Как выделить вирус из крови

Почти каждый человек на Земле является носителем какой-либо вирусной инфекции. Это связано с тем, что ежеминутно мы контактируем с множеством вредных микроорганизмов: вирусами, грибками, бактериями. Вирусы, которые долго паразитируют в организме, разрушительно действуют на него. Причем последствия могут быть такими, что нанесенный вред организму нельзя будет устранить.

Вирусы

Вирусы - это паразитические микроорганизмы (частички нуклеиновых кислот РНК, ДНК). Паразитизм - образ их существования. Они живут и питаются за счет организма, внутри которого существуют. Вне организма вирусы (снаружи) гибнут, им просто нечем питаться.

Когда у человека сильный иммунитет, он противостоит размножению вирусов. Но при ослабленном иммунитете вирусы активизируются. Устроившись в благоприятной для себя среде, вирусы стремительно размножаются, быстро и неограниченно.

У женщин вирусы влияют на мочеполовую систему, на этой почве возникает эрозия, воспаления слизистых, мочевых путей, а дальше - бесплодие.

Вирусы чрезвычайно опасны для беременных женщин. Они поражают плод, может случиться выкидыш или родится мертвый младенец.

Иммунитет - враг вирусов

Попав в организм, вирусы подвергаются атаке иммунитетом человека. У вирусов много разновидностей, наша иммунная защита с некоторыми из них не в состоянии бороться. Поэтому отдельные виды патогенов поселяются в организме человека и живут там, затаившись. Пробуждаются к действию они тогда, когда иммунитет ослабевает. То есть человек живет и не подозревает, что заражен вирусной инфекцией, но анализ крови на вирусы выявляет ее. Если в результате установлено наличие вирусов, немедленное и грамотное лечение полностью исцелит организм. Лучше не рисковать и следить за своим физическим состоянием, в этом человеку как раз и помогают анализы на вирусы. Никогда не стоит забывать о том, что человек, у которого есть вирусная инфекция, пусть и не в острой стадии, является ее переносчиком, то есть представляет опасность для окружающих.

Самые опасные вирусы

В организме человека могут присутствовать вирусы, против которых бессилен иммунитет и медикаменты. Это гепатит, папилломавирус, герпес, ротавирус и самый опасный для жизни человека - СПИД. Они долгое время могут ничем себя не проявлять, но от этого они не менее опасны. Обнаружить их можно, только сдав анализы на вирусы и инфекции.

Способы выявления вирусных инфекций

Материалом для анализа на вирусы являются: кровь, моча, кал, слюна, соскоб слизистой оболочки, мазок.

Выявить наличие вирусов можно разными медицинскими способами диагностики. Для этого делают анализ крови на вирусы, используют метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), метод иммуноферментного анализа (ИФА). Способы исследования ИФА и ПЦР - это высокоточные современные методы исследования крови на вирусы. Такой точный результат не даст даже общий анализ крови.

ИФА - это анализ на антитела к вирусам. В ходе исследования выявляется, есть ли в крови специфические антитела, этиология и стадия заболевания.

ПЦР - способ молекулярно-генетической диагностики, который выявляет, есть ли вирусы в человеке. Анализ показывает присутствие и природу вируса еще до начала болезни. ПЦР никогда не дает ошибочных результатов. Если вирусов нет, то анализ на вирусы будет отрицательным.

Старый способ выявления вирусов - это микробиологический посев (БАКпосев). Метод хоть и древний, но достаточно точный. Материалом для исследования служат соскобы из уретры, влагалища. Соскобы оставляют в питательной субстанции и наблюдают, будут ли расти (и как быстро) микроорганизмы.

Только квалифицированный врач, осмотрев пациента и выслушав его жалобы, может решить, какие анализы на вирусы необходимо сдать.

Данные, подтверждающие наличие вирусов

Общий анализ крови показывает развитие в организме болезни, если лимфоциты, моноциты, СОЭ превышают норму, а нейтрофилы и лейкоциты ниже нормы.

Иммунитет человека вырабатывает иммуноглобулины (IGM, IGA, IGG) в ответ на внедрение в него чужеродных микроорганизмов (то есть вирусов). Их присутствие в крови выявляет метод ИФА. Если сформировались иммуноглобулины, значит, точно присутствуют вирусы. Этот анализ на вирусы определяет стадию болезни и форму заражения (острая, хроническая, бессимптомная), степень продуктивности назначенного лечения. Недостаток этого вида исследования в том, что исследуется не сам вирус, а ответная реакция организма на него.

Каждый вирус имеет уникальную ДНК. По ней можно определить, что это за чужеродный микроорганизм. Это исследование производит метод ПЦР. В основе методики исследования лежит молекулярная биология. Если анализ показал наличие генного материала, принадлежащего вирусу, значит, этим вирусом заражен человек. Кроме типа вируса, подобный анализ на вирусы дает представление об их количестве, уязвимости к определенным медикаментозным препаратам. Это дает возможность подобрать эффективные методы и способы лечения. Метод ПЦР абсолютно точно выявляет все виды вирусов.

Как сдать анализы?

В любой поликлинике пациенту разъяснят, какие анализы сдают на вирусы. Сдать кровь на исследование возможно в любой больнице, где есть лаборатория. В настоящее время существуют платные медицинские диагностические учреждения, где тоже делают анализы. Здесь же выдадут и результаты, но расшифровать результаты должны врачи. Для подтверждения диагноза иногда нужны не только результаты анализов, но и другие способы диагностики.

К сдаче крови на анализ важно правильно подготовиться. В противном случае могут получиться ошибочно положительный или ошибочно отрицательный результат.

Основные правила, как подготовиться и сдать анализы на вирусы:

• Забор крови проводится утром (от 7 до 10 часов).
• Забор крови осуществляется только на голодный желудок. Перед процедурой нельзя ничего есть, пить можно только воду (чай, кофе, соки, напитки исключены).
• Не принимать лекарства в течение недели перед сдачей крови на анализ. Если принимать лекарства обязательно, то об этом надо сказать врачу, который дает направление на исследование.
• Не употреблять спиртные напитки, спиртосодержащие бальзамы, настойки за неделю до сдачи крови.
• Перед проведением анализов (примерно неделю) придерживаться диеты, не есть жирную, маринованную, копченую, жареную пищу.
• В идеале перед процедурой несколько дней не следует курить, но так как страстные курильщики этого придерживаться не будут, хотя бы не курить 2 часа перед забором крови.
• За месяц до анализа прекратить употребление оральных контрацептивов, свечей и мазей.

Очень хорошо перед сдачей крови пациенту находится в спокойном физическом и эмоциональном состоянии. Повышенная возбудимость или физические нагрузки отражаются на структуре крови.

Сама техника забора крови на анализ простая, ее берут из локтевой вены человека.

Основные показания для назначения анализов

Появление красноватой сыпи неизвестного происхождения на теле, раздражение, зуд, жжение слизистой оболочки, болезненность, дискомфорт в нижней части живота и в паху, нездоровые выделения из половых органов, плохой аппетит, постоянная усталость, потеря веса, регулярно повторяющиеся простуды - это все показания для проведения анализов.

Если на теле очень много папиллом, то надо обязательно сделать анализы на вирусы и на определение типа вируса. В некоторых случаях все может закончиться онкологическим заболеванием.

Расшифровка полученных результатов

Метод исследования ИФА строится на выявлении антигенов к разным вирусам. Новый микроорганизм, поселяющийся в человеке, получает от него ответ его иммунной системы. У каждого вида вируса свой антиген. Присутствие антигена LGG к вирусу говорит о том, что иммунитет к нему уже выработан, так как человек болел этой вирусной инфекцией раньше. Если есть антиген LGM, то вирус первый раз внедрился в организм, и идет процесс выработки иммунитета к этому вирусу. В острой фазе инфекции в крови присутствуют оба антигена.

Расшифровать результат исследования методом ПЦР может и не врач, если есть ДНК вируса, то есть и вирус. В некоторых случаях бывают и ошибки. Сам метод очень точный, ошибки могут быть возникнуть по вине медработников, которые делали забор крови.

Какие заболевания выявляют анализы?

Результаты исследований позволяют обнаружить: гепатит В, С; герпес; вирус Эпштейна-Барра; папилломавирус; вирус иммунодефицита; аденовирус; ротавирус; половые инфекции (в том числе и сифилис).

Больному вирусной инфекцией ни в коем случае нельзя заниматься самолечением. Лечение должен назначить квалифицированный врач, специалист по вирусным инфекциям. Лечение должно проходить под наблюдением этого врача.

Больной должен ограничить свои контакты с людьми, выполнять все процедуры, назначенные доктором.

Противопоказания

Сдавать анализы на вирусы противопоказано тем, кто болен половыми инфекциями, ВИЧ, гепатитами, туберкулезом, онкологией, после проведения прививок.

Сдавать анализы противопоказано женщинам во время менструального цикла. А также людям после удаления зуба - в течение 10 дней; после пирсинга, татуировки, иглоукалывания - один год; болевшим ОРВИ, ангиной, гриппом - один месяц; после родов - один год; после лактации - три месяца; после аборта - полгода.

Многие вирусы могут очень долго присутствовать в организме и циркулировать в крови, до поры до времени не вызывая никаких неприятностей. Однако это вовсе не значит, что они безопасны. Лабораторные анализы на вирусы позволяют выявить наличие последних, даже если никаких симптомов нет.

Анализы на вирусы: какие инфекции они выявляют

Для выявления вирусов лаборатории проводят исследования крови несколькими методами. Наибольшее распространение на сегодня получили ПЦР и иммуноферментный (ИФА) анализы.

Иммуноферментный анализ крови определяет наличие антител к вирусам (или антигенов к ним) в крови — иммуноглобулины (lgA, lgG, lgM) вырабатываются при заражении вирусами и являются своеобразными маркёрами инфекции.

Анализ на ДНК вируса, или ПЦР-исследование, позволяет выявить тип инфицирующего агента.

В качестве биоматериала для исследования обычно берут кровь. Анализ крови может подтвердить гепатит, герпес и вирус Эпштейна-Барра, аденовирус, различные половые инфекции (в том числе и сифилис), вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) и другие инфекции. Однако кровь не единственный биоматериал, пригодный для выявления вирусных поражений. В зависимости от заболевания и симптомов, для анализа на вирусы сдают соскоб слизистой оболочки, кал, мочу, мазок, слюну.

Как мы уже отмечали, исследование крови на вирусы можно проводить двумя разными способами. Расскажем о них подробнее.

Иммуноферментный метод анализа на вирусы позволяет установить форму болезни, вызванной вирусом (хроническая, острая или бессимптомная), а также оценить эффективность противовирусной терапии. Это один из самых распространенных и точных методов для выявления половых инфекций, в частности ВИЧ и ВПЧ, гепатита В.

Для анализа на вирусы чаще всего сдается кровь. Обязательно предупредите врача, если вы недавно проводили вакцинацию, — этот факт может отразиться на точности анализов. Рекомендуется не принимать пищу на протяжении 8-ми часов перед забором биоматериала, а также воздержаться от употребления алкоголя и от курения.

Время ожидания результатов зависит от типа вируса, на который проводится анализ, и от методики работы лаборатории. Обычно результаты готовы через 1–3 дня, но иногда приходится ждать и 2 недели.

Рассказать о том, каким образом следует трактовать результаты анализов на все виды вирусов, в рамках одной статьи невозможно. Далее мы поговорим лишь о наиболее известных заболеваниях и о часто назначаемых исследованиях.

В случае проведения анализа методом ИФА наличие IgG в крови на гепатит говорит о том, что этот вирус в организме присутствовал, но иммунная система выработала к нему антитела. Присутствие одновременно антител класса IgM и IgG говорит о заболевании в острой форме. Иммуноглобулины только класса IgM — признак первичного инфицирования.

При проведении исследования методом ПЦР определяется РНК вируса. Результаты могут быть приведены в следующем формате:

• РНК вируса не выявлена.
• РНК вируса выявлена в концентрации ниже предела количественного определения (менее15 МЕ/мл). Сомнительный результат.
• РНК вируса гепатита С выявлена (от 15 и выше 100000000 МЕ/мл).

Для выявления этого вируса гепатита чаще всего назначается ИФА. Если в крови присутствуют антитела IgG и IgM, это значит, что вирус очень активен или же заражение произошло недавно.

В случае проведения ПЦР-анализа определяется концентрация фрагментов ДНК вируса гепатита В. Пациент получает результат с одной из приведенных трактовок:

• Не обнаружено.
• Сомнительный результат (результат положительный с концентрацией ДНК вируса гепатита В на границе точности метода).
• Обнаружено.

Если говорить о трактовке ИФА, то наличие антител, обозначаемых как Anti-HSV-IgG, говорит не об иммунитете к вирусу, а о том, что вы уже были когда-то инфицированы. Этот маркёр наблюдается у большинства пациентов. Если показатель anti-HSV-IgG в пробах, взятых в динамике за 2-недельный период, заметно растет, это значит, что заражение произошло недавно. О рецидиве говорит высокий показатель IgG.

Расшифровка анализа крови на ВИЧ очень проста — если результат отрицательный, это значит, что вирус не обнаружен, если положительный — увы, вирус в крови есть. Но следует знать, что сегодня даже самые надежные методы точны лишь на 98–99%, то есть всегда остается шанс, что результат будет, например, ложноположительным.

При анализе на аденовирус, вызывающий респираторные заболевания, применяется в основном ИФА. В ходе анализа подсчитываются IgG-антитела. Если показатель менее 0,8 условных единиц — результат отрицательный, более 0,8 — положительный.

Не пре­не­бре­гай­те про­фи­лак­ти­чес­ки­ми ана­ли­за­ми на ви­ру­сы. Ран­нее вы­яв­ле­ние ин­фек­ции по­зво­ля­ет от­сро­чить или по­да­вить раз­ви­тие за­бо­ле­ва­ния. В слу­чае же бе­ре­мен­нос­ти сда­ча био­ма­те­ри­а­ла на ана­лиз с целью вы­яв­ле­ния ви­рус­ных ин­фек­ций яв­ля­ет­ся обя­за­тель­ной про­це­ду­рой. По­во­дом для про­хож­де­ния ис­сле­до­ва­ния так­же мо­жет стать по­вы­шен­ный уро­вень лей­ко­ци­тов в кро­ви, сдвиг лей­ко­ци­тар­ной фор­му­лы, уве­ли­че­ние ко­ли­чест­ва нейтро­фи­лов (па­лоч­ко­ядер­ных), ми­е­ло­ци­тов и ме­та­ми­е­ло­ци­тов, сни­же­ние чис­ла лим­фо­ци­тов при вы­со­кой СОЭ в ре­зуль­та­тах кли­ни­чес­ко­го ана­ли­за кро­ви.

Лабораторные исследованияпри проведении идентификации вирусов и диагностике вирусных инфекций включают следующие этапы: выделение, культивирование, индикация (выявление) и идентификация вирусов.

2.3.1 Культивирование вирусов

Вирусы не растут на искусственных питательных средах, а размножаются только внутриклеточно. Крупным достижением было предложение Р. Гудпасчура в 1932 г. использовать для культивирования вирусов куриные эмбрионы. Окончательное решение проблемы культивирования вирусов оказалось возможным лишь после того, как были разработаны основные способы культивирования клеток вне организма.

Использование куриных эмбрионов. Куриные эмбрионы – практически идеальные модели для культивирования не­которых вирусов (например, гриппа и кори). Замкнутая полость эмбриона препятствует проник­новению микроорганизмов извне, а также развитию спонтанных вирусных инфекций. Эмбрионы применяют для первичного выделения вирусов из патологического материала; для пассирова­ния и сохранения их, а также для получения необходимых количеств вируса. Некоторые возбу­дители (например, герпесвирусы) вызывают характерные изменения (по ним можно распозна­вать заболевание).

Для заражения обычно используют куриные эмбрионы 7–12-дневного возраста. Перед заражением определяют жизнеспособность эмбриона путем овоскопирования (просматривают в проходящем свете). Живые эмбрионы при овоскопировании проявляют двигательную активность, хорошо виден сосудистый рисунок. Простым карандашом очерчивают границы воздушной камеры.

Куриные эмбрионы заражают вируссодержащим материалом в асептических условиях стерильными инструментами, предварительно обработав скорлупу над воздушным пространством йодом и спиртом. Заражение проводят на хорион-аллантоисную оболочку, в амниотическую или аллантоисную полость, либо в желточный мешок (рисунок 29). Выбор метода заражения зависит от биологических свойств вируса.

Рисунок 29 – Схематическое изобра­жение развивающегося куриного эмбриона

Культура клеток. Вначале был использован метод переживающих тканей. Он заключался в том, что в колбу, содержащую питательную среду, вносили кусочек ткани. Клетки некоторых тканей в таких условиях могут пережи­вать (но не размножаться) до 30 дней, а в них могут размножаться вирусы. Однако этот способ давал очень небольшой выход вирусов. Необходимо было разработать условия, при которых клетки ткани могли бы свободно размножаться.

Для получения культур клеток необхо­димо было решить четыре главных задачи:

– получить в необходимом количестве свободные (т. е. изолированные друг от друга) клетки;

– создать такие питательные среды и условия, в которых клетки могли бы активно размножаться;

– обеспечить условия, при которых в культурах клеток не могли бы размножаться бактерии;

– определить методы, с помощью которых можно было бы распознавать рост вируса в культуре клеток и идентифицировать его.

Для выделения изолированных (разобщенных), но жизнеспособных клеток из разрушенных тканей, стали использовать обработку их слабым раствором трипсина, разрушающего межкле­точные мостики. Для культивирования клеток были предложены различные среды, содержащие все необходимые для размножения клеток питательные вещества (аминокислоты, основания, витамины и другие), минеральные соли, имеющие оптимальную рН и т. д. К питательным средам добавляли индикатор, по изменению цвета которого можно было судить о метаболизме клеток и их размноже­нии. Было установлено, что в качестве основы, на которой клетки размножаются и образуют монослой, может быть использовано хорошо обработанное стекло пробирок и колб. Для подавления возможного роста бактерий вируссодержащий материал перед посевом его в культуры клеток стали обраба­тывать антибиотиками.

В 1949 г. Дж. Эндерс, Т. Веллер и Ф. Роббинс показали, что вирус полиомиелита хорошо размножается в первично-трипсинизированных культурах клеток, полученных из почек обезьян. Основной недостаток первично-трипсинизированных клеток заключается в том, что после нескольких пересевов они перестают размножаться. Поэтому предпочтением стали пользоваться культуры таких клеток, которые способны размножаться in vitro бесконечно долго. Такие перевиваемые культуры клеток (клеточные линии характеризуются бессмертием и гетероплоидным кариотипом) получают из опухолевых тканей (HeLa получена из карциномы шейки матки, НЕр-2 – из карциномы гортани; Детройт-6 – из метастаза рака легкого в костный мозг; RН – из опухоли почки человека) или из мутантных клеток с полиплоидным набором хромосом. Однако опухолевые клетки нельзя применять для получения вакцин. Для этих целей используют только культуры таких клеток, которые не содержат никаких контаминантных вирусов и не обладают злокачественностью. Лучше всего этим требованиям отвечают культуры диплоидных клеток.

Полуперевиваемые (диплоидные) культуры клеток – клетки одного генотипа, способные in vitro выдерживать 50–100 пассажей, сохраняя при этом свой исходный диплоидный набор хромосом. Диплоидные линии фибробластов эмбриона человека используются как для диагностики вирусных инфекций, так и при производстве вирусных вакцин. Как оказалось, вирусы могут размножаться не только в культурах клеток, образующих монослой на стекле пробирок, но и в суспензиях живых клеток.

Для обеспечения жизнедеятельности культивируемых клеток необходимы питательные среды. По назначению они делятся на ростовые и поддерживающие. В ростовых питательных средах должно содержаться больше питательных веществ, обеспечивающих активное размножение клеток и формирование монослоя. Поддерживающие среды обеспечивают переживание клеток в уже сформированном монослое в период размножения в них вирусов.

2.3.2 Выделение вирусов

Выделение вирусов в культурах клеток. При выделении вирусов из различных инфекционных материалов (кровь, моча, слизистые отделяемые, смывы из органов) применяют культуры клеток, обладающих наибольшей чувствительностью к предполагаемому вирусу. Для заражения используют культуры в пробирках с хорошо развитым монослоем клеток. Перед заражением клеток питательную среду удаляют и в каждую пробирку вносят по 0,1–0,2 мл взвеси исследуемого материала, предварительно обработанного антибиотиками для уничтожения бактерий и грибов. После 30-60 мин контакта вируса с монослоем клеток удаляют избыток материала, в культуру вносят поддерживающую среду и пробы оставляют в термостате до выявления признаков размножения вируса.

Выделение вирусов на лабораторных животных. При невозможности выделить и идентифицировать вирус стандартными методами in vitro инфекционный материал вводят чувствительным к возбудителю животным, и после развития типичного инфекционного процесса проводят повторное заражение чувствительных клеточных культур. Наиболее часто используют мышей, кроликов и обезьян; для выделения некоторых вирусов (например, вирусов Коксаки) заражают мышат-сосунков. Вследствие дороговизны и сложности содержания лабораторных животных, практически повсеместно их вытеснили кле­точные культуры. Тем не менее животные модели активно используют для изучения особенно­стей патогенеза и формирования иммунных реакций при вирусных инфекциях.

Таким образом, для выделения чистых культур вирусов в лабораторных условиях в настоящее время используются следующие живые объекты (биологические модели): 1) культура клеток (тканей, органов); 2) куриные эмбрионы; 3) лабораторные животные.

2.3.3 Индикация вирусов

Индикация вирусов в культурах клеток. Индикатором наличия вируса в зараженных культурах клеток может служить:

1) развитие специфической дегенерации клеток – цитопатическое действие вируса (ЦПД), имеющее три основных типа: крупно- или мелкоклеточная дегенерация; образование многоядерных гигантских клеток (симпластов); развитие очагов клеточной пролиферации, состоящих из нескольких слоев клеток (гроздевидная дегенерация клеток).

Различают два механизма гибели клеток, вызываемой вирусами, – некроз и апоптоз. Некроз происходит из-за необратимых нарушений целостности клеточных мембран, апоптоз – вследствие фрагментации ядерной ДНК под действием клеточной эндонуклеазы.

Цитопатические эффектыоценивают при микроскопии клеточных культур. По степени поражения клеток выделяют вирусы с высокой или умеренной цитопатогенностью:

2) обнаружение внутриклеточных включений, располагающихся в цитоплазме и/или в ядрах пораженных клеток;

3) положительная реакция гемагглютинации (РГА) или гемадсорбции (РГАдс). Некоторые вирусы, в частности, вирус гриппа, обладают особыми рецепто­рами (гемагглютининами), с помощью которых они адсорбируются на эритроцитах и вызывают их склеивание (гемагглютинацию). Такие вирусы легко обнаруживаются с помощью реакции гемагглютинации или гемадсорбции (эритроциты адсорбируются на инфицированных вирусами клетках куль­туры тканей);

4) феномен бляшкообразования. Широкое распространение получил предложенный в 1952 г. Р. Дюльбекко метод бляшек (негативных колоний), позволяющий производить количественное определение вирусов. Для выделения вирусов монослой клеток после удаления питательной среды заражают вируссодержащим материалом и покрывают слоем агара, содержащего индикатор нейтральный красный. Чашки (флаконы) инкубируют при 37 °С. Через 48–96 ч выявляются пятна – бляшки. Они имеют диаметр 1–3 мм и выглядят неокрашенными на розовом фоне. Пятна возникают за счет цитопатического действия вируса;

5) цветная реакция Солка. О росте вирусов в клетках можно судить с помощью индикатора, добавляемого к питательной среде. Если клетки активно осуществляют метаболизм, рН среды сдвигается в кислую сторону, и среда окрашивается в желтый цвет. В случае размножения вируса клетки погибают, рН среды мало меняется, и она сохраняет первоначальный (малиновый) цвет или (при нейтральной рН) приобретает оранжевый;

6) реакция интерференции (используется при отсутствии ЦПД, гемагглютинации и гемадсорбции): исследуемая культура повторно заражается вирусом, вызывающим ЦПД. В положительном случае ЦПД будет отсутствовать (реакция интерференции положительна). Если в исследуемом материале вируса не было, наблюдается ЦПД.

Кроме того, для обнаружения вируса в культурах клеток могут быть использованы различные серологические реакции.

Индикация вирусов на лабораторных животных. Индикация вируса основана на обнаружении у животных признаков инфекционного заболевания, регистрации их гибели, изучении характера патоморфологических и патогистологических изменений в тканях и органах, выявлении положительной реакции гемагглютинации.

2.3.4 Методы идентификации вирусов

Определение типа вируса (его идентификация) основано на нейтрализации биологической активно­сти вируса с помощью типоспецифических сывороток. Конечный результат ее может быть установлен на основании следующих признаков:

1) нейтрализация цитопатического действия: в культуральную среду, содержащую изучаемый вирус, вносят коммерческую сыворотку (например, к вирусу краснухи при подозрении на неё), инкубируют и заражают вторую культуру; через 1–2 дня в неё вносят известный цитопатогенный вирус. При наличии цитопатогенного эффекта делают вывод о том, что первая культура была заражена вирусом, соответствовавшим антителам примененной сыворотки;

2) нейтрализация реакции гемадсорбции;

3) изменение проявления цветной пробы;

4) задержка (торможение) реакции гемагглютинации: смешивают культуральную среду, со­держащую возбудитель, с известной коммерческой антисывороткой и вносят в культуру клеток. После инкубации определяют способность культуры к гемагглютинации и при её отсутствии делают заключение о несоответствии вируса антисыворотке.

5) нейтрализация в опытах на животных.

Таким образом РН (реакция нейтрализации) основана на подавлении соответствующей реакции, феномена, развития инфекционного процесса после внесения в культуру или введения в организм животного смеси вируса со специ­фичными AT, содержащимися в диагностической сыворотке.

Вопросы для самоконтроля

1 Назовите основные принципы классификации вирусов.

2 Приведите русские и латинские названия основных семейств вирусов человека и животных.

3 Назовите типовых представителей основных семейств вирусов и заболевания, вызываемые ими.

4 Каковы особенности морфологии и ультраструктуры вирусов человека и животных (основных семейств)?

5 Назовите РНК-геномные и ДНК-геномные фитовирусы.

6 Какие этапы включают в себя лабораторные исследования при идентификации вирусов и диагностике вирусных инфекций?

7 Какие биологические модели используются для выделения и культивирования вирусов человека и животных?

8 Как происходит заражение куриных эмбрионов в лабораторных условиях?

9 Какие методы получения культуры клеток вы знаете?

10 Как проводят идентификацию вирусов в курином эмбрионе и на лабораторных животных?

11 Какие существуют методы индикации вирусов на культуре клеток?

12 В чем заключается назначение и сущность реакций нейтрализации вирусов?

13 Назовите способы постановки реакций нейтрализации вирусов.

Все новости

Нашли кого бояться: 8 вирусов, которые живучее коронавируса

Как защититься от каждого — в одной простой картинке (сохраните ее)

Чистые руки — это только часть защиты себя от вирусов

Фото: Артем Устюжанин / E1.RU

Коронавирус научил весь мир постоянно мыть руки. Ученые уже выяснили, что на разных поверхностях вирус может оставаться от нескольких часов до нескольких дней. Например, в воздухе COVID-19 держится до трех часов, зато на изделиях из пластика и нержавеющей стали — до 3–4 дней.

Впрочем, остальные вирусы не перешли в режим ожидания. Мы решили напомнить о них, а также о том, как себя защитить. Хорошая новость: мытье рук помогает и тут.

Некоторые вирусы живучее коронавируса, да и встречаются почаще

Фото: Евгения Бикунова / Сеть городских порталов

Ежегодно от заражения вирусом бешенства в мире умирают около . Опасен тем, что практически сразу оказывает влияние на организм и мозг. Переносчики — животные.

Как передается: укус бешеного животного, попадание слюны на рану.

Сколько живет: на поверхности земли при температуре от +2 до до .

Как защититься: прививка для питомцев. Если контакт с диким животным произошел у человека, нужно немедленно промыть рану и обратиться к врачу. Если прививка не сделана в первые , болезнь, скорее всего, приведет к летальному исходу.

Руки надо мыть чаще и для того, чтобы не подхватить ротавирусную инфекцию. Она вызывает тошноту, несварение желудка и все те неприятные симптомы, которые в итоге приводят в инфекционку.

Как передается: через пищу (немытые фрукты и овощи), воду (плохая непитьевая вода), контактно-бытовой (немытые руки, предметы обихода, посуда и т. д.).

Сколько живет: от нескольких часов до нескольких суток. Зависит от поверхности, влажности, температуры воздуха.

Как защититься: мыть руки, обрабатывать пищу, пить чистую воду, при купании в водоемах — не глотать воду.

До сих пор корь считается самой заразной в мире инфекцией. Подвержены ей в большей степени дети и взрослые, не прошедшие вакцинацию. В юном возрасте болезнь переносится легче.

Как передается: через контакт с заболевшим.

Сколько живет: в воздухе и на поверхностях остаётся несколько недель при температуре от +15 до . При комнатной температуре от до , при этом вирус чувствителен к солнечному свету.

Как защититься: вакцинация.

Несколько раз в год города объявляют пиковые периоды и карантины по гриппу — а все потому, что он очень популярен и заразиться им легко. Люди знают, как лечить грипп, и понимают, что игнорирование болезни может привести к смерти. К слову, смертность от него не выше, чем от коронавируса, как любят говорить скептики. Например, в 2018 году в России от гриппа скончалось — а от коронавируса всего за полтора месяца уже по всей стране.

Как передается: от человека к человеку воздушно-капельным путем.

Сколько живет: до . Погибает при температуре свыше , чувствителен ко всем дезинфицирующим средствам.

Как защититься: не контактировать с чихающими/кашляющими, мыть руки после улицы и посещения общественных мест, пить больше воды, витамина C. В период активного распространения гриппа — смазывать нос оксолиновой мазью. Если появились симптомы (температура, заложенность носа, кашель) — не заниматься самолечением, а обращаться к врачу.

Ветрянка для многих — этап детства. Ее приносят из детского сада, школы, а теперь и с ветряночных вечеринок, которые устраивают мамы для заражения детей. Взрослые переносят вирус сложнее, но и с детьми нужно быть осторожнее.

Как передается: воздушно-капельным путем, при контакте с заболевшим. Вирус не остается на поверхности, подвержен солнечному свету, а также легко выветривается из помещения.

Сколько живет: вне организма .

Как защититься: вакцинация. Больного необходимо изолировать до его полного выздоровления.

Не самая распространенная болезнь. В большей степени ей подвержены дети и взрослые, которые с ними взаимодействуют, — родители, воспитатели, врачи.

Как передается: от заболевшего человека, при чиханье или кашле. Также от матери к ребенку через плацентную кровь.

Сколько живет: при комнатной температуре остаётся в воздухе несколько часов. Быстро погибает под воздействием ультрафиолета, обычных дезинфицирующих средств.

Как защититься: вакцинация.

Вирусный гепатит — это воспаление ткани печени. Самыми распространенными возбудителями гепатита в мире являются вирусы гепатита, но причиной могут также стать другие инфекции, токсичные вещества (например, алкоголь и некоторые наркотики) и аутоиммунные заболевания.

Как передается: через биологические жидкости (кровь, слюна, моча и так далее), повреждение кожи (через нестерильную иглу), при родах от матери к ребенку, при использовании одного и того же предмета личной гигиены. Гепатит С — через переливание крови.

Сколько живет: гепатит В сохраняется до , выдерживает кипячение, сухой жар и этиловый спирт. Вирус гепатита С живет вне организма до полутора месяцев.

Как защититься: предохраняться при половых контактах, использовать стерильные инструменты на маникюре, пирсинге, татуировке. От гепатита В есть вакцина, от гепатита С вакцины нет.

Как передается: незащищенные половые контакты, от матери ребенку во время беременности, родов или кормлении грудью, через кровь, поврежденные кожу или слизистые. Не передается при поцелуе, общении, рукопожатиях, при пользовании одной посудой или одеждой.

Сколько живет: в воздухе вирус живет всего несколько минут, но в крови, оставшейся на предметах, может жить до .

Как защититься: проверенный половой партнер или контрацепция, индивидуальные предметы личной гигиены, стерильные инструменты (в тату- и пирсинг-салонах), регулярная проверка на ВИЧ.