Рекомендации по эпидемиологическому надзору за энтеровирусами для поддержки программы ликвидации полиомиелита
УТВЕРЖДАЮ
Руководитель Федеральной
службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей и
благополучия человека,
Главный государственный
санитарный врач
Российской Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
31 декабря 2008 г.
ПРОГРАММА
"ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЙ НАДЗОР И ПРОФИЛАКТИКА ЭНТЕРОВИРУСНОЙ
(НЕПОЛИО) ИНФЕКЦИИ НА 2009-2011 ГГ."
Паспорт Программы
"Эпидемиологический надзор и профилактика энтеровирусной
(неполио) инфекции на 2009-2011 гг."
Наименование Программы - "Эпидемиологический надзор и
профилактика энтеровирусной (неполио)
инфекции на 2009-2011 гг."
Основание для разработки - нестабильная ситуация в Российской
Программы Федерации по заболеваемости
энтеровирусной (неполио) инфекцией:
регистрация эпидемических очагов с
групповыми случаями заболеваний,
сезонные эпидемические подъемы
заболеваемости, возможность завоза с
сопредельных территорий и государств
Основные разработчики - Федеральная служба по надзору в сфере
Программы защиты прав потребителей и благополучия
человека, ФГУЗ "Федеральный центр
гигиены и эпидемиологии"
Роспотребнадзора, ГУ "Институт
полиомиелита и вирусных энцефалитов
имени М.П.Чумакова" РАМН
Цели Программы - снижение заболеваемости энтеровирусной
(неполио) инфекцией, предотвращение
эпидемических подъемов заболеваемости и
формирования локальных очагов,
недопущение распространения клинических
форм энтеровирусной инфекции,
приводящих к инвалидизации и летальным
исходам
Задачи Программы - изучение эпидемического процесса
энтеровирусной (неполио) инфекции
- определение закономерностей развития
эпидемических подъемов заболеваемости и
формирования локальных очагов
- установление причин формирования
эпидемических штаммов энтеровирусной
(неполио) инфекции
- усовершенствование лабораторной
диагностики энтеровирусной (неполио)
инфекции
- совершенствование системы
эпидемиологического надзора за
энтеровирусной (неполио) инфекцией
- оптимизация системы санитарно-
противоэпидемических (профилактических)
мероприятий
- подготовка квалифицированных кадров по
вопросам диагностики, эпидемиологии и
профилактики энтеровирусной (неполио)
инфекции
Показатели Программы - уровни заболеваемости энтеровирусной
(неполио) инфекцией, в том числе
серозным менингитом
- доля умерших от энтеровирусной
(неполио) инфекции в течение года
- число эпидемических вспышек, вызванных
энтеровирусами
- удельный вес подтвержденных и
этиологически расшифрованных случаев
энтеровирусной (неполио) инфекции
- число эпидемических вспышек
энтеровирусной (неполио) инфекции,
купированных в течение 1-го
инкубационного периода
- удельный вес этиологически
расшифрованных эпидемических очагов
энтеровирусной (неполио) инфекции
- число выделенных энтеровирусов
(неполио) из объектов окружающей среды
- структура выделенных энтеровирусов
(неполио) из объектов окружающей среды
- число исследований на
неполиоэнтеровирусы (НПЭВ), проведенных
в вирусологических лабораториях в
плановом и во внеплановом порядке
Объемы и источники - Федеральный бюджет, финансовые
финансирования программы средства, выделенные на реализацию
региональных и ведомственных отраслевых
программ в сфере обеспечения санитарно-
эпидемиологического благополучия
населения, а также финансовые средства
из других источников в соответствии с
законодательством Российской Федерации
Ожидаемые конечные - Снижение заболеваемости энтеровирусной
результаты реализации (неполио) инфекцией
Программы и показатели ее
социально-экономической - уменьшение числа случаев инвалидизации
эффективности и предотвращение летальных исходов
- снижение числа регистрируемых вспышек
энтеровирусной (неполио) инфекции
- определение причин формирования
эпидемических штаммов энтеровирусов
- внедрение в практику алгоритма по
купированию очагов энтеровирусной
(неполио) инфекции
- введение стандарта по лабораторной
диагностике энтеровирусных (неполио)
инфекций и выделению НПЭВ из объектов
внешней среды
- внедрение в практику профилактических
мероприятий, направленных на
предотвращение формирование
эпидемических очагов
- внедрение схем экстренной
неспецифической профилактики
энтеровирусной (неполио) инфекции
Без эффективного эпидемиологического надзора, который является фундаментом всей работы по ликвидации полиомиелита, невозможно определить, где и как продолжает циркулировать полиовирус, или подтвердить его ликвидацию.
Для этого нужны квалифицированные вирусологи, эпидемиологи, клиницисты и вакцинаторы, опирающиеся на глобальную лабораторную сеть. Первым звеном системы надзора за болезнью являются работники медицинских учреждений первичного уровня. Они должны оперативно сообщать о каждом случае острого вялого паралича (ОВП) у детей в возрасте до пятнадцати лет. Кроме того, ответственный медицинский работник должен периодически посещать больницы и Центр реабилитации для выявления случаев ОВП, которые остались нераспознанными или не были зарегистрированы. При этом необходимо проверить истории болезни как госпитализированных, так и амбулаторных больных, а также побеседовать с персоналом медицинского учреждения. Нужно также установить тесные контакты с местной администрацией и наиболее авторитетными представителями общественности, учителями и социальными работниками, от которых можно получить информацию о недавних случаях паралитических заболеваний у детей.
На ранних стадиях заболевания бывает сложно отличить полиомиелит от других форм острых вялых параличей.
ВОЗ подчеркивает,что должны быть зарегистрированы абсолютно все случаи ОВП. Такие заболевания могут возникнуть в любом возрасте и не обязательно должны быть связаны с полиовирусами. Число таких случаев, регистрируемых ежегодно, может служить показателем эффективности национальной системы эпидемиологического надзора — в том числе и в тех случаях, когда полиомиелит в стране уже ликвидирован. Система надзора должна быть достаточно чувствительной — даже при отсутствии заболеваний полиомиелитом должно регистрироваться не менее одного случая ОВП на 100 тысяч детей в возрасте до пятнадцати лет.
На ранних стадиях заболевания бывает сложно отличить полиомиелит от других форм острых вялых параличей. Именно поэтому врачи должны обязательно регистрировать любой случай острого вялого паралича — даже тогда, когда на основании результатов клинического обследования больного они совершенно уверены, что это не полиомиелит. Доказательства того, что в паралитические заболевания детей не связаны с полиовирусом, имеют особенно важны для документального подтверждения ликвидации полиомиелита. По мере того, как в результате проведения национальных дней иммунизации заболевания полиомиелитом будут прекращаться, почти все случаи ОВП будут обусловлены другими причинами. Не менее половины случаев ОВП будут связаны с синдромом Гийена-Барре (это заболевание неизвестной этиологии, поражающее людей любого возраста, но чаще всего — взрослых). Синдром Гийена-Барре обычно характеризуется симметричными параличами, проявляющимися одинаково интенсивно с обеих сторон и в большинстве случаев заканчивающимися полным выздоровлением. Для полиомиелита же характерны несимметричные стойкие параличи. Острые вялые параличи могут быть вызваны различными причинами, в том числе с поперечным миелитом, травматическим невритом или поражением энтеровирусами.
Для исключения возможного диагноза полиомиелита необходимо исследовать на полиовирусы пробу фекалий больного. Длительность выделения вируса с фекалиями у разных больных различна, поэтому рекомендуется исследовать две пробы, взятые с интервалом не менее чем 24 часа. Не следует откладывать вирусологический анализ, так как максимальная концентрация вируса в фекалиях отмечается в течение первых двух недель после начала паралитического заболевания.
Пробы фекалий должны быть тщательно запечатаны в чистые контейнеры, которые необходимо сразу же поместить в холодильник с температурой 4-8° С или в термоконтейнер, в котором уже находятся хладоэлементы (пакеты со льдом), и как можно раньше направить в лабораторию. При непредвиденных задержках в доставке материала или при нарушении температурного режима в процессе транспортировки вирус может погибнуть. Пробы фекалий должны поступить в лабораторию не позже, чем через 72 часа после их взятия. Если доставить пробы на исследование в такие сроки невозможно, их следует заморозить при -20° С и затем транспортировать в лабораторию в замороженном состоянии, лучше всего — предварительно упаковав с сухим льдом или с хладоэлементами, замороженными при такой же температуре.
В лаборатории производят посев исследуемого материала на культуры клеток, с тем чтобы вирусолог смог выделить полиовирус и определить, к какому из трех возможных типов он относится. Если в клеточной культуре обнаружены изменения, свидетельствующие о наличии вирусов в пробе, необходимо отделить полиовирусы от других вирусов, которые могут присутствовать в фекалиях. Для этого используют специфические антитела к различным вирусам, которые блокируют репликацию гомологичных вирусов и позволяют вирусологу идентифицировать полиовирус.
Если в лаборатории удается выделить полиовирус, на следующем этапе необходимо определить, является ли выделенный штамм диким (т. е. естественного происхождения) или вакцинным (искусственного происхождения). В частности, это можно сделать с помощью иммуноферментного анализа, используя специфические антитела к вакцинным или диким вирусам для определения небольших различий в антигенной структуре этих штаммов.
После вспышки полиомиелита в Албании в 1996 году целью кампании массовой иммунизации было сделать привививки более чем трем миллионам человек.
Точная информация об особенностях циркуляции полиовирусов имеет существенное значение для разработки наиболее экономичной и эффективной стратегии ликвидации полиомиелита. Там, где выявленные территории циркуляции полиовируса не совпадают с границами государств или регионов, могут потребоваться согласованные международные акции для синхронизации проведения национальных дней иммунизации и максимального повышения их эффективности. Например, в районе дельты Меконга на территории Вьетнама и Камбоджи были зарегистрированы случаи полиомиелита, вызванные близко родственными штаммами полиовируса. В связи с этим были разработаны согласованные планы проведения национальных дней иммунизации в одни и те же сроки, чтобы оказать наибольшее воздействие на ход эпидемии. Другой пример: Китай и Бирма также провели согласованные мероприятия по борьбе с полиомиелитом. В апреле 1995 года ВОЗ приступила к осуществлению межрегиональной кампании массовой иммунизации (операция МЕКАКАР), в ходе которой было иммунизировано 56 миллионов детей в восемнадцати соседних странах Среднего Востока, Кавказа и Центральной Азии. В декабре 1996 года во время согласованной кампании всего за неделю удалось привить более 250 миллионов детей в Бангладеш, Бутане, Китае, Индии, Бирме, Непале, Пакистане, Таиланде и Вьетнаме. До недавнего времени две трети всех случаев полиомиелита приходилось на страны Юго-Восточной Азии, а циркулировавшие здесь полиовирусы были причиной возникновения многочисленных вспышек инфекции в других регионах планеты. Специалисты считают, что только в 1992-1993 годах вирусы с Индийского субконтинента были импортированы в Канаду, Германию, Иорданию, Малайзию, Нидерланды, Норвегию, Оман, Швецию и Объединенные Арабские Эмираты.
Необходимо срочно повысить качество эпидемиологического надзора во многих странах. Из 116 стран, где полиомиелит до недавних пор был или пока все еще остается эндемичной инфекцией, лишь менее чем в 10 % регистрируется минимальный уровень заболеваемости острыми вялыми параличами (один случай на 100 тысяч детей в возрасте до пятнадцати лет). Более того, к концу 1996 года в 25 странах с эндемическим полиомелитом еще не был организован эпидемиологический надзор за ОВП, четкое функционирование которого является непременным условием для подтверждения ликвидации болезни. Если в 1997 году эти страны не выполнят необходимые требования ВОЗ, сертифицировать ликвидацию полиомиелита в них будет невозможно.
480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация, - 480 руб., доставка 1-3 часа, с 10-19 (Московское время), кроме воскресенья
Автореферат - бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников
Чернявская, Ольга Павловна. Эпидемиологический надзор за острыми вялыми параличами в период реализации программы ликвидации полиомиелита в Российской Федерации : диссертация . кандидата медицинских наук : 14.02.02 / Чернявская Ольга Павловна; [Место защиты: ГОУВПО "Российский университет дружбы народов"].- Москва, 2012.- 137 с.: ил.
Введение к работе
Актуальность проблемы. Главной вехой в истории борьбы с полиомиелитом является создание вакцин против полиомиелита и в первую очередь – живой оральной полиомиелитной вакцины (ОПВ). Именно наличие этой вакцины позволило поставить задачу ликвидации этого тяжелого заболевания в глобальном масштабе. Успех ликвидации заболеваемости в большинстве стран мира трудно переоценить, но поставленная задача ликвидировать инфекцию не выполнена. В настоящее время не только не удалось ликвидировать полиомиелит в мире, но имеет место распространение инфекции из эндемичных стран на территории государств, в которых была прекращена циркуляция дикого полиовируса (Сейбиль В.Б. и соавт., 2011). Реализация Глобальной Программы ликвидации полиомиелита оказалась более сложной, чем это представлялось на начальном этапе ее выполнения. Трудности в реализации программы связаны с наличием вакцинородственных штаммов вируса полиомиелита, возникновением вакциноассоциированных случаев заболеваний, снижением охвата прививками против полиомиелита, увеличением количества мигрантов и кочующих групп населения (Онищенко Г.Г. и соавт., 2008).
По последним данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) в мире остаются 3 эндемичные страны, в которых местная передача дикого вируса полиомиелита никогда не прекращалась - это Нигерия, Пакистан и Афганистан, ежегодно отмечается завоз дикого полиовируса в страны, свободные от полиомиелита.
После провозглашения Программы ликвидации полиомиелита (1988 г.) ВОЗ был разработан план по ликвидации полиомиелита в мире, одним из разделов которого было введение в странах эпидемиологического надзора за заболеваниями с синдромом острого вялого паралича (ОВП).
В период ликвидации любой инфекции особенно важным является получение и анализ специфичных и надежных доказательств о ее полном отсутствии на конкретной территории. Для полиомиелита - это выявление не менее одного случая заболеваний с ОВП на 100 тысяч детей до 15 лет (Marx A. и соавт., 2000). Под синдром ОВП понимают любой случай острого вялого паралича у ребенка до 15 лет, включая синдром Гийена-Барре, или любое паралитическое заболевание независимо от возраста при подозрении на полиомиелит. Синдром ОВП охватывает все случаи паралитического полиомиелита. Выявление максимального количества ОВП служит показателем эффективности системы эпидемиологического надзора и сохранения высокого уровня настороженности медицинских работников в отношении полиомиелита. Каждый случай ОВП должен рассматриваться как потенциальный случай полиомиелита, требующий немедленного эпидемиологического расследования.
В период отсутствия заболеваний полиомиелитом, вызванным диким штаммом полиовируса на первое место в России вышла проблема вакциноассоциированного паралитического полиомиелита (ВАПП). Все случаи ВАПП были выявлены в рамках эпидемиологического надзора за ОВП. В целях исключения случаев ВАПП в календарь профилактических прививок введена вакцинация инактивированной полиомиелитной вакциной (ИПВ).
В 2010 г. ситуация по полиомиелиту в мире осложнилась в связи с возникновением в Республике Таджикистан вспышки этого заболевания, вызванного диким полиовирусом. В России, впервые после 1996 г., зарегистрированы случаи полиомиелита, вызванные завозным диким полиовирусом. Все эти случаи были выявлены в рамках эпидемиологического надзора за ОВП и благодаря своевременно организованным противоэпидемическим (профилактическим) мероприятиям удалось не допустить распространение инфекции (Онищенко Г.Г. и соавт., 2011).
Учитывая глобальные процессы в мире, стирание границ, огромное количество мигрантов и гастарбайтеров в последнее время риск завоза вируса из эндемичных регионов значительно увеличился. Поэтому эпидемиологический надзор за заболеваниями, сопровождающимися ОВП, будет продолжаться до полной глобальной ликвидации полиомиелита.
Наибольшую значимость в современных условиях приобретают вопросы дальнейшего совершенствования эпидемиологического надзора за ОВП, системой их регистрации, окончательной классификации каждого случая, определения новых подходов к проведению дополнительной иммунизации против полиомиелита и выбору вакцин для иммунизации.
Целью исследования явилось совершенствование организации эпидемиологического надзора за острыми вялыми параличами в период реализации Программы ликвидации полиомиелита в Российской Федерации.
Задачи исследования
Изучить уровень заболеваемости полиомиелитом и острыми вялыми параличами в Российской Федерации.
Установить этиологические, эпидемиологические и клинические особенности полиомиелита и заболеваний с синдромом острого вялого паралича в Российской Федерации на этапе реализации Программы ликвидации полиомиелита.
Усовершенствовать систему эпидемиологического надзора за острыми вялыми параличами на этапе реализации Программы ликвидации полиомиелита в России.
Оптимизировать систему мероприятий по профилактике полиомиелита, включая случаи завоза дикого вируса из стран (территорий) эндемичных (неблагополучных) по полиомиелиту.
Научная новизна исследования
Впервые изучена динамика заболеваемости полиомиелитом в России за период 1998-2009 гг., которая характеризовалась отсутствием полиомиелита, вызванного диким полиовирусом и регистрацией только случаев ВАПП.
Изучена многолетняя динамика заболеваемости ОВП в России в период с 1998 по 2009 гг., характеризующаяся наличием тенденции к незначительному увеличению уровня заболеваемости с темпом роста 0,018%000 в год. Среднемноголетний показатель заболеваемости ОВП за изучаемый период составил 1,7 на 100 тысяч детей до 15 лет.
Проанализирована внутригодовая динамика заболеваемости полиомиелитом и ОВП, позволившая установить отсутствие сезонности в проявлениях заболеваемости полиомиелитом и ОВП.
Определено, что основными этиологическими агентами возникновения ВАПП являются полиовирусы типа 2 и 3. От больных ОВП превалирует выделение полиовируса типа 3.
Охарактеризованы клинические особенности острых вялых параличей, свидетельствующие о преобладании в структуре клинических проявлений ОВП полирадикулонейропатий, в т.ч. синдрома Гийена-Барре.
Практическая значимость работы
В результате проведенного исследования:
Разработаны и законодательно утверждены форма, объем, структура и периодичность подачи информационных данных по регистрации (заболеваемости) острыми вялыми параличами в интересах функционирования системы эпидемиологического надзора за полиомиелитом и острыми вялыми параличами в рамках Глобальной программы ликвидации полиомиелита.
Выявлены субъекты Российской Федерации, где ежегодно регистрируются наиболее высокие показатели заболеваемости ОВП, в том числе субъекты с высокой численностью населения и наличием профильных клинических научно-исследовательских учреждений, что свидетельствует о высоком уровне организации эпидемиологического надзора на данных территориях.
Показано, что главным направлением совершенствования эпидемиологического надзора за полиомиелитом и заболеваниями с синдромом острого вялого паралича является системный подход к сбору и анализу информации, включающий эпидемиологический, этиологический и клинический мониторинг.
Предложены изменения в комплексе мероприятий в очаге полиомиелита, вызванного диким полиовирусом, включающие иммунизацию контактных лиц и сокращение объемов лабораторных обследований в очаге полиомиелита.
Предложена новая схема иммунизации против полиомиелита: в детских закрытых учреждениях – применение только ИПВ, в Национальном календаре профилактических прививок постепенное увеличение доз ИПВ и отказ от ОПВ.
Внедрение результатов исследования в практику
На основании результатов исследования автором разработаны и внедрены в практику здравоохранения Российской Федерации следующие нормативные и методические документы:
Национальный план действий по поддержанию свободного от полиомиелита статуса Российской Федерации на 2009-2011 гг. и на 2012-2014 гг.
Апробация работы
Личный вклад автора
Автор принял личное участие в сборе исходных данных для проведения научного исследования, в проведении ретроспективного эпидемиологического анализа заболеваемости полиомиелитом и ОВП, в проведении анализа и законодательной модернизации существующей системы эпидемиологического надзора за острыми вялыми параличами на этапе реализации Программы ликвидации полиомиелита. Математико-статистическая обработка материала проводилась с личным участием автора. Автор принял личное участие в подготовке специалистов Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по вопросам профилактики полиомиелита, эпидемиологическому надзору за острыми вялыми параличами, а также в разработке информационных и обучающих материалов по данным вопросам.
Публикации
По материалам выполненных исследований опубликовано 16 печатных работ, в том числе 6 работ в журналах, поименованных в перечне ВАК Российской Федерации.
Структура и объем диссертации
Идентификацию выделенных штаммов НПЭВ проводят в реакции нейтрализации инфекционности на культуре клеток микрометодом.
Используют смеси иммунных к энтеровирусам сывороток, которые распространяются ВОЗ для лабораторий, включённых в Глобальную лабораторную сеть по диагностике полиомиелита, позволяющие определить принадлежность выделенного вируса к полиовирусу, группе вирусов Коксаки В1-6, идентифицировать 20 серотипов вирусов ЕСНО и вирус Коксаки А9. Могут быть использованы антисыворотки к НПЭВ, зарегистрированные и разрешённые в Российской Федерации к применению в установленном порядке. Подготовку рабочих разведений сывороток/смесей сывороток проводят в соответствии с инструкциями производителя.
Типирование выделенного вируса проводят на той культуре, на которой он выделен.
Выделенные штаммы НПЭВ и исходные образцы фекалий, из которых они были выделены, в течение 7 дней после идентификации направляют в НЦ для проведения подтверждающих исследований. При выявлении смеси полиовируса и НПЭВ в НЦ отправляют неразделённую смесь или разделённые штаммы для подтверждения результатов и ВТД полиовируса.
Внутритиповая дифференциация полиовирусов
ВТД полиовирусов выполняет НЦ, используя для этого два метода, рекомендованные и поддерживаемые реагентами ВОЗ:
1) метод иммуноферментного анализа с использованием перекрёстно адсорбированных антисывороток
2) метод диагностической ПЦР.
ВТД должна быть проведена в течение 14 дней от момента получения из РЦ или выделения и идентификации штамма в НЦ. Каждый штамм должен быть исследован двумя методами ВТД.
Сроки хранения материалов от больных полиомиелитом, с подозрением на это заболевание, с синдромом ОВП, а также от лиц общавшихся с ними
Все образцы фекалий от больных ПОЛИО/ОВП, а также от лиц общавшихся с ними, хранят при температуре минус 20 0 С в течение 12 месяцев от момента поступления в лабораторию.
Экстракты образцов фекалий хранят при температуре минус 20 0 С в течение 3 месяцев от момента подтверждения результата исследования в НЦ.
Изоляты полиовирусов/НПЭВ хранят при температуре минус 20 0 С в течение 3 месяцев от момента подтверждения результата исследования в НЦ и получения результатов ВТД.
После истечения срока хранения материалы уничтожаются автоклавированием в установленном порядке.
Выявление и титрование нейтрализующих антител к полиовирусу.
Выявление специфических антител к полиовирусу в сыворотках больных ПОЛИО/ОВП проводят с диагностическими целями в реакции нейтрализации инфекционности микрометодом. Порядок отбора, хранения, направления для исследования парных сывороток изложен в пп. 3 и 4 настоящих МУ.
В основе определения титров антител с помощью реакции нейтрализации лежит принцип взаимодействия известного вируса с гомологичными антителами, присутствующими в сыворотке, что проявляется в виде отсутствия ЦПЭ на культуре клеток.
Для реакции нейтрализации с целью выявления антител к полиовирусу используют клетки НЕр-2 (Cincinnati).
В качестве известного вируса с известным титром используют только вакцинные штаммы Сэбина вируса полиомиелита типов 1, 2 и 3 (референс-штаммы). Предварительно готовят рабочие запасы референс-штаммов, используя для пассажа штаммы, полученные в НЦ (выполняют не более 3-х последовательных пассажей на культуре клеток НЕр-2 при температуре 36 0 С). Рабочие запасы референс-штаммов разливают на аликвоты, достаточные для проведения одного опыта, в пластиковые флаконы с завинчивающейся крышкой, тщательно маркируют и хранят при температуре от минус 20 0 С до минус 70 0 С. До постановки опыта нейтрализации определяют титр референс-штаммов (Приложение 5), исходя из которого рассчитывают рабочее разведение вируса каждого типа так, чтобы в 50 мкл вируссодержащей жидкости содержалось 100 ТЦД50 (допускаются колебания в интервале 50-200 ТЦД50).
В каждый опыт включают контрольное титрование лабораторной референс-сыворотки, т.е. сыворотки с известным уровнем нейтрализующей активности. Такая сыворотка обычно представляет собой смесь сывороток взрослых людей, недавно иммунизированных бустер-дозой оральной полиовирусной вакциной. Сыворотку разливают на аликвоты, которые хранят при температуре минус 20 0 С.
Работают с сыворотками в резиновых перчатках в БЗУ 2 класса безопасности.
Проведение реакции нейтрализации для выявления антител к полиовирусу изложено в Приложении 6, рис.2.
Обеспечение биологической безопасности при проведении вирусологических исследований материалов от больных полиомиелитом, с подозрением на это заболевание, с синдромом острого вялого паралича
1. Доступ посторонних лиц в лабораторию ограничен. К работе допускаются сотрудники, только полностью иммунизированные против полиомиелита.
2. Работа в лаборатории проводится в лабораторной защитной одежде и лабораторной обуви с закрытыми носками.
3. Все перечисленные работы проводятся с полным соблюдением мер безопасности: регистрация проб, обработка проб, работа с пипетками, отделение сыворотки крови от сгустка, использование центрифуг, гомогенизаторов, встряхивателей, ультразвуковых и механических измельчителей ткани, холодильников, хранение инфекционных материалов, вскрытие ампул с инфекционным материалом, пересылка и транспортирование клинических проб и проб с инфекционным материалом.
4. В лаборатории запрещается приём пищи и питья, курение. В лабораторных помещениях и в каких-либо хранилищах, где могут находиться инфекционные материалы, запрещается хранение пищи и питья.
5. Первичная обработка материала, заражение культур клеток, работы, связанные с использованием выделенных штаммов вирусов, серологические исследования проводят в резиновых перчатках в БЗУ 2 класса безопасности.
6. В каждом вирусологическом боксе должны быть инструкции по проведению каждого вида работ. Все приборы – центрифуги, БЗУ 2 класса защиты и пр., должны иметь инструкции по работе с ними.
7. Контейнеры из-под первичного материала, использованная одноразовая посуда, наконечники микропипеток, микротитровальные планшеты, пипетки и пр. во время проведения работ собирают в пластиковые пакеты, предназначенные для автоклавирования. После окончания работ – обеззараживают автоклавированием. Стеклянную посуду помещают в 6% раствор перекиси водорода.
8. Обеззараживание рабочих поверхностей, оборудования проводят дезинфицирующими средствами с вирулицидной активностью, не содержащими хлора, и последующей обработкой ультрафиолетом в течение 30-60 минут.
9. Потенциальные источники дикого полиовируса для снижения риска случайного инфицирования сведены к минимуму следующим образом:
- использование дикого полиовируса прекращается во всех случаях, где ту же задачу можно выполнить при помощи аттенуированных вакцинных штаммов, инактивированных антигенов или НПЭВ;
- во всех случаях, когда нет программной или научной необходимости хранения полиовирусов, все запасы таких вирусов и потенциально инфицированных ими материалов, следует уничтожить автоклавированием или сжиганием.
10. Лаборатории, сохраняющие дикие полиовирусы, должны выполнять следующие требования:
- если дикие полиовирусы необходимы для проведения исследований, то используют только штаммы, которые могут быть легко идентифицированы молекулярными методами;
- все виды работ с материалами, инфицированными или потенциально инфицированными дикими полиовирусами, проводят в БЗУ 2 класса безопасности;
- холодильники/морозильники, в которых хранят дикие полиовирусы, запираются (доступ к ключам ограничен), чётко маркируются, как хранящие такие вирусы;
- инвентарные списки материалов, инфицированных или потенциально инфицированных дикими полиовирусами, должны быть полными, включать сведения о происхождении материала, источнике, дате сбора, количестве, расположении в холодильнике;
- материалы, инфицированные или потенциально инфицированные дикими полиовирусами, хранят в пластиковых пробирках с завинчивающимися крышками и непротекающих прочных контейнерах, переносят из холодильника в холодильник в непротекающих прочных вторичных контейнерах.
Приложение 1
Нормативные ссылки
1. Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан от 22 июля 1993г. № 5487-1.
3. Положение о Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Утверждено постановлением Правительства Российской Федерации от 30 июня 2004 г. № 322.
4. Положение об осуществлении государственного санитарно-эпидемиологического надзора в Российской Федерации. Утверждено постановлением Правительства Российской Федерации от 15 сентября 2005 г. № 569.
5. Положение о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании. Утверждено постановлением Правительства Российской Федерации от 24 июля 2000 № 554.
6. Общие требования по профилактике инфекционных и паразитарных болезней. СП 3.1.3.2.1379-03.
7. Организация и проведение производственного контроля за соблюдением санитарных правил и выполнением санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий. СП 1.1.1058-01.
8. Изменения и дополнения № 1 к СП 1.1.1058-01 - Организация и проведение производственного контроля за соблюдением санитарных правил и выполнением санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий. СП 1.1.2193-07.
9. Санитарно-эпидемиологические требования к организациям и осуществлению дезинфекционной деятельности. СП 3.5.1378-03.
10. Отраслевой стандарт. Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения. Методы, средства и режимы (ОСТ 42-21-85)
11. Безопасность работы с микроорганизмами III-IУ групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней. СП 1.3.2322-08.
12. Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IУ групп патогенности. СП 1.2.036-95.
13. Безопасность работы с материалами, инфицированными или потенциально инфицированными диким полиовирусом. СП 1.3.1325-03.
14. Порядок учета, хранения, передачи и транспортировки материалов, инфицированных или потенциально инфицированных диким полиовирусом. СП 1.3.1.2690-07.
18. Энтеровирусные заболевания: клиника, лабораторная диагностика, эпидемиология, профилактика. МУ 3.1.1.2130-06.
19. Организация контроля за уровнем квалификации персонала вирусологических лабораторий по вопросам безопасности лабораторного хранения материала, инфицированного или потенциально инфицированного диким полиовирусом. МР № 0100-8607-07-34 от 23.08.2007 г.
20. Дезинфекция, предстерилизационная очистка и стерилизации изделий медицинского назначения . МУ № 287-113 от 30.12.03.
21. Контроль работы паровых и воздушных стерилизаторов. МУ 1516-5 от 28.02.91.
22. Использование электромагнитного излучения сверхвысокой частоты для обеззараживания инфекционных медицинских отходов. МР 02.007-06.
23. Методические указания № 11-16/03-06 по применению бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха и поверхностей в помещениях, утв. Минздравмедпромом России 28.02.95.
24. Инструкция по эксплуатации и контролю эффективности вентиляционных устройств на объектах здравоохранения, утв.Минздравом СССР 20.03.75.
25. Организация работы при исследовании методом ПЦР материала, инфицированного патогенными биологическими агентами III-IV групп патогенности. МУ 1.3.1888-04.
26. Организация работы по обеспечению безопасного лабораторного хранения диких полиовирусов. МР 12.11.2001.
27. Руководство по лабораторным исследованиям полиомиелита, 4-е издание. ВОЗ, Женева, 2005 г.
28. Рекомендации по эпидемиологическому надзору за энтеровирусами для поддержки программы ликвидации полиомиелита. ВОЗ, Женева, 2005 г.
29. Глобальный план действий для обеспечения безопасного лабораторного хранения диких полиовирусов. ВОЗ, Женева, 2000 г.
30. Рекомендации по обеспечению безопасного лабораторного хранения дикого полиовируса. ВОЗ, Женева, 2000 г.
31.Руководство по лабораторной безопасности, 3-е издание. ВОЗ, Женева, 2004 г.
32.Национальный план действий по поддержанию свободного от полиомиелита статуса Российской Федерации. Утвержден Минзравсоцразвитием 17.03.2006 г.
Приложение 2
Дата добавления: 2018-02-28 ; просмотров: 102 ;
Читайте также:
