается титр антител, увеличенный в 4 раза.

Дифференциальная диагностика

Дифференциальную диагностику гриппа проводить не сложно, когда есть эпидемия заболевания. В случаях, когда заболевание возникает в нетипичное время и редко, диагностика усложняется.

Сравнивать грипп необходимо с такими заболеваниями:

Ангина (острый тонзиллит). Температура тела и интоксикация одинаковая для двух заболеваний. При ангине симптоматика более выраженная, можно увидеть изменения в миндалинах. Также больному с ангиной сложно глотать и есть. При гриппе такого нет.
Орнитоз. При орнитозе поражаются верхние дыхательные пути, возникает повышение температуры тела, но интоксикация менее выражена, чем при гриппе. Также возникает увеличение печени и селезёнки. Предварительно обязателен контакт с птицами, например, голубями.
Корь. Корь так же, как и грипп начинается с катаральных явлений и повышения температуры. Но при кори в ранний период возникают пятна Филатова-Коплика (пятна на слизистой оболочке щёк). На 3-5 день кори, возникает сыпь с дальнейшим распространением на туловище и конечности. Подробней о кори у детей смотрите в этой статье.
Энтеровирусная инфекция (ЭИ). ЭИ, как и грипп начинается с катаральных явлений, но заболевание чаще возникает летом. При ЭИ возникают нарушения стула, может увеличиваться перистальтика кишечника, чаще возникают поражения мозга, сердца, плевры.

Также грипп чаще всего сравнивают с другими простудными заболеваниями такими как: парагрипп, аденовирусная инфекция, риновирусная. Подробней об аденовирусной инфекции смотрите в этой статье.

Лечение гриппа

Как показывает практика, пациенты с гриппом предпочитают домашнее лечение пребыванию в стационаре. Следует знать, что госпитализацию необходимо проводить людям, у которых грипп возникает на фоне хронических заболеваний почек, легких, сердца.

Лечение следует начинать с правильного режима и питания. Консервативное лечение следует назначать при быстром прогрессировании симптомов. Режим должен быть постельным, а диета состоять из молочно-растительных продуктов. Для питья используют большое количество кисловатой жидкости (чай с лимоном, морсы, компоты). Рекомендовано пить чаи из калины, малины, цветков сирени, липы, чабреца. Количество жидкости от 1,5 литра в день.

Раньше при начале гриппа назначали Ремантадин по 0.1 г 3 раза в день, в последующие дни по 0.1 г. 2 раза в день. Следует учитывать, что данный препарат имеет небольшую эффективность только при возникновении гриппа типа А. У большинства населения сформировалась к нему резистентность.

Другим методом лечения является применение противогриппозного иммуноглобулина по 3 мл внутримышечно.

Основным препаратом, который имеет наибольшую доказательную базу, является Тамифлю, или препараты, которые имеют сходный с ним эффект (Занамивир, Озельтамивир). Применение препаратов из данной группы позволяет достичь выздоровления, начиная со второго дня приёма.

Антибактериальную терапию назначают только в случаях присоединения бактериальных осложнений в виде пневмонии, отита, тонзиллита и т.д. Препаратами выбора являются защищенные пенициллины (аминопенициллины: Флемоксин, Амоксиклав), Цефалоспорины.

При повышении температуры тела, следует использовать Ибупрофен (по 200 мг 2 раза вдень) или Парацетамол (325 мг , разовая доза).

ВАЖНО! Аспирин для снижения температуры нельзя применять детям до 12 лет, поскольку это может привести к заболеванию печени или развитию синдрома Рея (недостаточность внутренних органов).

На протяжении всего лечения можно делать отвлекающую терапию, применять горячие ванночки для ног, растирания.

Тяжёлые формы гриппа лечат в стационаре. Вводят глюкокортикостероиды, проводят инфузионную терапию с форсированным диурезом, для быстрой фильтрации крови и вывода вируса из органзима.

Для профилактики гриппа проводят специальные вакцинации, подробней о них можно посмотреть в этой статье.

Современные препараты для лабораторной диагностики гриппа и ОРВИ

И. В. Амосова, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ НИИ гриппа МЗ РФ, “Научно-исследовательский институт гриппа” Минздрава России (ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ), ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”), Санкт-Петербург, Россия

На сегодняшний день грипп и другие острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) остаются серьезной медицинской и социальной проблемой, о чём свидетельствуют высокие показатели заболеваемости и смертности, особенно среди детей, пожилых людей и пациентов с хроническими заболеваниями. Для организации эффективных процессов лечения, профилактики и надзора за гриппом необходимо своевременное проведение лабораторной диагностики, позволяющей выявить возбудителя инфекции. Всемирная организации здравоохранения (ВОЗ) рекомендует использовать для идентификации возбудителей ОРВИ методы иммунофлуоресценции (ИФ) и реакции торможения гемагглютинации (РТГА) наряду с выделением вирусов в культуре клеток или полимеразной цепной реакцией (ПЦР)1.

ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ООО “ППДП”) организовано в 2013 году с целью обеспечения учреждений здравоохранения препаратами для диагностики вирусов гриппа А, В и других ОРВИ: вирусов парагриппа 1, 2 и 3 типов, РС-вируса

и аденовирусов. Основной учредитель Предприятия – ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России, выполняющий в качестве Федерального центра по гриппу одну из ключевых функций в системе надзора за заболеваемостью гриппом в России и являющийся признанным Национальным центром по гриппу ВОЗ в рамках глобального контроля этой инфекции.

В основе производства – научные разработки и многолетний опыт лаборатории биотехнологии диагностических препаратов НИИ гриппа, а также современные методы накопления, очистки и концентрации вирусов, иммунохроматографии, иммуноблоттинга, иммуноферментного и ИФ- анализа и методы гибридомной технологии, позволяющие создавать новые препараты моноклонального типа.

Предприятие выпускает и реализует следующие диагностические препараты:

Наименование препарата

Ед. изм.

Кол-во анализов

Назначение

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие гриппозные сухие (ИФ-Г):

грипп А (Н1N1)pdm 09

грипп В

анализов

Ранняя диагностика ОРВИ по выявлению антигенов: вирусов гриппа А или В; адено- или РС-вирусов; вирусов парагриппа 1, 2 или 3 типа, вирусов герпеса 1 или 2 типов в клетках цилиндрического эпителия носа от больных с симптомами ОРВИ; обнаружение вирусных антигенов в препаратах клеточных культур, инфицированных материалами от больных.

Материалом для исследования служат мазки из носа, взятые от больных ОРВИ, содержащие клетки цилиндрического эпителия слизистой оболочки глубоких отделов носовой полости.

Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновыйсухой (ИДФАГ)

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие парагриппозные сухие (ИФ-ПГ):

парагрипп 1 типа

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие

РС-вирусные сухие (ИФ-РС)

Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие герпетические сухие (ИФ-Герпес):

герпес 2 типа

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИГ):

грипп А (Н1N1)pdm09

грипп В (Викторианская линия)

грипп В (Ямагатская линия)

50
анализов

Диагностика гриппозной инфекции по выявлению прироста антител в сыворотках реконвалесцентов, оценка коллективного иммунитета, оценка иммуногенности гриппозных вакцин, научные исследования.

Диагностикумы парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие (ДИ-ПГ):

парагрипп 1 типa

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Наименование препарата

Ед. изм.

Кол-во анализов

Назначение

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СДГ):

грипп А(Н1N1)pdm 09

грипп В (Викторианская линия)

грипп В (Ямагатская линия)

50
анализов

Идентификация типов/ субтипов вирусов гриппа А и В, выделенных из материалов от больных, изучение антигенной структуры вирусного гемагглютинина, контроль специфичности штаммов вирусов гриппа.

Сыворотка диагностическая парагриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая (СД-ПГ):

парагрипп 1 типа

парагрипп 2 типа

парагрипп 3 типа

Иммуноферментная тест-система для определения антител класса IgG

к вирусу гриппа А (H1N1)pdm 09

к вирусу гриппа А (H3N2)

к вирусу гриппа B

к вирусу парагриппа 1 типа

к вирусу парагриппа 3 типа

набор

90
анализов

Определение антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРВИ по приросту уровня специфических антител (IgG).

Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятые в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.

Набор реагентов для культивирования клеток и выделения вирусов гриппа в культуре клеток

набор

Выделение вирусов гриппа, надзор и быстрая расшифровки эпидемий гриппа.

Флуоресцирующие иммуноглобулины обеспечивают быструю (в течение 1,5-2-х часов) возможность непосредственной детекции вирусных антигенов в клинических материалах или в клеточных культурах, инфицированных материалами от больных.

Препараты зарегистрированы в Росздравнадзоре и допущены к обращению на территории РФ

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие гриппозные сухие

РУ № ФСР 2009/05255 от 09.07.2009 г.

Иммуноглобулин диагностический флуоресцирующий аденовирусный антигексоновый сухой

РУ № ФСР 2008/03940 от 26.12.2008 г.

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие парагриппозные сухие

РУ № ФСР 2009/05254 от 09.07.2009 г.

Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие РС-вирусные сухие

РУ № ФСР 2009/05256 от 09.07.2009 г.

В лаборатории биотехнологии диагностических препаратов ФГБУ “НИИ гриппа” МЗ РФ разработаны и широко используются в практике здравоохранения Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие сухие, которые представляют собой коньюгат очищенных противовирусных антител с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ). Препараты имеют красящий титр не ниже 1:16, содержат консервант – мертиолат 1:10000, лиофилизированы, выпускаются во флаконах по 0,5 или 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5.В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Диагностикумы гриппозные/парагриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие

Гриппозные диагностикумы для реакции торможения гемагглютинации (РТГА) используют в качестве подтверждающего теста при поступлении больных в стационар на 6-10 сутки заболевания, когда другие тесты (ИФЛ, ПЦР, выделение вируса) оказываются уже мало чувствительными.

Диагностикумы предназначены для субтиповой серодиагностики гриппа (по 4-х кратному приросту титров антител в сыворотках реконвалесцентов); контроля популяционного иммунитета населения; оценки иммуногенности живых и инактивированных гриппозных вакцин.

Препараты готовятся по оригинальным технологиям из антигенно актуальных штаммов, в соответствии с рекомендациями ВОЗ, не содержат инфекционного вируса, включают наполнитель, препятствующий сорбции антигенов на полистироловых планшетах. 1 мл препарата достаточно для тестирования 100 сывороток микрометодом РТГА.

Диагностикумы выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие зарегистрированы в Росздравнадзоре и допущены к обращению на территории РФ

Диагностикумы гриппозные для реакции торможения гемагглютинации сухие РУ № ФСР 2009/05253 от 09.07.2009 г.

Специфические сыворотки для идентификации возбудителей ОРВИ

Высокоспецифичные диагностические сыворотки предназначены для идентификации вирусов гриппа А (субтипов H1, H2, H3, H5, Н7, H9) и В (обеих современных эволюционных ветвей), а также других возбудителей ОРВИ в ИФА, реакциях торможения гемагглютинации и микронейтрализации.

Сыворотки выпускаются в лиофилизированном виде, во флаконах по 1 мл. Флаконы упаковывают в коробки. Количество флаконов в коробке от 1 до 5. В коробку вкладывают Инструкцию по применению. Срок годности препаратов – 2 года.

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая зарегистрирована в Росздравнадзоре и допущена к обращению на территории РФ

Сыворотка диагностическая гриппозная для реакции торможения гемагглютинации сухая РУ № ФСР 2009/05257 от 09.07.2009 г.

Иммуноферментные тест-системы (ИФТС) для определения антител класса IgG к ОРВИ и гриппу

Современные методы иммунодиагностики с определением классов и субклассов IgG открывают новые возможности в исследовании структуры иммунитета и формирования иммунопатологических состояний.

Характерными особенностями разработанных ИФТС являются:

• высокая чувствительность анализа;

• возможность использования микроколичеств сывороток (0,5 – 1 мкл);

• снижение трудоемкости анализа за счет исключения операций титрования сывороток;

• возможность индикации класс-специфических противовирусных антител;

• сокращение сроков проведения анализов.

Иммуноферментные тест-системы представляет собой 13-компонентный набор, основными реагентами которого являются очищенные вирусные антигены, позитивные и негативные контрольные образцы сывороток, а также конъюгаты моноклональных антител к IgG человека.

Тест-системы предназначены для детекции антител классов IgG в сыворотках людей, переболевших вирусными ОРЗ, рассчитаны на проведение 96 анализов, включая контрольные пробы. Предназначены для серодиагностики инфекций по определению достоверного прироста уровня специфических IgG.

Материалом для исследования служат парные сыворотки крови от больных ОРВИ, взятыми в первые 5 дней болезни и через 14-30 суток от начала заболевания.

Парные сыворотки от одного больного исследуют одновременно, в одной постановке реакции. Постановку реакций осуществляют в соответствии с прилагаемыми Инструкциями по применению. Срок годности ИФТС – 6 месяцев.

Предприятие является единственным в России производителем препаратов для иммунодиагностики ОРВИ и полностью обеспечивает организации здравоохранениявсем необходимым для осуществления лабораторного надзора за гриппом и ОРВИ на территории России и стран СНГ. Штаммовый состав выпускаемых препаратов постоянно обновляется в соответствии с рекомендациями ВОЗ. Диагностические препараты, выпускаемые ООО “ППДП”, зарегистрированы в федеральной службе по надзору в сфере здравоохранения (Росздравнадзор).

ООО “ППДП” оказывает информационную поддержку и консультационные услуги по всему ассортименту своей продукции, а также принимает участие в организации и проведении конференций, семинаров, и других научно-практических мероприятий на базе ФГБУ “НИИ гриппа” Минздрава России.

ООО “Предприятие по производству диагностических препаратов” (ППДП)

197376, Санкт-Петербург, ул. профессора Попова, д. 15/17

Клиническая диагностика. Грипп диагностируют на основании внезапного начала с повышения температуры тела до высоких цифр, значительной интоксикации в виде лихорадки, адинамии, головной боли, миалгий, сухого кашля с болью за грудиной при слабо выраженных катаральных явлениях со стороны ротоглотки. Во время эпидемии гриппа в типичных случаях диагноз устанавливается без затруднения на основании клинико-эпидемиологических данных (возникновение массовых однотипных заболеваний в окружении больного).

Лабораторная диагностика состоит из клинических и специфических методов. Следует отметить, что в межэпидемический период диагноз гриппа должен быть подтвержден лабораторно (специфическими диагностическими тестами).

Специфические лабораторные диагностические методы предназначены для ранней (экстренной) или ретроспективной диагностики гриппа. По скорости получения результатов первоочередными методами являются следующие:

иммунофлюоресцентный метод (РИФ), с помощью которого в поле зрения люминесцентного микроскопа в клетках верхних дыхательных путей выявляют вирусные антигены после их взаимодействия со специфическими антителами, меченными флюорохромом; образование специфического комплекса антиген— антитело проявляется ярким красным свечением в поле зрения микроскопа;
выявление адсорбции груженных антителами эритроцитов поверхности клеток, пораженных вирусом (РНГ);
выявление агглютинации обработанных противовирусными антителами эритроцитов под действием вируса гриппа, который содержится в опытном материале в лунках панели микротитратора Такачи (РСНГА);
гемадсорбции (PIT), реакции связывания комплемента (РСК) и др.

Результат анализа описанных методик может быть получен уже через 3-5 часов с момента доставки материала в лабораторию.

К наиболее точным методам диагностики относится вирусологический метод — выделение вируса гриппа из секретов верхних дыхательных путей или из крови. Для этого метода материал от больного необходимо брать в ранние сроки болезни и доставлять в вирусологическую лабораторию в охлажденном состоянии (в термосе, заполненном льдом, или портативном холодильнике). Для выделения вируса гриппа чаще всего используют куриные эмбрионы, реже — культуру клеток и лабораторных животных. Индикацию выделенного вируса проводят с помощью РГА и реакции торможения

Но вирусологический метод является наиболее тяжелым и дорогостоящим и поэтому на практике применяется редко.

Из методов ретроспективной диагностики наибольшее распространение получили серологические методы. При этом диагностическим является нарастание титра антител в 4 и больше раз при исследовании парных сывороток крови, взятых в разгар заболевания и еще через 7-14 дней. В практическом здравоохранении чаще всего пользуются реакцией торможения гемагглютинации (РТГА), иногда РСК, редко — реакциями нейтрализации и радиального гемолиза.

Среди других рекомендованных для ретроспективной диагностики методов можно отметить реакцию непрямой гемагглютинации (РИГА), метод дифференцированного определения антител с помощью редуцирующих веществ, реакцию определения антител к нейраминидазе и другие (иммунодиффузные, иммуноэнзимные и радиоиммунные методы). Методы иммуноферментного анализа (ИФА) и молекулярной гибридизации (ММГ) пока еще не получили широкого распространения в практике. Серологическая диагностика гриппа обеспечивает точное определение этиологии вируса путем выявления в крови увеличения количества специфических антител в динамике заболевания; она особенно незаменима при атипичном или бессимптомном течении гриппозной инфекции.

Дифференциальная диагностика

Диагноз гриппа во время эпидемии не вызывает особенных трудностей. Намного тяжелее установить диагноз во внеэпидемический период, у больных с легкими формами заболевания, при поздней госпитализации в стационар, при микст-инфекциях с поражением респираторного тракта. Количество диагностических ошибок увеличивается после периода относительного эпидемиологического благополучия в связи с уменьшением настороженности относительно гриппа. Особенно опасны случаи гиподиагностики в связи с быстрым распространением заболевания и тяжелыми исходами. Распознавание гриппа представляет бесспорную сложность, потому что его симптомы подобны симптомам многих заболеваний. Дифференциальную диагностику необходимо проводить с целым рядом инфекционных болезней вирусной и бактериальной этиологии. Осуществить это возможно при использовании экспресс-методов лабораторных исследований, а также зная типичную клиническую симптоматику, свойственную каждой этиологической форме заболевания.

Острые респираторные вирусные инфекции (табл. 1).

Таблица 1. Дифференциально-диагностические признаки гриппа и других острых респираторных инфекций

Герпетическая инфекция. Она является наиболее сложной для дифференциальной диагностики с гриппом. Для так называемой герпетической лихорадки свойственные острое начало, выраженная температурная реакция с высокими цифрами, озноб, головная боль, тошнота, возможная рвота, снижение аппетита. Обращает на себя внимание сухость и гиперемия слизистых оболочек ротоглотки. Высыпания, типичные для герпетической инфекции, не всегда наблюдаются в первые дни заболевания. Появление их возможно на 3-7-й день от начала лихорадочного периода. Катаральные явления мизерные, возможны конъюнктивиты, но чаще кератоконъюнктивиты. Течение заболевания, как правило, длительное. С целью диагностики используют ИФА, ПЦР.

Тяжелый острый респираторный синдром (ТОРС). Новое заболевание, которое имеет много общих симптомов и ряд общих свойств с гриппом не только во время возникновения, но и в месте появления вирусов с повышенной вирулентностью.

Вирус ТОРС попал в человеческую популяцию от диких кошек (виверр). Передается не только при близком контакте с больным через зараженную мокроту, но и воздушно-капельным и даже водным путем. Инкубационный период колеблется от 2 до 10 дней.

Основные симптомы ТОРС: высокая температура (выше 38°С), озноб, головная и мышечно-суставная боль, першение в горле, частый сухой непродуктивный кашель, общая слабость, снижение аппетита, тошнота, иногда неинтенсивная рвота, редко — высыпания на коже. Через 3-7 дней наступает поражение нижних отделов респираторного тракта, которое усиливает сухой кашель, вызывает затруднение дыхания, одышку. Аускультативно в легких наблюдаются ослабленное дыхание, крепитация или мелкопузырчатые хрипы. Новая болезнь приводит к тяжелому отеку легких, часто с летальным исходом. При рентгенологическом обследовании в начале заболевания выявляется диффузное затемнение легочной ткани или локальные, ограниченные участки затемнения в сегментах, а также очаговые инфильтраты. На ранних стадиях болезни в периферической крови наблюдается лимфопения, нормо- или лейкоцитопения. Дальше наблюдаются повышения уровней креатинфосфокиназы, лактат-дегидрогеназы, активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы. В настоящее время разработан ИФА-тест, с помощью которого можно очень быстро уточнить диагноз.

Коронавирусная инфекция. Основным отличием этой инфекции является наличие у подавляющего большинства больных симптомов поражения желудочно-кишечного тракта, которые наблюдаются с первых часов заболевания и нередко предшествуют катаральным проявлениям. Наряду со слизисто-серозным ринитом достаточно часто наблюдается воспаление слизистой гортани и увеличение шейных лимфатических узлов. Коронавирусы, как и аденовирусы, являются частыми возбудителями внутрибольничных инфекций. Наиболее распространенным методом выявления возбудителя является метод флюоресцирующих антител. Материалом является слизь ротоглотки и носа. Серологическая диагностика используется для ретроспективной расшифровки этиологии и проводится на основании повышения титров антител в РСК, РНГА.

Микоплазменная инфекция. Респираторный микоплазмоз чаще протекает по типу ОРЗ и пневмонии. Для первого характерно постепенное начало с умеренной и более длительной температурной реакцией, маловыраженнои интоксикацией, ринитом, сухим навязчивым кашлем длительностью до 10-15 дней. При осмотре обращает на себя внимание легкая гиперемия лица, конъюнктивит. Для микоплазменной пневмонии характерны более длительный инкубационный период (15-40 дней), потом острое начало с симптомами выраженной интоксикации (головная боль, анорексия, вялость, повторная рвота, мышечная боль). После высокой температуры тела, до 39-40°С в течение 7-12 дней (то есть более длительной, чем при гриппе) устанавливается длительный субфебрилитет (иногда до месяца). В отличие от гриппа — выраженная гиперемия дужек, язычка и задней стенки глотки, которая напоминает гиперемию ротоглотки при катаральной ангине. Кашель сухой, надсадный, коклюшеподобный, длительностью до 2-4 недель. Физикальные данные в большинстве случаев малоинформативные, лишь рентгенография легких позволяет распознать пневмонию. Используется специфическая идентификация микоплазм методом ИФА и ПЦР.

Легионеллез. Острая респираторная болезнь (лихорадка Понтиак) — клиническая форма болезни легионеров, по своим проявлениям подобна гриппу. Начинается остро с озноба, лихорадки, головной боли и боли в мышцах, нарастающей слабости. Больные жалуются на сухой кашель, насморк, сухость и боль в горле, ощущение сдавливания и умеренную боль за грудиной. Возникают неврологические изменения, иногда возможна боль в животе, рвота и понос. При исследовании крови выявляется нейтрофильный лейкоцитоз, сдвиг лейкоцитарной формулы влево, лимфопения, тромбоцитопения, резкое увеличение СОЭ. Характерны эпидемиологические особенности: возникает в летне-осенний период, основным фактором передачи является водный аэрозоль, который образуется при функционировании различных систем бытового, промышленного, лабораторного и медицинского назначения. Решающее значение имеют данные серологического (РНИФ) и микробиологического исследования.

Сибирская язва. Заболевание начинается остро с озноба, повышения температуры тела до 40°С, общей слабости, конъюнктивита (слезотечение, светобоязнь, гиперемия конъюнктивы), катаральных явлений со стороны верхних дыхательных путей (чихание, насморк, хриплый голос, кашель). Состояние больных с первых часов тяжелое, отмечаются сильные боли в груди, одышка, цианоз, тахикардия, артериальное давление снижено, профузный пот. Мокрота имеет примесь крови вязкой консистенции. Физикально и рентгенологически определяются признаки пневмонии, плеврита. Диагноз подтверждается эпидемиологическими и клиническими данными, лабораторной идентификацией палочки сибирской язвы.

Бруцеллез. Многообразие клинических проявлений заболевания создает трудности при определении диагноза и обусловливает необходимость дифференциальной диагностики инфекции с большим количеством заболеваний, в том числе и с гриппом. Острая форма бруцеллеза характеризуется высокой лихорадкой (39-40°С и выше), температурная кривая имеет тенденцию к волнообразному течению, нередко неправильного (септического) типа с большими суточными колебаниями, повторными ознобами, которые сменяются повышенной потливостью. Несмотря на высокую температуру тела, самочувствие больного остается удовлетворительным. Отсутствуют и другие признаки общей интоксикации. Из других клинических проявлений острой формы бруцеллеза стоит отметить генерализованную лимфаденопатию. При исследовании периферической крови отмечается лейкопения, СОЭ не повышена, учитываются данные эпидемиологического анамнеза.

В отдельных случаях возникает необходимость проводить дифференциальную диагностику гриппа с заболеваниями тифо-паратифозной группы и малярией в разгар заболевания, гепатитом А в преджелтушном периоде, бактериальными и вирусными менингитами и другими инфекционными заболеваниями, которые сопровождаются повышением температуры тела, симптомами интоксикации и катаральным синдромом.

Читайте также: