Анализ крови антитела коронавирус



Отличные новости: тесты на антитела к коронавирусу совсем скоро (к концу апреля) появится в медицинских лабораториях по всей России!

Об этом в эфире Первого канала заявил заместитель директора Центрального института эпидемиологии Роспотребнадзора Александр Горелов.

Почему это так важно, и как поможет нам в борьбе с пандемией коронавируса? Дадим ответы на три важных вопроса.

1. Что показывает анализ на антитела к коронавирусу?

Серологические тесты на SARS-CoV-2 — это анализы крови.

В рамках теста образец помещают на центрифугу и отделяют клетки крови от плазмы и сыворотки, чтобы изучить жидкую часть. По итогам обследования можно получить четкий ответ, переболел ли человек коронавирусом в какой-то момент.

Сам коронавирус найти непросто — у него короткий период активности, и живые образцы могут не попасть в конкретную пробу, дав ложноотрицательный результат. Но антитела более стабильны и после столкновения с вирусом формируются практически у всех.

Есть и минусы — если мы находимся на ранней стадии заболевания COVID-19, иммунный ответ не успевает развернуться, и анализ ничего не покажет. У одних людей антитела появляются на четвертый день, у других — только через полтора месяца. Наиболее часто это происходит через две недели, а спустя месяц титр антител становится достаточно высоким у 95% переболевших.

Работы над этим анализом идут по всему миру, и ученые исследуют различные аспекты иммунного ответа. Тесты могут быть сфокусированы на разных типах антител.

Спайковый белок является иммуногенным — то есть, вызывающим интенсивный иммунный ответ.

Другой тип серологического теста использует технологию lateral flow. Если вы когда-нибудь делали домашний тест на беременность, то уже использовали этот метод анализа.

Образец биологической жидкости попадает на пористый материал тестовой полоски и растекается по ней. В процессе жидкость пересекает области, покрытые различными химическими веществами, связанными с антителами (или с антигенами — в зависимости от того, как работает конкретный тест).

Это простой и быстрый метод анализа, но и он имеет свои проблемы. Тест-полоски менее чувствительны, они не позволяют оценить количество антител и могут давать ложноположительный результат, если человек ранее болел старыми и безобидными штаммами коронавирусной инфекции.

2. Почему нам важно знать, у кого есть антитела к коронавирусу?

Информация о том, сколько людей переболело коронавирусом, имеет огромное значение для общественного здоровья.

Многие люди болеют коронавирусом бессимптомно или настолько легко, что даже не замечают этого, соответственно, они не попадают в общую статистику заболеваемости. Эпидемиологи могут использовать результаты серологии, чтобы определить, насколько распространены такие случаи. Серологические исследования также могут помочь узнать настоящий уровень смертности от COVID-19.

Информация об истинном уровне инфицирования позволит здравоохранению лучше прогнозировать вероятное течение пандемии и определять, какие меры действительно необходимы для борьбы с болезнью.

Ученые осторожно предполагают (а мы все — очень надеемся), что антитела к коронавирусу будут достаточно стойкими, чтобы сформировать надежный иммунитет на долгое время.

Наверное, самое важное для нас с вами: широкое тестирование на антитела к коронавирусу позволит вернуться к работе тем, кто уже переболел. Сейчас в московских больницах проходит массовое исследование медиков для того, чтобы определить, кто может работать без опасности для себя и риска для окружающих.

3. Где пройти тест на антитела к коронавирусу?

Как обещает правительство, к концу апреля анализ на антитела к коронавирусу станет доступным в серологических лабораториях по всей России.

Это не значит, что вам нужно немедленно плюнуть на карантин и отправиться на анализы: скорее всего, в первых рядах будут протестированы люди, от которых зависит функционирование наших городов. Они вынуждены ходить на работу каждый день и сталкиваться со множеством людей, поэтому с эпидемиологической точки зрения разумно удостовериться в их безопасности.

При пассивной иммунизации у человека, переболевшего коронавирусом и выздоровевшего, берется кровь. Из нее выделяется сыворотка, содержащая антитела, которую можно ввести больному, чтобы его иммунная система смогла побороть вирус.

Аналогичным способом работает передача антител от матери к ребенку во время беременности и кормления грудью, поэтому с пассивной иммунизацией уже сталкивался каждый из нас.

Лекарства, защищающего от коронавируса, еще нет, поэтому метод пассивной терапии уже используется во многих больницах по всему миру, в том числе — и в России. Обычно его применяют для спасения пациентов в особо тяжелом состоянии.


Антитела к коронавирусу – это защитные белки, их вырабатывают клетки иммунной системы для борьбы с инфекцией. С 5-6 дня от заражения в крови циркулирует иммуноглобулин М, а после 10-14 дня появляется IgG, и он предположительно может сохраняться в крови до 1-1,5 лет. При выработке коллективного иммунитета, то есть наличия IgG, у большинства населения пандемия пойдет на спад.

Анализ на антитела проводят при помощи экспресс-теста, он дает 3 варианта ответа: нет антител (человек здоров или от заражения не прошло 5 дней), есть IgМ – признак текущей болезни, есть IgМ и IgG – пациент перенес коронавирус (если не осталось симптомов) или выздоравливает. Этот способ ориентировочный и требует подтверждения другими анализами. Ведется разработка способов применения антител к коронавирусу для лечения и профилактики COVID-19.

Что означают антитела к коронавирусу

Антитела к коронавирусу SARS-CoV-2 – это часть естественной иммунной защиты организма, они вырабатываются в ответ на поступление чужеродных белков. Для противовирусного иммунитета основное значение имеют иммуноглобулины (Ig) А, G и М. Первые находятся на слизистых оболочках дыхательных путей и создают местное препятствие для проникновения вирусов в организм. Их меньше при сухости поверхностного эпителия, у курящих, имеющих хронические болезни носоглотки и бронхов.

LgМ вырабатываются клетками иммунной системы в острый период коронавирусной инфекции, в среднем их титр (концентрация в крови) начинает расти с 5-6 дня от момента заражения. LgG есть у человека, выздоровевшего от коронавируса, они появляются в среднем на 10 день и сохраняются обычно длительное время, поддерживая невосприимчивость к повторному инфицированию.

Максимальное повышение антител в крови можно ожидать только через 2 недели после появления первых симптомов (температура, кашель, слабость), поэтому первичное обследование далеко не всегда нужно брать во внимание.

Роль антител в реакциях иммунитета состоит в:

Важно не столько само образование антител, как их адекватное количество. При хорошей работе иммунной системы она способна производить достаточно защитных иммуноглобулинов, что позволяет справиться с инфекцией при минимальной симптоматике или вообще без признаков болезни. При низком иммунитете антител меньше, чем нужно, что дает возможность коронавирусу быстро распространяться по организму и вызывать обширные поражения легочной ткани. Такое течение инфекции COVID-19 характерно для пожилых и ослабленных пациентов.

Чрезмерная ответная реакция в острой стадии болезни COVID-19 не менее вредна, так как она способствует массовому притоку и разрушению клеток иммунной системы. Из них выходят вещества (цитокины), вызывающие воспаление и отек легочной ткани, что потом приводит к дыхательной недостаточности.

Пока ученым не до конца понятно, насколько долго сохранится иммунитет к коронавирусу SARS-CoV-2. Это очень важно как для понимания, можно ли им заразиться повторно, так и предварительной оценки эффективности создаваемой вакцины.

За время эпидемии зафиксированы случаи повторного развития COVID-19, но пока сложно точно установить, является ли это недостатком антител или неполным излечением от первого эпизода болезни.

Если провести массовое тестирование населения на антитела, то будет понятно, насколько сформирован коллективный иммунитет и когда можно снять карантинные ограничения. Поэтому большинство стран пытаются создать собственное производство тест-систем на антитела к коронавирусу SARS-CoV-2.

Анализ на антитела к коронавирусу: можно ли сдать по желанию

Анализ на антитела к коронавирусу можно сдать по желанию в частных лабораториях, но сам по себе он даст мало информации. Его результат должен оценить врач и сопоставить с клиническими проявлениями, показателями иммунограммы и выявлением самого вируса методом ПЦР-диагностики.

Есть два вида исследований на антитела – экспресс-тесты, когда для анализа достаточно всего 15 минут, и стандартное исследование крови методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Быстрые тесты имеют чувствительность около 89%, что считается хорошим показателем и означает, что можно найти антитела именно к SARS-CoV-2. Их достоверность также близка к 90%. Но если показан отрицательный результат – нет антител в крови, то это не может дать 100% гарантию, что человек не заражен, потому что могло пройти менее 5 дней. Поэтому для исключения заболевания нужно искать РНК коронавируса в мазках из носа, глотки (ПЦР-тест).

Если есть IgМ, то это означает, что пациент находится в острой стадии болезни COVID-19, ему обязательно необходима изоляция и наблюдение за дальнейшим течением инфекции. При выздоровлении в крови будут два класса иммуноглобулинов – G и М.

Для того чтобы обследование было максимально информативным, необходимо сдать кровь на ИФА при обращении к врачу и повторить через 2 недели. Если рост титра за это время достиг двукратного показателя, то это дает полное основание поставить диагноз коронавирусной инфекции.

Анализы на коронавирус и антитела к нему проводят лаборатории:

Большинство быстрых тестов на антитела к COVID-19 представляют собой панель с двумя окошками, в одно капают каплю крови из пальца, а в другой появляются полосы, которые означают:

  • одна – негативный результат, нет антител в крови;
  • две – острый период болезни;
  • три – при выздоровлении.

Такие экспресс-тесты могут быть проведены вне лаборатории, то есть на приеме у врача или при визите скорой помощи на дом, в аэропорту. Для того чтобы пройти полное обследование, кровь берут из вены и отправляют на иммуноферментный анализ. Он проводится путем добавления меченных антигенов, которые при соединении с антителами изменяют цвет пробы.

Для определения интенсивности образования антител (титра) сыворотка крови разводится физраствором, капли помещают в лунки с уже нанесенным реактивом. Находят максимальное разведение, при котором видна реакция. Без специальных знаний о течении коронавирусной инфекции результат анализа понять сложно, поэтому направляет на исследование врач и правильная его оценка возможна только при обращении к инфекционисту.

Правда ли, что нашли антитела к коронавирусу у россиян

Антитела к коронавирусу нашли у россиян, которые ранее не были зарегистрированы как зараженные COVID-19. Это объясняется тем, что у 80% заболевших течение инфекции легкое, а на обычную симптоматику простуды большинство просто не обратило внимание. Есть также сведения и о том, что единственным признаком болезни была общая слабость 1-3 дня без повышения температуры и кашля, у части людей возникал понос или/и тошнота. Также важно учитывать, что сами коронавирусы давно циркулируют, а в период эпидемий вирусных инфекций на них приходится около 10-15% случаев всех простудных заболеваний.

Действительно ли в Нидерландах нашли антитела к коронавирусу и создали вакцину

Данные, полученные в Голландии, подтверждают ученые из Китая (институт вирусологии Уханя и университет Фудань в Шанхае).

Есть и еще одно направление поиска антител к коронавирусу. Он взаимодействует не только с рецепторами к ангиотензину, но и с белком-мишенью для малярийного плазмодия. К нему уже есть выявленные антитела, идет исследование возможности их применения для борьбы с COVID-19.

Антитела к коронавирусу появляются на 5 день после заражения, к 10 дню в крови их находится максимальное количество. Для обнаружения проводят качественный анализ экспресс-тестами, а установить количество помогает иммуноферментная диагностика в лабораторных условиях. По количеству антител после болезни оценивают стойкость индивидуального и коллективного иммунитета.

Они реагируют на все коронавирусные инфекции, не узнавая COVID-19

17.04.2020 в 17:32, просмотров: 16453

Сегодня многие с нетерпением ждут появления тестов на антитела к COVID-19 и начала массовых исследований, которые позволят понять истинные масштабы распространения эпидемии коронавируса и количество иммунной прослойки. В некоторых странах мира такие исследования уже начались.


Однако известный немецкий вирусолог, профессор Кирстен Дростен, который руководит отделением вирусологии берлинской университетской клиники Charite, заявил, что надежды могут оказаться призрачными: есть вероятность, что тестирование будет выявлять всех, кто переносил любые коронавирусные инфекции, не связанные с COVID-19. Чтобы результаты были точными, требуются дополнительные контрольные тесты.

Сегодня профессора Кирстена Дростена, который руководит отделением вирусологии берлинской университетской клиники Charite, считают одним из самых популярных в Германии экспертов по коронавирусу. Группа ученых под его руководством занимается разработкой различных тест-систем. В одной из своих последних лекций профессор Дростен выразил серьезные сомнения по поводу эффективности тестирования на антитела к COVID-19 – по его данным, тестирование может выявлять всех, кто болел другими коронавирусными инфекциями.

Небольшой ликбез: после перенесенной вирусной инфекции в крови сначала появляются ранние антитела IgM, а через какое-то время – поздние антитела к вирусу IgG. Антитела класса IgM сохраняются от шести недель до двух месяцев (в редких случаях - до полугода), в зависимости от инфекции.

Антитела класса IgG остаются надолго, а при многих инфекционных заболеваниях всю жизнь, и их наличие к какому-то возбудителю в крови указывает на то, что человек встречался с ним. Например, при коронавирусах SARS и MERS известно, что они сохраняются в течение трех-пяти лет.

"У тех, кто болел одним из четырех обычных коронавирусов, есть не только антитела IgG, но и IGM, которые связывают родственные вирусы. Такие антитела сохраняются у человека 6-8 недель после болезни. Это может привести к ложноположительному тесту на антитела к новому коронавирусу.

Мы сделали уже 2000 тестов, и на данный момент, по моему опыту, количество ложноположительных составляет 3-4%. В холодное время года и сезон гриппа процент ложноположительных тестов будет выше. Ложные реакции могут быть вызваны антителами класса IgM или высоким титром антител класса IgG к одному из распространенных простудных коронавирусов", - заявил профессор Дростен.

В Германии, например, было проведено исследование по тестированию на антитела в общине Гангельт, где заболеваемость одна из самых высоких в стране.

Однако после получения положительных результатов там проводили дополнительное исследование - под названием "тест нейтрализации". "Вирус вместе с сывороткой пациента помещают в клеточную культуру и смотрят, продолжает ли он инфицировать клетки. Если у пациента есть антитела против вируса, то они помешают вирусу атаковать клетки. Сегодня наличие антител может быть диагностически доказано лишь в случае, если к тесту на антитела проводят дополнительный тест нейтрализации, который дает положительный результат", - отмечает немецкий вирусолог.

Эксперт лабораторной диагностики, к которому обратился "МК", на условиях анонимности подтвердил, что немецкий профессор абсолютно прав. "Если говорить о конкретной тест-системе, то очень важны ее аналитические характеристики. Например, одна из них – чувствительность.

Если она высокая, это означает, что тест определяет минимальное количество искомого вещества, чтобы дать положительный ответ. Это характеристика крайне важна для тестирования на наличие вируса в крови у инфицированных в данный момент людей, то есть, для ПЦР-диагностики, которую сейчас проводят людям с симптомами коронавируса.

Увы, изначально разработанные у нас тесты обладают невысокой чувствительностью: ученые разрабатывали их, не имея живой культуры вируса, а имея только ее ДНК. Потом нашу систему повезли в Китай, на подтверждение эффективности, китайцы сказали – все ок. Другого варианта проверить ее чувствительность не было.

Но для тестов на антитела большее значение имеет не чувствительность, а специфичность, то есть, способность выявления именно того агента, который мы ищем. Опасения немецкого вирусолога по поводу возможной низкой специфичности тех или иных тест-систем вполне обоснованы.

Существуют четыре коронавируса, которые являются сезонными и которыми мы постоянно инфицируемся в сезон ОРВИ и гриппа. По разным данным, около 20% ОРВИ связаны с коронавирусами, и они совершенно безвредны. Наличие таких коронавирусов и наличие нового коронавируса - это и проблема, и задача для разработчиков тест-систем.

Да, все эти вирусы могут давать перекрестные реакции. Поэтому системы должны быть настолько специфичными, что будут давать ответ только на антитела к ковид. Это сделать очень трудно, но в принципе реально. Проблема специфичности присутствует во многих других инфекциях, но она решается".

Открытым остается и вопрос – означает ли присутствие антител гарантию иммунитета к коронавирусу в будущем. "Являются ли эти антитела защитными, то есть, формируют ли иммунитет, еще не факт, - продолжает эксперт. – Но многое говорит в пользу того, что скорее формируют, чем нет.

Важно еще понимать, какое количество или титр антител является гарантией, что человек больше не заболеет. Ответ на этот вопрос ученые получат уже в ближайшем будущем.

10 апреля в России зарегистрирована своя тест-система на антитела. За ее аналитические характеристики отвечают разработчики, но раз она прошла регистрацию, вероятно, все хорошо. Ибо если тесты будут определять антитела ко всем коронавирусам одновременно, смысла в них и вправду нет".

Тем временем, профессор Дростен развенчал и миф о случаях якобы повторного инфицирования COVID-19, основанный на том, что у выздоровевших пациентов находят наличие вируса.

"Действительно, иногда у выписавшегося из больницы пациента с подтверждённым негативным тестом через несколько дней повторный тест показывает наличие вируса. Свидетельствует ли это о повторном заражении? Нет.

К сожалению, пока недостаточно исследовано поведение вируса в различных выделениях человеческого организма – мазке из гортани, анализе мокроты из лёгких, стуле. Представьте себе бассейн с золотыми рыбками. Вы с завязанными глазами зачерпываете ведром воду из бассейна. Если в бассейне много рыбок, то, скорее всего, они окажутся и в вашем ведре. Но если их мало, то вполне возможно в ведре будет только вода.

То же самое с вирусом. Чем меньше вирусов в организме человека, тем больше шансов, что мы их не обнаружим с помощью теста. Именно так можно объяснить этот феномен. Речь не идёт о повторном инфицировании", - пояснил немецкий вирусолог.

Кто из нас уже успел переболеть коронавирусной инфекцией? У кого появляется иммунная защита от CОVID-19 и как долго она сохраняется? Можно ли заболеть дважды? Именно эти вопросы, волнующие сейчас большинство людей в нашей стране и по всему миру, станут предметом нового научного исследования. Его запускают несколько российских биотехнологических компаний с участием ведущих медицинских экспертов.

ПРИБЛИЗИТЬ ЧЕЛОВЕЧЕСТВО К РАЗГАДКЕ ТАЙН КОРОНАВИРУСА

- Как будет выглядеть ваше исследование?


Руководитель научного центра молекулярно-генетических исследований ДНКОМ Андрей Исаев. Фото: YouTube

Участниками исследования смогут стать жители Москвы , Подмосковья , Рязани , Тулы и Курска . В этих городах находятся лаборатории, проводящие тестирование.

- У людей может возникнуть вопрос: с чего вдруг такая щедрость, бесплатный анализ на антитела, о котором многие давно мечтали?

- Как я уже сказал, это именно научное клинико -лабораторное исследование. Его задача, во-первых, собрать фундаментальные данные, которых сейчас нет нигде в мире. Это не преувеличение. Мы будем измерять уровень антител у разных групп людей: тех, кто переболел вирусной патологией в последние 6 месяцев, в том числе выписался из больниц после лечения COVID-19, кто не болел или, возможно, перенес инфекцию бессимптомно. Для этого участники будут заполнять анкеты. И мы проанализируем: как меняется концентрация антител к коронавирусу со временем.

ПОМОЧЬ В РАЗРАБОТКЕ ВАКЦИНЫ И ЛЕЧЕНИИ ТЯЖЕЛО БОЛЬНЫХ

- Во-вторых, по результатам исследования мы хотим получить ответы на прикладные вопросы, - продолжает Андрей Исаев . - Какие показатели говорят о том, что у человека действительно есть иммунная защита от СOVID-19? У кого больше антител: у тех, кто переболел легко или тяжело, или вообще у бессимптомных? Через какое время формируется иммунная защита и как долго она сохраняется? Кто и в какой срок может заболеть повторно?

Все это, с одной стороны, поможет продвинуться в исследовании новой инфекции, разработке вакцины против нее . А с другой стороны, позволит решать насущные проблемы. В частности, врачи смогут понять, в какое время эффективнее всего брать плазму у переболевших СOVID-19 для лечения тяжелобольных. Когда в ней будет оптимальный уровень антител - через неделю или через месяц?


КАКИЕ ТЕСТЫ БУДУТ ИСПОЛЬЗОВАТЬ?

- Да. Но в рамках научного исследования законодательство позволяет использовать и любые другие тесты. Мы будем применять закупленную для исследования высокоточную тест-систему немецкой компании Euroimmun. Она сертифицирована в Европе , и широко применяется по всему миру.

БУДЬ В КУРСЕ

Как это будет выглядеть на практике

Участниками исследования могут стать совершеннолетние, юридически дееспособные мужчины и женщины в возрасте до 65 лет, не болевшие или переболевшие вирусной патологией в последние 6 месяцев.

Чтобы стать участником нужно:

Срок подачи заявки — до 1 мая 2020 года. После заполнения анкеты в течение двух недель вы получите положительный или отрицательный ответ о попадании в исследование.

2. Если вы соответствуете требованиям участия в исследовании, с вами свяжется персональный куратор. Будет названа дата и адрес лаборатории для сдачи анализа крови. Для проведения теста потребуется не больше 10 мл, это одна маленькая пробирка.

3. Сотрудники лаборатории проведут анализ полученного биоматериала на предмет оценки антител к вирусу COVID-19.

4. Все участники получат информацию о личных показателях и результатах исследования.

ВАЖНО

Академик Гинцбург - о старте испытаний вакцин против коронавируса.

ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ

"Вставайте с диванов, сдавайте плазму!": супруги из Москвы, переболевшие коронавирусом, рассказали о мизерном количестве доноров

Медики призывают переболевших москвичей становиться донорами, а пациенты с COVID-19 рассказывают о положительном эффекте переливания после первой же процедуры (подробности)

Распространение коронавируса в мире: Хроника.

Согласно руководству ВОЗ, анализы на вирус SARS-CoV-2 должны проводиться:

  1. Методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с обратной транскрипцией. Это самый точный и надежный метод диагностики вирусной инфекции, который позволяет обнаружить даже очень небольшое количество генетического материала (РНК) вируса в биологическом материале человека. Предпочтительно брать мазок из ротоглотки или носоглотки, потому что в кале и крови вирусов меньше.
  2. В лаборатории с уровнем биологической безопасности 2 (BSL-2). Всего существует четыре уровня безопасности. На первом уровне требования минимальные, на четвертом — самые строгие. В лабораториях с уровнем безопасности BSL-2 исследуют микробов, представляющих умеренную опасность для сотрудников лаборатории и для окружающей среды.

ПЦР-анализ с обратной транскрипцией на SARS-CoV-2 можно провести только в лабораторных условиях, потому что для него требуется набор реактивов и лабораторное оборудование. Для этого нужны:

  • микроцентрифуга,
  • мешалка,
  • детекторный модуль ПЦР в реальном времени с реакционным модулем амплификатора.
На дому такой тест сделать нельзя, поэтому экспресс-тестов на основе ПЦР не существует.

Но даже если в конце концов экспресс-тесты на основе ИФА и появятся, они будут уступать лабораторной ПЦР и в точности, и в скорости определения заражения вирусом. ИФА-тест обнаруживает не генетический материал вируса, а антитела — иммунные белки, которые организм вырабатывает к вирусу. Чтобы организм успел выработать антитела, с момента заражения должно пройти около недели. Если сделать ИФА-тест раньше, он не покажет заражения, даже если в организме у человека уже есть вирус SARS-CoV-2.

Где делают тест. В Европе, Великобритании и Австралии тесты делают в любой лаборатории с уровнем безопасности BSL-2, в которой есть оборудование для ПЦР-реакции с обратной транскрипцией и реактивы, которые необходимы для поиска РНК вируса SARS-CoV-2. В США тесты делают в лабораториях Центра по контролю и профилактике инфекционных заболеваний (CDC) и в государственных лабораториях общественного здравоохранения. Тест проводится в соответствии с протоколом, принятым в конкретной стране.

Принцип действия теста. В США и других странах для анализа берут мазок с задней стенки глотки, образец слюны или жидкости из нижних дыхательных путей (то есть мокроты). Затем образец доставляют в лабораторию и выделяют из него рибонуклеиновую кислоту (РНК), содержащую геном вируса. Затем к смеси реагентов добавляют фермент, который превращает РНК в ДНК — это и есть обратная транскрипция. После этого вирусную ДНК копируют миллионы раз и ищут в ней участок, соответствующий геному SARS-CoV-2. Если такой участок есть, анализ признают положительным.

Точность. Тест способен обнаружить 0,3–3 копии вирусной РНК в микролитре (0,001 мл).

Сроки. 24–48 часов.

Сколько сделано анализов. По данным CDC, на 16 марта 2020 года в США на SARS CoV-2 было проверено: в лабораториях CDC — 4 тыс. 255 анализов; в 48 государственных лабораториях — 20 тыс. 907 анализов. Анализы начали делать 18 января 2020 года.

Цена. Тестирование оплачивает государство. Сдать анализ на SARS-CoV-2 в частной лаборатории за деньги нельзя.

Это соответствует уровню безопасности BSL-3. Пример микроба, с которым обычно работают в лаборатории BSL-3 — Mycobacterium tuberculosis, то есть бактерии, вызывающие туберкулез. Получается, что в нашей стране для работы с коронавирусом лаборатории нужен почти что самый высокий уровень биологической безопасности из возможных — BSL-3. Это притом что большинство российских лабораторий, как и везде в мире, имеет уровень безопасности BSL-2. (Дополнение от 17.03.2020, 18:27 мск: в этот фрагмент внесены изменения, уточнена информация об уровнях безопасности лабораторий.)

Принцип действия теста. Как и за рубежом, анализ проводят методом ПЦР-реакции с обратной транскрипцией.

  • реагент-1, прозрачная бесцветная жидкость, 0,70 мл, 1 пробирка;
  • реагент-2, прозрачная бесцветная жидкость, 1,20 мл, 1 пробирка;
  • положительный контроль (ПКО), прозрачная бесцветная жидкость, 0,20 мл, 1 пробирка;
  • отрицательный контроль (ОКО), прозрачная бесцветная жидкость, 0,20 мл, 1 пробирка;
  • эксплуатационная документация: инструкция по применению и паспорт.
Данные по составу реагентов не опубликованы.

Точность. ТАСС сообщает, что тест позволяет обнаружить 50–500 вирусных частиц в образце.

Цена. Тестирование оплачивает государство. Сдать анализ на SARS-CoV-2 в частной лаборатории за деньги нельзя.

Срок исполнения

Исследуемый материал

Метод определения

ОПИСАНИЕ

Инфекционный перитонит кошек (ИПК, Feline infectious peritonitis, FIP) — чрезвычайно тяжелая форма течения коронавирусной инфекции, получившая свое название наиболее часто встречающегося клинического проявления: воспаления брюшной полости (перитонита). Возбудитель данной инфекции — вирус порядка Nidovirales семейства Coronaviridae рода Coronavirus вида Felinae Coronavirus (FCoV). В эту группу входят также таксономически близкие коронавирусы: вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ВТГС, TGEV) и коронавирус собак (CCV).
Болеют кошки всех возрастов, но наиболее чувствительны к заболеванию молодые животные в возрасте до 2 лет, а также взрослые старше 10 лет. Количество зарегистрированных случаев ИПК не зависит от времени года (не наблюдается сезонности заболевания), соотношение по полу больных животных существенно не отличается (болеют как коты, так и кошки), особой чувствительностью к инфекции обладают кошки британской породы голубого и серого окраса. Не отмечено устойчивости к инфекции у беспородных животных.
Клинически болезнь проявляется в двух формах: влажной (инфузионной), сопровождающейся скоплением экссудата в брюшной и/или плевральной полостях, и сухой (неинфузионной), проявляющейся в гранулематозном поражении внутренних, преимущественно паренхиматозных органов и не сопровождающейся накоплением экссудата в полостях тела. Инфузионный ИПК считается классической формой проявления и составляет приблизительно 75% клинических случаев. ИПК может иметь длительный инкубационный период (от одной недели до полугода), во время которого клинические признаки не наблюдаются. Кроме того, существует скрытая форма заболевания, при которой возможно выделение вируса во внешнюю среду.
Передача вируса от больных животных происходит вертикально (трансплацентарно), либо горизонтально (контактно от животного к животному или через предметы ухода).
Первоначально коронавирус попадает в ротовую или носовую полость, где в фарингеальных эпителиальных клетках происходит первичная репликация вируса. Затем вирус проникает в клетки столбчатого эпителия кишечника — основное место его размножения и персистенции. При таком варианте заражения инфекция может протекать бессимптомно или проявляться в виде энтерита, легкого недомогания, диареи, снижения аппетита и не представляет опасности для жизни животного. Кошки с персистирующей коронавирусной инфекцией являются основным источником вируса, выделение которого может происходить со слюной, мочой, но основное количество выделяется с калом.
Однако в некоторых случаях коронавирус приобретает способность поражать моноциты и макрофаги, и тогда инфекционный процесс формируется совершенно по другому пути, приводящему к развитию ИПК. После попадания в макрофаги, вирус разносится по всему организму. Пораженные макрофаги скапливаются под серозной оболочкой стенок кровеносных сосудов, вызывая системный васкулит, что приводит к повышению проницаемости сосудов и скоплению выступающей жидкости (выпота) в полостях тела (инфузионная форма ИПК). В случае незначительного поражения кровеносных сосудов паренхиматозных органов (печени, селезенки, легких, брыжеечных лимфатических узлов, стенок кишечника, поджелудочной железы, увеального глазного тракта) происходит образование отдельных пиогранулем (гранулематозная, сухая форма ИПК). Обе формы заболевания могут привести к смерти животного.
Изменение тропности коронавируса и поражение макрофагов — ключевого компонента в системе иммунной защиты организма — является основной причиной, обуславливающей тяжесть заболевания ИПК. Заражение макрофагов приводит к так называемому антителозависимому усилению инфекции. Поскольку макрофаги, содержащие вирус, не экспрессируют вирусные антигены на поверхности, то специфические антикоронавирусные антитела (АТ) не узнают инфицированные вирусом клетки. В то же время, сывороточные иммунные комплексы АТ с вирусом продолжают распространять вирус в организме и инфицировать макрофаги. Таким образом, наличие АТ не только не защищает, но и, напротив, способствует развитию ИПК.
Сложность серологической диагностики ИПК связана с тем, что большой процент здоровых кошек имеют АТ против коронавирусов: 20–60% среди домашних животных и до 100% у животных из приютов или питомников.
Установлено, что тяжесть клинических проявлений при ИПК имеет прямую корреляцию с величиной титра АТ к возбудителю заболевания. Другими словами, важен не сам факт наличия в сыворотке крови АТ к коронавирусу, а высокий уровень титров с тенденцией к быстрому нарастанию. Однако, необходимо помнить, что некоторые кошки, которые будут иметь клиническое проявление ИПК и не будут иметь АТ к возбудителю.
Широкое применение находит иммуноферментный анализ (ИФА) для определения точной величины титра АТ к вирусу ИПК.
Метод основан на взаимодействии иммобилизованного в лунках планшета антигена коронавируса со специфическими антителами из исследуемой пробы сыворотки и последующем выявлении полученного комплекса конъюгатом (меченными пероксидазой хрена специфическими антителами к IgG кошки). Связанная пероксидаза вызывает разложение находящейся в растворе перекиси водорода и окисление хромогена. В лунках развивается окраска, интенсивность которой прямо пропорциональна количеству антител в определяемой пробе.
Для уточнения диагноза проводят повторные исследования клинического материала с интервалом 2–4 недели. Снижение или увеличение титра АТ напрямую связано с течением инфекционного процесса.
Диагностика инфекционного перитонита должна осуществляться комплексно, с учетом клинических признаков и результатов серологических и других видов исследований.

ПРЕАНАЛИТИКА

Для исследования методом тИФА (твердофазный иммуноферментный анализ) основным биоматериалом является сыворотка крови кошек. Образец стабилен 5 дней при температуре +2С…+8С. Гемолиз и хилез сыворотки (++++) может стать препятствием для проведения исследования.

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ (РАСШИФРОВКА АНАЛИЗОВ)

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

РЕЗУЛЬТАТ ИССЛЕДОВАНИЯ

Многие здоровые кошки и кошки с другими болезнями имеют антитела к коронавирусу. Обнаружение только антител к коронавирусу НЕ является диагностическим критерием ИПК. Диагноз Инфекционный перитонит кошек ставится комплексно.

Антитела в исследуемом образце (сыворотка крови) не обнаружены.
Диагноз ИПК (инфекционный перитонит кошек) ставится комплексно. На основании только данного исследования подтвердить или опровергнуть ИПК невозможно, так как в редких случаях антитела могут не обнаруживаться .

Титры коронавируса у кошек

Результат свидетельствует об обнаружении антител в исследуемом. Данный титр следует считать фоновым, свидетельствующем о контакте кошки с энтеральным штаммом коронавируса.
Диагноз ИПК (инфекционный перитонит кошек) ставится комплексно. На основании только данного исследования подтвердить или опровергнуть ИПК невозможно.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.