Селективный бульон cplm для выделения трихомонад

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к микробиологии, и может быть использовано для культуральной диагностики трихомоноза. Питательная среда содержит твердую и жидкую фазы. Твердая фаза представлена коагулированной сывороткой. Жидкая фаза содержит питательную среду 199, раствор натриевой соли бензил-пенициллина и раствор стрептомицина. Изобретение позволяет повысить чувствительность питательной среды для выделения трихомонад. 2 табл.

Изобретение относится к области медицины, а именно микробиологии, и может быть использовано, в частности, для культуральной диагностики трихомоноза.

Так, например, начиная с 40-х годов прошлого века широкое распространение получила среда Джонсона-Трасселя (CPLM), которая в модификации ЦНИИКВИ представляет собой жидкую среду зеленоватого цвета, обладающую высокими ростовыми качествами, однако она нестандартна (готовится в лабораторных условиях), имеет ограниченный срок годности.

К середине 90-х годов сложилась парадоксальная ситуация: при эпидемии инфекций передаваемых половым путем (ИППП), и в том числе трихомоноза, в России фактически отсутствовал производственный выпуск стандартных питательных сред для культуральной диагностики этого заболевания. В практике использовались среды, приготовленные в лабораториях, что, естественно, сказывалось на их качестве.

В то же время имеется настоятельная необходимость шире использовать культуральную диагностику трихомоноза, необходимую при постановке диагноза, особенно при сомнительных результатах микроскопии, а также при хроническом рецидивирующем инфекционном процессе, обследовании детей, беременных женщин и ряде других случаев.

Использование питательной среды с высокими ростовыми показателями, стандартного состава и простотой приготовления несомненно приведет к адекватной диагностике такого широко распространенного, отягощенного разнообразными осложнениями заболевания, как мочеполовой трихомоноз.

Наиболее близкой по составу к предлагаемой среде является среда следующего состава: питательная среда 199 - 10 мл, солевой раствор - 100 мл, дрожжевой автолизат - 10 мл, сыворотка крупного рогатого скота или лошади - 30 мл, 20%-ный раствор мальтозы - 10 мл, пенициллин - 160000 ЕД и стрептомицин - 160000 ЕД (Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. - Москва: Медицинская книга, Н.Новгород: Издательство НГМА, 2003. C.180-181).

Однако применение этой среды не исключает необходимость последующей микроскопии с целью установления наличия трихомонад в исследуемом материале. Целью представленного изобретения является повышение чувствительности среды для выделения трихомонад.

Поставленная цель достигается тем, что предлагаемая питательная двухфазная среда содержит твердую фазу, представленную коагулированной сывороткой, в количестве 5 мл и жидкую фазу, содержащую питательную среду 199, в количестве 5 мл с раствором натриевой соли бензил-пенициллина 10000-30000 ЕД /мл и раствором стрептомицина 10000-30000 мкг/мл - 1 мл соответственно.

Предлагаемая среда была апробирована на кафедре общей и биоорганической химии Астраханской государственной медицинской академии на 50 образцах материала от больных в течение 2003 г.

Ниже приводятся результаты апробации.

Для приготовления среды используют компоненты в следующих количествах, мл:

Р-р натриевой соли бензил-пенициллина 10000 ЕД /мл - 1

Р-р стрептомицина 10000 мкг/мл - 1

Антибиотики разводят каждый в 1 мл 0,9% стерильного раствора хлорида натрия и асептически вносят в среду 199.

Посев исследуемого материала осуществляют на поверхность коагулированной сыворотки штрихом бактериологической петлей. Затем на сыворотку наслаивают среду 199 с антибиотиками.

Инкубацию посевов осуществляют при 37°С до 7 суток при отсутствии роста в течение первых дней. При наличии трихомонад в исследуемом материале на границе раздела сред отмечается их обильный рост. Бесприборная визуализация роста трихомонад возможна еще и потому, что среда 199 содержит цветной индикатор, который в случае роста клеток и как следствие этого изменения рН раствора изменяет цвет с красного на желтый.

Среду готовят в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующих количествах, мл:

Р-р натриевой соли бензил-пенициллина 20000 ЕД /мл - 1

Р-р стрептомицина 20000 мкг/мл - 1

Антибиотики стерильно разводят каждый в 1 мл 0,9% раствора хлорида натрия и асептически вносят в среду 199.

При наличии трихомонад в исследуемом материале на границе раздела сред отмечается их обильный рост при изменении цвета жидкой фазы.

Среду готовят в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующих количествах, мл:

Р-р натриевой соли бензил-пенициллина 30000 ЕД /мл - 1

Р-р стрептомицина 30000 мкг/мл - 1

Антибиотики разводят каждый в 1 мл 0,9% стерильного раствора хлорида натрия и асептически вносят в среду 199.

При наличии трихомонад в исследуемом материале на границе раздела сред отмечается их обильный рост и изменение цвета жидкой фазы.

При посеве на предлагаемую среду материала от больных рост сопутствующей бактериальной флоры подавляется.

В таблице 1 даны результаты испытания трех вариантов предлагаемой среды.

Преимуществом предлагаемой среды является ускорение роста трихомонад по сравнению с ростом на среде Био-Рад в связи с тем, что среда 199 содержит питательные компоненты, необходимые для роста эукариотических клеток, к которым и относятся трихомонады. В таблице 2 даны результаты чувствительности известной и предлагаемой сред при посеве трихомонад.

Кроме того, наличие роста трихомонад при посеве их на предлагаемую среду считывается визуально в результате изменения цвета рН-индикатора, в связи с чем отпадает необходимость в последующей микроскопии, что ускоряет процесс постановки диагноза и делает анализ менее трудоемким и дорогостоящим.

Таким образом, использование новой среды значительно повышает чувствительность бактериологического исследования, направленного на выявление трихомонад в материале от больных и обследуемых лиц.

Изобретение может быть рекомендовано к применению в практическом здравоохранении в венерологических, урологических и андрологических учреждениях, а также в научной работе лабораторий соответствующего профиля.

Классы МПК: C12N1/10 простейшие; питательные среды для них
C12R1/90 простейшие
Автор(ы): Бойко Оксана Витальевна (RU) , Николаев Александр Аркадьевич (RU) , Бойко Андрей Виталиевич (RU) , Плосконос Мария Вячеславовна (RU) , Луцкий Дмитрий Леонидович (RU) , Гудинская Наталья Игоревна (RU)
Патентообладатель(и): Николаев Александр Аркадьевич (RU)
Приоритеты:
Таблица 1
Ингибирующее влияние на сопутствующую микрофлору и стимулирующее влияние на рост трихомонад компонентов испытуемой среды
Содержание ингредиентов в среде Наличие визуального роста трихомонад через 24 ч инкубации Наличие роста сопутствующей микрофлоры через 24 ч инкубации
Минимальное Слабый рост Единичные колонии бактерий на поверхности твердой фазы
Оптимальное Обильный рост Отсутствие роста
Максимальное Умеренный рост Отсутствие роста

Таблица 2
Результаты посевов трихомонад на испытуемую среду и среду Био-Рад
Посевная доза, число клеток в 1 мл Результаты посевов на сравниваемые среды (количество часов, после которых рост трихомонад фиксируется визуально)
Предлагаемая среда Среда Био-Рад
100 48 96
500 24 48

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Питательная двухфазная среда для выделения трихомонад, содержащая твердую фазу, представленную коагулированной сывороткой в количестве 5 мл, и жидкую фазу, содержащую питательную среду 199, в количестве 5 мл с раствором натриевой соли бензил-пенициллина 10000-30000 ЕД/мл и раствором стрептомицина 10000-30000 мкг/мл - 1 мл соответственно.

Назначение набора для визуального выявления Trichomonas vaginalis

Набор СВТ предназначен для выявления Trichomonas vaginalis в отделяемом из цервикального канала и влагалища, в семенной жидкости, в секрете предстательной железы, в отделяемом уретры и в центрифугате мочи.

Набор рассчитан на проведение 100 определений наличия Trichomonas vaginalis в исследуемом материале.

Принцип метода

Метод определения основан на использовании питательной среды, компоненты которой обеспечивают оптимальные условия для роста Trichomonas vaginalis до количеств, необходимых для их визуальной оценки с помощью микроскопа, а селективный компонент подавляет рост простейших грибов и большинства представителей бактериальной флоры, потенциально содержащихся в образце.


Состав набора для визуального выявления Trichomonas vaginalis

  • Питательная среда для обнаружения Trichomonas vaginalis, лиофилизированная – 1 фл.


Потенциальный риск применения набора - класс 2а.

Набор СВТ предназначен только для in vitro диагностики. Компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.

При работе с набором следует соблюдать "Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.).

  • термостат, поддерживающий температуру 37 ± 1 °С;
  • дозаторы пипеточные или пипетки стеклянные.
  • Приготовление жидкой питательной среды

Во флакон с лиофилизированной питательной средой для выделения Trichmonas vaginalis добавить 100 мл дистиллированной воды. Содержимое флакона перемешать до полного растворения (в течение 1 мин.). Полученный прозрачный раствор от светло-соломенного до янтарного цвета разлить по 1 мл в пробирки для микропроб, закрыть и хранить до применения при температуре 2 - 8 °С не более 1 недели или при температуре минус 7 °С и ниже не более 3 месяцев.

Помутневшие в процессе хранения среды использовать для определения нельзя!

Приготовление проб для исследования 1

Перед взятием материала для посева обследуемому пациенту необходимо, по крайней мере, на 1 - 2 дня исключить применение местного лечения; в противном случае это может повлиять на результаты культивирования.

У мужчин материал отбирать после длительного воздержания от мочеиспускания в течение времени не менее 3 - 4 часов. Отделяемое слизистой оболочки брать петлей из глубины уретры, предварительно очистив ее отверстие тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия. При малом количестве выделений до взятия материала необходимо провести массаж уретры в дистальном направлении.

У женщин образец из уретры и цервикального канала отбирать в зеркалах ватным тампоном, специальной щеточкой или ложечкой. Необходимо тщательно очистить наружное отверстие цервикального канала (при помощи большого марлевого тампона) от вагинальных выделений для предотвращения возможной контаминации.

Для более успешной диагностики забор материала необходимо производить из разных очагов поражения (уретра, предстательная железа и семенные пузырьки – у мужчин, влагалище, уретра, цервикальный канал - у женщин) в сочетании с анализами центрифугата свежесобранной мочи.

1 Методические указания № 2003/34 "Обеспечение качества подготовки образцов биологических материалов для цитологических исследований", МЗ РФ, Москва, 2003 г.

Посев и учет результатов

Посев материала в маркированные пробирки с предварительно прогретой до 37 °С питательной средой осуществлять щеточкой или тампоном однократного применения.

Пробирки со средой сразу после посева поместить в термостат при температуре 37 °С. Рекомендуется проводить просмотр сред на наличие Trichomonas vaginalis через 48 - 96 часов после посева, при отрицательном результате - еще через 7 - 10 дней.

При обильном росте Trichmonas vaginalis можно обнаружить методом микроскопии уже через 48 часов после посева. Наиболее интенсивно трихомонады размножаются в придонном слое среды, поэтому при контроле посевов материал надо брать с помощью пастеровской пипетки со дна пробирки, после чего на предметном стекле приготовить препарат "раздавленная капля" и просматривать в затемненном поле микроскопа при увеличении в 400 - 600 раз. При обильном росте в поле зрения можно видеть 5 - 50 и более трихомонад. При микроскопии среди клеточных элементов (эпителий, лейкоциты) трихомонады различают по их форме (грушевидная, овальная), характерны толчкообразные, поступательные и вращательные движения за счет жгутиков и ундулирующей мембраны.

Состав:

Ингредиенты

г/л

Ферментативный гидролизат казеина

Папаиновый перевар соевой муки

* Обезвоженный порошок, хранить в сухом месте в плотно закрытых контейнерах ниже 25 °C и защищать от прямых солнечных лучей.

Инструкция по использованию

Растворите 68,13 г в 750 мл дистиллированной воды. Осторожно нагрейте и полностью растворите среду. Стерилизуйте путем автоклавирования при 108 ºC в течение 15 минут. Охладите до 45-50 °С и добавьте 250 мл Стерильного лошадиной сыворотки (TS 014). Хорошо перемешайте и распределите по желанию.

Внешний вид: темно-янтарный цвет, прозрачный

рH (при 25 °C): 6,2 ± 0,2.

Принцип

Основа бульона для трихомонад № 2 используется для выделения Trichomonas vaginalis. Включение печени в среду играет важную роль в выявлении Trichomonas vaginalis. Среда одинаково подходит для обследования уретры, вагинальных тампонов и образцов мочи. Ферментативный гидролизат казеина, папаиновый перевар соевой муки и перевар печени обеспечивают азотистые вещества. Глюкоза действует как источник энергии. Селективный агент хлорамфеникол является ингибирующим для грамположительных и грамотрицательных бактерий, но не для видов Trichomonas. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды. Дикалий фосфат буферизует среду. Пантотенат кальция действует как фактор роста. Небольшое количество агара помогает создать анаэробиоз. Добавление сыворотки лошади делает среду очень питательной, получившей T. vaginalis.

\u0420\u0430\u0441\u0442\u0432\u043e\u0440\u0438\u0442\u0435 68,13 \u0433 \u0432 750 \u043c\u043b \u0434\u0438\u0441\u0442\u0438\u043b\u043b\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u043d\u043e\u0439 \u0432\u043e\u0434\u044b. \u041e\u0441\u0442\u043e\u0440\u043e\u0436\u043d\u043e \u043d\u0430\u0433\u0440\u0435\u0439\u0442\u0435 \u0438 \u043f\u043e\u043b\u043d\u043e\u0441\u0442\u044c\u044e \u0440\u0430\u0441\u0442\u0432\u043e\u0440\u0438\u0442\u0435 \u0441\u0440\u0435\u0434\u0443. \u0421\u0442\u0435\u0440\u0438\u043b\u0438\u0437\u0443\u0439\u0442\u0435 \u043f\u0443\u0442\u0435\u043c \u0430\u0432\u0442\u043e\u043a\u043b\u0430\u0432\u0438\u0440\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u044f \u043f\u0440\u0438 108 \u00baC \u0432 \u0442\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 15 \u043c\u0438\u043d\u0443\u0442. \u041e\u0445\u043b\u0430\u0434\u0438\u0442\u0435 \u0434\u043e 45-50 \u00b0\u0421 \u0438 \u0434\u043e\u0431\u0430\u0432\u044c\u0442\u0435 250 \u043c\u043b \u0421\u0442\u0435\u0440\u0438\u043b\u044c\u043d\u043e\u0433\u043e \u043b\u043e\u0448\u0430\u0434\u0438\u043d\u043e\u0439 \u0441\u044b\u0432\u043e\u0440\u043e\u0442\u043a\u0438 (TS 014). \u0425\u043e\u0440\u043e\u0448\u043e \u043f\u0435\u0440\u0435\u043c\u0435\u0448\u0430\u0439\u0442\u0435 \u0438 \u0440\u0430\u0441\u043f\u0440\u0435\u0434\u0435\u043b\u0438\u0442\u0435 \u043f\u043e \u0436\u0435\u043b\u0430\u043d\u0438\u044e. \n

\u0412\u043d\u0435\u0448\u043d\u0438\u0439 \u0432\u0438\u0434: \u0442\u0435\u043c\u043d\u043e-\u044f\u043d\u0442\u0430\u0440\u043d\u044b\u0439 \u0446\u0432\u0435\u0442, \u043f\u0440\u043e\u0437\u0440\u0430\u0447\u043d\u044b\u0439 \n

\u0440H (\u043f\u0440\u0438 25 \u00b0C): 6,2 \u00b1 0,2. \n

\u041f\u0440\u0438\u043d\u0446\u0438\u043f \n

\u041e\u0441\u043d\u043e\u0432\u0430 \u0431\u0443\u043b\u044c\u043e\u043d\u0430 \u0434\u043b\u044f \u0442\u0440\u0438\u0445\u043e\u043c\u043e\u043d\u0430\u0434 \u2116 2 \u0438\u0441\u043f\u043e\u043b\u044c\u0437\u0443\u0435\u0442\u0441\u044f \u0434\u043b\u044f \u0432\u044b\u0434\u0435\u043b\u0435\u043d\u0438\u044f Trichomonas vaginalis. \u0412\u043a\u043b\u044e\u0447\u0435\u043d\u0438\u0435 \u043f\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438 \u0432 \u0441\u0440\u0435\u0434\u0443 \u0438\u0433\u0440\u0430\u0435\u0442 \u0432\u0430\u0436\u043d\u0443\u044e \u0440\u043e\u043b\u044c \u0432 \u0432\u044b\u044f\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u0438 Trichomonas vaginalis. \u0421\u0440\u0435\u0434\u0430 \u043e\u0434\u0438\u043d\u0430\u043a\u043e\u0432\u043e \u043f\u043e\u0434\u0445\u043e\u0434\u0438\u0442 \u0434\u043b\u044f \u043e\u0431\u0441\u043b\u0435\u0434\u043e\u0432\u0430\u043d\u0438\u044f \u0443\u0440\u0435\u0442\u0440\u044b, \u0432\u0430\u0433\u0438\u043d\u0430\u043b\u044c\u043d\u044b\u0445 \u0442\u0430\u043c\u043f\u043e\u043d\u043e\u0432 \u0438 \u043e\u0431\u0440\u0430\u0437\u0446\u043e\u0432 \u043c\u043e\u0447\u0438. \u0424\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u044b\u0439 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430\u0442 \u043a\u0430\u0437\u0435\u0438\u043d\u0430, \u043f \u0430\u043f\u0430\u0438\u043d\u043e\u0432\u044b\u0439 \u043f\u0435\u0440\u0435\u0432\u0430\u0440 \u0441\u043e\u0435\u0432\u043e\u0439 \u043c\u0443\u043a\u0438 \u0438 \u043f\u0435\u0440\u0435\u0432\u0430\u0440 \u043f\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438 \u043e\u0431\u0435\u0441\u043f\u0435\u0447\u0438\u0432\u0430\u044e\u0442 \u0430\u0437\u043e\u0442\u0438\u0441\u0442\u044b\u0435 \u0432\u0435\u0449\u0435\u0441\u0442\u0432\u0430. \u0413\u043b\u044e\u043a\u043e\u0437\u0430 \u0434\u0435\u0439\u0441\u0442\u0432\u0443\u0435\u0442 \u043a\u0430\u043a \u0438\u0441\u0442\u043e\u0447\u043d\u0438\u043a \u044d\u043d\u0435\u0440\u0433\u0438\u0438. \u0421\u0435\u043b\u0435\u043a\u0442\u0438\u0432\u043d\u044b\u0439 \u0430\u0433\u0435\u043d\u0442 \u0445\u043b\u043e\u0440\u0430\u043c\u0444\u0435\u043d\u0438\u043a\u043e\u043b \u044f\u0432\u043b\u044f\u0435\u0442\u0441\u044f \u0438\u043d\u0433\u0438\u0431\u0438\u0440\u0443\u044e\u0449\u0438\u043c \u0434\u043b\u044f \u0433\u0440\u0430\u043c\u043f\u043e\u043b\u043e\u0436\u0438\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u044b\u0445 \u0438 \u0433\u0440\u0430\u043c\u043e\u0442\u0440\u0438\u0446\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u044b\u0445 \u0431\u0430\u043a\u0442\u0435\u0440\u0438\u0439, \u043d\u043e \u043d\u0435 \u0434\u043b\u044f \u0432\u0438\u0434\u043e\u0432 Trichomonas. \u0425\u043b\u043e\u0440\u0438\u0434 \u043d\u0430\u0442\u0440\u0438\u044f \u043f\u043e\u0434\u0434\u0435\u0440\u0436\u0438\u0432\u0430\u0435\u0442 \u043e\u0441\u043c\u043e\u0442\u0438\u0447\u0435\u0441\u043a\u043e\u0435 \u0440\u0430\u0432\u043d\u043e\u0432\u0435\u0441\u0438\u0435 \u0441\u0440\u0435\u0434\u044b. \u0414\u0438\u043a\u0430\u043b\u0438\u0439 \u0444\u043e\u0441\u0444\u0430\u0442 \u0431\u0443\u0444\u0435\u0440\u0438\u0437\u0443\u0435\u0442 \u0441\u0440\u0435\u0434\u0443. \u041f\u0430\u043d\u0442\u043e\u0442\u0435\u043d\u0430\u0442 \u043a\u0430\u043b\u044c\u0446\u0438\u044f \u0434\u0435\u0439\u0441\u0442\u0432\u0443\u0435\u0442 \u043a\u0430\u043a \u0444\u0430\u043a\u0442\u043e\u0440 \u0440\u043e\u0441\u0442\u0430. \u041d\u0435\u0431\u043e\u043b\u044c\u0448\u043e\u0435 \u043a\u043e\u043b\u0438\u0447\u0435\u0441\u0442\u0432\u043e \u0430\u0433\u0430\u0440\u0430 \u043f\u043e\u043c\u043e\u0433\u0430\u0435\u0442 \u0441\u043e\u0437\u0434\u0430\u0442\u044c \u0430\u043d\u0430\u044d\u0440\u043e\u0431\u0438\u043e\u0437. \u0414\u043e\u0431\u0430\u0432\u043b\u0435\u043d\u0438\u0435 \u0441\u044b\u0432\u043e\u0440\u043e\u0442\u043a\u0438 \u043b\u043e\u0448\u0430\u0434\u0438 \u0434\u0435\u043b\u0430\u0435\u0442 \u0441\u0440\u0435\u0434\u0443 \u043e\u0447\u0435\u043d\u044c \u043f\u0438\u0442\u0430\u0442\u0435\u043b\u044c\u043d\u043e\u0439, \u043f\u043e\u043b\u0443\u0447\u0438\u0432\u0448\u0435\u0439 T. vaginalis. ","description_short":"

\u0421\u043e\u0441\u0442\u0430\u0432: \n

\n

\u0418\u043d\u0433\u0440\u0435\u0434\u0438\u0435\u043d\u0442\u044b \n \n

\n

\u0433\/\u043b \n \n

\n

\u0424\u0435\u0440\u043c\u0435\u043d\u0442\u0430\u0442\u0438\u0432\u043d\u044b\u0439 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u043b\u0438\u0437\u0430\u0442 \u043a\u0430\u0437\u0435\u0438\u043d\u0430 \n \n

\n

17,00 \n \n

\n

\u041f\u0435\u0440\u0435\u0432\u0430\u0440 \u043f\u0435\u0447\u0435\u043d\u0438 \n \n

\n

18,00 \n \n

\n

\u0413\u043b\u044e\u043a\u043e\u0437\u0430 \n \n

\n

22,50 \n \n

\n

\u0425\u043b\u043e\u0440\u0438\u0434 \u043d\u0430\u0442\u0440\u0438\u044f \n \n

\n

5,00 \n \n

\n

\u041f\u0430\u043f\u0430\u0438\u043d\u043e\u0432\u044b\u0439 \u043f\u0435\u0440\u0435\u0432\u0430\u0440 \u0441\u043e\u0435\u0432\u043e\u0439 \u043c\u0443\u043a\u0438 \n \n

\n

0,25 \n \n

\n

\u0414\u0438\u043a\u0430\u043b\u0438\u0439 \u0433\u0438\u0434\u0440\u043e\u0444\u043e\u0441\u0444\u0430\u0442 \n \n

\n

2,50 \n \n

\n

\u0425\u043b\u043e\u0440\u0430\u043c\u0444\u0435\u043d\u0438\u043a\u043e\u043b \n \n

\n

0,125 \n \n

\n

\u041f\u0430\u043d\u0442\u043e\u0442\u0435\u043d\u0430\u0442 \u043a\u0430\u043b\u044c\u0446\u0438\u044f \n \n

\n

* \u041e\u0431\u0435\u0437\u0432\u043e\u0436\u0435\u043d\u043d\u044b\u0439 \u043f\u043e\u0440\u043e\u0448\u043e\u043a, \u0445\u0440\u0430\u043d\u0438\u0442\u044c \u0432 \u0441\u0443\u0445\u043e\u043c \u043c\u0435\u0441\u0442\u0435 \u0432 \u043f\u043b\u043e\u0442\u043d\u043e \u0437\u0430\u043a\u0440\u044b\u0442\u044b\u0445 \u043a\u043e\u043d\u0442\u0435\u0439\u043d\u0435\u0440\u0430\u0445 \u043d\u0438\u0436\u0435 25 \u00b0C \u0438 \u0437\u0430\u0449\u0438\u0449\u0430\u0442\u044c \u043e\u0442 \u043f\u0440\u044f\u043c\u044b\u0445 \u0441\u043e\u043b\u043d\u0435\u0447\u043d\u044b\u0445 \u043b\u0443\u0447\u0435\u0439. ","available_now":"","available_later":"\u041f\u043e\u0434 \u0437\u0430\u043a\u0430\u0437","id":11572,"id_product":11572,"out_of_stock":2,"new":0,"id_product_attribute":"0","quantity_wanted":1,"extraContent":[<"title":"\u041e\u0442\u0437\u044b\u0432\u044b","content":"

Селенитовый бульон — среда обогащения с селективными свойствами, предназначенная для выделения патогенной бактерий рода сальмонелла (лат. Salmonella). Она очень эффективна при необходимости обнаружить именно этот патогенный организм в числе других представителей кишечной микрофлоры. Среда используется как для клинической диагностики, так и в санитарных целях при проверке пищевых продуктов.

Общая характеристика

Селенитовый бульон готовится на основе порошка, представляющего собой гомогенизированную смесь различных компонентов состава. Цвет сухого материала может быть светло-желтым или кремовым, в зависимости от типа среды. Порошок обладает сыпучими свойствами.

Готовый селенитовый бульон представляет собой жидкую прозрачную среду светло-желтого цвета. Эта масса заливается в емкости, куда производится посев для дальнейшей инкубации.


Существует три основных вида селенитового бульона:

  • среда в чистом виде — подходит для выделения сальмонелл как из клинического, так и из санитарного материала;
  • с добавлением маннита (двухкомпонентный бульон) — предназначен для работы только с клиническим материалом;
  • цистеин-селенитовая среда — может использоваться для выделения сальмонелл из патологического биоматериала пациента (кал, моча и др).

Эти типы немного отличаются компонентным составом и особенностями действия.

Основная задача селенитового бульона — способствовать накоплению сальмонелл, подавляя рост сопутствующей микрофлоры. Это дает возможность не только обнаружить патоген в материале, но и впоследствии пересеять его на агар. Среда была разработана Лейфлером, который первым обнаружил селективное действие селенита в отношении сальмонелл.

Состав

В состав селенитового бульона входят:

  • гидролизат казеина;
  • лактоза;
  • фосфат натрия;
  • гидроселенит натрия.

Селенит-цистеиновая среда, кроме этих компонентов, содержит L-цистеин и гидрофосфат натрия. Состав бульона с маннитом отличается тем, что вместо гидролизата казеина туда входит пептический перевар животной ткани. Лактоза в такой среде отсутствует, но зато есть маннит. Последний выступает в качестве ферментируемого субстрата и обеспечивает буферные свойства бульона.

Все компоненты порошка, кроме гидроселенита натрия, условно называют частью А, а селективное вещество — частью Б.

Принцип действия и свойства среды

Селенитовый бульон работает как накопительная среда с селективным действием. Избирательный эффект обеспечивается за счет токсичности селенита, который подавляет рост большинства микроорганизмов. При этом бактерии рода сальмонелла способны восстанавливать это соединение, тем самым устраняя токсический эффект для собственных клеток. Однако в результате реакции образуется щелочь, которая снижает пагубное влияние селенита на рост сопутствующей микрофлоры, в связи с чем возникает необходимость стабилизировать pH. Эту функцию выполняют бактерии, ферментирующие лактозу с образованием кислоты. Буферность среды обеспечивается фосфатом.

В двухкомпонентном бульоне pH стабилизируется за счет маннита. Среда с цистеином улучшает селективное действие в отношении сальмонелл. Такой бульон эффективен для контроля инфекционного фона у пациентов с неострой стадией заболевания или реконвалесцентов.


Проявление ростовых характеристик референтных штаммов в среде можно наблюдать по истечении 12-24 часов с момента начала инкубации. При этом сальмонеллы образуют бесцветные колонии.

Особенности приготовления

Приготовление среды осуществляют в два этапа. Вначале делают раствор с селективным компонентом из расчета 4 грамма селенита натрия на литр дистиллированной воды. Затем добавляют 19 грамм основного порошка (часть А). Раствор тщательно перемешивают и подогревают до полного растворения частиц, после чего заливают в стерильные пробирки.


При приготовлении важно следить за температурным режимом, поскольку среда неустойчива к перегреву. Стерилизацию бульона можно осуществлять только на водяной бане или же использовать струю пара. Автоклавирование среды категорически недопустимо.

Тендер: Поставка микробиологических питательных сред

Предмет закупки:
Наименование товара, работы, услуги Код по ОКПД2 Единица измерения Количество Цена за ед.изм. Стоимость
Бацитрацин (1фл.х50дисков)(ФСЗ 2009/03634) (для идентификации Streptococcus pyogenes) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Селективная добавка для бруцелл, модифицированная (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708)(Методические рекомендации Роспотребнадзора МР 02.009-06.Саратов.2006) 20.59.52.140 УПАК 2.00 5 988 ,67 11 977 ,34
Добавка для изучения коагулазной активности стафилолококков, (1уп.=2Х5фл.) (1фл. по Змл.) (ФСЗ 2012/12473) (аналог кроличья плазма) 20.59.52.140 УПАК 2.00 20 869 41 738
Добавка для кампилобактерий-V (BFCSA), (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 3 594 ,67 7 189 ,34
Бульон для обнаружения кишечной палочки, 100г 20.59.52.140 УПАК 3.00 3 980 ,67 11 942 ,01
Стандартный питательный агар, 500г 20.59.52.140 УПАК 3.00 6 910 ,33 20 730 ,99
Основа модифицированной среды CPLM для трихомонад, 500г 20.59.52.140 УПАК 3.00 11 816 ,67 35 450 ,01
ХайХром агар для сальмонелл, 500г 20.59.52.140 УПАК 3.00 97 032 ,67 291 098 ,01
Питательный агар, 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 3.00 4 426 ,33 13 278 ,99
Основа двухпробирочной среды Кона №1, 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 2.00 17 595 ,33 35 190 ,66
Целлобиоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Глюкоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Основа селективной среды для бруцелл, 500г 20.59.52.140 УПАК 6.00 6 913 ,67 41 482 ,02
Дульцит (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Галактоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 410 ,33 1 230 ,99
Основа селективного агара для выделения S.agalactiae (Основа селективного ХайХром агара для стрептококков группы В), 500г (ФСЗ 2009/03709) 20.59.52.140 УПАК 3.00 23 128 ,33 69 384 ,99
Основа агара М-СР для клостридий, 500г (ФСЗ 2009/03709) 20.59.52.140 УПАК 3.00 6 913 ,67 20 741 ,01
Основа бульона (вторичного) обогащения для листерий, 500г 20.59.52.140 УПАК 3.00 7 988 ,67 23 966 ,01
Основа ХайХром агара для выделения и идентификации стафилококков, 500г 20.59.52.140 УПАК 3.00 15 773 ,33 47 319 ,99
Основа ХайХром агара для дрожжевых и плесневых грибов, 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 3.00 24 283 ,33 72 849 ,99
Основа колумбийского кровяного агара, 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 2.00 5 069 10 138
Агар-агар (бактериологический), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 3.00 10 856 ,67 32 570 ,01
Бульон с маннитом и феноловым красным, 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 3.00 8 101 24 303
Бульон Сабуро с глюкозой, 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 2.00 3 564 ,33 7 128 ,66
Селективная добавка Фрейзера, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 5.00 3 599 ,67 17 998 ,35
Селективная добавка с окситетрациклином, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 2 331 ,67 4 663 ,34
Селективная добавка для Enterococcus faecium, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 5.00 6 337 ,33 31 686 ,65
ХайХром селективная добавка для стрептококков группы В, (1уп.х5фл.) (ФСЗ 2012/12473) 20.59.52.140 УПАК 5.00 6 257 ,67 31 288 ,35
Печеночный экстракт, сухой (бактериологический), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 3.00 7 905 ,67 23 717 ,01
Мясной экстракт, сухой (бактериологический), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 2.00 5 934 ,33 11 868 ,66
Сорбитол (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Сахароза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Трегалоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Ксилоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 410 ,33 1 230 ,99
Инулин (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Рамноза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 519 ,33 1 557 ,99
Салицин (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Эмульсия яичного желтка стеллуритом (для бактериологии), (1уп.=5фл.х100 мл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 10 240 ,33 20 480 ,66
Лактоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Мальтоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Маннит (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 275 825
Манноза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 505 1 515
Мелибиоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Раффиноза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Жидкая тиогликолевая среда (сделано в соответствии с Европейской фармакопеей -Fluid Thioglycollate Medium), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 3.00 4 128 ,33 12 384 ,99
ХайХром агар для обнаружения и подсчета уропатогенных бактерий, 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 1.00 28 437 28 437
Основа ХайФлюоро агара для Pseudomonas aeruginosa, 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 2.00 90 565 ,33 181 130 ,66
Фенилаланиновый агар , 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 2.00 7 662 ,33 15 324 ,66
Сабуро декстрозный агар, 500г (ФСЗ 2009/03709) 20.59.52.140 УПАК 2.00 4 157 ,67 8 315 ,34
Основа уреазного агара (по Кристенсену), 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 3.00 5 346 16 038
Адонит (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) . 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Арабиноза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Пептон специальный, 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 2.00 7 729 15 458
Мочевина 40% раствор (для бактериологии)(добавка), 1уп.=10фл. (ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 1 760 ,33 3 520 ,66
Эмульсия яичного желтка (для бактериологии), (1уп.=5фл.х100 мл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 20.00 10 240 ,33 20 480 6,6
Фруктоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 383 1 149
Печеночный бульон, 500г (ФСЗ 2009/03706) 20.59.52.140 УПАК 3.00 6 497 ,33 19 491 ,99
Инозит (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 3.00 652 ,67 1 958 ,01
Селективная добавка для среды М-СР (I), (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 5.00 6 438 ,33 32 191 ,65
Селективная добавка для среды М-СР (II), (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 5.00 4 191 20 955
Селективная добавка L.mono II, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 4 897 ,33 9 794 ,66
Селективная добавка L.mono II, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 10.00 4 504 ,67 4 504 6,7
Бактериологический Пептон, 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 5.00 4 210 ,33 21 051 ,65
Казеина Ферментативный Гидролизат; (Тип-1), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 2.00 5 985 ,67 11 971 ,34
Казеина Кислотный Гидролизат (технический), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 5.00 6 583 32 915
Лошадиная сыворотка (питательная добавка), (Стерилизовано гамма-облучением) (Отсутствуют бактерии, грибы, микоплазмы, бактериофаги, возбудители губчатой энцефолопатии) 100 мл. (ФСЗ 2012/12473) 20.59.52.140 УПАК 20.00 10 119 202 380
Маннит (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 10.00 252 ,67 252 6,7
Лактозно-желатиновая среда, 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 1.00 9 498 ,33 9 498 ,33
Ксилоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 10.00 377 ,33 377 3,3
Основа дифференциального агара для листерий (среда ALOA, агар Оттавиани - Агости), 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 2.00 13 057 26 114
Добавка с сульфаметазином для среды Бэрда-Паркера, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 3 594 ,67 7 189 ,34
Манноза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 10.00 464 ,33 464 3,3
Экстракт Дрожжевой (бактериологический), 500г (ФСЗ 2009/03707) 20.59.52.140 УПАК 15.00 5 494 ,67 82 420 ,05
Глюкоза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 10.00 252 ,67 252 6,7
Основа дифференциального агара для листерий (среда ALOA, агар Оттавиани - Агости), 500г (ФСЗ 2009/03705) 20.59.52.140 УПАК 3.00 12 011 ,33 36 033 ,99
Обогатительная добавка L.mono I, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 10.00 22 525 225 250
Обогатительная добавка L.mono I, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 5.00 24 488 ,67 122 443 ,35
Сердечно-мозговой агар с дрожжевым экстрактом (для культивирования микоплазм и L-форм бактерий), 500г (ФСЗ 2009/03706) 20.59.52.140 УПАК 3.00 10 187 ,67 30 563 ,01
Набор красителей для окрашивания кислотоустойчивых микроорганизмов, (1набор)(ФСЗ 2009/03635) 20.59.52.140 НАБОР 3.00 4 279 12 837
Селективная добавка L.mono I, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 2.00 3 267 ,33 6 534 ,66
Рамноза (1фл.х25дисков)(ФСЗ 2009/03633) 20.59.52.140 ФЛАК 10.00 477 ,67 477 6,7
Селективная добавка L.mono I, (1уп.х5фл.)(ФСЗ 2009/03708) 20.59.52.140 УПАК 10.00 3 005 ,33 3 005 3,3
Итого: 2 480 618 ,75

Почтовый адрес: Российская Федерация, 123022, Москва, ш ЗВЕНИГОРОДСКОЕ, 5

Ответственное должностное лицо: Самарчян Стэлла Эдуардовна

Адрес электронной почты: tender@vgnki.ru

Номер контактного телефона: 7-495-9285018

Место доставки товара, выполнения работ и оказания услуг: Российская Федерация, Москва

Размер обеспечения заявок: 24806.19

Размер обеспечения исполнения контракта: 124030.94
Среды готовые питательные для выращивания микроорганизмов
код_к-->

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.