Хеликс анализ на вирус герпеса

Авидность антител IgG к вирусу простого герпеса I и II типов – общая стабильность связывания антител с антигенами вируса, которая характеризуется низкоавидными антителами IgG в первые недели и месяцы после первичного инфицирования, их постепенным исчезновением из крови и заменой на высокоавидные антитела IgG, что позволяет благодаря определению индекса авидности отличить первичную инфекцию от рецидива.

Данный анализ используется для подтверждения или исключения недавнего первичного инфицирования вирусом простого герпеса I или II типа, дифференциальной диагностики первичного инфицирования герпес-вирусной инфекцией и реактивации хронической или латентной инфекции, оценки риска передачи герпетической инфекции плоду или новорождённому и развития связанным с вирусом осложнений.

Назначается при выявлении положительных и сомнительных результатов определения IgG- и IgM-антител к вирусу простого герпеса, при обследовании беременных с подозрением на первичное инфицирование герпес-вирусом.

Какие тесты входят в данный комплекс:

Herpes Simplex Virus 1/2, IgG
Определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2

Авидность, антитела класса G, ВПГ-1, ВПГ-2, герпес-вирус человека, тип 2, герпес-вирус человека, тип 1.

Синонимы английские

Нerpes simplex virus type 1 (HSV-1); Нerpes simplex virus type 2 (HSV-2), HSV avidity antibodies (IgG).

Хемилюминесцентный иммуноферментный анализ - Herpes Simplex Virus 1/2, IgG;

иммуноферментный анализ - определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Герпетическая инфекция (ГИ) может формировать тяжелую патологию у детей и взрослых, особенно у иммунодефицитных лиц. Наибольшую опасность это заболевание представляет для беременных женщин, у которых в результате первичной инфекции может произойти самопроизвольный выкидыш либо родиться ребенок с тяжелыми пороками развития. Важной задачей для врача является определение сроков инфицирования беременной. Кроме того, определение формы герпетической инфекции (первичная, рецидивирующая) важно с точки зрения выбора тактики лечения. Серологические тесты, в которых у обследуемых лиц определяют наличие антител к вирусу простого герпеса (ВПГ), позволяют выявлять в крови первично инфицированного ВПГ человека специфические иммуноглобулины класса М (ВПГ- Ig M) через 4-6 дней, иммуноглобулины класса G (ВПГ- Ig G) через 10-14 дней с момента клинических проявлений заболевания. Продукция I g M достигает максимального значения на 15-20-е сутки. IgM сохраняются в организме человека недолго (1-2 месяца), а IgG – всю жизнь на высоком уровне. Это обусловлено тем, что ВПГ относится к возбудителям, которые могут персистировать в организме человека неограниченно долго (пожизненно) в латентной форме. Рецидивирующий герпес обычно протекает на фоне высокой концентрации IgG, что свидетельствует о постоянной антигенной стимуляции организма больного. Однако следует иметь в виду, что далеко не всегда высокие титры коррелируют с активностью инфекционного процесса. Появление IgM у таких больных говорит об обострении болезни. IgM к ВПГ могут образовываться как при первичном инфицировании, так и при реинфекции и при реактивации вируса. Таким образом, выявление специфических IgM не является надежным и достоверным доказательством первичной герпетической инфекции. Кроме того, отсутствие IgM и/или динамики титров специфических IgG могут быть обусловлены поздним сроком взятия крови с момента инфицирования или неадекватным иммунным ответом, связанным с нарушениями иммунной системы.

Данное исследование позволяет определить антитела IgG к 1-му и 2-му типу вируса простого герпеса в сыворотке крови. Антитела IgG к вирусу простого герпеса 1-го или 2-го типа обнаруживают у 80-90 % взрослых людей, поэтому однократное их определение не имеет клинического значения. Важно наблюдать за динамикой изменения их уровня. При острой инфекции или реактивации вируса выявляется нарастание уровня антител IgG. Антитела IgG могут циркулировать пожизненно. 4-кратное нарастание уровня антител при исследовании в парных сыворотках, взятых с интервалом 7-10 суток, свидетельствует о рецидивирующей герпетической инфекции. Определение IgG в сыворотке крови к вирусу простого герпеса 2-го типа показано всем беременным, так как установлено, что инфицированные имеют в 2-3 раза больший риск спонтанного аборта и инфицирования новорождённого по сравнению с интактными пациентами.

При инфицировании вирусом простого герпеса 1-го и/или 2-го типа концентрации антител IgG на ранних стадиях инфекции могут не обнаруживаться. Уровни антител могут быть очень низкими или необнаруживаемыми в периоды между реактивациями. В подобных ситуациях можно получить отрицательный результат даже при наличии предшествующего контакта с вирусом.

Определение авидности IgG – характеристика прочности связи специфических антител с соответствующими антигенами (определяется числом связывающих участков и силой связывания). Высокая авидность специфических IgG-антител позволяет исключить недавнее первичное инфицирование. Определение индекса авидности IgG к вирусу простого герпеса 1-го и 2-го типа позволяет уточнить сроки инфицирования и дифференцировать первичную герпетическую инфекцию от обострения хронической или латентно текущей инфекции.

Вирус простого герпеса 1-го типа. Наиболее частые клинические проявления:

орально-фациальные поражения;
афтозно-язвенный стоматит;
лабиальный герпес;
герпетический дерматит;
герпетиформная экзема;
кератит;
конъюнктивит;
энцефалит.

Вирус простого герпеса 2-го типа. Наиболее частые клинические проявления:

генитальные поражения слизистых;
менингит.

Для чего используется исследование?

Для подтверждения или исключения недавнего первичного инфицирования вирусом простого герпеса 1-го или 2-го типа;
для дифференциальной диагностики первичного инфицирования герпес-вирусной инфекцией и реактивации хронической или латентной инфекции;
для оценки риска передачи герпетической инфекции плоду или новорождённому и развития связанным с вирусом осложнений.

Когда назначается исследование?

При выявлении положительных и сомнительных результатов определения IgG- и IgM-антител к вирусу простого герпеса;
при обследовании беременных с подозрением на первичное инфицирование герпес-вирусом.

Что означают результаты?

Herpes Simplex Virus 1/2, IgG

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат означает присутствие антител IgG к HSV-1 или HSV-2, что указывает либо на активную, либо на перенесенную в прошлом герпес-вирусную инфекцию.

Отрицательный результат говорит о малой вероятности острой герпес-вирусной инфекции, а также о том, что организм до этого не контактировал с вирусом простого герпеса. Однако непосредственно после инфицирования, когда достаточное количество антител еще не выработалось, результат может оказаться ложноотрицательным. В этом случае рекомендуется дополнительный тест на IgM и повторный анализ на IgG через несколько недель.

Определение авидности IgG к Herpes simplex virus 1/2

Единицы измерения : результаты приводятся в виде индекса авидности (ИА), %.

Индекс авидности менее 50 % – низкоавидные антитела IgG к ВПГ. При первичной инфекции более 50 % антител, персистирующих в организме, обладают низкой авидностью. Если в крови при наличии IgM обнаруживаются IgG с низкой авидностью, то это свидетельствует об острой стадии первичной инфекции. Обнаружение низкоавидных IgG без присутствия IgM может иметь место при сроках инфицирования более 1 месяца. В таких случаях необходимо определять в динамике увеличение титра IgG и изменение индекса авидности.

Индекс авидности 50-60 % – пограничная авидность (серая зона). Пограничный результат указывает на позднюю первичную либо раннюю паст-инфекцию.

Индекс авидности более 60 % – высокоавидные антитела IgG к ВПГ. Наличие высокоавидных IgG при наличии IgM предполагает реактивацию герпетической инфекции либо свидетельствует о вторичном иммунном ответе в случае реинфекции ВПГ. Определение высокоавидных IgG при отсутствии IgM свидетельствует о паст-инфекции. При паст-инфекции (рецидивирующий герпес, первый эпизод непервичного герпеса) индекс авидности IgG составляет 60-100 %.

Только с наработкой высокоавидных ВПГ-IgG и стабилизацией их концентрации можно говорить об окончании острой фазы первичной герпетической инфекции.

Кто назначает исследование?

Дерматолог, инфекционист, гинеколог, уролог, педиатр.

22 Herpes Simplex Virus 1/2, IgM

10 Herpes Simplex Virus 1/2, ДНК [ реал - тайм ПЦР ]

10 Human Papillomavirus высокого канцерогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы), ДНК генотипирование [реал-тайм ПЦР]

Литература

1. Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G к вирусу простого герпеса 1 и 2 типов в сыворотке (плазме) крови. – ВектоВПГ-1,2-IgG-авидность. – Инструкция по применению. – 2014.

2. Герпетическая инфекция. А.В. Мурзич, М.А. Голубев. Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины МЗ РФ. Южно - Российский медицинский журнал . – № 3 . – 1998 .

3. Levi M., Ruden U., Wahren B. Peptide sequences of glycoprotein G-2 discriminate between Herpes simplex virus type 2 (HSV-2) and HSV-1 antibodies. // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. -1996. - Vol. 3, No.3. - P. 285-289.

5. Liljeqvist J., Trubala E. Localization of type -specific epitopes of Herpes simplex virus type 2 glycoprotein G recognized by human and mouse antibodies. // Journal of General Virology. -1998. - Vol. 79. - P. 1215-1224.

Исследование для выявления возбудителя герпес-вирусной инфекции 1-го и 2-го типа (Herpes Simplex Virus 1/2), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) вируса простого герпеса.

Вирус герпеса, вирус простого герпеса 1-го (HSV-1) и 2-го (HSV-2) типа, определение герпеса по ДНК.

Синонимы английские

Herpes Simplex Virus, Type 1 and Type 2, HSV-1 or HSV-2 IgM or IgG, HSV-1, HSV-2, HHV1, HHV2.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок из зева (ротоглотки), секрет простаты, первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, слюну, соскоб с эрозивно-язвенных элементов, соскоб урогенитальный, эякулят, венозную, капиллярную кровь, ликвор.

Общая информация об исследовании

Методом ПЦР возможно выявить даже небольшое количество вирусных частиц в биологическом материале. Он позволяет идентифицировать вирусы герпеса вне зависимости от срока заражения даже в тот период, когда антитела еще не образовались.

Наиболее распространенными являются 1-й и 2-й типы герпеса. Оба заразные и способствуют появлению на слизистых оболочках маленьких пузырьков (везикул), которые лопаются, образуя открытые ранки. При HSV-1 пузырьки появляются вокруг рта и в ротовой полости, тогда как HSV-2 обычно поражает участки в районе гениталий.

Вирус простого герпеса может передаваться через кожный контакт при наличии на коже везикул, а иногда и при отсутствии на ней видимых поражений. HSV-2 часто относят к болезням, передаваемым половым путем, однако заражение герпесом HSV-1 также может произойти, например, через оральный секс. По данным ВОЗ, от 50 % до 80 % взрослого населения развитых стран инфицировано герпесом 1-го типа и около 20 % – 2-го типа. Поскольку симптомы 2-го типа едва заметны, 90 % инфицированных им могут не подозревать о своей инфекции.

В случае первичного инфицирования на месте заражения через две недели обычно образуются болезненные пузырьки, которые, как правило, проходят через четыре недели. Они появляются на половых органах, вокруг ануса, на ягодицах либо на бедрах, после чего могут лопаться. Кроме того, возможно появление симптомов, напоминающих грипп, например озноба и болей в горле.

Однако пузырьки при герпесе образуются не всегда. Иногда проявления болезни бывают настолько слабыми, что остаются незамеченными либо ошибочно принимаются за что-то другое, например за укусы насекомых или за аллергию. После попадания инфекции в организм и ее распространения вирус герпеса находится в латентной форме. При стрессе или других заболеваниях, приводящих к снижению иммунитета, он может активизироваться заново. В большинстве случаев простой герпес не опасен для здоровья, однако он может вызывать тяжелые заболевания: неонатальный герпес (если ребенок заразится при родах от матери, инфицированной генитальным герпесом) и энцефалит. Они способны привести к серьезным неизлечимым неврологическим заболеваниям и даже к смерти. Риск заражения герпесом повышают следующие факторы:

болезни, при которых происходит подавление иммунной системы (например, ВИЧ/СПИД),
трансплантация органов.

В настоящее время излечение от герпеса не представляется возможным, тем не менее существуют противовирусные препараты, которые подавляют его распространение, а также укорачивают продолжительность острой фазы вирусной инфекции и смягчают симптомы болезни.

Для чего используется исследование?

Для выявления герпес-вирусной инфекции половых органов у мужчин и женщин и контроля за ее лечением.
Для проверки женщины на герпес до и во время беременности (если существует риск заражения).

Когда назначается исследование?

При необходимости подтвердить или опровергнуть факт инфицирования герпесом половых органов.

Определение в крови специфических антител к вирусу простого герпеса (ВПГ) 2 типа, используемое для диагностики и профилактики передачи генитального герпеса.

Антитела к вирусу простого герпеса 2 типа;

Специфические антитела к ВПГ 2.

Синонимы английские

Herpes Simplex Virus Type 2, Abs;

HSV 2, Specific serologic test.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус простого герпеса (ВПГ) – крупный ДНК-содержащий вирус, отличительной особенностью которого является тропизм к нервным клеткам и способность устанавливать латентную инфекцию. Существует два типа вируса, схожих по антигенному составу и вирулентным свойствам: ВПГ 1 типа (чаще выявляется при лабиальном герпесе) и ВПГ 2 типа (чаще выявляется при генитальном герпесе). Герпетическая инфекция чрезвычайно распространена и контагиозна: подсчитано, что 65-90 % людей планеты инфицированы ВПГ одного или двух типов. Несмотря на то что клиническая картина герпетической инфекции достаточно типична, диагноз не может быть поставлен только на основании симптомов. Основой диагностики ВПЧ являются лабораторные тесты. Для идентификации ВПГ могут быть использованы различные лабораторные анализы и их комбинации, в том числе проба Тцанка, выделение вируса в культуре клеток, методы молекулярной диагностики (ПЦР) и серологические тесты. В настоящий момент появились специфические серологические тесты, способные не только выявлять наличие ВПГ, но и определять его тип, что имеет особое значение для диагностики и профилактики передачи генитального герпеса.

Специфические серологические тесты основаны на определении в крови пациента типоспецифических антител к гликопротеину G – одному из немногих антигенов, различающихся у ВПГ 1 и 2 типа. Так, в крови пациентов, инфицированных ВПГ 1 типа, удается выявить антитела к гликопротеину G1, а у инфицированных ВПГ 2 типа – антитела к гликопротеину G2. Чувствительность теста на специфические антитела к ВПГ составляет 80-95 % (для сравнения: чувствительность культурального метода – около 75 %), специфичность – 96-100 % (сопоставима со специфичностью культурального метода и ПЦР).

Следует отметить, что специфический серологический тест на ВПГ 2 типа является дополнительным методом диагностики герпетической инфекции, однако он может быть особенно полезным в следующих ситуациях:

Для выявления генитального герпеса, протекающего бессимптомно.

Обнаружение антител к ВПГ 2 практически всегда говорит о наличии генитального герпеса (или сочетания генитального и лабиального герпеса), так как изолированный лабиальный герпес, вызванный ВПГ 2 типа, встречается крайне редко. Следует отметить, что антитела к ВПГ 2 типа могут быть обнаружены примерно у 30 % взрослых людей, при этом лишь у 10-25 % из них наблюдаются клинические признаки герпетической инфекции. Таким образом, в большинстве случае генитальный герпес протекает бессимптомно и не вызывает никакого беспокойства у инфицированного человека. С другой стороны, пациенты с бессимптомным генитальным герпесом являются источником распространения герпетической инфекции. Более того, в некоторых группах пациентов генитальный герпес, в том числе при бессимптомном течении, может представлять серьезную опасность (например, риск неонатального герпеса при заражении матери). Пациенты с положительным результатом на антитела к ВПГ 2 типа должны быть проконсультированы о необходимости защищенных половых контактов, что позволит снизить риск заражения их половых партнеров.

Для оценки прогноза генитального герпеса.

Хотя в исследованиях показано, что тяжесть обострения генитального герпеса не отличается между ВПГ 1 и 2 типа, известно, что рецидивы заболевания наблюдаются в 6-10 раз чаще при ВПГ 2.

Для оценки риска инфицирования ВПГ 2 типа при наличии ВПГ 1 типа.

Описаны случаи инфицирования ВПГ 2 типа при наличии генитального герпеса, вызванного ВПГ 1 типа. В этом случае генитальный герпес принимает течение, более характерное для ВПГ 2 типа, то есть более часто рецидивирует. Это имеет особое значение, если генитальный герпес без определения типа ВПГ был диагностирован у каждого из половых партнеров. Таким парам часто говорят, что, учитывая, что оба партнера уже инфицированы, с точки зрения профилактики генитального герпеса необходимости в использовании барьерного метода контрацепции нет. Это, однако, не совсем верно. Если партнеры инфицированы разными типами ВПГ, существует вероятность передачи ВПГ 2 типа при наличии ВПГ 1 типа и ухудшения течения генитального герпеса. Интересно, что обратная ситуация (передача ВПГ 1 типа при наличии ВПГ 2 типа) наблюдается крайне редко. Если же оба партнера инфицированы одним и тем же типом ВПГ, риск инфицирования новым типом ВПГ и его последствия клинического значения не имеют. В этом случае с точки зрения профилактики генитального герпеса необходимости в использовании барьерного метода контрацепции действительно нет.

Для подтверждения диагноза "генитальный герпес" при типичной клинической картине.

Выделение ВПГ в культуре клеток является на данный момент "золотым стандартом" диагностики генитального герпеса. Этот метод, однако, не лишен недостатков: тест не всегда дает положительный результат при первичном герпесе и обычно отрицателен при рецидиве или если мазок был выполнен через 5 и более дней от начала появления симптомов. Высокая частота ложноотрицательных результатов теста в целом негативно сказывается на то, насколько серьезно пациенты воспринимают диагноз "генитальный герпес" и следуют назначенному лечению. Без сомнения, многие пациенты убеждены, что диагноз поставлен неверно, если после клинического диагноза врача приходит отрицательный ответ подтверждающего теста на ВПГ. Этот сценарий можно избежать, используя серологические тесты. Интерпретацию серологических тестов, в том числе и на ВПГ 2, следует проводить с учетом времени, прошедшего с момента заражения. Иммуноглобулины IgG начинают вырабатываться и могут быть определены в крови не ранее чем через 4 недели от момента заражения. Наибольшее значение имеет нарастание титра антител: диагностическим считается нарастание в 4 раза и более (по сравнению с нулевым значением при первичной инфекции или по сравнению с базальным значением при рецидиве инфекции).

Для подтверждения диагноза "генитальный герпес" при атипичной клинической картине.

В некоторых случаях генитальный герпес, даже ВПГ 2 типа, протекает с минимальными симптомами и редкими рецидивами, при этом выделить ВПГ с помощью культуры клеток или определить его в реакции ПЦР сложно. В такой ситуации можно попросить пациента обратиться в клинику сразу при возникновении "свежих" высыпаний или, что более удобно, выполнить исследование на антитела к ВПГ 2 типа.

При выявлении генитального герпеса у одного из половых партнеров.

Достаточно часто при выявлении клинических признаков генитального герпеса у одного из партнеров выясняется, что второй половой партнер таких признаков не имеет и никогда генитальным герпесом не болел. Эта ситуация создает значимое психологическое напряжение в таких "дискордантных парах". В действительности "дискордантность" может быть установлена только после проведения специфического теста на ВПГ. По меньшей мере 25 % пар, дискордантных по ВПГ клинически, являются конкордантными серологически. Информация о "ВПГ-статусе" каждого из партнеров помогает вовремя предотвратить передачу инфекции.

Для диагностики генитального герпеса во время беременности.

Первичное заражение ВПГ на поздних сроках беременности крайне неблагоприятно. В исследованиях показано, что первичное заражение ВПГ 1 или 2 типа в третьем триместре беременности повышает риск развития неонатального герпеса до 30-50 %. Большая часть этих случаев вызвана тем, что беременная женщина инфицируется и является бессимптомным носителем ВПГ, в том числе и в момент родов. Исследование на антитела к ВПГ 2 типа позволяет выявить беременных женщин, находящихся в группе риска по первичному заражению ВПГ. Если женщина не имеет указаний на генитальный герпес в анамнезе, следует провести анализ на антитела к ВПГ 2. Если беременная женщина не имеет антител к ВПГ 2 типа (серонегативна), в то время как ее половой партнер серопозитивен, должны быть настоятельно рекомендованы меры профилактики первичного заражения ВПГ, то есть защищенные половые контакты или воздержание. Если беременная женщина имеет антитела к ВПГ 2 типа (серопозитивна), первичное заражение во время беременности по определению невозможно, а риск передачи вируса младенцу очень низкий (при условии исключения активной инфекции в момент родов). Тестирование ее полового партнера в этом случае не проводится. Также не проводятся дополнительные меры профилактики заражения ВПГ.

Для профилактики передачи ВПГ у ВИЧ-инфицированных пациентов.

Выделение ВПГ 2 типа происходит гораздо активнее у ВИЧ-инфицированных, чем у иммунокомпетентных людей. Таким образом, ВИЧ-инфицированные пациенты представляют особый риск передачи ВПГ-2 своим половым партнерам. Определение антител ВПГ 2 и "ВПГ-статуса" у таких пациентов и рекомендации по профилактике передачи ВПГ могут снизить риск передачи заболевания в этой группе пациентов.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и профилактики передачи инфекции ВПГ 2 типа.

Когда назначается исследование?

Всех сексуально активных пациентов;
Половых партнеров пациентов с генитальным герпесом;
Беременных женщин.

Что означают результаты?

При интерпретации результата теста следует учитывать следующие особенности:

Тест не позволяет дифференцировать первичную инфекцию от рецидива. Возникнув через некоторое время после первичного заражения, антитела к ВПГ-2 сохраняются в крови неопределенно долгое время. По этой же причине анализ не используется для оценки эффективности лечения.
Генитальный герпес может быть вызван ВПГ 1 типа, поэтому отсутствие антител к ВПГ 2 типа не противоречит диагнозу "генитальный герпес".
Тест не используется для диагностики герпеса у детей младше 14 лет из-за низкой чувствительности и специфичности в этой возрастной группе.
Тест не используется при решении задач медицинской экспертизы. В этом случае используется выделение ВПГ в культуре клеток.

Так как заражение ВПГ 2 типа практически всегда происходит половым путем, при выявлении антител к ВПГ 2 целесообразно провести дополнительные исследования на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), в том числе на сифилис и хламидиоз.

Что может влиять на результат?

Время, прошедшее с момента инфицирования;
возраст.

Тест не позволяет дифференцировать первичную инфекцию от рецидива;
Отрицательный результат теста не позволяет полностью исключить наличие генитального герпеса;
Тест не используется для диагностики герпеса у детей младше 14 лет.

21 Herpes Simplex Virus 1, IgG

113 Herpes Simplex Virus 1/2 с определением типа, ДНК [реал-тайм ПЦР]

60 Интимный - 9 тестов по моче

41 Интимный - оптимальный - анализ мазка у мужчин

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, уролог, акушер-гинеколог, врач общей практики.

Литература

Wald A, Ashley-Morrow R. Serological testing for herpes simplex virus (HSV)-1 and HSV-2 infection. Clin Infect Dis. 2002 Oct 15;35(Suppl 2):S173-82.
Sheary B, Dayan L. Herpes simplex virus serology in an asymptomatic patient. Aust Fam Physician. 2005 Dec;34(12):1043-6.
Beauman JG. Genital herpes: a review. Am Fam Physician. 2005 Oct 15;72(8):1527-34.
Sen P, Barton SE. Genital herpes and its management. BMJ. 2007 May 19;334(7602):1048-52.

Комплексное исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) цитомегаловируса, вирус Эпштейна – Барр, вируса герпеса человека 6-го типа методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Цитомегаловирус; ЦМВ; вирус Эпштейна – Барр; ЭБВ; герпес-вирус 6-го типа; ВГЧ-6; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.

Синонимы английские

Cytomegalovirus; CMV; Epstein Barr-Virus; EBV; Human Herpes Virus 6; HHV-6; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative; qRT-PCR.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Ликвор, мазок из зева (ротоглотки), слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ), венозная кровь.

Общая информация об исследовании

Цитомегаловирус, вирус Эпштейна – Барр, вирус герпеса человека 6-го типа являются представителями семейства герпес-вирусов. Они обладают высокой патогенностью для человека, имеют способность к длительному латентному существованию, к персистенции в организме человека и могут вызывать заболевания с различными клиническими проявлениями.

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.

Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме.

Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгия, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита. У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита. Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели эмбриона. При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, отмечается поражение нервной системы.

Вирус Эпштейна – Барр (EBV) относится к семейству герпес-вирусов (Herpesviridae) человека 4-й группы. Он представляет собой ДНК-содержащий лимфопролиферативный вирус. Его основной особенностью является способность реплицироваться преимущественно в В-лимфоцитах без последующего разрушения клеток.Помимо этого, вирус может инфицировать Т-лимфоциты и эпителиальные клетки.

Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса – преимущественно воздушно-капельный. У 90-95 % населения некоторых стран выявляются антитела к антигенам вируса, что свидетельствует о предшествующем инфицировании вирусом. Острая инфекция обычно протекает бессимптомно у детей с нормально функционирующей иммунной системой, клинически проявляясь в виде инфекционного мононуклеоза у 30-50 % иммунокомпетентных подростков и взрослых. При патологиях иммунной системы, иммунодефицитных состояниях, при применении иммуносупрессивных препаратов возможно развитие разнообразных патологических процессов и заболеваний, вызванных вирусом Эпштейна – Барр. У таких больных присутствие вируса ассоциировано с развитием различных лимфопролиферативных нарушений и некоторых онкологических процессов, включающих лимфому Беркитта, назофарингеальную карциному, лимфогранулематоз (болезнь Ходжкина), В-клеточную лимфому. Также вирус обнаруживается у пациентов при некоторых аутоиммунных заболеваниях, синдроме хронической усталости.

Инфекционный мононуклеоз – это острое вирусное заболевание, причиной которого является вирус Эпштейна – Барр. В основном заболевание регистрируется у детей и лиц молодого возраста до 35 лет. Инкубационный период заболевания составляет в среднем 5-14 дней, иногда до 30 дней. К клиническим проявлениям заболевания относятся лихорадка, головная боль, поражение зева, нёбных, глоточных миндалин, лимфатических узлов (лимфоаденопатия), увеличение печени и селезенки. Заболевание может протекать в легкой, средней тяжести и тяжелой форме. К осложнениям инфекционного мононуклеоза относятся отиты, синуситы, паратонзиллиты, пневмонии, гепатиты. Редко могут встречаться разрывы селезенки, острая печеночная недостаточность, острая гемолитическая анемия, тромбоцитопения, миокардит, неврит, менингит, менингоэнцефалит. В редких случаях развивается хроническая активная инфекция, при которой симптомы заболевания сохраняются на протяжении более чем 6 месяцев после первичного инфицирования вирусом Эпштейна – Барр.

Вирус герпеса человека типа 6 (ВГЧ-6) представляет собой ДНК-содержащий вирус, относящийся к семейству герпес-вирусов человека. Он способен к репликации в Т-лимфоцитах, но может быть обнаружен в В-лимфоцитах, моноцитах, эндотелиальных клетках, гепатоцитах и ряде других. Источником инфекции является больной человек или вирусоноситель. Путь передачи вируса преимущественно воздушно-капельный. Возможна передача вируса вертикальным путем от матери к плоду во время беременности, при гемотрансфузиях, во время операций и при трансплантации органов.

Вирус способен проникать в лимфатическую систему и вызывать заболевания с разнообразной клинической симптоматикой. Чаще всего патологический процесс, вызванный ВГЧ-6, развивается у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями, в частности при ВИЧ-инфекции, при применении иммуносупрессивной терапии, после трансплантации органов, при аутоиммунных заболеваниях.

В большинстве случаев инфекция, вызванная ВГЧ-6, протекает бессимптомно. К основным клиническим проявлениям относятся лихорадка, экзантема в виде эритематозных пятен или пятнисто-папулезной сыпи. В некоторых случаях возможно развитие осложнений со стороны центральной нервной системы: судороги, энцефалит, менингоэнцефалит, серозный менингит. У иммунокопрометированных лиц инфекция характеризуется тяжелым течением, генерализацией процесса. Развиваются лимфаденопатии, пневмония, гепатит, энцефалит.

Диагностика вирусной инфекции, вызванной представленными вирусами, является комплексной и основана на оценке клинических проявлений заболеваний и лабораторных методов диагностики. Современные методы лабораторной диагностики играют важную роль в диагностики герпес-вирусных инфекций, особенно на ранних стадиях инфекционного процесса. К таким методам относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Для диагностики может использоваться разнообразный биологический материал, взятый у детей, взрослых лиц, людей с патологией иммунной системы, беременных женщин. Метод позволяет определять количество молекул ДНК исследуемого вируса, что является важным в диагностике острой формы инфекции, реактивации персистентной инфекции, носительстве вируса, а также при контроле эффективности проводимой противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

Для диагностики и подтверждения инфекционного процесса, вызванного цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа.
Для диагностики острой или текущей вирусной инфекции.
Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы инфекции в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
Для дифференциальной диагностики инфекций, вызванных герпес-вирусами.
Для дифференциальной диагностики инфекций, протекающих с развитием ангин, тонзиллитов, высыпаниями, лихорадкой.

Когда назначается исследование?

При диагностике и дифференциальной диагностике инфекций, вызванных герпес-вирусами.
При клинических проявлениях заболеваний, вызванных цитомегаловирусом, вирусом Эпштейна – Барр, вирусом герпеса человека 6-го типа, или при их бессимптомном, латентном течении.
При обследовании женщин, планирующих беременность, и женщин при патологиях имеющейся беременности.
При комплексном обследовании пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями и гемобластозами.
При обследовании реципиентов органов и тканей до и после трансплантации, при проведении иммуносупрессивной терапии.
При диагностике вирус-ассоциированных заболеваний у ВИЧ-инфицированных и при других иммунодефицитных состояниях.
При контроле за эффективностью проведенного лечения противовирусными препаратами.

Что означают результаты?

ДНК CMV концентрация: не обнаружено.

ДНК EBV концентрация: не обнаружено.

ДНК HHV6 концентрация: не обнаружено.

* При положительном результате показатель выдается в копиях на миллилитр (копий/мл).

Причины положительного результата:

Инфицирование цитомегаловирусом или носительство вируса.
Инфицирование вирусом Эпштейна – Барр или носительство вируса.
Инфицирование вирусом герпеса человека 6-го типа или носительство вируса.

Причины отрицательного результата:

Отсутствие инфицирования цитомегаловирусом;
Отсутствие инфицирования вирусом Эпштейна – Барр;
Отсутствие инфицирования вирусом герпеса человека 6-го типа.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, инфекционист, аллерголог-иммунолог, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, оториноларинголог, гематолог, невропатолог, хирург, онколог.

Литература

Fauci, Braunwald, Kasper, Hauser, Longo, Jameson, Loscalzo Harrison’s principles of internal medicine, 17th edition, 2009.
Покровский В.И., Творогова М.Г., Шипулин Г.А. Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / М. : БИНОМ. – 2013.
Шувалова Е.П. Инфекционные болезни / М.: Медицина. – 2005. – 696 с.
Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
VanGuilder HD, Vrana KE, Freeman WM (2008). "Twenty-five years of quantitative PCR for gene expression analysis". Biotechniques 44: 619–626.

Читайте также: