Лабораторная диагностика вируса простого герпеса

Просим уточнять время приёма конкретного анализа и график работы врачей в графе: "Как сдавать" и в "Расписании приёма врачей"

• 8(495) 380-20-19
• 8(495) 459-17-18
• 8-905-546-59-33
• 8-905-546-59-35
• 8-905-546-59-51

К оплате принимаются наличные и карты.

Вирус Простого Герпеса - диагностика и анализ. ВПГ тип 1 и 2.

ЭТИОЛОГИЯ.

Впервые ВПГ выделил Гротер (W.Gruter) в 1912 году. Это ДНК-содержащий вирус, вирион которого со­стоит из центрально расположенного плотного нуклеотида, белковой капсулы - капсида и наружной оболочки. Наружняя оболочка неправильной формы содержит белки, углеводы, липиды и другие вещества, а в антигенном отношении прояв­ляет сродство с антигенами клетки хозяина. На своей оболоч­ке ВПГ имеет антирецепторы, благодаря чему он присоединя­ется к тканям экто- и эндодермального происхождения (пан-тропизм). То есть он может поражать кожу, слизистые, центральную и периферическую нервную систему, печень, эн­дотелий сосудов, клетки крови (Т-лимфоциты, эритроциты, тромбоциты). , как ДНК-содержащий , может ин­тегрировать генетический аппарат клетки хозяина и вызывать злокачественную трансформацию клеток ( -2 и рак шейки матки). При этом не обязательно постоянное присутствие вируса в клетке. Геном может интегрировать с генами не­которых других , вызывая их активацию. С другой стороны развитие ряда и бактериальных инфекций сопровождается активацией латентного .

ВПГ термолабилен, при нагревании до 50-52 °С он инактивируется через 30 минут. Вирус погибает под воздействием ультрафиолетовых и рентгеновских лучей. ВПГ чувствителен к действию этилового спирта, протеолитических ферментов, фосфатазы, желчи и других органических растворителей. Низ­кие температуры вирус переносит хорошо и при температуре от -20 °С до -70 °С сохраняется в жизнеспособном состоянии годами или десятилетиями. Устойчив он также к повторному замораживанию и оттаиванию, действию ультразвука и года­ми может сохраняться в высушенном состоянии.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ.

Источниками инфекции при забо­леваниях вызываемых ВПГ являются больные с различными формами болезни, в том числе и латентной, а также вирусо-носители. Вирус передается главным образом контактным пу­тем (прямой контакт), возможна передача возбудителя также контактно-бытовым, воздушно-капельным и вертикальным пу­тями (от матери к плоду). Последнее может осуществляться во время родов (контакт с родовыми путями матери), трансплацентарно или же вирус проникает в полость матки через цервикальный канал (восходящий путь). В связи с тем, что при генерализации процесса имеет место вирусемия возможен трансфузионный и парентеральный пути передачи.

Восприимчивость всеобщая, антитела к ВПГ выявляются у 80-90% взрослых. Наибольшее количество заболеваний регистрируется в холодные месяцы, но эпидемии не бывает, хотя могут наблюдаться небольшие вспышки в дошкольных учреждениях, школах, больницах.

ПАТОГЕНЕЗ.

Независимо от того, каким путем по­падает в организм, начальное размножение происходит у входных ворот, далее он проникает в региональные лимфо­узлы, затем в кровь и гематогенно заносится во внутренние органы, мозг. В центральную нервную систему он может проникать и по нервным стволам. Первичное заражение, как правило, происходит в раннем детстве и протекает первичный герпес у 80% больных бессимптомно. Уже через несколько дней после заражения в сыворотке крови появляются антите­ла (у 85% детей до 3 лет они уже имеются). Попав в организм, ВПГ сохраняется в нем в течение всей жизни, находясь в не­активном (латентном) состоянии. Вирусоносительство встречается более чем у 90% людей и является одной из особенностей герпеса. Причем вирус может обнаруживаться только после его реактивации в результате ослабления иммунитета под влиянием разнообразных факторов, поскольку вирус находится в клетках паравертебральных сенсорных ганглиев в непродук­тивном состоянии. Дефекты иммунной системы приводят к рецидиву болезни.

Но существует и другая точка зрения, согласно которой репродукция и выделение из ганглия ВПГ происходит посто­янно, но в небольшом количестве. Мигрируя центробежно, он из ганглия по аксону периферического нерва достигает эпите­лиальных клеток, но механизмы защиты устраняют микрооча­ги инфекции, то есть предупреждают клинические проявле­ния. Определенную роль играют и защитные свойства кожи.

КЛИНИКА.

Заболевания вызываемые ВПГ подразделяют на первичную и вторичную (рецидивирующую) герпетичес­кую инфекцию. По клиническим проявлениям выделяют 4 формы: латентную, локализованную, генерализованную и сме­шанную.

Первичная герпетическая инфекция возникает при первом контакте человека с ВПГ. Как правило это происходит в ран­нем детском возрасте (до 5-ти лет).

После короткого (от 2-х до 14-ти дней) инкубационного периода в крови начинают определяться тела к ВПГ и у 80-90% первично инфицированных болезнь протекает в латент­ной форме. У 10-20% имеют место клинические проявления для которых характерен общеинфекционный синдром с ли­хорадкой и другими признаками интоксикации. Чаще всего это ОРЗ или афтозный стоматит. Первичный герпес может проявляться поражением кожи и слизистых, в том числе конъ­юнктивы или роговицы глаза. Особенно тяжело протекает первичная герпетическая инфекция у новорожденных и на фо­не выраженного иммунодефицита. Здесь возможна генерали­зация процесса с поражением внутренних органов и/или го­ловного мозга. Без этиотропной терапии обычно заканчивает­ся смертью.

Вторичная (рецидивирующая) герпетическая инфекция встречается в любом возрасте после первичного герпеса. Так как рецидивы возникают при наличии противовирусных анти­тел, то они протекают со слабовыраженным общеинфекцион­ным синдромом и, как правило, на фоне болезней и/или со­стояний снижающих иммунитет: другие инфекционные и со­матические болезни, переохлаждение, перегрев, ультрафиоле­товое излучение, эндокринные изменения (например менструа­ции), эмоциональный стресс и т.п.

Рецидивы простого герпеса могут возникать с различной частотой. Если они проявляются один раз в несколько лет (но не чаще 2-х раз в год), высыпания выражены в умеренной сте­пени и фиксированы на одном и том же месте, то это являет­ся неплохим прогностическим признаком. Если же рецидивы возникают чаще (1 раз в квартал и чаще), то можно говорить о дефекте в иммунной системе и необходимости ее коррекции.

Клинические проявления первичного и вторичного герпеса имеют много общего и различаются в основном по количест­венным, а не по качественным признакам. При первичном герпесе более выражены симптомы общей интоксикации, тя­желее протекают местные поражения и чаще происходит ге­нерализация процесса.

Локализованные формы простого герпеса (син. пузырько­вый лишай - herpes simplex) дифференцируют прежде всего по локализации очагов поражения (кожа, слизистые, глаза и т.п.).

ПОРАЖЕНИЕ КОЖИ ПРИ ПРОСТОМ ГЕРПЕСЕ

Наиболее распространенная форма герпетической инфекции. Клиническая картина характеризуется появлением на коже после инкубационного периода (2-12 дней, чаще 3-4 дня) группы пу­зырьков диаметром 0,1-0,3 см на фоне ограниченного, слегка отеч­ного розового пятна. Часто за 1-2 суток до высыпания больные чувствуют жжение и зуд кожи на месте будущей сыпи. Содержи­мое пузырьков вначале прозрачное, через несколько дней мутнеет. Расположены пузырьки тесно и нередко сливаются в многока­мерный сплошной пузырь. В дальнейшем пузырьки вскрываются, образуя мелкие эрозии. Образующиеся корочки отпадают, эрозии эпителизируются и на 6-8 день заживают, не вызывая рубцовых изменений кожи. Иногда сроки заживления удлиняются до 3-4 недель и более. Высыпание пузырьков сопровождается ощущени­ем зуда, жжения, общего недомогания, боли.

Пузырьковые высыпания имеют фиксированный характер и при первичной инфекции располагаются в месте внедрения вируса, а при вторичной - в зоне иннервации того или иного нерва. Обычная локализация - кожа лица: окружность рта, особенно красная кайма губ (herpes labialis), носа (herpes nasalis), реже кожа щек, век, ушных раковин.

Распространенные герпетические поражения кожи могут возникнуть при массивной инфекции, например у борцов, ког­да при тесном контакте вирус втирается в кожу. Обычная ло­кализация сыпи в этом случае - руки, туловище, лицо. Неред­ко повышается температура (до 38 °С) и имеют место другие симптомы общей интоксикации. Элементы сыпи находятся в разных стадиях развития (везикулы, пустулы, корочки).

ГЕРПЕТИФОРНАЯ ЭКЗЕМА (экзема Капоши, вакцино-формный пустулез) развивается на месте экземы, эритродермии, нейродерматита и др. хронических поражений кожи. Чаще все­го эта форма простого герпеса встречается у детей. Обычно по­сле острого начала с повышением температуры до 40 °С, озно­ба, симптомов общей интоксикации на 3-4 день на поражен­ных участках кожи появляются многочисленные, довольно крупные однокамерные пузырьки с прозрачным содержимым (иногда содержимое пузырьков носит геморрагический харак­тер), распространяющиеся постепенно на соседние здоровые участки. Затем образуются корочки, может быть шелушение ко­жи. Температура и другие симптомы общей интоксикации (сла­бость, разбитость, мышечные боли, снижение аппетита и пр.) сохраняются в течение 8-10 дней. Больных беспокоит также зуд, жжение, напряжение кожи, регионарный лимфаденит. У детей до 1 года заболевание протекает особенно тяжело и за­канчивается в 10-40% случаев летальным исходом.

К редко встречающимся (атипичным) проявлениям по­ражений кожи при простом герпесе можно отнести:

1. Зостериформную разновидность простого герпеса. Она характеризуется расположением высыпаний по ходу нервных стволов чаще в области нижних конечностей, ягодиц и лица. От опоясывающего лишая эта форма простого герпеса отлича­ется отсутствием болей, иррадиирующих по ходу нерва.

2. Геморрагическую форму с кровянистым содержанием пузырьков.

3. Геморрагически-некротическую, характеризующую об­разованием некрозов на месте высыпаний.

Язвенно-некротическая форма также относится к атипич­ным и возникает на фоне тяжелого иммунодефицита любого генеза. У больных на фоне типичных высыпаний образуются язвы, которые постепенно увеличиваясь, достигают 2-5 см в диаметре. Позже они сливаются в обширные язвенные по­верхности с неровными краями. Такие поражения сохраняют­ся в течение нескольких месяцев, а обратное развитие проис­ходит медленно (если они сохраняются более 3-х месяцев, то их относят к СПИД-маркерным заболеваниям).

К атипичным формам простого герпеса также относят эритоматозную, папулезную, зудящуюся и отечную. При них везикулы не образуются, а в месте появления рецидива воз­никают соответственно гиперемия, мелкие папулы, резкая| отечность тканей в области поражения. Частые рецидивы этой формы в одном и том же месте могут быть причиной стойко­го элефантиаза (элефантиазоподобный герпес).

Абортивная форма простого герпеса также может быть отнесена к атипичным. Она встречается преимущественно у лиц, часто контактирующих с больными (медицинские работники). Входными воротами для вирусов является кожа пальцев и ладоней. Типичные везикулы при этом отсутствуют. Болезнь сопровождается кожным зудом, чувством жжения и, нередко, болями по ходу нервов. Местные изменения характеризуются отеком и гиперемией кожи. Нередко при этом ставится диагноз "панариций".

ПОРАЖЕНИЕ СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК ПРИ ПРОСТОМ ГЕРПЕСЕ

Герпетический стоматит может быть проявлением как первичной, так и рецидивирующей герпетической инфекции. Наиболее часто эта форма встречается у детей 1-3 лет. Начинается болезнь остро с повышения температуры и общего недомогания. У детей отмечается плохой аппетит, беспокойство, нарушение сна. Через 1-2 дня на гиперемированных и отечных слизистых оболочках щек, языка, неба, десен, губ возникает множество пузырьков, которые через 2-3 дня лопаются, образуя очень болезненные эрозии, покрытые белым налетом в виде афт. Появляется интенсивное слюноотделение, болез­ненность и увеличение регионарных лимфатических узлов. Выздоровление наступает через 2-3 недели.

У 40% больных после выздоровления возможно развитие хронического рецидивирующего герпетического стоматита. Протекает он, как правило, без лихорадки и интоксикации.

Если имеет место поражение ВПГ слизистых оболочек верхних отделов дыхательных путей, то возникают острые респираторные заболевания, которые клинически не отлича­ются от ОРЗ другой этиологии. Их частота составляет 5-7% всех ОРЗ.

Генитальный герпес чаще всего протекает бессимптомно. ВПГ может персистировать у мужчин в мочеполовом тракте, а у женщин в канале шейки матки, влагалище и уретре. Лица с бессимптомным генитальным герпесом являются источниками и резервуарами инфекции.

Клинические проявления генитального герпеса наиболее ярко наблюдаются при первичном инфицировании. После ин­кубационного периода (около 7 дней) на половых органах возникает отек и гиперемия, затем появляются везикулезные высысыпания на головке и стволе полового члена, на внутренней поверхности крайней плоти, на коже мошонки; у женщин - на больших и малых половых губах, влагалище, промежности. Сыпь, как правило, обильная, пузырьки быстро лопаются, образуя эрозивные или эрозивно-язвенные поверхности. Прак­тически всегда появлению высыпаний предшествует зуд, жже­ние и болезненность слизистых.

Генитальный герпес может сопровождаться лихорадкой, увеличением лимфатаческих узлов, невралгическими болями, возможно образование обширных эрозий и отека половых органов. При орогенитальных и анагенитальных контактах мо­гут возникнуть герпетические тонзилиты, фарингиты, уретриты и проктиты.

50-75% людей после первичного инфицирования герпес принимает рецидивирующее течение. При рецидиве характер болезни будет определяться выраженностью иммунодефицита. При выраженном иммунодефиците рецидивы герпеса сопро­вождаются тяжелыми местными изменениями эрозивно-язвенного характера, распространением процесса на близлежащие участки кожи, регионарным паховым лимфаденитом. Иногда язвы сопровождаются некрозом и на их месте остаются рубцы.

В других случаях в период рецидива изменения отличают­ся от таковых при первичном герпесе отсутствием интоксика­ционного синдрома и менее обильными высыпаниями. У ряда больных могут иметь место абортивные рецидивы, проявляю­щиеся незначительной гиперемией, на фоне которой возника­ют мелкие, быстро вскрывающиеся пузырьки. Нередко все клинические проявления органичиваются только появлением чувства жжения и зуда, а также незначительным отеком и ги­перемией кожи и слизистых половых органов.

Часто рецидивирующий генитальный герпес приводит к вовлечению в патологический процесс лимфатических сосу­дов. При этом у больных возможно развитие лимфостаза, как результат, - слоновость половых органов.

Генитальный герпес представляет собой важную медицин­скую и социальную проблему. Рецидивирующий генитальный герпес нередко препятствует созданию семьи, частые рецидивы нарушают нормальную половую жизнь. Следствием дли­тельно существующего генитального герпеса могут быть неврастенические и депрессивные нарушения. У женщин ге­нитальный герпес даже при бессимптомном течении может стать причиной невынашивания беременности, заражения пло­да и новорожденного, что приводит к умственному недоразви­тию, уродствам или летальному исходу. С возбудителем генитального герпеса связано возникновение рака шейки матки.

Офтальмогерпес может быть первичным и вторичным (рецидивирующим).

Первичный герпес развивается у людей, не имеющих противовирусного иммунитета (дети от 6 месяцев до 5 лет или взрослые в возрасте от 16 до 25 лет). Первичная инфекция у детей вызывается ВПГ-1, после 16 лет - ВПГ-2. Клинически довольно часто (до 40%) отмечается сочетание кератоконъюнктивита с поражением кожи век, лица.

Более 90% герпетических поражений глаз приходится на вторичный (рецидивирующий) офтальмогерпес. Так как реци­дивы возникают на фоне циркулирующих противовирусных антител, то обычно не наблюдается распространения процесса. Чаще всего эта форма офтальмогерпеса встречается у мужчин в возрасте 20-40 лет.

Поверхностные поражения переднего отдела глаза харак­теризуются развитием конъюнктивита (фолликулярного, ка­тарального, везикулезно-язвенного), сочетанного поражения конъюнктивы и век - блефаро-конъюнктивита, каналикулита, различных кератитов (точечный, везикулезный, древовидный, географический, краевой). Возможно развитие рецидивирую­щей эрозии роговицы, а также изолированное поражение склеры в виде диффузного (нередко двухстороннего) эписклерита. При герпетическом конъюнктивите слизистая век, глазного яблока, краев век гиперемирована. Характерны умеренные светобоязнь и слезотечение. Для везикулезного и древовидного кератита характерно развитие умеренно выраженных светобоязни, слезотечения, перикорнеальной инъ­екции, а затем невралгии (часто значительной) по ходу I и II ветвей тройничного нерва.

Глубокие поражения переднего отдела глаза характеризу­ются распространением инфильтрации в строму роговицы и протекают в виде стромального кератита (с изъязвлением и без). Большинство из них сочетаются с воспалением переднего отдела сосудистого тракта, то есть являются кератоиридо-циклитами.

Рецидивирующие герпетические поражения внутренних оболочек глаза проявляются в виде изолированного иридоциклита, хориоидита, периваскулита и флеботромбоза сетчатки, неврита зрительного нерва.

Висцеральные формы простого герпеса проявляются во­влечением в патологический процесс нервной системы, лег­ких, печени и других внутренних органов.

Поражение центральной нервной системы протекает чаще всего в виде серозного менингита и острого энцефалита. По характеру клинических проявлений герпетические менингиты и энцефалиты трудно отличить от аналогичных заболеваний, вызываемых другими возбудителями. По данным литературы герпетическую природу имеют около 10% всех энцефалитов, 0,6% асептических менингитов и 20% менингоэнцефалитов.

Поражение периферической нервной системы протекает по типу невритов и полирадикулоневритов.

Герпетические пневмонии возникают в результате актива­ции герпетической инфекции под влиянием различных имму-нодепрессантов. При этом практически всегда имеет место на­слоение вторичной бактериальной инфекции.

Герпетический гепатит представляет собой одно из прояв­лений генерализованной инфекии. С возможностью изо­лированного поражения печени ВПГ у взрослых согласны не все ученые. Герпетический гепатит характеризуется острым началом, выраженной интоксикацией, коротким преджелтушным периодом, быстрым развитием желтухи и тяжелым тече­нием с развитием острой печеночной энцефалопатии. Исход болезни, как правило, летальный.

Проблема заболеваний, вызванных вирусами простого герпеса (ВПГ) чрезвычайно актуальна. Инфицированность взрослого населения впг приближается к 100%. Так в 15 летнем возрасте антитела к ВПГ-1 выявляются у 75%, к ВПГ-2 у 11%. У взрослых эти показатели составляют 99% и 73%.

По статистике ВОЗ, среди вирусных заболеваний человека, уверенно занимает 2-ое место после гриппа. смертность от заболеваний вызванных ВПГ, в структуре смертности от вирусных болезней составляет 15,8% и также уступает лишь гриппу (35%).

of your page -->

Клиническая картина типичных герпетических поражений кожи и слизистых известна врачу любой специальности. Однако в ряде случаев диагностика герпесвирусных заболеваний затруднена.

Это связано с преобладанием хронических, нетипично протекающих форм заболевания. Так 20% больных с ВПГ-2 не имеют симптомов вообще, а в 60% случаев проявление имеют атипичные проявления. Большую проблему составляет диагностика инфекции, вызванной ВПГ, у лиц с иммунодефицитами различного происхождения (ВИЧ-инфекция, пациенты с онкологической патологией, больные получающие химиотерапию, пациенты после трансплантации).

У таких больных изменения со стороны кожи носят нетипичный характер, часто возникают поражения внутренних органов, без кожных проявлений. Особняком стоит проблема ВПГ у беременных. Так у женщин, у которых определяются антитела к ВПГ-2 угроза прерывания беременности, невынашивание беременности, многоводие встречается в 5–10 раз чаще, чем у серонегативных беременных.

Кроме того, при первичном заражении ВПГ-2 перед родами риск заражения ребенка составляет до 75%, что приводит к рождению ребенка с врожденной герпетической инфекцией, имеющей тяжелое течение, без специфической терапии, приводящей часто к летальному исходу.

1. Вирусологический метод

2. Иммунофлюоресцентный метод

Основан на определении антигенов ВПГ в биологическом материале, обработанном предварительно специфическими сыворотками, дающим специфическое свечение при микроскопии. Специфичность данного метода составляет 90%, чувствительность 55–75%.

3. Цитоморфологический метод

Заключается в проведении световой микроскопии специально окрашенных мазков их биологического материала. При герпетической инфекции выявляют характерные гигантские клетки (клетки Тцанка) и внутриядерные включения. Метод дешевый и быстрый, но обладает низкой (60%) чувствительностью.

4. Серологический метод

Обнаружение Ig M к ВПГ, как правило, свидетельствует об остром заражении, либо о реактивации хронической инфекции, однако Ig M к ВПГ могут определяться короткий промежуток времени, либо циркулировать в крови 1–3 месяца и более, что затрудняет интерпретацию этого показателя. IgG к ВПГ определяются в крови при второй половине инфекционного процесса при острой инфекции, при латентной, при обострении хронической герпетической инфекции.

Причем титр (концентрация) антител не всегда коррелирует с выраженностью клинических проявлений. Латентное течение герпетической инфекции может сопровождаться высоким титром IgG к ВПГ, так и выраженные клинические проявления могут сопровождаться низким титром антител. Может быть полезным двукратное исследование IgG к ВПГ с интервалом в 7–10 дней — 4-кратное и более нарастание титра антител свидетельствует об остром процессе.

5. ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Метод основан на определении ДНК ВПГ, полученным в процессе многократного копирования (амплификации) участка вирусного генома. Обладает очень высокой чувствительностью (98%) и специфичностью (94%). Но высокая точность данного метода определяет его недостатки. Возможны ложноположительные результаты, связанные с контаминацией (загрязнением) лабораторного оборудования от предыдущих постановок. Кроме того обнаружение ДНК возбудителя латентной инфекции в биоматериале не позволяет определить остроту процесса. Ложноотрицательные результаты мотельные результаты мо гут быть связаны с неправильным забором, хранением и транспортировкои материала на исследование, либо с использованием некачественных реактивов.

Таким образом, несмотря на большое количество лабораторных методов, диагностика инфекций, вызванных ВПГ является сложной задачей и должна проводиться с использованием нескольких методов, с учетом клинической картины заболевания.

Генитальный герпес (Клинические рекомендации)

Генитальный герпес – наиболее распространенное эрозивно-язвенное заболевание гениталий.

… согласно данным серологического обследования около 90% всего населения планеты инфицировано одним или несколькими серотипами вируса простого герпеса.

Введение. Герпесвирусы широко распространены в человеческой популяции, они пантропны, способны поражать практически все органы и системы организма хозяина, вызывая латентную, острую и хроническую формы инфекции. В настоящее время известно 8 антигенных серотипов вирусов герпеса: вирусы простого герпеса 1-го и 2-го типа, ветряной оспы (опоясывающего герпеса), цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Барра, вирусы герпеса человека 6, 7 и 8-го типов.

(1) Вирус простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1) ассоциирован с лабиальным герпесом, герпесом кожи и слизистых оболочек, офтальмогерпесом, пневмонитами, генитальным герпесом, герпетическим энцефалитом.

(2) Вирус простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2) ассоциирован с генитальным герпесом и неонатальным герпесом.

(3) Вирус ветряной оспы (опоясывающего герпеса, ВВО-ОГ) ассоциирован с ветряной оспой и опоясывающим герпесом.

(4) Вирус Эпштейна-Барра (ВЭБ) ассоциирован с назофарингиальной карциномой, инфекционным мононуклеозом, лимфомой Беркитта, волосатой лейкоплакией.

(5) Цитомегаловирус (ЦМВ) ассоциирован с врожденными поражениями ЦНС, ретинопатиями, пневмонитами, гепатитами, сиаладенитами.

(6) Вирус герпеса человека 6-го и 7-го типов (ВГЧ-6:ВГЧ-6А, ВГЧ6Б; ВГЧ-7) - лимфотропные вирусы; предполагают этиологическую связь ВГЧ-6Б с внезапной экзантемой, а ВГЧ-7 с синдромом хронической усталости.

(7) Вирус герпеса человека 8-го типа (ВГЧ-8) ассоциирован с саркомой Капоши у ВИЧ-серонегативных людей, саркомой Капоши, ассоциированной с ВИЧ-инфекцией и СПИДом, а также лимфопролиферативными заболеваниями: многоочаговое заболевание Кастлемана, лимфомой первичного экссудата;

ПЦР-диагностика ВПГ-1,2. (1) В острой фазе вирусы простого герпеса паразитируют в эпителиальных клетках слизистых оболочек и кожи, вызывают типичные (и атипичные) клинические проявления. Среди атипичных возможны бессимптомные формы. При первичной инфекции ВПГ 1, 2 обнаруживается методом ПЦР в пузырьках (или в трещинах при атипичном течении) максимум в течение 7 дней после первых проявлений. У носителей во время рецидивов – до 4-х дней. При сниженном иммунитете – до 21 дня.
Обнаружение вирусов методом ПЦР в пробе соскоба эпителия свидетельствует об острой фазе инфекции. (2) Во время латентной фазы (ремиссии) вирусы простого герпеса персистируют в нервных ганглиях и отсутствуют в эпителиальных клетках, а значит, не выявляются методом ПЦР в соскобе. Клинических проявлений инфекции при этом нет или наблюдаются остаточные проявления (пузырьки могут заселяться неспецифической микрофлорой).

Выводы: таким образом, если вирусы не обнаружили методом ПЦР в соскобе эпителия, то это означает, либо латентную фазу герпесвирусной инфекции, либо отсутствие вирусов в организме. Проверить есть ли носительство можно только с помощью метода ИФА.

ПЦР-диагностика ЦМВ. Биологическим материалом для ПЦР-исследований могут быть: кровь, ликвор, моча, слюна, мокрота, грудное молоко, соскобы (урогенитальные, из зева), сперма, лаваж, биоптаты, в зависимости от формы заболевания. Для беременных адекватной пробой для ПЦР-исследования является соскоб из цервикального канала (при положительном результате – угроза плоду).

ИФА-диагностика ВПГ-1, ВПГ-2 и ЦМВ. Необходимо помнить: исследование сыворотки крови методом иммуноферментного анализа (ИФА) на наличие антител к герпесвирусам поможет установить, есть ли носительство и фазу заболевания (первичный острый процесс, латенция или вторичное обострение, - рецидив).

Рецидив и реинфекция. Активация герпесвирусной инфекции у носителей (рецидивы) и реинфекция сопровождаются: (1) появлением и нарастанием титров IgG к предранним белкам вирусов (всегда), (2) нарастанием в 2-4 раза титра имеющихся поздних, высокоавидных IgG (не всегда). IgG к предранним белкам вирусов вырабатываются в ответ на самое начало развития вирусного цикла в организме человека, на неструктурные предранние белки. Они появляются на 5-7 день активации вирусной инфекции и циркулируют в крови 1-2 месяца после наступления ремиссии. Это очень специфичные антитела, поэтому при их выявлении не возникает ложноположительных результатов. IgG к предранним белкам вирусов являются однозначными маркерами активности вирусной инфекции. Они вырабатываются как при первичной острой инфекции, так и во время рецидива и реинфекции. Количество поздних IgG у носителей может варьировать в зависимости от стадии заболевания, от состояния иммунной системы пациента вообще и на момент обследования в частности. Например, при наличии иммуносупрессии, которую может вызывать длительное течение хронической вирусной инфекции, во время рецидива количество поздних IgG совсем не увеличивается, или увеличивается, но не в 4 раза, как при классическом иммунном ответе на рецидив. Поэтому количественный показатель IgG далеко не всегда обладает диагностической ценностью, даже в динамике.

Выводы. Для вирусоносителей единственный надежный тест для определения активности герпесвирусов это выявление IgG к предранним белкам вирусов (полуколичественно). Появление их в любом титре свидетельствует об активности вирусной инфекции. Увеличение титра через 1-3 недели свидетельствует о развитии рецидива, а уменьшение – о наступлении ремиссии. Выявление поздних IgG при отсутствии IgG к предранним белкам вирусов свидетельствует о спокойном носительстве, латентной фазе. Выявление IgM и низкоавидных IgG, предранних IgG при отсутствии поздних IgG, - свидетельствует о первичном инфекционном процессе. Отсутствие поздних IgG, IgM и IgG к предранним белкам герпесвирусов, то есть серонегативность в отношении данных вирусов, означает отсутствие как носительства, так и развития инфекции.

Лабораторная диагностика и интерпретация результатов определения в сыворотке крови антител классов М и G к антигенам вируса Эпштейна-Барр (ЕBV/ВЭБ). ВЭБ относится к наиболее распространенным герпесвирусам, носительство в различных регионах достигает 100%. Однако актуальной является лабораторная диагностика данного вируса при дифференциальной диагностике инфекционного мононуклеоза, а также в поисках этиологии некоторых кардиологических, онкологических и др. патологий. Острая фаза мононуклеоза характеризуется выявлением вируса Эпштейна-Барр методом ПЦР из мазка из зева. Однако наиболее точно выяснить стадию заболевания или носительство можно с помощью метода ИФА. В настоящее время различают 3 диагностически значимых антигена ЕBV – ранний (ЕА), капсидный (VСА) и ядерный (ЕВNА). Определяя антитела к данным антигенам, а именно, - (1) IgM, IgG к VCA, (2) IgG к EA и (3) IgG к EBNA, можно диагностировать стадию инфекции EBV: первичную, прошедшую (паст-инфекцию) и реактивацию. Отсутствие инфицирования - VСА: IgM (-) IgG (-); ЕА IgG (-); ЕВNА IgG (-); очень ранняя первичная инфекция - VСА: IgM (+) IgG (-); ЕА IgG (-); ЕВNА IgG (-); ранняя первичная инфекция - VСА: IgM (+) IgG (+); ЕА IgG (+); ЕВNА IgG (-); поздняя первичная инфекция - VСА: IgM (+/-) IgG (+); ЕА IgG (-/+); ЕВNА IgG (+); паст-инфекция - VСА: IgM (-) IgG (+); ЕА IgG (-); ЕВNА IgG (+); реактивация - VСА: IgM (+/-) IgG (+); ЕА IgG (+); ЕВNА IgG (+). Наиболее адекватно эти маркеры выявляются с помощью тест-систем ВСМ производства США (высокая чувствительность и воспроизводимость результатов).

Рекомендуется определение всех упомянутых серологических маркеров в комплексе, так как это повышает вероятность постановки точного диагноза и дает возможность выбора адекватной терапии. Особую трудность представляет диагностика ВЭБ-инфекции у иммуноскомпрометированных пациентов; в этом случае серологический профиль может быть сильно искажен и непоказателен. Для диагностики ВЭБ–инфекции параллельно с определением серологических маркеров целесообразно выявление ДНК возбудителя методом ПЦР в крови или другом биоматериале (мазки из зева при инфекционном мононуклеозе). Для постановки клинического диагноза необходимо сопоставлять результаты серологического тестирования с результатами других анализов, симптоматикой и анамнезом пациента.