| Приоритеты: |
Группа изобретений относится к области ветеринарной вирусологии. Сыворотка содержит антитела в титрах: к ротавирусу, вирусу диареи - болезни слизистых - не ниже 1:1600 (в ИФА), вирусу инфекционного ринотрахеита - не ниже 1:16 (в РН), коронавирусу и вирусу парагриппа-3 не ниже 1:512 (в РТГА). Сыворотка получена гипериммунизацией волов-продуцентов поливалентным вирусным антигеном, содержащим смесь культуральных вирусных суспензий ротавируса крупного рогатого скота с титром 7,0-8,0 lg ТЦД 50/мл, коронавируса крупного рогатого скота с титром 6,0-7,0 lg ТЦД 50/мл, вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота с титром 7,5-8,0 lg ТЦД 50/мл, вируса парагриппа-3 с титром 7,5-8 lg ТЦД 50/мл, вируса диареи - болезни слизистых с титром 4,5-9,5 lg ТЦД 50/мл. С профилактической целью теленку вводят сыворотку не позднее 2-3 часов после рождения и повторно через 24 часа, подкожно в несколько точек из расчета 1,0 см 3 на 1 кг массы животного. В случае появления симптомов заболевания теленку вводят сыворотку в лечебных дозах 1,5 см 3 на 1 кг массы, в сочетании с антибиотиками подкожно в несколько точек 1 раз в сутки 2-3 дня подряд. Группа изобретений обеспечивает надежный пассивный иммунитет в предельно короткие сроки и сокращает число прививок. 2 н.п. ф-лы.
Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, в частности к изготовлению специфической гипериммунной сыворотки против болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых, и предназначено для специфической иммунизации и пассивной профилактики смешанных форм инфекционных энтеритов и энтероколитов новорожденных телят.
В структуре заболеваемости новорожденных телят желудочно-кишечные болезни вирусной этиологии, клинически проявляющиеся диареей, занимают особое место и являются одной из основных причин гибели молодняка.
Эта группа болезней наносит хозяйствам огромный экономический ущерб, складывающийся из высокой смертности заболевших, больших затрат на лечение больных, снижения привесов и проведения общих и специфических мероприятий.
Без эффективной защиты новорожденных животных от возбудителей инфекционных болезней не представляется возможным получение здорового молодняка и биологически полноценной животноводческой продукции.
Имеющиеся в специальной литературе данные последних лет и накопленные знания и опыт свидетельствуют о том, что массовые энтериты и энтероколиты новорожденных телят с клиническими признаками диареи обуславливаются различными этиологическими факторами: если в основе возникновения незаразных болезней лежат функциональные расстройства желудочно-кишечного тракта новорожденных, тесно связные с нарушениями обмена веществ у коров-матерей вследствие неполноценного кормления и нарушения правил содержания, то при инфекционной диарее огромная роль принадлежит рота-, корона-, герпесвирусам (вирусу инфекционного ринотрахеита и т.д.), в меньшей степени - паравирусу и вирусу диареи - болезни слизистых крупного рогатого скота и т.д.
Инфекционный процесс усугубляется тем, что эти возбудители действуют на беззащитный организм новорожденного в комбинации друг с другом (вирус + вирус, вирус + бактерии и т.д.), вызывая смешанную инфекцию, приводящую к более тяжелому заболеванию часто с летальным исходом.
Диарея новорожденных телят смешанной этиологии характеризуется стационарностью, тяжелой и затяжной формой течения. Новорожденные телята заражаются в инфицированных родильных отделениях в первые минуты жизни с первым вдохом контаминированного воздуха и первым глотком инфицированного молока, и затем в течение 2-5 дней наступает их гибель на фоне прогрессивно развивающихся необратимых патологических изменений.
Возникновение и развитие инфекционного процесса обусловлены высокой концентрацией поголовья скота, латентным персистированием возбудителей в организме коров и нетелей, но вызывающих острое заболевание у новорожденных телят.
Наиболее распространенным и эффективным способом защиты новорожденных телят от возбудителей, участвующих в патогенезе смешанной инфекции, является повышение специфической резистентности их организма путем спаивания молозива от вакцинированных коров-матерей.
Разработки последних лет во многих странах мира, в том числе и в Российской Федерации, позволили создать моно-, бивалентные и ассоциированные вакцины, обуславливающие эффект невосприимчивости у телят к энтеритам. Антитела, полученные с молозивом коров, обеспечивают защиту телят от заболеваний до тех пор, пока у них не разовьются собственные механизмы иммунитета. По различным причинам некоторые телята после рождения не получают в необходимом количестве эту естественную защиту, что связано с недостаточным поступлением иммуноглобулинов с молозивом матери и недостаточным получением молозива в первые часы после рождения или нарушением механизма абсорбции иммуноглобулинов молозива кишечником новорожденных животных.
Следовательно, только антитела, введенные телятам перорально, предохраняют их от заболевания, обеспечивают полную защиту от развития клинически выраженного заболевания и прекращения экскреции вирусов и бактерий.
С учетом этого положения, с целью специфической пассивной профилактики и лечения в различных странах практикуется перорально введение гипериммунных сывороток или иммуноглобулинов, полученных от гипериммунизированных животных-продуцентов, гамма-глобулина, выделенного из молозива первого сдаивания или из сыворотки крови крупного рогатого скота.
Однако эти биопрепараты не позволяют получить лечебно-профилактический эффект при смешанных формах инфекционных диарей новорожденных телят.
Как правило, в 75-85% случаев имеют место сочетанные инфекции, а моносыворотка не обладает специфической активностью в отношении рота-, корона-, герпесвирусов - основных возбудителей этой патологии.
Известна также полиспецифическая гипериммунная сыворотка против рота-, корона-, герпесвирусов и Е. coli (K-99, А 20) для локальной защиты и иммунотерапии смешанных форм диареи новорожденных телят.
Сыворотка содержит антитела в титрах: к ротавирусу - не менее 1:3200 (в ИФА), к коронавирусу - не менее 1:512 (в РНГА), к герпесвирусу - 1:512 (в РН), к эшерихиям, имеющим адгезины К 99 и А 20 - не менее 1:1600 (в РА), к термостабильному энтеротоксину Е. coli - не менее 1:4 (в РДП).
Полученная гипериммуннизацией волов-продуцентов поливалентным вирусным антигеном, содержащим смесь культуральных вирусных суспензий, и инактивированными антигенами Е. coli, содержащими соматические, адгезивные (K-99, А 20) антигены в физиологическом растворе, анатоксины в среде культивирования (бульон Хоттингера) при следующем соотношении их компонентов в двух различных иммуногенах (об.%):
1. Культуральные вирусные суспензии для внутривенной иммунизации:
2. Эшерихиозные антигены для подкожной иммунизации:
Для изготовления вирусных антигенов с целью гипериммунизации волов-продуцентов проводят раздельное размножение и выращивание вирусов, а полученные рота-, корона- и герпесвирусные суспензии, содержащие не менее 30-35 мг/мл специфического белка, объединяют в равных соотношениях и используют для гипериммунизации волов-продуцентов.
Способ получения эшерихиозных антигенов заключается в следующем: получают анатоксин и соматические адгезивные антигены, которые затем смешивают в равных объемных соотношениях и используют для гипериммунизации животных.
Для гипериммунизации используют полиантигены, состоящие из рота-, корона-, герпесвирусов и эшерихий коли, содержащих адгезивные антигены К 99 и К 20.
Смесь антигенов рота-, корона-, герпесвирусов вводят внутривенно четырехкратно в нарастающих дозах. Для десенсибилизации организма иммунизируемых животных за 1-1,5 ч до внутривенного введения, им подкожно инъецируют смесь вирусных антигенов в десятикратно меньшей дозе.
Эшерихиозный антиген вводят подкожно в область шеи в первый раз с неполным адъювантом Фрейнда, в последующем - без адъюванта. Пробное взятие крови проводят из яремной вены на 20-й день после последнего введения антигенов. Полученную сыворотку от каждого продуцента с помощью серологических реакций исследуют на наличие антител. Продуцентам, в сыворотке которых титры антител низкие, антиген вводят повторно в дозах согласно последнему введению, а взятие крови не производят.
Производственное крововзятие разрешается при наличии антител в сыворотке крови продуцентов к ротовирусу не ниже 1:3200 в ИФА; коронавирусу - не ниже 1:512 а РТГА; герпесвирусу - не ниже 1:256 в РН; эшерихиям - не ниже 1:1600 в РА и при условии, что температура у животных не должна превышать 39,5°С, а также после предварительной выдержки их на голодной диете в течение 12 ч при неограниченном водопое. На 20-й день после взятия крови продуцентам вводят полиантиген в дозах согласно последнему введению.
Оценку эффективности полиспецифической гипериммунной сыворотки проводят в остром опыте на новорожденных телятах.
С лечебной целью сыворотку применяют больным телятам внутривенно при выраженной интоксикации в дозе 60-80 см 3 , при слабой - в дозе 40-60 см 3 . При необходимости сыворотку вводят повторно через 24 часа подкожно в дозе 50 см 3 .
С профилактической целью сыворотку вводят перорально в дозе 60-80 мл на прием до первой порции молозива (первые 1-1,5 ч жизни теленка) и повторное введение не позднее 24-30 ч после первого в той же дозе (2). (Прототип.)
Известна ассоциированная вакцина против ротавируса, коронавируса телят и вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота, в которой были использованы следующие штаммы вирусов: штамм РМ (ротавирус) штамм 2-КЛ-2 (коронавирус), и штамм ВК-В1 № 36 (вирус диареи - болезни слизистых). Все штаммы вирусов были изолированы от неблагополучных хозяйств. Российской Федерации и адаптированы к репродукции в различных клеточных культурах (3).
В задачу исследований входило - разработать технологию производства полиспецифической гипериммунной сыворотки против болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота-, корона- и диареи - болезни слизистых, обеспечивающей пассивный иммунитет в предельно короткие сроки, и экстренное лечение при развивающейся болезни, а также сокращение числа прививок при гипериммунизации и лечении.
Это удалось достичь благодаря тому, что гипериммунизацию волов-продуцентов проводят культуральной суспензией следующего состава при введении быкам:
Сыворотка содержит готовые антитела против вирусов инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых и обладает профилактическим эффектом и лечебным действием, создает пассивный иммунитет, который сохраняется до трех месяцев.
Сыворотку получают из крови волов (телят на откорме или оленей), которых гипериммунизируют коммерческими вакцинами против инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и вируса диареи - болезни слизистых.
Биопредприятия, изготавливающие сыворотку, используют слудующие коммерческие вакцины:
1. Вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и вирусной диареи - болезни слизистых КРС эмульсионная инактивированная производства ФГУ ВНИИЗЖ.
2. Вакцина против рота-, коронавирусной инфекций и вирусной диареи - болезни слизистых КРС эмульсионная инактивированная производства ВНИИЗЖ.
В качестве продуцентов используют здоровых, имеющих удовлетворительную упитанность волов (телят на откорме или северных оленей) 2-5-летнего возраста, массой не ниже 300-400 кг.
Все вновь поступающие животные подлежат карантинированию и обследованию на инфекционные заболевания, согласно действующей инструкции о порядке подготовки и санитарной обработки животных, используемых для изготовления биопрепаратов.
Кормление волов-продуцентов должно быть сбалансировано по основным показателям.
После окончания карантинного периода (30 дней), если животное отвечает требованиям, приступают к гипериммунизации согласно разработанной схеме.
В процессе эксплуатации особое внимание уделяют состоянию здоровья продуцентов. Ежедневно проводят клинический осмотр с измерением температуры тела животных.
Пробное крововзятие проводят из яремной вены в стерильные пробирки. Полученную сыворотку от каждого продуцента с помощью серологических реакций исследуют на наличие антител к вирусу ИРТ - в РН, ротавирусу и вирусу диареи - болезни слизистых в ИФА, к коронавирусу и вирусу ПГ-3 в РТГА.
Производственное крововзятие разрешается при наличии антител в сыворотке крови продуцентов к ротавирусу и вирусу диареи - болезни слизистых в ИФА не ниже 1:1600, вирусу ИРТ в РН не ниже 1:16, а к коронавирусу и вирусу ПГ-3 в РТГА - не ниже 1:512.
Температура тела животных при производственном крововзятии не должна превышать 39,5°С. Животных надо выдержать предварительно на голодной диете в течение 12 часов при неограниченном водопое.
Продуцентам, в сыворотке крови которых титры антител ниже указанных, взятие крови не производят.
Первое крововзятие от продуцентов по объему не должно превышать 0,6 л крови на 100 кг массы животного, а в последующие 1,6 л на 100 кг массы.
Ежегодно делают месячный перерыв в эксплуатации животных. На 30-й день отдыха продуцентам вводят полиантиген в дозах согласно последующему введению.
Продуцентов эксплуатируют в течение 3-5 лет, после чего их реализуют в установленном порядке.
Обработка крови и получение сыворотки.
Для предохранения крови от свертывания применяют антикоагулянт - 10%-ный раствор лимоннокислого натрия (С 6 Н 5 Na 3 O 7 ·5H 2 O, м.в. 348,17), который готовят на 5-7%-ном растворе хлористого натрия и стерилизуют атоклавированием.
Для отделения форменных элементов крови полученную центрифугированную кровь подвергают сепарированию (сепаратор марки АС-2Ж). На начальном этапе сепарирования (в течение 10-15 минут) форменные элементы крови не полностью отделяются от плазмы, и ее первая порция вытекает из сепаратора с эритроцитами. Такую плазму собирают отдельно и сепарируют повторно.
Полученную плазму дефибринируют в стерильном реакторе, добавляя в нее 30%-ный раствор хлористого кальция из расчета 1,3 см 3 на 1 л плазмы.
Сыворотку консервируют 5%-ным раствором х.ч. фенола до конечной концентрации 0,5% и при помощи вакуумного насоса перекачивают в стерильные емкости, где выдерживают 2 месяца при 4-10°С.
После отстоя сыворотку фильтруют и стерилизуют через пластины с расчетом нагрузки 5 л на 1 пластину.
Каждая серия сыворотки должна на предприятии-изготовителе пройти контроль согласно действующему ТУ (или СТО).
Определяют внешний вид по цвету, наличие примесей, плесени и т.д.
Определение стерильности проводят по ГОСТ 28065.
Для проверки на безвредность смесь проб сывороток из 5 флаконов вводят подкожно в объеме 5,0 см 3 5 морским свинкам. В течение 10 суток наблюдения животные должны оставаться здоровыми.
Активность полиспецифической сыворотки с антигенами ротавируса и вируса диареи - болезни слизистых определяют в ИФА, вируса ИНР - в РН, а против коронавируса и вируса ПГ-3 - в реакции торможения гемагглютинации (РТГА).
На каждый флакон с сывороткой наклеивают этикетки с указанием: предприятия-изготовителя, его товарного знака, наименование сыворотки, количества ее во флаконе, номера серии и контроля, даты изготовления, срока годности, условий хранения и обозначения ТУ (СТО).
Предложенную сыворотку применяют для лечения и специфической профилактики острых желудочно-кишечных и респираторных заболеваний телят (с момента рождения и до 9-месячного возраста), вызываемых вирусами парагриппа, инфекционного ринотрахеита, диареи - болезни слизистых, ротавируса и коронавируса крупного рогатого скота.
Для профилактики желудочно-кишечных и респираторных заболеваний теленку применяют сыворотку не позднее 2-3 часов после рождения и повторно через 24 часа. Сыворотку вводят подкожно в несколько точек из расчета 1,0 см 3 на 1 кг массы животного.
В случае появления симптомов заболевания органов пищеварения или дыхания теленку вводят сыворотку в лечебной дозе (1,5 см 3 на 1 кг массы) в сочетании с антибиотиками подкожно в несколько точек один раз в сутки 2-3 дня подряд.
Противопоказаний к применению сыворотки нет.
Сыворотка апробирована с положительным результатом в 20 областях Российской Федерации с 2002 по 2010 гг.
Сыворотка найдет широкое применение во всех областях Российской Федерации в животноводческих хозяйствах для профилактики и лечения желудочно-кишечных и респираторных заболеваний, вызываемых рота-, коронавирусами, вирусом диареи - болезни слизистых, вирусами ПГ-3 и ИРТ. Препарат позволит резко снизить вышеперечисленные заболевания и тем самым сохранить здоровье молодняка и получить благополучное маточное поголовье.
1. Патент RU № 2043772, А61К, 39/42; А61К 39/40, 1995 г.
2. Патент RU № 2145504, А61К 39/42, А61К 39/40, 1999 г.
3. Диссертация на соискание ученой степени кандидата вет. наук Беловой Н.Б. Антигенные и протективные свойства ассоциированной вакцины против ротавирусного, коронавирусного энтеритов телят и вирусной диареи - болезни слизистых оболочек крупного рогатого скота. М., 2005, стр.40-45.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Сыворотка против болезней крупного рогатого скота, вызываемых вирусами инфекционного ринотрахеита (ИРТ), парагриппа (ПГ-3), рота, корона и диареи - болезни слизистых, полиспецифическая гипериммунная, отличающаяся тем, что она содержит антитела в титрах: к ротавирусу, вирусу диареи - болезни слизистых - не ниже 1:1600 (в ИФА), вирусу ИРТ - не ниже 1:16 (в РН), коронавирусу и вирусу ПГ-З не ниже 1:512 (в РТГА), полученная гипериммунизацией волов-продуцентов поливалентным вирусным антигеном, содержащим смесь культуральных вирусных суспензий ротавируса крупного рогатого скота с титром 7,0-8,0 lg ТЦД 50/мл, коронавируса крупного рогатого скота с титром 6,0-7,0 lg ТЦД 50/мл, вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота с титром 7,5-8,0 lg ТЦД 50/мл, вируса ПГ-З с титром 7,5-8 lg ТЦД 50/мл, вируса диареи - болезни слизистых - с титром 4,5-9,5 lg ТЦД 50/мл.
2. Способ профилактики и лечения болезней крупного рогатого скота, вызванных вирусом инфекционного ринотрахеита, парагриппа, рота, корона и диареи - болезни слизистых, отличающийся тем, что для профилактики желудочно-кишечных и респираторных заболеваний теленку вводят сыворотку, охарактеризованную по п.1, не позднее 2-3 ч после рождения и повторно через 24 ч, подкожно в несколько точек из расчета 1,0 см 3 на 1 кг массы животного, а в случае появления симптомов заболевания теленку вводят сыворотку в лечебных дозах 1,5 см 3 на 1 кг массы в сочетании с антибиотиками подкожно в несколько точек 1 раз в сутки 2-3 дня подряд.
ВИРУСНАЯ ДИАРЕЯ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Вирусная диарея (лат. — Diarhea viralis bovum; англ. — Viral diarhea; вирусная диарея — болезнь слизистых) — остро протекающая контагиозная болезнь преимущественно телят, характеризующаяся лихорадкой, эрозийно-язвенным поражением слизистых оболочек ротовой полости, пищевода и пищеварительного тракта, профузной с примесью крови диареей, слизисто-гнойными истечениями из носовых отверстий, сильным слюноотделением, конъюнктивитом, а у стельных коров — абортами (см. цв. вклейку).
Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. Вирусная диарея — болезнь слизистых (ВД — ВС) крупного рогатого скота, впервые обнаружена в США П. Олофсоном и Фоксом в 1946 г. Болезнь получила широкое распространение во многих странах мира. В бывшем СССР впервые установлена Бучневым и сотр. в 1965 г.
Болезнь наносит значительный экономический ущерб. В зависимости от формы инфекции и процента зараженных животных конкретные потери оцениваются в 20. 57 млн долл. США на 1 млн телят.
Возбудитель болезни. Возбудитель — мелкий (величиной 40 нм), округлой формы РНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Togaviridae, роду Pestivirus.
Вирус ВД крупного рогатого скота может быть выделен из крови и кала больных животных в период острого течения болезни. Он не обладает строгим тропизмом к какой-либо ткани. В высоких концентрациях вирус обнаруживают на слизистых оболочках верхних дыхательных путей, кишечника; в меньших — в среднем и нижнем отделах респираторного тракта; в низких — в печени, селезенке, почках.
Возбудитель репродуцируется в культурах клеток, вызывая их дегенерацию. Культивировать его удается также на куриных эмбрионах. Штаммы вируса различаются по патогенности, вирулентности и цитопатоген-ному действию, но идентичны в антигеном отношении. Культуральные штаммы вируса при длительном пассировании снижают или полностью утрачивают вирулентность, сохраняя иммуногенность. Отмечается антигенная общность вируса диареи крупного рогатого скота и вируса чумы свиней.
Возбудитель инактивируется при 37 °С в течение 5 сут, 56 °С — в течение 35 мин, быстро теряет жизнеспособность при рН 3,0. Находясь в цитрированной крови, лимфатических узлах, селезенке при температуре —4 "С, он остается активным 6 мес, в лимфатических узлах при температуре —20 "С — не менее 1 мес, при —40 "С сохраняется годами, к тому же выдерживает пятикратное замораживание и оттаивание. В культуральной жидкости при —15 "С активен до 1 года.
Эпизоотология. Вирусной диареей болеет в основном крупный рогатый скот, а также олени, косули, овцы, свиньи. Основной источник возбудителя инфекции — больные животные, выделяющие вирус во внешнюю среду со слюной, слезой, мочой и фекалиями, со спермой (быки). У телят вирус выделяется из носовой полости в течение 10 дней. Большую опасность представляет скот с хроническим течением и латентной формой болезни. Вирусоносительство может быть продолжительным. Возбудитель выделяют из паренхиматозных органов переболевших животных до 200 дней, из респираторного тракта — до 56 дней, лимфатических узлов — до 39 дней, из крови — в течение 4 мес.
Вирус диареи может персистировать среди овец, коз, свиней и некоторых животных диких видов, что способствует созданию резервуара возбу-
329дителя инфекции в природе. Заражение возможно путем прямого и опосредованного контакта. Возбудитель болезни передается с кормом и питьевой водой. Люди, обслуживающие животных, могут распространять болезнь. Возможна передача вируса коровам при естественном и искусственном осеменении, а также интраплацентарно, что вызывает патологию воспроизводства.
Наибольшая заболеваемость животных регистрируется осенью, зимой и весной, но спорадические случаи и сравнительно небольшие вспышки наблюдаются и летом. В основном восприимчив молодняк крупного рогатого скота до 2 лет, но чаще болеют телята до 5-месячного возраста. Болезнь поражает от 10 до 100 % животных в стаде. Летальность составляет 10. 90 %.
Возникновению болезни способствуют снижающие резистентность факторы: антисанитария, плохие погодно-климатические условия, неполноценное и недостаточное кормление (особенно при бедности рационов минеральными веществами и витаминами), отсутствие выгула.
Патогенез. Из места внедрения вирус быстро попадает в кровь и разносится по всему организму. Примерно через 2. 4сут возбудитель локализуется на слизистой оболочке ротовой полости, пищевода, желудочно-кишечного тракта, коже межкопытной щели, в жидкостях глаза, обусловливая соответствующие поражения.
Вирус характеризуется весьма коварным механизмом воздействия на иммунную систему организма. Это действие обусловлено выраженной способностью возбудителя к репликации в лимфоидной ткани, вследствие чего происходит угнетение специфических и неспецифических защитных реакций животного (иммунодепрессия).
Проникая в лейкоциты, вирус разрушает их, в результате развивается острое заболевание, заканчивающееся гибелью, что связано с неспособностью животных продуцировать защитные вируснейтрализующие антитела. Инфицированные лимфоциты могут стать им-мунологически неполноценными, что позволяет вирусу сохраняться в других чувствительных клетках в течение жизни животного. Такие животные, не имея вируснейтрализующих антител и оставаясь клинически здоровыми, могут выделять патогенный для неиммунного скота возбудитель вирусной диареи.
Возбудитель диареи крупного рогатого скота проникает через плацентарный барьер, что приводит к широкому распространению скрытой инфекции среди новорожденных телят, может вызывать поражения центральной нервной системы при инфицировании плодов на критической стадии развития.
Диарея приводит к обезвоживанию организма и, как следствие этого, нарушению водно-солевого обмена, резкому и быстрому истощению, расстройству кровообращения, усилению токсикоза.
Заражение в период до 90 дней стельности в большинстве случаев сопровождается абортами и установлением персистентной инфекции у матери. Если заражение происходит между 90-м и 150-м днем, возникают конгенитальные дефекты нервной системы. Инфицирование после 150-го дня стельности, по данным многих исследователей, не отражается на состоянии плода.
Течение и клиническое проявление. Инкубационный период болезни длится 2. 6 дней. Болезнь протекает остро, подостро, хронически и в абортивной форме.
Симптомы, тяжесть переболевания, широта распространения и процент летальности значительно варьируются в зависимости от вирулентности вируса, чувствительности животных и наличия стрессорных факторов.
При внутриутробном заражении телята, как правило, рождаются гипо-трофиками, в первые 24 ч жизни у них развивается гастроэнтерит с гиперемией слизистой оболочки ротовой полости, воспалением десен, слюнотечением, иногда кровоизлиянием и эрозиями на нёбе. Через 7. 12 дней около 70 % таких телят заболевает пневмонией, летальность составляет 25. 30%.
У пораженных телят (между 90-м и 118-м днем стельности) обнаружены клинические признаки поражения центральной нервной системы, которые характеризовались атаксией, кривошеестью, тремором мышц и опистотонусом. Отмечалась врожденная курчавость волосяного покрова.
Острое течение наблюдается обычно в начале эпизоотического процесса и преимущественно среди молодняка. Оно характеризуется высокой лихорадкой (39,5. 42,3 °С) в течение 12. 60 ч, сильной депрессией, серозным, а позже слизистыми и слизисто-гнойными истечениями из носа, слезотечением, кашлем, тахикардией (80. 120 в 1 мин), учащением дыхания (48. 90 в 1 мин), отсутствием аппетита. В ротовой полости и на носовом зеркале первоначально появляются гиперемчрованные рассеянные припухлости, превращающиеся в папулы различной величины (от 5 до 30 мм) и везикулы с быстро разрушающимися стенками. На их месте образуются эрозии и язвы с красным, покрытым желто-серым отрубьевид-ным налетом дном, по периферии четко очерченные воспалительным валиком. При таких поражениях резко выражено слюнотечение. Поражения, подобные имеющимся в ротовой полости, нередко отмечают в области межкопытной щели, венчика копытец, половых органов, ноздрей, вокруг глаз.
Одновременно с поражением ротовой полости и носового зеркала или несколько позже появляется диарея. Фекалии становятся водянистыми, темно-бурыми, с примесью слизи, сгустков крови, фибринозных отторжений, пузырьков зловонных газов. Животные быстро худеют, стоят угнетенные, сгорбленные, с взъерошенной шерстью, или залеживаются. У них появляется отек в подчелюстной области, развивается умеренная тим-пания.
В отдельных случаях (10. 15%) устанавливают кератит, помутнение роговицы, выпадение резко воспаленной геморрагичной прямой кишки. Появляются симптомы поражения центральной нервной системы — возбуждение, атаксия, коматозное состояние. Развивающуюся лейкопению считают признаком, имеющим при вирусной диарее диагностическое значение. Животные гибнут при полном упадке сил и в состоянии комы. Длительность болезни при остром течении 1. 2 нед; почти всегда она заканчивается смертью животного.
Подострое течение наблюдают чаще у позднемолочных и половозрелых телят. Больные животные теряют аппетит. Температура поднимается на 0,5. 1,5 °С или остается в пределах нормы. Отмечаются учащенное сердцебиение и дыхание, умеренный ринит, кратковременная диарея, лейкопения. Слизистая оболочка ротовой полости или не поражена, или поражения слабо выражены. Появляется хромота, обусловленная эрозиями и воспалением копыт. У телят до 2. 4 мес может развиваться респираторная форма болезни, которая наряду с ринитом, эрозиями на слизистой оболочке верхнего нёба и носового зеркала характеризуется признаками хронической бронхопневмонии.
Хроническое течение нередко развивается у животных, болевших остро или подостро. Однако нередко хронически болезнь может протекать с самого начала. У таких животных выражена задержка в развитии, снижен аппетит, отмечается продолжительная умеренная лихорадка, появляются носовые и глазные истечения. На слизистой оболочке ротовой полости появляются долго не заживающие эрозии и язвы. Наблюдается длительная изнуряющая диарея, развивается кахексия. При этом может быть выпадение прямой кишки. Шерсть взъерошена. Кожа теряет эластичность, становится складчатой, появляются аллопеции, гиперкератозы. Нередко развивается пневмония. Больные животные обычно погибают в конце второго месяца болезни. При благоприятном исходе здоровье и упитанность восстанавливаются медленно — за 6 мес и более. Переболевшие телята длительное время остаются вирусоносителями.
Абортивная форма болезни проявляется у молодняка старшего возраста и характеризуется незначительной кратковременной лихорадкой, слабо-выраженным ринитом, иногда диареей. Через 3. 4 дня больные клинически выздоравливают.
Патологоанатомические признаки. Основные морфологические изменения локализованы в пищеварительном тракте. На слизистой оболочке губ, щек и десен, боковых поверхностях языка, нёбе и гортани постоянно обнаруживают гиперемию, рассеянные, иногда сливающиеся папулы, эрозии и язвы различного размера (чаще диаметром 2. 3 мм). Их часто находят на носовом зеркале и наружной поверхности ноздрей. На всем протяжении пищевода имеются четко выраженные многочисленные или единичные, удлиненные в продольном направлении эрозии и язвы, покрытые серовато-коричневым налетом. Они располагаются в основном поверхностно, но иногда распространяются и на подслизистую ткань. Слизистая оболочка рубца и сычуга гиперемирована, с точечными кровоизлияниями, а в пилорической части последнего обнаруживают эрозии и язвы различной величины.
Содержимое всех отделов кишечника слизисто-водянистое, с примесью слизи и крови, зловонное. Тонкий кишечник местами катарально, геморрагически или фибринозно-некротически воспален, с наличием поверхностных язв. Толстый кишечник очагово гиперемирован и воспален. Пейеровы бляшки увеличены и отечны. На слизистой оболочке прямой кишки обнаруживают петехии, а иногда изъязвления. В случаях выпадения прямой кишки отмечают разлитые геморрагии.
В острых случаях вирусной диареи брыжеечные лимфатические узлы увеличенные, сочные. Печень оранжево-желтого цвета, увеличена, с очагами некроза или жировой дегенерации. Желчный пузырь воспален, переполнен желчью. Почки часто (до 90 %) увеличены в объеме, отечны, анемичны, дряблой консистенции. Под капсулой могут быть геморрагии.
При хроническом течении болезни в почках отмечают общий фиброз и кистеобразные разращения в корковом слое. Головной мозг отечен и гиперемирован. Нередко обнаруживают бронхиты, катаральную или крупозную бронхоплевропневмонию.
У абортированных плодов отмечают воспаление мягких оболочек мозга, очаги геморрагии и умеренный отек нервных тканей. Нередки случаи мумификации плода.
Диагностика и дифференциальная диагностика. На основании перечисленных выше данных можно поставить предварительный диагноз, который уточняют методами лабораторного исследования. Лабораторную диагностику проводят с использованием наборов диагностикумов вирусной диареи крупного рогатого скота.
В лабораторию направляют патологический материал от больных или убитых с диагностической целью животных: смывы со слизистой оболочки, пробы крови в первые 3 дня болезни и через 3 нед от тех же животных, соскобы с изъязвленных участков слизистой оболочки ротовой полости и носового зеркала, а от трупов — кусочки легких с бронхами, селезенки, мезентериальные, средостенные, бронхиальные и брыжеечные лимфатические узлы, миндалины, пораженные участки слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, носовой и ротовой полости.
Лабораторная диагностика включает:
1) обнаружение в мазках-отпечатках и срезах патологического материала антигена в реакции иммунофлуоресценции (РИФ);
2) выделение возбудителя в культуре клеток и его идентификацию по цитопатогенному действию, в реакции нейтрализации (РН) или РИФ;
3) выявление диагностического прироста титра антител в парных сыворотках крови больных и переболевших животных в РН, РНГА, РСК, РДП или обнаружение антител в высоких титрах у больных или переболевших телят.
Диагноз считают установленным при совпадении результатов РИФ с установлением антител в парных сыворотках или обнаружением четырехкратного (диагностического) прироста титра антител в парных сыворотках крови. В сомнительных случаях ставят биопробу на телятах 2. 6-месячного возраста или крольчатах 3. 6-недельного возраста. При постановке диагноза используют также ИФА и ПЦР.
При дифференциальной диагностике исключают ящур, инфекционный ринотрахеит, паратуберкулез, чуму крупного рогатого скота, злокачественную катаральную горячку, парагрипп, респира-торно-синцитиальную инфекцию, инфекционные стоматиты, корона-, парво- и аденовирусные инфекции, некробактериоз, алиментарные отравления.
Иммунитет, специфическая профилактика. Животные-реконвалесценты приобретают устойчивость к повторному заражению не менее чем на 1 год. Однако у них образуется нестерильный иммунитет — отмечается длительное вирусоносительство, которое связано с иммунодепрессивным действием вируса. Новорожденные телята, получавшие молозиво от иммунных коров, обладают колостральным иммунитетом до 4. 5 нед.
Профилактика и меры борьбы. Общие профилактические мероприятия при вирусной диарее такие же, как и при парагриппе-3 и инфекционном ринотрахеите крупного рогатого скота. Большую роль в борьбе с вирусной диареей играют своевременное обнаружение и удаление из стада персис-тентно инфицированных животных.
Для профилактики вирусной диареи применяют живые и инактивиро-ванные вакцины. Живые вакцины обладают слабой реактогенностью и применяются для профилактики вирусной диареи главным образом в откормочных хозяйствах. Инактивированные препараты можно использовать в репродукторных хозяйствах для иммунизации коров на 7. 8-м месяце стельности.
Лечение. Применяют поливалентную сыворотку против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота из расчета 1. 2 мл/кг массы тела подкожно через 24. 48 ч. Животных обеспечивают легкопереваримыми кормами. Для подавления секундарной микрофлоры используют антибиотики и сульфаниламидные препараты.
Синтомицин дают внутрь через каждые 6. 8 ч из расчета по 0,02. 0,04 г/кг в течение 3. 5 дней, а биомицин — 2. 3 раза в день по 0,02 г/кг массы животного до выздоровления. Вводят внутримышечно (на 1 кг мас-
333сы животного): стрептомицин —3. 5 тыс. ЕД, неомицин — 20 тыс., кана-мицин — 4. 5 тыс., мономицин — 4. 6тыс., эритромицин — 10 тыс. ЕД; перорально: канамицин — 20 тыс. ЕД, мономицин — 20 тыс. и левоми-цетин— 10. 20 тыс. ЕД. Применяют препараты 2 раза в день в течение 4. 6 дней. Целесообразно использовать ихтиол в дозе 5. 10 г в 100. 200 мл воды в течение 3. 4 дней. Ротовую полость при наличии эрозий и язв ежедневно орошают 0,1. 0,2%-ным раствором калия перманганата.
Эффективно применение рекомбинантного 1-а-гибрида интерферона из Е. coli, который вводят перорально в капсулах или с регидратационной жидкостью. Эффективна смесь из 117 г хлорида натрия, 150 г хлорида калия, 168 г бикарбоната натрия и 135 г ортофосфата калия (5,7 г смеси растворяют в 1 л настоя сена). Получены положительные результаты при применении электролитов, которые восстанавливали кислотно-щелочное равновесие и устраняли дегидратацию.
Читайте также:
Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.
