Трихомониаз мальтофилия чувствительность к антибиотикам
Динамика чувствительности влагалищной трихомонады к антипротозойным препаратам
В.Н. Лесовой, А.В. Аркатов, А.В. Kнигавко, В.А. Kривицкий
Харьковский государственный медицинский университет
Харьковский областной клинический центр урологии и нефрологии им. В.И. Шаповала
В статье проанализирована динамика чувствительности влагалищной трихомонады (возбудителя трихомониаза) на протяжении 8 лет (1999-2006), основываясь на данных, предоставленных лабораторией ХОKЦУН у 1472 пациентов, проходивших лечение в андрологическом отделении ХОKЦУН. Выявлено, что за указанный период наблюдается постепенное снижение чувствительности трихомонады к метронидазолу и тинидазолу. Отмечено также снижение чувствительности к орнидазолу, нифурантелу, секнидазолу и нитазолу в последние два года. Снизившаяся до средней в 2002-2004 гг. чувствительность к тенонитразолу вновь выросла до высокой к 2006 г.
Kлючевые слова: трихомониаз, вагинальная трихомонада (ВТ), инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), антипротозойные препараты.
The dynamics of sensitivity of Trichomonas Vaginalis to antiprotosoa drugs
The dynamic of the sensitivity of Trichomonas Vaginalis (agent of trichomoniasis) during 8 years (1999-2006) was analyzed in the article on the base of information represented by the laboratory of KhRCCUN of 1472 patients who had taken treatment in andrology department of KhRCCUN. It was revealed that during underlined period decrease of the sensitivity of the agent to metronidazolum and tinidazolum was observed. Also decrease of sensitivity was learned to ornidazolum, nifu-rantel and nimorazol during latest two years. The sensitivity to tenoni-trazol , which had decreased during 2002-2004, increased again to high level in 2006.
Keywords: trichomoniasis, Trichomonas Vaginalis, sexually transmitted infections (STI), antiprotosoa drugs.
На сегодняшний день инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), приобрели в Украине эпидемический характер. Этому способствует широкая либерализация сексуальных отношений, раннее вступление подростков в половую жизнь при малой информированности о средствах контрацепции, отсутствие цензуры в СМИ, широкая миграция населения. Kак правило, этиологически ИППП представлены микст-инфекцией, среди которой на первом месте оказывается трихомониаз [1]. Заболеваемость трихомониазом в мире составляет порядка 186 млн. случаев в год, в Украине официальный показатель заболеваемости составляет 1263,7 случая на 100 000 населения, реальный же показатель почти в 5 раз больше и составляет порядка 6% всего населения или 12% населения сексуально активного, репродуктивного возраста [2].
Важными факторами такой обширной заболеваемости трихомониазом в Украине являются высокий процент бессимптомного носительства данного заболевания, а также многочисленные случаи неполной эрадикации возбудителя при его лечении. Возможность перехода влагалищной трихомонады в цистную форму позволяет ей сохраняться в организме даже при проведении полноценного курса терапии [3]. Кроме того, главной проблемой в лечении трихомониаза на первый план сегодня выступает все возрастающая резистентность вагинальной трихомонады (ВТ) к антипротозойным препаратам. Так, согласно исследованиям, проведенным авторами в 1999 году, всего 35% ВТ чувствительны к метронидазолу [4]. Согласно другим исследованиям, всего 55% трихомонад чувствительны к тинидазолу [5]. Соответственно, изучение изменяющейся чувствительности ВТ к современным антипротозойным препаратам является актуальной проблемой лечения трихомониаза и микстных инфекций половых путей.
Целью исследования было изучение динамики чувствительности ВТ к антипротозойным препаратам (АПП) на протяжении последних 10 лет.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
На базе андрологического отделения и клинической лаборатории ХОKЦУН им. В.И. Шаповала было проведено изучение культуральных рассевов трихомонад с подбором чувствительности к антипротозойным средствам у 1472 пациентов, проходивших в дальнейшем лечение в андрологическом отделении. Результаты данного анализа были объединены в группы, в зависимости от года проведенного исследования. Общегодовые градации чувствительности АПП определялись по проценту выявления хорошей чувствительности к препарату (чистая зона более 19 мм вокруг диска или отсутствие возбудителя в чашке с препаратом). Высокой среднегодовой чувствительностью обладал АПП при наличии чувствительности в более чем 75% культуральных рассевов, средний – от 50 до 75%, низкий – менее 50%. Также оценивалась клиническая картина заболевания (клинические анализы крови, мочи, секрета простаты), пациентам проводилось УЗИ в сроки 10-12 и 25-30 дней. Пациентам проводили двукратные контрольные культуральные рассевы на трихомонаду. Также у больных оценивались биохимические показатели (уровни билирубина, аланин- и аспартатаминотранферазы), а также отмечалось самочувствие больных при приеме препаратов и наличие побочных действий трихомонацидных средств.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В результате исследований мы получили представленные в таблице 1 результаты чувствительности ВТ к антипротозойным препаратам.
Таблица 1. Процент высокой чувствительности ВТ к АПП по годам
| Препараты | 1999 | 2000 | 2001 | 2002 | 2003 | 2004 | 2005 | 2006 |
| Метронидазол (Метрогил, Трихопол, Эфлоран) | 53,6 | 50,2 | 49,8 | 42,6 | 39,6 | 44,3 | 34,2 | 35,7 |
| Тинидазол (Тиниба, Фазижин) | 73,4 | 74,1 | 72,5 | 67,6 | 65,3 | 34,1 | 58,4 | 54,6 |
| Нифурантел (Макмирор) | 82,1 | 79,4 | 76,3 | 77,6 | 68,3 | 64,8 | 61,4 | 67,2 |
| Орнидазол (Тиберал, Мератин) | 94,5 | 93,1 | 92,4 | 89,1 | 85,4 | 79,8 | 76,5 | 68,4 |
| Ниморазол (Наксоджин) | 86,4 | 84,3 | 81,2 | 75,6 | 73,4 | 77,1 | 65,4 | 62,4 |
| Тенонитразол (Атрикан) | 87,4 | 81,7 | 73,6 | 58,9 | 56,4 | 68,4 | 76,4 | 82,3 |
Из приведенных данных видно, что чувствительность к АПП ко всем препаратам планомерно падает с 1997 до 2006 года. При этом чувствительность к метронидазолу и тинидазолу падает со средней до низкой, нифурантела, орнидазола, ниморазола – с высокой до средней. Исключение составляет лишь чувствительность к тенонитразолу, которая с высокой первоначальной (1999-2000 гг.) к 2001 снизилась до средней чувствительности, однако к 2005 г. вновь выросла до высокой, к тому же, вопреки общей тенденции, еще выросла в 2006 г. до 82,3%. Очевидно, это связано с малой назначаемостью тенонитразола в 2001-2004 гг. ввиду падения к нему чувствительности.
В таблице 2 указаны клиническая эффективность (процент эрадикации) и процент побочных действий при применении различных препаратов.
Таблица 2. Суммарная клиническая эффективность и оценка побочных действий препаратов
| Препарат | Kлиническая эффективность, % эрадикации | Наиболее часто встречаемые осложнения | Процент побочных явлений |
| Метронидазол (Метрогил, Трихопол, Эфлоран) | 78,3 | Тошнота, рвота, болезненность в эпигастрии, в правом подреберье, нарушение аппетита | 13,6 |
| Тинидазол (Тиниба, Фазижин) | 79,5 | Тошнота, рвота, боль в эпигастрии, тяжесть в правом подреберье, нарушение аппетита | 19,5 |
| Нифурантел (Макмирор) | 83,3 | Тошнота | 9,4 |
| Орнидазол (Тиберал, Мератин) | 89,6 | Тошнота, болезненность в эпигастрии, нарушение аппетита | 6,9 |
| Ниморазол (Наксоджин) | 83,2 | Подташнивание | 8,1 |
| Тенонитразол (Атрикан) | 87,4 | Пожелтение склер, пота, мочи | 12,2 |
ВЫВОДЫ
- За последние 8 лет среди пациентов андрологического отделения ХОKЦУН им. В.И. Шаповала наблюдается снижение чувствительности влагалищной трихомонады к большинству антипротозойных препаратов.
- Единственный из исследуемых препаратов – тенонитразол (Атрикан) показал высокую чувствительность в 2005 и 2006 гг.
- Наименьшее количество побочных явлений оказывают препараты орнидазол и ниморазол (6,9 и 8,1% соответственно).
- Менее тяжелым для организма с точки зрения клинических жалоб и показателей азотистого обмена является тенонитразол, хотя при его приеме зачастую отмечается пожелтение кожи, мочи, пота, реже – склер.
Таким образом, учитывая высокую клиническую эффективность тенонитразола, высокую чувствительность к нему влагалищных трихомонад в последнее время, а также наименее опасные для организма побочные последствия, мы рекомендуем этот препарат для моно- или комбинированной терапии трихомониаза.
ЛИТЕРАТУРА
1. Горпинченко И.И., Гурженко Ю.Н. Хронический уретральный трихомониаз и его комплексное лечение с использованием препарата орнизол (орнидазол). Новости медицины и фармации 2006; 6: 13–14.
2. Kоган Б.Г. Этиотропная терапия хламидийных и трихомонадных уретритов у мужчин. Медицина сегодня 2006; 9: 10.
3. Мавров И.И. Половые болезни: Руководство для врачей. Харьков: Факт; 2002: 557-559.
4. Собольський С.Я., Гнатко О.П., Чубатий А.І. Сучасні підходи до лкування урогенітального трихо-моніазу. Медицина сегодня 2006; 7: 10.
5. Тихомиров А.Л. Тиберал в лечении ЗППП. Урология 1997; 2: 16.
Зубарев А.С.
Городская клиническая больница №40, Екатеринбург, отделение реанимации №3
Резюме
В результате анализа литературных данных установлено. Частота случаев инфекции, связанной со S. maltophilia в ОРИТ заметно возросла. Выбор антибактериальных препаратов для ведения таких инфекций представляет большую проблему для микробиологической лаборатории и клиницистов. Методы выявления чувствительности бактерии к антимикробным препаратам часто дают неточные результаты и требуют дальнейшего совершенствования. Наибольший опыт терапии связан с использованием тикарциллина\клавуланата и триметоприм\сульфометаксазола. Значение альтернативных препаратов для ведения инфекции S. maltophilia, особенно новых фторхинолонов требует дальнейшего изучения. Необходима оценка клинической эффективности комбинации антимикробных препаратов, показавших синергизм in vitro в отношении бактерии.
За последние три десятилетия в связи с интенсивным развитием медицинских технологий и совершенствованием оказания помощи при многих острых критических состояниях и декомпенсации хронических заболеваний, в ОРИТ увеличилось количество ослабленных больных с тяжелым соматическим фоном и инфекционными осложнениями. В свою очередь, в этих условиях, в результате необходимости использования антибиотиков широкого спектра существенно выросла значимость в качестве возбудителей нозокомиальных инфекций слабовирулентных микроорганизмов, обладающих природной резистентностью ко многим антимикробным препаратам.
К таким микроорганизмам относится и Stenotrophomonas maltophilia, неферментирующая грамотрицательная бактерия, ранее известная как Pseudomonas maltophilia или Xanthomonas maltophilia.
Цель настоящего аналитического обзора - обобщение данных литературы, посвящённых значимости инфекций обусловленных Stenotrophomonas maltophilia у пациентов ОРИТ.
S. maltophilia - единственный представитель рода Stenotrophomonas (Stenos, греч. - узкий; trophos, греч. - питающаяся; monas, греч. - единица, организм; и malt, староанглийский - солод; philos, греч.- друг). Название отражает ограниченную способность вида использовать питательные субстраты при способности образовывать кислые продукты из мальтозы ("солодовый сахар"), что было использовано при разработке среды для селекции S. maltophilia. Род был выделен в 1993 году Palleroni и Bradbury [58] после многолетних дебатов относительно таксономического положения этого микроорганизма.
Клетки S. maltophilia прямой или слегка изогнутой формы неспорообразующие грамотрицательные бациллы, от 0,5 до 1,5 мкм длиной. Они подвижны, благодаря наличию нескольких полярно расположенных жгутиков. Колонии гладкие, блестящие с ровными краями, белого или бледно-желтого цвета. S. maltophilia облигатный аэроб. Рост не отмечается при температуре выше 40° С и ниже 5°. Оптимальная температура для роста - 35° С. Бактерия относится к относительно метаболически неактивным микроорганизмам (395), но может метаболизировать ряд необычных субстратов, включая аминогликозидный антибиотик стрептомицин [27]. Штаммы бактерии изучаются для потенциального использования в качестве биодеградантных агентов.
S. maltophilia широко распространена в окружающей среде и географических регионах, включая Антарктику [88], и занимает экологические ниши как внутри так и за пределами больниц. Бактерия была выделена из большого количества нозокомиальных источников, включая контуры аппаратов искусственной вентиляции, руки персонала, аппараты диализа, небулайзеры, устройства для ингаляционной терапии и даже растворы дезинфектантов. Достаточно мало информации известно о способности S. maltophilia переносить высушивание, однако Rosenthal сообщает, что хотя бактерия достаточно часто выделяется во влажной среде, обнаружение ее в сухих местах, таких как больничный пол, встречается нечасто [73].
S. maltophilia использовалась как агент биологического контроля среде с ризосферами и против агрокультурных паразитов. Учитывая ингибирование бактерией широкого спектра фитопатогенных грибов, не удивительно сообщение о том, что S.maltophilia подавляет рост патогенных для человека грибов, таких как Candida spp. и Aspergillus fumigatus [39]. Jakobi с соавторами сообщали о выработке S. maltophilia мальтофилина, нового макроциклического лактамного агента с антигрибковой активностью против сапрофитных, фитопатогенных и человеческих изолятов [35].
О факторах вирулентности S. maltophilia известно мало. Сложности с разделением колонизации и инфекции привело к формированию представления об ограниченной патогенности возбудителя. Описана выработка бактерией ряда внеклеточных ферментов, включая ДНКазу, РНКазу, фибринолизин, липазу, гиалуронидазу, протеазу и эластазу [8]. Сродство к пластику считается важным свойством бактерии, часто формирующей колонизацию и инфекцию вдоль инфузионных линий и внутривенных канюль [40]. Способность S. maltophilia выживать и размножаться в растворах для парентерального питания и других типах инфузионных сред может также вносить вклад в патогенез ассоциированных с внутривенной линией инфекций. [52, 62]. Также известна способность бактерии к росту в диализных растворах с высвобождением низкомолекулярных пирогенов.
До недавнего времени, S. maltophilia считалась достаточно необычным микроорганизмом при выделении в диагностической микробиологической лаборатории. Частота выделения возросла с начала 1970-х годов. Вероятно, такой рост связан с достижениями медицинских технологий в результате чего увеличилось количество пациентов с имеющимися факторами риска развития инфекции (таблица 1) [54].
Факторы риска инфекции, связанной со S. maltophilia [93]
В масштабном исследовании по изучению факторов риска развития нозокомиальных инфекций в ОРИТ, проводившемся в нескольких центрах в Германии наиболее значимыми выявленными независимыми факторами риска для выделения микроорганизма были предшествующее использование карбапенемов и длительное пребывание в ОРИТ (более 12 дней) [115]. В другом масштабном проспективном исследовании по методу случай-контроль, проведенном во Франции в период с 1998 по 2001 наиболее значимыми факторами риска были наличие хронических легочных заболеваний у пациента и предшествующая антибактериальная терапия. Уровень смертности в ОРИТ, продолжительность искусственной вентиляции и продолжительность пребывания в ОРИТ были значительно выше у пациентов с инфекцией S. maltophilia, по сравнению с группой контроля. В случае инфекции S. maltophilia смертность была значительно выше у пациентов, которым была назначена неадекватная антибактериальная терапия [94].
Особо сложной задачей для клиницистов является ведение ослабленных пациентов с инфекцией, вызванной полирезистентными микроорганизмами. Ansari с соав. изучили онкологических больных с инфекцией, вызванной полирезистентной S. maltophilia и сравнили их двумя группами контроля: пациентами с факторами риска развития инфекции S. maltophilia (С-контроль), а также пациентами с инфекцией, вызванной S. maltophilia, чувствительной по меньшей мере к двум антибиотикам (S-контроль). По сравнению с пациентами группы C-контроля, у больных с инфекцией, вызванной полирезистентной S. maltophilia значимо чаще использовались до выделения микроорганизма карбапенемы и фторхинолоны, они имели более длительное время пребывания в ОРИТ, и уровень смертности среди них был также значимо выше. По сравнению с пациентами S-контроля, факторами риска были - предшествующие в течение года инфекция S. maltophilia и использование триметоприм-сульфаметоксазола [121].
Сравнение факторов риска между разными исследованиями затруднено из-за разнородности популяции пациентов, критериев, используемых для выявления инфекции и статистических методов, использованных для обработки данных. Примечательно, однако, что некоторые из них, такие как предшествующее назначение антибактериальных препаратов, связываются с инфекцией S. maltophilia большинством авторов и что почти все факторы риска свидетельствуют о выраженном снижении антиинфекционной защиты пациента. Описано несколько серьезных вспышек инфекции и/или колонизации S. maltophilia. В нескольких случаях был выявлен источник загрязнения. Контаминированная дистиллированная вода, которая использовалась для изготовления дезинфицирующих растворов была установлена в качестве источника одной вспышки инфекции S. maltophilia, в которую были вовлечены 63 пациента в одном австралийском госпитале [92]. Четыре случая септицемии S. maltophilia были связаны с недостаточной дезинфекцией многоразовых диализаторов [84]. У восьми пациентов гематологического отделения (четверо с лейкемией и четверо с множественной миеломой) с развившейся инфекцией S. maltophilia, таким источником стала морозильная камера [69]. Лед использовался для создания прохладных напитков и содержал высокую концентрацию бактерий (> 105 КФЕ/мл).
Спектр клинических проявлений, связанных с инфекцией S. maltophilia постоянно расширяется. Многие ранние публикации не могли установить четкие признаки инфекции, связанной с этим микроорганизмом. Действительно, частое выделение бактерий в смешанных культурах, трудность разделения инфекции и колонизации в области поверхностных зон, таких как кожа или верхние отделы дыхательных путей сформировали мнение, встречающееся в ранних публикациях, о том, что S. maltophilia является организмом со строго ограниченным патогенным потенциалом. Однако, более поздние исследования, в которых использовались строгие критерии определения инфекции, связанной с выделением бактерии из в норме стерильных зон однозначно установили роль S. maltophilia как истинного возбудителя.
Хотя S. maltophilia относится к преимущественно нозокомиальным возбудителям, случаи внебольничной инфекции могут случаться чаще, чем это считалось ранее [32]. Наиболее часто встречающимися проявлениями инфекции являются бактериемия, пневмония, инфекция мочевого тракта, инфекция в области хирургического вмешательства и перитонит [108].
Бактериемия
Бактериемия является распространенным проявлением инфекции S. maltophilia и, по всей видимости, частота ее развития у пациентов ОРИТ возрастает [45]. Бактериемия может быть вторичной при первичном источнике инфекции в легких, мочевом и желудочно-кишечном трактах, однако нередко выявить входные ворота не представляется возможным [108]. Публикуется все больше сообщений о значимости устройств для внутривенного введения в патогенезе бактериемии S. maltophilia и в случаях, когда не установлен явный первичный очаг, предполагается, что именно эти устройства могут быть источником инфекции [113]. Так Muder с соавт. сообщает о том, что в изученной им группе из 91 пациента с бактериемией S. maltophilia, у 56% не было клинически выявлено входных ворот инфекции, но 84% из этих больных имели установленный центральный венозный катетер [53]. В некоторых случаях было возможно установить резервуар в окружающей среде, из которого S. maltophilia была занесена. Flaherty с соавторами [23] изучили вспышку грамнегативной бактериемии, включавшую четыре случая, вызванных со S.maltophilia. В качестве источника было установлено О-кольцо в аппарате гемодиализа. В серии случаев, о которых сообщает Fisher с соавт. [22], источником были контаминированные системы мониторинга, используемые во время операции на открытом сердце.
Senol с соавторами сравнили в своем ретроспективном исследовании пациентов с бактериемией, вызванной S. maltophilia и пациентов группы контроля, подобранных по методу случай-контроль в соответствии с клиническими и демографическими характеристиками. У пациентов исследуемой группы уровень смертности был значительно выше с уровнем атрибутивной летальности бактериемии S. maltophilia 27,7 % [104].
Jumaa с соавт. также изучали эпидемиологию бактериемии, вызванной S. maltophilia в одном из госпиталей Объединенных Арабских Эмиратов. Все эпизоды бактериемии, связанной со S. maltophilia были внутрибольничными. В большинстве случаев бактериемия была связана с контаминацией катетера и венозной линии. Основными предрасполагающими факторами были злокачественные новообразования [95].
В исследовании Ubeda с соавторами основными сопутствующими факторами при развития бактериемии S. maltophilia были гемобластозы, госпитализация в ОРИТ, предшествующее назначение антибиотиков широкого спектра, имуносупрессия, связанная с использованием кортикостероидов и химиотерапии [113].
Сообщается, что уровень смертности у пациентов с бактериемией, связанной со S. maltophilia может составлять от 10 до 60 % [97, 98], она встречается преимущественно у больных в критическом состоянии с тяжелой иммуносупрессией. Однако, атрибутивная летальность, связанная с бактериемией S. maltophilia, по всей видимости, эквивалента бактериемии, вызванной другими микроорганизмами при сравнении групп, равнозначных по сопутствующим заболевания [97, 104]. Значимыми факторами, ассоциированными с выживаемостью, являются своевременное удаление инфицированного устройства сосудистого доступа и назначение адекватной антибактериальной терапии [116].
В исследовании Lai с соавторами при одномерном анализе данных нозокомиальная бактериемия, длительно сохраняющаяся нейтропения (> 10 дней), бактериемия, связанная с инфекцией респираторного тракта, шок, низкий уровень сывороточного альбумина (
*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ
Журнал входит в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК.
Читайте в новом номере
ММА имени И.М. Сеченова
Попадая в мочеполовой тракт, в среднем через 3–7 дней, трихомонады вызывают развитие воспаления в виде острого, подострого или торпидного уретрита (уретропростатита) у мужчин и вульвовагинита и уретрита у женщин. Как правило, процесс изначально протекает в виде острой или подострой формы, затем через 2 месяца воспалительная реакция стихает и трихомониаз переходит в хроническую форму или трихомонадоносительство.
Клиническая картина мочеполового трихомониаза неспецифичная. Трихомонада способна поражать любые органы урогенитального тракта, процесс может также локализоваться на слизистой миндалин, конъюнктивы, прямой кишки. Следует отметить, что в виде моноинфекции трихомониаз встречается лишь у 10–30% пациентов [1], в 70–80% случаев урогенитальный трихомониаз ассоциируется с другими микроорганизмами, в том числе и инфекциями, передаваемыми половым путем [5]. Чаще всего регистрируются трихомонадно–гонорейная, трихомонадно–бактериальная (в ассоциации с энтерококками, гемолитическими стрептококками, эпидермальным стафиллококком), а также трихомонадно–микотическая инфекции. Важен тот факт, что при микст–инфекции трихомонада является резервуаром сопутствующей инфекции, поэтому вследствие внутритрихомонадной персистенции гонококки, хламидии и др. неуязвимы для антибиотиков, что приводит к рецидиву заболевания.
Клиническая картина урогенитального трихомониаза не отличается от любой другой инфекции, передаваемой половым путем.
Терапия урогенитальных инфекций всегда остается актуальной и обсуждаемой проблемой дерматовенерологии, акушерства и гинекологии, урологии. В отношении трихомониаза основным предметом для дискуссий является терапия микст–инфекций, а так же выбор оптимального противопротозойного препарата. Поскольку за счет незавершенного фагоцитоза трихомонада зачастую является основной причиной неудач в терапии ИППП, при ассоциированных инфекциях необходимо в первую очередь проводить пульс–терапию трихомониаза. Для этого существует большой арсенал быстродействующих и эффективных антипротозойных средств. Все рекомендуемые препараты относятся к группе нитроимидазола. Родоначальником (впрочем, не потерявшим свою значимость и по сей день) является метронидазол. По данным Всемирной Организации Здравоохранения (2001 г.), однократный прием 2,0 г этого препарата приводит к излечению у 88% женщин, а при совместном лечении половых партнеров положительный эффект достигается в 95% случаев. Такая же высокая эффективность и у тинидазола. Как правило, для излечения достаточно однократного применения 2,0 г внутрь. Наиболее современными и эффективными антипротозойными препаратами являются орнидазол и секнидазол: однократный прием 1,5 г или 2,0 г соответственно гарантирует элиминацию возбудителя практически у всех больных с неосложненным трихомониазом. Однократные пульс–курсы терапии также удобны для лечения половых партнеров. Однако частое отсутствие клиники или ее минимальные проявления, невысокий лейкоцитоз не позволяют достоверно определить сроки инфицирования, довольно проблемно исключить и поражение трихомонадами парауретральных желез, простаты и т.д. В связи с этим мы рекомендуем использовать вышеназванные препараты пролонгированными курсами по 5–10 дней. Для курсового системного лечения могут быть использованы и другие препараты группы нитроимидазола: ниморазол и нифурател.
В последние годы в России появляется все большее количество методически рекомендаций, указаний, стандартов по терапии ИППП. Все они основаны на большом клиническом материале, а выпускают их ведущие дерматовенерологические учреждения, Ассоциация акушеров–гинекологов. Существуют так же международные европейские рекомендации, рекомендации ВОЗ. Все они построены по единому принципу и предлагают как рекомендуемые схемы терапии, так и альтернативные.
По данным ВОЗ, рекомендуемыми являются схемы терапии трихомониаза метронидазолом или тинидазолом в однократной дозировке 2,0 г. Альтернативным является применение тех же препаратов по 500 мг 2 раза в сутки в течение 5–7 дней. Сходные данные представляют специалисты США, выводя метронидазол на первое место – 2,0 г однократно.
Согласно данным европейских рекомендаций оптимальным способом лечения трихомониаза является прием метронидазола в течение 7 дней по 500 мг каждые 8 часов.
Итак, как же выбрать оптимальный антипротозойный препарат? По международному опыту, а также данным части отечественных исследователей – это метронидазол.
Однако не все так однозначно. Что касается эффективности при соблюдении рекомендаций врача и одновременном лечении половых партнеров, то она примерно одинакова у всех препаратов (все производные нитроимидазола). В удобстве применения так же все препараты схожи, но что касается побочных эффектов, то, по собственным данным и данным литературы, все–таки переносимость орнидазола и секнидазола несколько лучше, чем у метронидазола.
При приеме последнего чаще отмечаются диспептические растройства, головные боли, бессонница, аллергические реакции, чем у других препаратов данной группы.
Лабораторная диагностика
Принципы лабораторной диагностики мочеполового трихомониаза
1. Лабораторные методы исследований
Материалом для паразитологических исследований у женщин служит отделяемое из цервикального канала, смыв из влагалища и осадок мочи; у мужчин — отделяемое из уретры, центрифугат свежевыпущенной мочи, секрет предстательной железы и эякулят.
Накануне обследования женщинам в течение суток не рекомендуется делать спринцеваний. Материал для анализа берется у них со слизистой заднего свода влагалища. В некоторых случаях исследуется отделяемое из цервикального канала.
Мужчинам перед обследованием предлагается в течение 3-4 ч воздерживаться от мочеиспусканий. Материал из уретры у них забирается с глубины 5-7 см специальным зондом или ложкой Фолькмана. Исследуется также секрет предстательной железы и эякулят. Если речь идет о хронической трихомонадной инвазии, накануне исследования рекомендуется сделать провокацию гоновакциной, пирогеналом или неспецифическую (алкогольную).
1.1. Диагностика мочеполового трихомониаза
Диагностика мочеполового трихомониаза проводится путем микроскопии нативных препаратов, а также мазков, окрашенных метиленовым синим, по Романовскому-Гимзе и по модифицированному способу Грама. Для обнаружения трихомонад в нативных препаратах исследуется эякулят, секрет предстательной железы и осадок мочи у мужчин и смыв из влагалища у женщин.
Исследование нативных препаратов
Нативные препараты готовятся и исследуются сразу же после взятия материала. Если это невозможно, материал помещается в питательную среду, обеспечивающую кратковременное сохранение трихомонад, из расчета 1 мл исследуемого материала на 5 мл среды. Материал должен быть доставлен в лабораторию в теплом виде, сроки доставки материала не должны превышать 2 часов.
Для приготовления препарата на предметное стекло наносится капля теплого изотонического раствора хлорида натрия или раствора Рингера-Локка, с которой смешивается исследуемый материал. Взвесь накрывается покровным стеклом и микроскопируется при увеличении объектива 40 и окуляра 7 или 10.
При изучении нативного препарата особое внимание обращается на размеры и форму трихомонад, характер их движения, внутреннее содержимое клеток. В типичных случаях трихомонады обнаруживаются в виде подвижных образований грушевидной, реже овальной формы, размером в среднем от 13 до 17 мкм. Характер их движений толчкообразный. Иногда удается заметить движение свободных жгутиков. Ядра трихомонад чаще не обнаруживаются или плохо различимы. Цитоплазма трихомонад обычно зернистая, чаще вакуолизирована.
Размеры лейкоцитов, имеющих округлую, реже овальную форму, как правило, не превышают 10 мкм. Цитоплазма лейкоцитов прозрачна, зернистость обычно не отмечается или слабо выражена. Сегментоядерные нейтрофилы обычно содержат хорошо различимое сегментированное ядро.
Голые ядра эпителиоцитов отличаются от трихомонад относительно толстой оболочкой (кариолеммой) и иным характером зернистости (отдельные глыбки хроматина). В клетках молодого эпителия, даже если они по размерам соответствуют трихомонадам и обладают зернистостью, всегда прослеживается четко различимое округлое или овальное ядро.
В некоторых случаях обнаруживаются амебоидные формы Т. vaginalis, длина тела которых достигала 30 мкм, а также атипично делящиеся (почкующиеся) клетки. Основными дифференциально-диагностическими критериями, отличающими атипичных трихомонад от клеток эпителия и лейкоцитов, служат наличие в цитоплазме этих простейших выраженной зернистости и вакуолей, а также отсутствие хорошо различимого ядра. Кроме того, они значительно крупнее, чем наиболее часто встречающиеся форменные элементы — сегментоядерные нейтрофилы. По размеру такие трихомонады могут быть сопоставимы с моноцитами, которые, в отличие от них, имеют четко выраженное ядро и никогда не встречаются в значительных концентрациях (несколько клеток в каждом поле зрения). При отсутствии типичных форм клеток трихомонад диагноз трихомониаза может считаться лишь предположительным и должен подтверждаться другими методами.
Окраска метиленовым синим
Готовится 1% водный раствор метиленового синего. Высушенный на воздухе мазок фиксируется в течение 3 мин 96% этиловым спиртом, высушивается, после чего на него наносили на 1 мин раствор метиленового синего. Оставшийся краситель осторожно смывается слабой струей холодной воды и мазок высушивается.
Трихомонады в препарате имеют округлую или овальную форму, с интенсивно окрашенными в синий цвет ядрами; цитоплазма клеток светло-синяя, с нежной сетчатой структурой, вакуоли — бесцветны.
Окраска по Романовскому-Гимзе
Высушенный на воздухе мазок фиксируется смесью Никифорова (абсолютный этиловый спирт и эфир в соотношении 1 : 1). Раствор краски Романовского (азур-эозин) перед употреблением разводится дистиллированной водой в соотношении 0,3 мл на 10 мл воды и пипеткой наносится на горизонтально расположенные препараты на 30-40 минут. Затем они быстро промываются водой и высушиваются.
В окрашенных препаратах трихомонады имеют эксцентрично расположенное овальное пурпурно-фиолетовое ядро. Цитоплазма клеток окрашивается в светло-синий цвет, вакуоли остаются бесцветными, оболочка клеток четко заметна.
Окраска по модифицированному способу Грама
Для окраски используются следующие реактивы:
1. 1% раствор генцианвиолета (1 г генцианвиолета растворяется в 100 мл кипящей дистиллированной воды, полученный раствор пропускается в горячем виде через бумажный фильтр).
2. Водный раствор Люголя (2 г калия йодида растворяется в 300 мл дистиллированной воды, к полученному раствору добавляется 1 г чистого йода, после чего раствор фильтруется через бумаж ный фильтр).
3. 3,96% этиловый спирт.
4. 1% водный раствор нейтрального красного (1 г нейтрального красного растворяется в 100 мл дистиллированной воды и пропускается через бумажный фильтр).
Препарат накрывается полоской фильтровальной бумаги и заливается раствором генцианвиолета на 1-2 мин, после чего бумага снимается, препарат осторожно промывается водопроводной водой и на несколько секунд заливается раствором Люголя (до почернения мазка). Остаток раствора смывается, препарат обесцвечивается в 96% этиловом спирте до тех пор, пока с тонких участков препарата перестают стекать фиолетовые струйки. После смывания спирта водой препарат сразу же докрашивается в течение 3 мин раствором нейтрального красного, затем тщательно промывается и высушивается.
При микроскопии окрашенных мазков ядра клеток T. vaginalis окрашиваются в фиолетовый цвет, цитоплазма — в красно-оранжевый цвет разной интенсивности. Метод окраски по Граму позволяет также диагностировать гонорею. В некоторых случаях для подтверждения диагноза трихомониаза используется ПЦР и культуральный метод.
Нами Т. vaginalis выращивается на питательной среде СДС-199 М (Захаркив Ю. Ф. и др., 1998), которая имеет следующий состав:
1) 100 мл солевого раствора (натрия хлорида 6,5 г, калия хлорида 0,14 г, кальция хлорида 0,12 г, натрия бикарбоната 0,2 г, 0,5 мл 0,2% раствора метиленового синего, дистиллированной воды до 1 л);
2) 20 мл среды 199;
3) 450 мг солянокислого цистеина;
4) 30 мл сыворотки крови эмбрионов телят (без консерванта);
5) 10 мл 20% раствора мальтозы;
6) тиамина хлорида 5% и пиридоксина гидрохлорида 5% по 0,25 мл и аскорбиновой кислоты 5% — 0,5 мл на 100 мл среды;
7) ампициллина натриевой соли 125 000 ЕД и гентамицина 40 000 ЕД на 100 мл среды.
Солевой раствор автоклавируется при 120°С в течение 30 минут, остальные ингредиенты добавляются стерильно после охлаждения среды. Антибиотики и витамины добавляются в питательную среду непосредственно перед использованием. Среда должна быть светло-зеленого цвета, прозрачной; показатель рН среды должен составлять 5,5-6,0.
Питательная среда объемом 4,5 мл помещается в стерильные пробирки и заливается слоем стерильного вазелинового масла толщиной 5 мм для создания анаэробных условий культивирования трихомонад. Посев производится пастеровской пипеткой путем помещения 0,5-1,0 мл исследуемого материала на дно пробирок.
Микроскопическое исследование производится через 48 и 96 часов после посева. При положительных результатах трихомонады дают придонный рост в виде плотного беловатого осадка, из которого пастеровской пипеткой берется материал для микроскопического исследования.
2. Определение чувствительности Тrichomonas vaginalis к метронидазолу
В 1962 году S. Squires and J. A. Fadzean для определения чувствительности Т. vaginalis предложили метод серийных разведений метронидазола в жидкой питательной среде в анаэробных условиях. В качестве критерия оценки чувствительности они использовали минимальную ингибирующую концентрацию (MIC), под которой понимали наименьшую концентрацию препарата, вызывающую иммобилизацию у 100% клеток трихомонад. С помощью указанной методики авторам удалось показать, что все изученные ими штаммы Т. vaginalis, выделенные от больных трихомониазом, были чувствительны к метронидазолу в диапазоне концентраций препарата от 0,25 до 1 мкг/мл.
В 90-х гг. появились работы, свидетельствующие о возникновении и распространении штаммов Т. vaginalis, устойчивых к значительно более высоким концентрациям метронидазола: 50 мкг/мл (Вorchardt K. A. et al., 1995), 32 мкг/мл (Debbia E. A. et al., 1996) и даже 250 мкг/мл (Тaru Meri I. T. et al., 1999). Тогда же было обосновано положение о том, что чувствительными к действию метронидазола в анаэробных условиях штаммами Т. vaginalis следует считать лишь те, для которых паразитоцидный эффект препарата наблюдается в концентрации более чем 15 мкг/мл (Muller М. et al., 1986, 1988; Тaru Meri I. T. et al., 1999). Процент резистентных к метронидазолу штаммов Т. vaginalis, выделенных в эти годы от больных трихомониаз ом, колебался от 5% (Narcisi E. M., Secor W. E., 1996) до 20% (Du Bouchet L. et al., 1997).
2.1. Определение чувствительности Тrichomonas vaginalis к антипротозойным препаратам in vitro при использовании критерия иммобилизации трихомонад
Чувствительность штаммов Т. vaginalis к метронидазолу определяется с помощью метода серийных разведений препарата в питательной среде СДС-199 М. При использовании критерия оценки чувствительности штаммы Т. vaginalis, используемые для исследования, должны содержать не менее 90% подвижных клеток.
Среда заливается по 4,0 мл в стерильные пробирки, затем в них вносится 0,5 мл раствора, содержащего разные концентрации метронидазола (или другого антипротозойного препарата): от 0,25 до 1000 мкг/мл (1 мг/мл).
После этого в пробирки вносится 0,5 мл культуры возбудителя с заранее определенной концентрацией клеток (кл./мл). Контролем служит среда без препарата. Затем для создания анаэробных условий, необходимых для культивирования Т. vaginalis, в пробирки со средой вносится вазелиновое масло (толщина слоя — 0,5 мм). Пробирки с исследуемым материалом инкубируются в термостате при t = 37°С. Учет результатов производится через 48 и 96 часов после посева.
Чувствительность трихомонад к метронидазолу оценивается путем определения минимальной ингибирующей концентрации (MIC), вызывающей иммобилизацию всех клеток Т. vaginalis. К лекарственно-устойчивым относятся штаммы, у которых иммобилизация обнаруживается при концентрациях метронидазола (или другого антипротозойного препарата), превышающих 15 мкг/мл.
2.2. Определение чувствительности Тrichomonas vaginalis к антипротозойным средствам in vitro при использовании критерия лизиса трихомонад при терапевтически эффективных концентрациях препаратов
В связи с широким распространением штаммов Т. vaginalis, устойчивых к метронидазолу, особенно среди больных хроническим мочеполовым трихомониазом, а также высокой частотой встречаемости амастиготных клеток, мы предлагаем оценивать чувствительность трихомонад к широкому спектру антипротозойных препаратов (производным 5-нитроимидазола пролонгированного типа действия (тинидазол, ниморазол, орнидазол и секнидазол), 4-аминохинолина (хлорохин, син. делагил) и нитрофурана (нифуратель, син. макмирор)) на основе оценки лизиса клеток трихомонад.
К высокоустойчивым (RIII) относятся штаммы, концентрация клеток которых в опытных пробирках с антипротозойным препаратом составляла не менее 50% по сравнению с контролем; к умеренно устойчивым (RII) — от 25 до 50%, к низкоустойчивым (RI) — менее 25%. Воздействие препарата считается оптимальным при лизисе всех клеток трихомонад; в этом случае штамм относится к чувствительным (S). По нашему мнению, именно такой подход позволяет подобрать препарат или комбинацию препаратов для назначения рациональной схемы этиотропной терапии.
2.3. Определение чувствительности Тrichomonas vaginalis к метронидазолу in vivo и текущий контроль эффективности этиотропной терапии
Определение чувствительности Т. vaginalis к метронидазолу in vivo проводится с помощью метода, основанного на установлении сроков исчезновения паразитов из исследуемого материала у больных трихомониазом на фоне этиотропной терапии. Паразитологические исследования материала проводят на 1,3, 5 и 7-й дни с момента начала лечения. Лекарственно-чувствительными считаются штаммы, которые перестают выделяться от больных на 2-5-е сутки с момента начала этиотропной терапии.
Читайте также:
