Му 3 1 1 2130-06 энтеровирусные заболевания клиника лабораторная диагностика эпидемиология профилактика

Эпидемиология, профилактика и лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций

В структуре заболеваемости энтеровирусной инфекцией 32% составляют энтеровирусные менингиты, которые регистрируются в 43 субъектах Российской Федерации-3223случая (2,2 на 100 тыс. населения), при этом около 90% заболеваний приходится на детей до 17 лет. Серозный менингит – наиболее распространенная форма энтеровирусного поражения ЦНС. Энтеровирусами часто контаминированы поверхности водных бассейнов. С потреблением контаминированной воды связан ряд вспышек этой инфекции в ряде городов Сибири и Дальнего Востока, во время которых интенсивно вовлекаются в эпидемический процесс дети младших возрастов.

В последние годы разработаны молекулярно-биологические методы индикации и типирования возбудителей, позволяющие спустя несколько часов выявлять их наличие в исследуемом материале. К сожалению, до настоящего времени не разработаны методы специфической и неспецифической профилактики.

Заболеваемость энтеровирусными менингитами в основном обусловлена резко выраженным сезонным подъемом этой инфекции, в июле-октябре, а также крупными вспышками.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ НЕПОЛИОМИЕЛИТНЫХ ЭНТЕРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ из МУ 3.1.1.2130-06

Энтеровирусы обнаруживают у людей во всех районах земного шара. В тропических и субтропических странах они циркулируют постоянно. В странах с умеренным климатом энтеровирусы наиболее часто встречаются в конце лета и начале осени и могут быстро распространяться среди населения в виде скрытых или явных эпидемий. Из-за отсутствия иммунитета дети наиболее восприимчивы к инфекции энтеровирусами и служат основными их распространителями. Зараженность детей при низком санитарно-гигиеническом уровне жизни может доходить до 50 %. Уровень естественного иммунитета с возрастом увеличивается. Чем хуже санитарные условия, тем в более раннем возрасте происходит инфекция, и вырабатывается невосприимчивость. В некоторых районах свыше 90 % детей оказываются иммунными к распространённым типам энтеровирусов уже в возрасте 5 лет. С возрастанием уровня личной и коммунальной гигиены циркуляция энтеровирусов сокращается, и увеличивается число лиц, доживающих до взрослого возраста без инфицирования и без иммунитета.

Пути передачи

Источником инфекции является больной человек или бессимптомный носитель вируса. Вирус выделяется из носоглотки и кишечного тракта и может передаваться как фекально-оральным, так и респираторным путями. Относительная роль каждого из путей передачи остаётся неясной, по-видимому, она может варьировать в зависимости от сроков после начала болезни (или инфицирования), характеристик вируса и условий окружения. Важным путём является, по-видимому, контакт с загрязнёнными предметами и руками другого человека с последующей аутоинокуляцией вируса через рот, нос или глаза. Энтеровирусы регулярно выделяют из сточных вод и по видовому составу и количественному содержанию можно судить об их циркуляции на соответствующих территориях. Поверхностные воды часто контаминированы энтеровирусами (озёра, бассейны), их изредка обнаруживали даже в хлорированной водопроводной воде. Доказано, что некоторые вспышки серозного менингита в сибирских городах были связаны с потреблением контаминированной воды. Использование сточных вод для полива сельскохозяйственных угодий и сохранение вируса на овощах не является важным путём передачи вируса.

Эпидемиология, профилактика и лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ - конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

Папиллярные узоры пальцев рук - маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.

Законы Российской Федерации и постановления Правительства Российской Федерации:

Технические регламенты таможенного союза

Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 880 (ред. от 10.06.2014) “О принятии технического регламента Таможенного союза “О безопасности пищевой продукции” (вместе с “ТР ТС 021/2011. Технический регламент Таможенного союза. О безопасности пищевой продукции”)
Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 881 “О принятии технического регламента Таможенного союза “Пищевая продукция в части ее маркировки” (вместе с “ТР ТС 022/2011. Технический регламент Таможенного союза. Пищевая продукция в части ее маркировки”)
Решение Комиссии Таможенного союза от 16.08.2011 N 769 (ред. от 15.11.2016) “О принятии технического регламента Таможенного союза “О безопасности упаковки” (вместе с “ТР ТС 005/2011. Технический регламент Таможенного союза. О безопасности упаковки”) (с изм. и доп., вступ. в силу с 21.05.2017)
Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 09.10.2013 N 67 (ред. от 20.12.2017) “О техническом регламенте Таможенного союза “О безопасности молока и молочной продукции” (вместе с “ТР ТС 033/2013. Технический регламент Таможенного союза. О безопасности молока и молочной продукции”) (с изм. и доп., вступ. в силу с 15.07.2018)
Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 09.10.2013 N 68 “О техническом регламенте Таможенного союза “О безопасности мяса и мясной продукции” (вместе с “ТР ТС 034/2013. Технический регламент Таможенного союза. О безопасности мяса и мясной продукции”)
Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 883 (ред. от 10.05.2016) “О принятии технического регламента Таможенного союза “Технический регламент на масложировую продукцию” (вместе с “ТР ТС 024/2011. Технический регламент Таможенного союза. Технический регламент на масложировую продукцию”)
Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 883 (ред. от 10.05.2016) “О принятии технического регламента Таможенного союза “Технический регламент на масложировую продукцию” (вместе с “ТР ТС 024/2011. Технический регламент Таможенного союза. Технический регламент на масложировую продукцию”)
Решение Комиссии Таможенного союза от 23.09.2011 N 799 (ред. от 10.04.2018) “О принятии технического регламента Таможенного союза “О безопасности парфюмерно-косметической продукции” (вместе с “ТР ТС 009/2011. Технический регламент Таможенного союза. О безопасности парфюмерно-косметической продукции”)
Решение Комиссии Таможенного союза от 23.09.2011 N 798 (ред. от 26.09.2017) “О принятии технического регламента Таможенного союза “О безопасности игрушек” (вместе с “ТР ТС 008/2011. Технический регламент Таможенного союза. О безопасности игрушек”) (с изм. и доп., вступ. в силу с 30.03.2018)
Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 18.10.2016 N 162 “О техническом регламенте Евразийского экономического союза “О безопасности рыбы и рыбной продукции” (вместе с “ТР ЕАЭС 040/2016. Технический регламент Евразийского экономического союза. О безопасности рыбы и рыбной продукции”)
Технический регламент Евразийского экономического союза ТР ЕАЭС 044/2017 О безопасности упакованной питьевой воды, включая природную минеральную воду

Санитарные нормы и правила, гигиенические нормативы:

Государственные и отраслевые стандарты:

ГОСТ 12.1.005-88. ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны.
ГОСТ 12.1.001-83. ССБТ. Ультразвук. Общие требования безопасности.
ГОСТ Р 57164-2016 Вода питьевая. Методы определения запаха, вкуса и мутности
ГОСТ 24940-2016 Здания и сооружения. Методы измерения освещенности
ОСТ 25.1-005-87 “Устойчивость медицинских инструментов к средствам предстерилизационной очистки, стерилизации и дезинфекции. Классификация. Выбор метода.”
ОСТ 42-21-16-86. ССБТ. Отделения, кабинеты физиотерапии. Общие требования безопасности.
ОСТ 42-21-2-85. Стерилизация и дезинфекции изделий медицинского назначения. Методы, средства и режимы.
ОСТ 42-91-15-83. ССБТ. Кабинеты рентгенологические. Общие требования безопасности.
ОСТ 42-21-14-82. ССБТ. Подразделения радиодиагностические. Требования безопасности.
ОСТ 42-21-11-81. ССБТ. Кабинеты и отделения лучевой терапии. Требования безопасности.
РТМ 42-2-4-80. Операционные блоки. Правила эксплуатации, техники безопасности и производственной санитарии.
ГОСТ 26668-85 “Продукты пищевые и вкусовые. Методы отбора проб для микробиологического анализа”.

Приказы Министерства здравоохранения РФ:

Методические указания Министерства здравоохранения РФ:

Письма Министерства здравоохранения РФ и Федеральной службы Роспотребнадзора РФ:

Письмо Федеральной службы Роспотребнадзора РФ от 13.04.2009 №01/4801-9-32 “О типовых программах производственного контроля”

ведущий научный сотрудник, руководитель отдела вирусологии и молекулярнобиологических методов исследования, д.б.н.,

старший научный сотрудник отдела вирусологии и молекулярно-биологических методов исследования, к.б.н.,

научный сотрудник отдела вирусологии и молекулярно-биологических методов исследования, к.б.н.,

научный сотрудник отдела вирусологии и молекулярно-биологических методов исследования, к.м.н.,

1. Скрипченко, Н.В. Энтеровирусная инфекция у детей (эпидемиология, этиология, диагностика, клиника, терапия, профилактика): учебное пособие для врачей и медицинских сестер / Н.В. Скрипченко. – СПб.: НИИДИ, 2009. – 96 с.

3. Беляков, В. Д. Эпидемиология: учебник / В. Д. Беляков, P. X. Яфаев – М.: Медицина, 1989. – 416 с.

4. Лобзин, Ю.В. Энтеровирусные инфекции: руководство для врачей / Ю.В. Лобзин, Н.В. Скрипченко, Е.А. Мурина. – СПб, 2012. – 432 с.

5. Лещинская, Е.В. Случаи вакциноассоциированного паралитического полиомиелита в Российской Федерации в 2000–2002 гг. / Е.В. Лещинская [и др.] // Российский медицинский журнал. – 2004. – № 3. – С. 19–24.

7. Программа ликвидации полиомиелита в СанктПетербурге на 1997–2000 годы. – 1997. – СПб. – 7 с.

8. Drake J.W., Holland J.J. Mutation rates among RNA viruses. Proc Natl AcadSci USA. 1999; 96: 13910- 13

9. Ward CD, Stokes MA, Flanegan JB. Direct measurement of the poliovirus RNA polymerase error frequency in vitro. J Virol. 1988; 6: 558-62

10. Kew O.M., Mulders M.N., LipskayaG.Yu, da Silva E.E., Pallansch M.A. Molecular epidemiology of polioviruses. SemVirol. 1995; 66: 401-14.

11. Kinnunen L, Poyry T, Hovi T. Genetic diversity and rapid evolution of poliovirus in human hosts. Curr Top MicrobiolImmunol. 1992; 176: 49-61.

12. Gavrilin G.V., Cherkasova E.A., Lipskaya G.Y., at al. Evolution of circulating wild poliovirus and of vaccine-derived poliovirus in an immunodeficient patient: a unifying model. J Virol. 2000; 74(16): 7381-90.

13. Shiomi H., Urasawa T., Urasawa S., at al. Isolation and characterisation of poliovirus mutants resistant to heating at 50 degrees Celsius for 30 min. J. Med. Virol. 2004; 74(3): 484–91.

14. Ackermann W.W., Fujioka R.S., Kurtz H.B. Cationic modulation of the inactivation of poliovirus by heat. Arch. Environ. Health. 1970; 21(3): 377–81

15. Dorval B.L., Chow M., Klibanov A.M. Stabilization of poliovirus against heat inactivation. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989; 159(3): 1177–83.

16. Shin G.-A., Sobsey M.D. Reduction of Norwalk virus, Poliovirus 1 and coliphage MS2 by monochloramine disinfection of water. Water Sci. Technol. 1998; 38(12):151–54.

17. Alvarez M.E., O’Brien R.T. Effects of chlorine concentration on the structure of Poliovirus. Appl. Environ. Microbiol. 1982; 43(1): 237–39.

18. Alvarez M.E., O’Brien R.T. Mechanism of inactivation of Poliovirus by chlorine dioxide and iodine. Appl. Environ. Microbiol. 1982; 44(5): 1064–71.

19. Herbold K., Flehmig B., Botzenhart K. Comparison of ozone inactivation, in flowing water, of Hepatitis A virus, Poliovirus 1, and indicator organisms. Appl. Environ. Microbiol. 1989; 55(11): 2949–53

20. Носов, С. Д. Руководство по инфекционным болезням у детей / С.Д. Носов. – 2-е издание, переработанное и дополненное – М.: Медицина, 1980. – 600 с.

21. Руководство по вирусологическим исследованиям полиомиелита. ВОЗ. Женева, 1998.

22. Руководство по лабораторным исследованиям полиомиелита. ВОЗ. Женева. 2005.

23. Лашкевич, В.А. Неполиомиелитные энтеровирусные инфекции: эпидемиология, характеристика энтеровирусов, клиника, диагностика, профилактика: методическое пособие / В.А. Лашкевич, С.Г. Дроздов, В.П. Грачев. – М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора РФ, 2004.

24. Энтеровирусные заболевания: клиника, лабораторная диагностика, эпидемиология, профилактика: Методические указания (МУ 3.1.1.2130-06).

25. DulbeccoR, VogtM. Plaque formationand isolation ofpure lines with poliomyelitis viruses. J Exp Med 1954, 99: 167-182.

26. Enders J.F. Early observations on cytopathogenicity of poliovirus. American Journal of Clinical Pathology 1972; 57(6): 846

27. Melnick, J.I., Ledinko N. Vaccination as a provoking factor in poliomyelitis: An experimental approach. Journal of Infectious Diseases. 1952; 90:279.

28. Организация и проведение вирусологических исследований материалов от больных полиомиелитом, с подозрением на это заболевание, с синдромом острого вялого паралича (ОВП). Методические указания. МУК 4.2.2410-08 (утв. Роспотребнадзором 28.07.2008).

29. Manor Y, Handsher R, Halmut T, at al. Detection of poliovirus circulation by environmental surveillance in the absence of clinical cases in Israel and the Palestinian authority. J. Clin. Microbiol. 1999; 37: 1670 – 75.

30. Dahling D.R., Wright B.A. Optimization of the BGM cell line culture and viral assay procedures for monitoring viruses in the environment. Appl. Environ. Microbiol. 1986; 51 (4): 790- 812.

31. Профилактика инфекционных болезней. Кишечные инфекции. Эпидемиологический надзор за полиомиелитом и острыми вялыми параличами в постсертификационный период. Методические указания МУ 3.1.1.2360-08.

32. Arola A., Kallajoki M., Ruuskanen O., Hyypia T. Detection of enteroviral RNA in end-stade dilated cardiomyopathy in children and adolescents. J.Med.Virol. 1998; 56(4): 364-71.

33. Mullis K.B., Faloona F.A. R.Wu(ed.). Methods in enzymology. London. Academic Press. 1987; 155: 335 – 50.

34. Innis M.A., Gelfand D.H., Sninsky J.J., at al. PCR protocols, a guide to methods and applications. California: Academia Press & San Diego. 1990; 241р.

35. Glimaker M., Johansson B., Ols n P., at al. Detection of enteriviral RNA by polymerase chain reaction in cerebrospinal fluid from patients with aseptic meningitis. Scand. J. Infect. Dis. 1992; 25: 547–57.

36. Petitjean J., Freymuth F., Kopecka H., at al. Detection of enteroviruses in cerebrospinal fluids: enzymatic amplification and hybridization with biotinylated riboprobe. Mol. Cell. Probes. 1994; 8:15–22

37. Rotbart H.A. Diagnosis of enteroviral meningitis with polymerase chain reaction. J. Pediatr. 1990; 117:85–89.

38. AhmedA, Hickey SM, Ehrett S, at al. Clinical utility of the polymerase chain reaction for diagnosis of enteroviral meningitis in infancy. Pediatrics. 1997; 131:393–97.

39. Andraeoletti L., Blassel-Damman N., Dewilde A. Comparison of use of cerebrospinal fluid, serum, and throat swab specimens in diagnosis of enteroviral acute neurological infection by a rapid RNA detection PCR assay. J. Clin. Microbiol. 1998; 36: 589– 91.

40. Hamilton M.S., Jackson M.A., Abel D. Clinical etility of polymerase chain reaction testing for enteroviral meningitis. Pediatr. Infect. Dis. J. 1999; 18: 533–37.

41. Akhtar N., Ni J., Stromberg D., Rosenthal G.L., at al. Tracheal aspirate as a substrate for polymerase chain reaction detection of viral genome in childhood pneumonia and myocarditis. Circulation. 1999; 99:2011–18.

42. Egger D., Pasamontes L., Ostermayer M., Bienz K. Reverse transcription multiplex PCR for differenciation between polioand enteroviruses from clinical and environmental samples. J. Clin. Microbiol. 1995; 33:1442 -47.

43. Muir P., Nicholson F., Jhetam M., at al. Rapid diagnosis of enterovirus infection by magnetic bead extraction and polymerase chain reaction detection of enterovirus RNA in clinical samples. J. Clin. Microbiol. 1993; 31:31–38.

44. Pichichero M.E., McLinn S., Rotbart H.A., at al. Clinical and economic impact of enterovirus illness in private pediatric practice. Pediatrics. 1988; 102: 1126–34.

45. Carrie L., Byington C.L., Taggart E.W., at al. A polymerase chain reaction-based epidemiologic investigation of the incidence of nonpolioenteroviral infections in febrile and afebrile infents 90 days and younger. Pediatrics. 1999;103: 27.

46. Marshall G.S., Hauck M.A., Buck G., Rabalais G.P. Potential cost savings through rapid diagnosis of enteroviral meningitis. Pediatr. Infecs. Dis. J.1997; 16: 1086 –87.

47. Casas J., Pozo F., Trallero G., at al. Viral diagnosis of neurological infection by RT multiplex PCR: A search for entero- and herpesviruses in a prospective stidy. J.Med.Virol. 1999; 57(2):145-51. 48. Федоров, Н.А. Методы генодиагностики инфекционных и неинфекционных заболеваний / Н.А.Федоров // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. – 1996. – Т 6, № 1. – С. 20–23.

48. Duck P., Alvarado-Urbina G., Burdick B.,Collier B. Probeamplifier system based on chimeric cycling oligonucleoti des. BioTechniques 1990; 9:142-148.

49. Залесских, А.Ф. Ускоренный метод идентификации энтероврирусов методом встречного иммуноэлектрофореза / А.Ф. Залесских // Вопросы вирусологии. -1982.- № 2. – С. 197-199.

50. Ланская, Т.И. Электронномикроскопическое исследование культуры клеток Hep-2, инфицированных вирусом Коксаки группы В / Т.И. Ланская, Б.А. Ерман, В.С. Головин // Материалы XV научой сессии института полиомиелита и вирусных энцефалитов.- M.; 1968. – С. 65-68.

51. Дяченко, С.С. Изучение возможных механизмов дифференциации вирусов Коксаки по свойству адсорбции на бентоните // С.С. Дяченко, В.П. Широбоков // Материалы XV научной сессии института полиомиелита и вирусных энцефалитов. – М.; 1968. – С. 32-39.

53. Мурина, Е.А. Характеристика вирулентных серотипов энтеровирусов и их роль в генезе серозных менингитов и острых вялых параличей : автореф. дис. … д-ра биол. наук. / Е.А. Мурина. – СПб.: НИИДИ, 2002. – 43 с.

Обратные ссылки не определены.

Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.

Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций проводится путем выделения вируса из организма больного, а также по нарастанию титра вирусспецифических антител. Вирусы выделяют из фекалий, крови, смывов носоглотки и другого материала в зависимости от периода заболевания одновременно на первичных и перевиваемых культурах клеток, а также путем заражения мышей-сосунков. Для идентификации вируса применяется реакция нейтрализации.

Гемагглютинирующие варианты вирусов ECHO и Коксаки можно идентифицировать с помощью РТГА, которая, подобно реакции вируснейтрализации, характеризуется типоспецифичностью.

Выделение энтеровирусов из организма бoльнoгo особенно из фекальных масс, не является абсолютным основанием для постановки диагноза, учитывая распространение бессимптомного носительства. Поэтому необходима серологическая диагностика с использованием парных сывороток, взятых в первые дни и на 2—3-й неделе после начала заболевания. В положительном случае отмечается нарастание титра антител во второй сыворотке не менее чем в 4 раза в реакциях нейтрализации, РСК, РТГА.

Риновирусы

Эта группа вирусов впервые была выделена в 1960 г. от людей, больных острым ринитом.

Вирионы риновирусов имеют сферическую форму и кубический тип симметрии, достигая 20—30 нм в диаметре. Они похожи на энтеровирусы, но в отличие от них теряют свои инфекционные свойства в кислой среде. Хорошо сохраняются при низких температурах.

Для культивирования риновирусов используют культуру клеток, приготовленную из фибробластов легких эмбриона человека или эпителия трахеи человека и хорьков. В оптимальных условиях культивирования проявляется ЦПД.

Выделено 113 серотипов риновирусов, многие из которых имеют идентичные антигены, ответственные за перекрестные серологические реакции. Они не обладают гемагглютинирующими свойствами.

Патогенез заболеваний человека и иммунитет. Заражение происходит воздушно-капельным путем. Риновирусы локализуются в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа, а у детей — и бронхов, вызывая насморк, бронхиты и бронхопневмонии.

После заболевания сохраняется непродолжительный иммунитет, который определяется не столько сывороточными антителами, сколько секреторными иммуноглобулинами типа IgA. Специфическая профилактика не разработана.

Лабораторная диагностика основана на выделении вируса в чувствительных культурах клеток. Для экспресс-диагностики применяется иммунофлюоресцентный метод, который позволяет обнаружить вирусный антиген в цитоплазме эпителиальных клеток слизистой оболочки.

Афтовирусы

К роду афтовирусов относится вирус ящура — возбудитель высококонтагиозного заболевания парнокопытных домашних животных, вирусная природа которого была установлена еще в 1898 г. Ф. Леффлером и П. Фрошем. Вирус ящура мало чем отличается от других пикорнавирусов. Существует 7 серотипов вируса яищфа, отличающихся друг от друга типоспецифическими антигенами.

Патогенез заболеваний человека. Вирус репродуцируется в средних слоях эпителия кожи и слизистых оболочек. Затем проникает в кровь, вызывая вирусемию. При этом может произойти поражение миокарда и паренхиматозных органов.

После перенесения заболевания сохраняется непродолжительный типоспецифический иммунитет (около 1 —1,5 лет).

Экология и распространение. Источником инфекции являются больные животные. Человек заражается главным образом при уходе за ними, реже — при употреблении в пищу зараженных продуктов (сырого молока и мяса) без достаточной термической обработки.

Вирус ящура в течение 2 мес сохраняется в некоторых пищевых продуктах (масле, жирах), а также в сгустках крови и костном мозге погибших животных.

Лабораторная диагностика. Исследуемый материал (содержимое везикул) вводится в кожу стопы морской свинки. Через 24—48 ч в месте введения, а также в полости рта появляются везикулы. Вирус можно выделить в культуре клеток. Серодиагностику проводят в реакции вируснейтрализации и РСК с парными сыворотками.

Дополнительные материалы по лабораторной диагностике энтеровирусной инфекции

Кишечные вирусы (энтеровирусы) человека входят в род Enterovirus семейства Picornaviridae. К ним относятся вирусы полиомиелита (3 серотипа), Коксаки А (24 серотипа), Коксаки В (6 серотипов), ECHO (34 серотипа) и энтеровирусы человека 69—72-го серотипов. Энтеровирус 70 вызывает острый геморрагический конъюнктивит, энтеровирус 72 — вирус гепатита А. В род Enterovirus входят также кишечные вирусы животных (крупного рогатого скота, обезьян, свиней, мышей) и насекомых. Энтеровирусы животных характеризуются видовой специфичностью.

Обратите внимание: Коксаки А 23 идентичен ЕСНО 9. ЕСНО 28 отнесен к риновирусам, ЕСНО 34 – вариант Коксаки А 24

Энтеровирусы вызывают у человека поражение центральной нервной системы (энцефалит, менингоэнцефалит, полиомиелит, менингит), желудка и кишок (диарея, гепатит, панкреатит), а также дыхательных путей (ринит, фарингит, пневмония новорожденных и др.), сердечно-сосудистой системы (миокардит, перикардит). Возможно также развитие герпетической ангины, экзантемы, везикулярного стоматита, миалгии и конъюнктивита. Различные энтеровирусы могут обусловливать одинаковые клинические проявления, в то же время один энтеровирус способен привести к развитию разных клинических синдромов.

Материалом для исследования служат фекалии, смывы с носовой части глотки, спинномозговая жидкость, кровь, сыворотка, содержимое везикул, моча, асцитическая жидкость. От трупа берут на исследование кровь, спинномозговую жидкость, ткань спинного и продолговатого мозга, варолиева моста, кусочки кишок и их содержимое, кусочки печени, селезенки, легкого, поджелудочной железы, миокарда, лимфатические узлы. Материал берут в первые часы болезни, от трупа — не позднее чем через 3—4 ч после смерти.

Кровь (около 10 мл) для вирусологического анализа и приготовления сыворотки берут натощак в начале болезни, а затем спустя 3—4 недели.

Фекалии (4—6 г) собирают с интервалом 1—2 дня (можно использовать флаконы из-под антибиотиков). Готовят 10 % суспензию в растворе Хенкса, встряхивают и осветляют центрифугированием в течение 30 мин при 3000 об/мин (при возможности материал центрифугируют при 10 000 об/мин). Надосадочную жидкость обрабатывают эфиром (к осветленной суспензии фекалыий добавляют 50 % по объему диэтилового эфира, смесь оставляют в холодильнике под ватно-марлевой пробкой в течение 12-16 часов) и антибиотиками.

Ректальные тампоны помещают в пробирку с 1—2 мл раствора Хенкса или Эрла, споласкивают, отжимают. Материал центрифугируют и обрабатывают эфиром и антибиотиками.

Глоточный смыв в объеме 20 мл получают при 2-кратном (с интервалом 3 мин) полоскании горла стерильным солевым раствором или дистиллированной водой. Тампонами протирают заднюю стенку глотки, миндалины и небные дужки и погружают в пробирку с 1—2 мл раствора Хенкса. Материал центрифугируют и обрабатывают эфиром и антибиотиками.

Стерильную прозрачную спинномозговую жидкость (около 3 мл) используют для выделения вируса без предварительной обработки. Мутную спинномозговую жидкость, а также содержащую эритроциты центрифугируют. Мочу в объеме 10 мл берут в стерильный сосуд в середине акта мочеиспускания и обрабатывают антибиотиками.

Пробы секционного материала растирают в стерильной ступке, готовят 20 % суспензию в растворе Хенкса, центрифугируют 5—10 мин при 2000 об/мин.

Материал обрабатывают антибиотиками — пенициллином (1000 ЕД/мл) и стрептомицином (500 ЕД/мл) в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем используют его для выделения вируса. Часть материала замораживают и хранят при температуре —70 °С. Многократное замораживание и оттаивание недопустимо, так как приводит к инактивации вируса.

Экспресс-диагностика не нашла широкого применения при энтеровирусных инфекциях из-за особенностей их патогенеза. Описано применение РИФ для исследования клеток спинномозговой жидкости. При ротавирусных инфекциях применяют ЭМ и ИЭМ (см. с. 243).

Выделение вируса проводят в культурах клеток и на однодневных белых мышах (табл.).

Таблица. Методы выделения и идентификации энтеровирусов

Читайте также: