Молоко и молочные продукты методы определения стафилококка гост
Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочные продукты, закваски, бактериальные концентраты и препараты и устанавливает два метода определения Staphylococcus aureus в определенном объеме или навеске продукта - определение количества с предварительным обогащением; определение количества без предварительного обогащения.
Метод определения Staphylococcus aureus с предварительным обогащением основан на высеве навески продукта и разведении его в жидкую селективную среду, инкубировании посевов, учете положительных пробирок (колб), пересеве на плотные селективные среды с последующим подтверждением принадлежности выросших колоний к Staphylococcus aureus .
Метод определения количества Staphylococcus aureus без предварительного обогащения посевом на агаризованные селективные среды основан на высеве продукта или разведении его на поверхности плотной среды, инкубировании, подсчете типичных колоний Staphylococcus aureus с последующим подтверждением выросших колоний к Staphylococcus aureus по плазмокоагулирующей способности.
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 9225-84 Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа
ГОСТ 10444.11-89 Продукты пищевые. Методы определения молочнокислых микроорганизмов
ГОСТ 27583-88 Яйца куриные пищевые. Технические условия
сухая плазма кроличья, цитратная;
контрольный штамм Staphylococcus aureus ;
калия теллурит [2], раствор с массовой концентрацией 10 г/дм 3 ;
глицин [1], раствор с массовой концентрацией 200 г/дм 3 ;
натрия пируват [8], раствор с массовой концентрацией 200 г/дм 3 ;
литий хлористый, гексагидрат [4];
экстракт дрожжевой [3] или
экстракт дрожжевой, очищенный [7];
фуксин основной [5], спиртовой раствор с массовой концентрацией 50 г/дм 3 ;
3.2 Питательные среды
3.2.3 Желточную эмульсию готовят следующим образом.
3.2.4 Солевой бульон*:
Состав: натрий хлористый ( NaCl ) - 7,5 г;
питательный сухой бульон - 1,5 г;
или гидролизованное молоко - 100 см 3 .
Приготовление: в 100 см 3 дистиллированной воды вносят 1,5 г сухого питательного бульона, кипятят 1-2 мин, фильтруют через ватный тампон, добавляют 7,5 г NaCl , устанавливают рН (6,9 ± 0,1).
Разливают в пробирки или колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 1) °С в течение (10 ± 1) мин.
Или к 100 см 3 гидролизованного молока добавляют 7,5 г NaCl , устанавливают рН (6,9 ± 0,1), разливают и стерилизуют, как указано выше.
3.2.5 Желточно-солевой агар**
Состав: питательный агар***
для культивирования микроорганизмов (на основе гидролизата кильки) [10] - 35 г
питательный агар II ***
(на основе гидролизата кормовых дрожжей) [10] - 24 г;
натрий хлористый ( NaCl ) - 75 г;
эмульсия желточная - 50,0 см 3 ;
вода дистиллированная - 1 дм 3 .
Приготовление: в 1 дм 3 дистиллированной воды вносят 36 г питательного агара для культивирования микроорганизмов или 24 г питательного агара сухого II , добавляют 75 г хлористого натрия ( NaCl ), кипятят до полного расплавления агара, фильтруют через ватный тампон, разливают во флаконы или колбы и стерилизуют при температуре (121 ± 1) °С в течение (20 ± 1) мин. После стерилизации охлаждают до температуры (45 ± 1) °С и добавляют 50 см 3 предварительно подготовленной желточной эмульсии. Смесь тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри. Чашки со средой хранят в холодильнике не более 5 сут.
3.2.6 Молочно-солевой агар**
Состав: питательный агар*** для культивирования микроорганизмов (на основе гидролизата кильки) [10] - 35 г
или питательный агар II *** (на основе гидролизата кормовых дрожжей) [10] - 24,0 г; натрий хлористый ( NaCl ) - 75,0 г;
молоко обезжиренное - 100 см 3 ;
вода дистиллированная - 1 дм 3 .
Приготовление: среду готовят, указано в 3.2.5, но после охлаждения до температуры (45 ± 1) °С добавляют вместо желточной эмульсии 100 см 3 стерильного обезжиренного молока. Смесь тщательно перемешивают и разливают в чашки Петри. Чашки со средой хранят в холодильнике не более 5 сут.
3.2.7 Агар Байрд-Паркера * 4
Состав. Основа среды:
дрожжевой экстракт [3] - 1,0 г;
* Допускается применение солевого бульона [9], который готовится согласно указанию на этикетке.
** Допускается использовать солевой агар [9], который готовится согласно указанию на этикетке и к которому после стерилизации добавляется желточная эмульсия или обезжиренное молоко.
*** При изменении заводом-изготовителем количества вносимой среды на 1 дм дистиллированной воды, количество среды вносится согласно указанию на этикетке.
* 4 Допускается использовать агар Байрд-Паркера [9]. Среда готовится согласно указанию на этикетке.
мясной экстракт - 5,0 г;
литий хлористый, гексагидрат [4] - 5,0 г;
вода дистиллированная - 1 дм 3 .
Раствор пирувата натрия:
пируват натрия [8] - 20,0 г;
вода дистиллированная - 100 см 3 .
вода дистиллированная - 100,0 см 3 .
3.2.7.1 Приготовление основы среды: в 1 дм 3 дистиллированной воды вносят 10 г триптона, 5 г мясного экстракта, 1 г дрожжевого экстракта, 5 г хлористого лития, 20 г агара.
При отсутствии мясного экстракта, триптона и дрожжевого экстракта вместо дистиллированной воды применяют 1 дм 3 мясопептонного бульона или питательный агар для культивирования микроорганизмов сухой или питательный агар сухой II [10].
Все компоненты, внесенные в 1 дм 3 дистиллированной воды (мясопептонный бульон), нагревают и перемешивают до полного растворения, охлаждают до температуры 50-60 °С. Устанавливают рН (7,2 ± 0,1), разливают в колбы или бутылки по 90 см 3 и стерилизуют при температуре (121 ± 1) °С в течение (20 ± 1) мин.
При использовании сухой среды в 1 дм 3 дистиллированной воды вносят 36 г питательного агара для культивирования микроорганизмов или 24 г питательного агара сухого II , добавляют 5 г хлористого лития. Нагревают до полного растворения, охлаждают до температуры 50-60 °С, устанавливают рН (7,2 ± 0,1), разливают и стерилизуют, как указано выше.
Готовую основу среды хранят не более 30 сут при температуре (6 ± 2) °С.
3.2.7.2 Перед использованием к 90 см 3 расплавленной основы среды добавляют асептически стерилизованные фильтрованием через мембранный фильтр растворы: 6,3 см 3 раствора глицина, 5 см 3 раствора пирувата натрия; 1 см 3 раствора теллурита калия; 5 см 3 желточной эмульсии.
Допускается растворы глицина, пирувата натрия, теллурита калия и желточную эмульсию готовить в асептических условиях на стерильной дистиллированной воде.
После тщательного перемешивания приготовленную среду разливают в чашки Петри.
Чашки со средой можно хранить не более 48 ч.
4.1 Приготовление растворов и реактивов
4.1.1 Раствор плазмы кроличьей цитратной готовится согласно инструкции по применению плазмы, прилагаемой к упаковке.
4.1.3 Приготовление реактивов для окраски по Грому
4.1.3.1 Приготовление реактива 1
В 100 см 3 этилового спирта растворяют 0,5 г кристаллического фиолетового [6].
4.1.3.2 Приготовление реактива 2
К 96 см 3 спиртового раствора йодистого калия массовой концентрацией 5 г/дм 3 добавляют 2 см 3 спиртового раствора основного фуксина [5] массовой концентрацией 50 г/дм 3 и 2 см 3 спиртового раствора йода массовой концентрацией 50 г/дм 3 .
Йодистый калий растворяют в спирте на водяной бане при температуре (45 ± 5) °С при постоянном помешивании.
5.1 Метод определения количества Staphylococcus aureus с предварительны м обогащением
5.1.1 Подготовка и проведение контроля
5.1.1.1 Из навески продукта готовят ряд десятикратных разведений по ГОСТ 9225 так, чтобы можно было определить наличие или отсутствие Staphylococcus aureus в определенной массе (объеме), указанной в нормативном документе на конкретный продукт.
5.1.1.2 Навеску продукта или его разведения засевают по 1 см 3 в пробирки или колбочки с солевым бульоном (3.2.4).
Соотношение между количеством высеваемого продукта или его эквивалентным разведением и питательной средой 1 : 10.
Пробирки и колбочки с посевами выдерживают в термостате при температуре (37 ± 1) °С в течение 24 ч.
5.1.1.3 Для подтверждения принадлежности микроорганизмов, выросших на солевом бульоне, к Staphylococcus aureus делают пересев петлей из бульона для получения изолированных колоний на чашки Петри с подсушенными средами типа Байрд-Паркера (3.2.7), желточно-солевой агар или молочно-солевой агар (3.2.5; 3.2.6).
Чашки с посевами выдерживают в термостате при температуре (37 ± 1) °С в течение 24-48 ч.
5.1.1.4 После термостатирования посевы просматривают и отмечают рост характерных колоний.
На желточно-солевом агаре колонии Staphylococcus aureus имеют форму плоских дисков диаметром 2-4 мм белого, желтого, кремового, лимонного, золотистого цвета с ровными краями; вокруг колоний образуется радужное кольцо и зона помутнения среды.
На молочно-солевом агаре колонии Staphylococcus aureus растут в виде непрозрачных круглых колоний, окрашенных от белого до оранжевого цвета, диаметром 2-4 мм, слегка выпуклых.
На среде Байрд-Паркера колонии Staphylococcus aureus растут в виде черных, блестящих, выпуклых колоний диаметром 1-1,5 мм, окруженных зоной просветления среды шириной 1-3 мм.
5.1.1.5 С каждой чашки Петри отбирают не менее пяти характерных колоний и пересеивают на поверхность скошенного питательного агара, как указано в 3.2.5, но без добавления хлористого натрия и желточной эмульсии.
Посевы выдерживают в термостате при температуре (37 ± 1) °С в течение 24 ч. У выросших колоний определяют отношение к окраске по Граму и коагулированию плазмы кролика.
5.1.1.6 Из пяти изолированных, характерных для Staphylococcus aureus колоний, делают препараты, окрашивают по Граму и микроскопируют.
Для приготовления препарата на чистое и охлажденное после фламбирования предметное стекло наносят петлей каплю дистиллированной воды, в которую вносят петлей небольшое количество агаровой культуры, не размешивая в воде. Затем вносят петлей каплю реактива 1, приготовленного по 4.1.3.1. Смесь распределяют на участке примерно 1 см 2 , просушивают при температуре (20 ± 2) °С и фиксируют, медленно пронося предметное стекло над пламенем горелки. На одном стекле можно готовить по шесть - восемь мазков, отделяя их один от другого линиями, проведенными с лицевой стороны стекла.
Препарат ополаскивают водой и тщательно просушивают фильтровальной бумагой.
После просушивания на препарат наносят с избытком реактив 2, приготовленный по 4.1.3.2 так, чтобы жидкость покрыла всю поверхность стекла. Продолжительность окрашивания 0,5 -1 мин. После окрашивания препарат быстро ополаскивают проточной водой, направляя струю под углом на стекло, помещенное вертикально. Препарат просушивают фильтровальной бумагой и просматривают под микроскопом с иммерсионной системой. Микробы, красящиеся по Граму, будут темно-фиолетового цвета, не красящиеся по Граму - красного цвета.
Стафилококки окрашиваются по Граму положительно (темно-фиолетового цвета), имеют шарообразную форму и располагаются скоплениями, чаще всего напоминающими гроздья винограда.
5.1.1.7 Постановка реакции плазмокоагуляции
В пробирку с 0,5 см 3 разведенной кроличьей плазмы вносят петлю суточной агаровой культуры. Внесенную культуру тщательно размешивают. Одну пробирку с плазмой оставляют незасеянной, а в другую засевают контрольный штамм Staphylococcus aureus (коагулазоположительный стафилококк). Пробирки помещают в термостат и выдерживают при температуре (37 ± 1) °С в течение 3-6 ч. Если через 6 ч коагуляции плазмы не произошло, то оставляют эти пробирки до 24 ч. Если через 24 ч плазма не свернулась, то испытуемую культуру стафилококка относят к коагулазоотрицательной.
При определении коагулазной активности реакцию считают отрицательной в тех случаях, когда в плазме не образуются отдельные нити или сгустки, или в тех случаях, когда в плазме появились отдельные нити (реакцию плазмокоагуляции оценивают на один плюс).
Реакцию считают положительной, если:
+ + + - сгусток, имеющий небольшой отсек;
+ + - сгусток в виде взвешенного мешочка.
Все три варианта являются положительным результатом.
При получении положительной реакции считают, что в посевах обнаружен Staphylococcus aureus .
5.1.2 Обработка результатов контроля
Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
5.1.3 Оформление результатов контроля
Морфологические, культуральные свойства и положительная реакция плазмокоагуляции свидетельствуют о присутствии коагулазоположительных стафилококков в засеянной массе продукта.
5.2 Метод определения количества Staphylococcus aureus без предварительного обогащения
5.2.1 Проведение контроля
5.2.1.1 1 см 3 жидкого продукта или его разведения (5.1.1) наносят на поверхность питательных сред (3.2.5 или 3.2.6 или 3.2.7) в 3 чашки Петри, тщательно растирают шпателем по поверхности питательной среды. Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение 24-48 ч. Чашки Петри с посевами инкубируют дном вверх.
5.2.1.2 После термостатирования подсчитывают количество характерных колоний на каждой чашке Петри (5.1.4). С каждой чашки Петри отбирают не менее пяти характерных и/или подозрительных колоний Staphylococcus aureus , а в случае роста менее пяти - все колонии характерные для Staphylococcus aureus и пересевают на поверхность скошенного питательного агара, разлитого в пробирки, как указано в 3.2.5, но без добавления хлористого натрия и желточной эмульсии. Пробирки с посевами выдерживают в термостате при температуре (37 ± 1) °С в течение 24 ч.
У выросших культур определяют отношение к окраске по Граму и коагулированию плазмы кролика в соответствии с требованиями 5.1.6 и 5.1.7.
5.2.2 Обработка результатов контроля
Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
Если при изучении характерных колоний в 80 % случаев, то есть не менее чем в 4 из 5 колоний подтвержден рост Staphylococcus aureus , то считают, что все характерные колонии, выросшие на чашках Петри (5.1.7), принадлежат к Staphylococcus aureus . В остальных случаях количество Staphylococcus aureus определяют, исходя из процентного отношения подтвержденных колоний к общему количеству характерных колоний, взятых для подтверждения.
5.2.3 Оформление результатов контроля
Количество колоний Staphylococcus aureus в 1 г или 1 см 3 Х после определения его в определенной навеске продукта вычисляют по формуле
п - число десятикратных разведений.
Подсчитываем количество колоний Staphylococcus aureus , выросших на трех засеянных чашках при посевах продукта или его разведений:
1 г или 1 см 3 продукта - 84 96 72
10 -1 разведение - 9 10 7
10 -1 разведение - 84 96 72
10 -2 разведение - 99 10 7
[1] ТУ 6-09-09-200-84 Глицин для медицинских целей
[2] ТУ 6-09-2060-77 Калий теллуристокислый водный
[3] ТУ 6-09-3462-73 Экстракт дрожжевой. Технические условия
[4] ТУ 6-09-3751-83 Литий хлорид 1-водный. Технические условия
[5] ТУ 6-09-3804-82 Фуксин основной для микробиологических целей. Технические условия
[6] ТУ 6-09-4119-75 Кристаллический фиолетовый. Технические условия
[7] ТУ 6-09-4510-77 Экстракт дрожжевой очищенный. Технические условия
[8] ТУ 6-09-08-990-75 Натрий пировинограднокислый. Технические условия
[9] ТУ 10-02-02-789-176-94 Среды питательные сухие для определения Staphylococcus aureus . Технические условия
Ключевые слова : питательные среды, коагулазоположительные стафилококки, характерные колонии, окраска по Граму, коагулирование плазмы
ГОСТ 27583-88. На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 52121-2003. Яйца куриные пищевые. Технические условия
Сметное дело и ценообразование в строительстве. Расчет смет.
Период обучения:
15 января - 5 марта 2019 года
Информационный бюллетень БУДСТАНДАРТ Online. Выпуск №1 2020 года
Утверждены изменения к ДБН В.2.4-2-2005, ДБН Б.2.2-5:2011, ДБН В.1.2-2:2006, ДБН В.1.2-6-2008, ДБН В.2.6-160:2010, ДБН .2.6-98:2009, ДБН В.2.2-25:2009 и ДБН В.2.5-76:2014
Перечень документов, которые вступили в силу 1 апреля 2020 года
Правительство обновило прогноз экономического и социального развития Украины на 2020 год
Новый указатель нормативных документов по дорожной отрасли Украины
Усредненные показатели транспортных расходов для определения в инвесторской сметной документации стоимости перевозки строительных грузов автомобильным транспортом (по состоянию на 01.03.2020)
Предложения об изменениях законодательства в сфере развития альтернативных источников энергии
Для работы с текстом документа
(печать документа, поиск по тексту)
необходимо авторизоваться.
Сервис содержит 19006 бесплатных документов, которые доступны зарегистрированным пользователям. Регистрируйся бесплатно >>>
- Информация о документе
- Ссылки на документы
- Ссылки из других документов
В данном документе нет ссылок на другие нормативные документы.
МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ
МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
STAPHYLOCOCCUS AUREUS
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ
ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
Минск
ВНЕСЕН Госстандартом Российской Федерации
2 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол № 11 от 25 апреля 1997 г.)
За принятие проголосовали:
Наименование национального органа по стандартизации
Главная государственная инспекция Туркменистана
3 Постановлением Государственного комитета Российской Федерации по стандартизации, метрологии и сертификации от 25 сентября 1997 г. № 341 межгосударственный стандарт ГОСТ 30347—97 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта Российской Федерации с 1 июля 1998 г. с правом досрочного введения
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
5 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Июль 2000 г.
1 Область применения
2 Нормативные ссылки
3 Средства контроля и вспомогательные устройства
3.1 Аппаратура, материалы, реактивы
3.2 Питательные среды
4 Порядок подготовки к проведению контроля
4.1 Приготовление растворов и реактивов
4.2 Отбор и подготовка проб
5 Порядок проведения контроля.
5.1 Метод определения количества Staphylococcus aureus с предварительным обогащением
5.1.1 Подготовка и проведение контроля
5.1.2 Обработка результатов контроля
5.1.3 Оформление результатов контроля
5.2 Метод определения количества Staphylococcus aureus без предварительного обогащения
5.2.1 Проведение контроля
5.2.2 Обработка результатов контроля
5.2.3 Оформление результатов контроля
Приложение А Библиография
МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ
Методы определения Staphylococcus aureus
Milk and milk products.
Methods for determination of staphylococcus aureus
Дата введения 1998—07—01
Дата введения в Украине 1999-07-01
1 ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочные продукты, закваски, бактериальные концентраты и препараты и устанавливает два метода определения Staphylococcus aureus в определенном объеме или навеске продукта — определение количества с предварительным обогащением; определение количества без предварительного обогащения.
Метод определения Staphylococcus aureus с предварительным обогащением основан на высеве навески продукта и разведении его в жидкую селективную среду, инкубировании посевов, учете положительных пробирок (колб), пересеве на плотные селективные среды с последующим подтверждением принадлежности выросших колоний к Staphylococcus aureus.
Метод определения количества Staphylococcus aureus без предварительного обогащения посевом на агаризованные селективные среды основан на высеве продукта или разведении его на поверхности плотной среды, инкубировании, подсчете типичных колоний Staphylococcus aureus с последующим подтверждением выросших колоний к Staphylococcus aureus по плазмокоагулирующей способности.
2 НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ*
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
ГОСТ 9225—84 Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа
ГОСТ 10444.11—89 Продукты пищевые. Методы определения молочнокислых микроорганизмов
ГОСТ 27583—88 Яйца куриные пищевые. Технические условия
Исследование молока и молочных продуктов проводится согласно НТД:
Пробы молочных продуктов для анализа отбирают в стерильную посуду, посев проводится не позднее 4х'часов с момента отбора. Пробы должны храниться и транспортироваться при температуре не выше 6 градусов, не допуская подмораживания. Поверхность упаковки перед посевом обрабатывается 70 градусным спиртом и вскрывается у спиртовки. Продукт тщательно перемешиваем. Кисломолочные продукты и закваски нейтрализуем 10% раствором гидрокарбоната натрия! Перед посевом готовим Юкратные разведение продукта в стерильном изотоническом растворе хлористого натрия. Для этого из проб молока, сливок, сметаны, кисломолочных напитков, мороженого, масла отбираем Юкуб.см. и вносим в 90куб.см. раствора хлористого натрия и получаем разведение 1:10, для масла и мороженого раствор хлористого натрия берем подогретый до 40-45градусов. Из проб творога, творожных изделий, сыра делаем навеску Юграмм и добавляем к 90куб.см. хлористого натрия, получая разведение 1:10. Дальнейшие разведения готовим из исходных. Для приготовления каждого разведения пользуемся новой стерильной пипеткой. В молочных продуктах определяем:
Патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы;
Количество плесневых и дрожжевых грибов;
Для определения количества МАФАнМ выбираем те разведения, при посевах которых на чашках вырастает не менее 30 и не более 300 колоний. Посев делаем на 2 стерильные чашки Петри из соответствующих разведений в количестве 1куб.см. Чашки заливаем расплавленным и охлажденным до 45 градусов слабо-щелочным агаром, содержимое чашек тщательно перемешиваем. После застывания чашки переворачиваем и инкубируем в термостате при ЗО градусах в течение 72 часов.
Для определения БГКП пользуемся средой Кесслер. Метод основан на способности бактерий группы кишечной палочки сбраживать в среде Кесслер лактозу, в следствие чего - образуются кислота и газ. Посев проводится по 1куб.см. из соответствующих разведений в 5куб.см. среды Кесслер. Посевы растут при Т 37градусов 18-20часов. Посевы просматриваем и при отсутствии газообразования в пробирках продукт считают не загрязненным БГКП. При наличии газа в засеянном объеме делаем высев на среду Эндо, далее отвиваем на среду с глюкозой.
Для определения наличия патогенных м/о проводим посев 25граммов продукта в магневую среду, посевы выдерживаем в термостате при Т 37градусов в течение 18-24 часов, после инкубации делаем высев на среды Плоскирева, висмут-сульфитный агар, среду Левина. После инкубации чашки просматриваются и отбираются характерные для патогенных колоний. Проводим дальнейшую идентификацию.
Для определения количества стафилококка делаем посев продукта или его разведений в солевой бульон. Соотношение засеваемого продукта и питательной среды 1:10. Выращивание при 37 градусах 24 часа. Для подтверждения выросших на бульоне м/о делаем высев петлей на чашке Петри подсушенного желточно-солевого агара и инкубируем при 37 градусах 24-48 часов. Из характерных колоний делаем препараты, окрашиваем по Граму и микроскопируем. Стафилококки -грамположительны, имеют шарообразную форму и располагаются скоплениями, чаще в виде виноградной грозди. Для подтверждения принадлежности к золотистому стафилококку ставим реакцию плазмокоагуляции. В пробирку с 0.5мл разведенной кроличьей плазмы вносим петлю суточной агаровой культуры, пробирку ставим в термостат и выдерживаем при 37 градусах в течение 3-6 часов. Если через 6 часов не произошло коагуляции плазмы, то оставляем до следующего дня. Если плазма не свернулась через 24 часа, то культуру относят к коагулазоотрицательным.
Наличие плесневых и дрожжевых грибов определяем при посеве продукта и их разведений на среде Сабуро. Посевы выращиваем при комнатной температуре в течение 120 часов. Подсчитываем количество характерных выросших колоний.
Определение количества бифидобактерий в кисломолочных продуктах проводим после нейтрализации. Берем разведение от 4 до 8 и засеваем пробирки с бифидоагаром, разлитую высоким столбиком не менее Юкуб.см. После тщательного перемешивания посевы .помещаем в термостат при 37 градусах на 72 часа предварительный учет допускается через 48 часов. Подтверждению наличия бифидобактерий проводим методом микроскопирования. Мазки грамположительной палочки, слегка изогнутые с бифуркацией на концах или без нее, расположенные группами в виде римских пятерок, могут образовывать короткие цепочки. На мазке может присутствовать и другая флора (молочнокислые стептококки и палочки или единичные клетки дрожжей).
Определение молочнокислых микроорганизмов распространяется на кисломолочные продукты и закваски. Метод основан на высеве определенного количества продукта или его разведений в жидкие или агаризованные селективные питательные среды, культивировании посевов при оптимальных условиях и при необходимости определении морфологических и биохимических свойств обнаруженных м/о. Посевы делаем в стерильное обезжиренное молоко, термостатируем при 32 градусах в течение 72 часов. При развитии молочнокислых бактерий молоко свертывается. При необходимости проводим микроскопирование препаратов.
ГОСТ 31450-2013 Молоко питьевое. Технические условия
ГОСТ 31450-2013
Группа Н17
Drinking milk. Specifications
Дата введения 2014-07-01
Предисловие
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом молочной промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИМИ Россельхозакадемии)
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт)
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 7 июня 2013 г. N 43)
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97
Код страны поМК (ИСО 3166) 004-97
Сокращенное наименование национального органа по стандартизации
4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. N 268-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 31450-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2014 г.
5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
6 Настоящий стандарт разработан на основе применения ГОСТ Р 52090-2003
1 Область применения
Настоящий стандарт распространяется на упакованное в потребительскую тару после термической обработки или термообработанное в потребительской таре питьевое молоко (далее — продукт), изготавливаемое из коровьего сырого молока и/или молочных продуктов, и предназначенное для непосредственного использования в пищу.
Настоящий стандарт не распространяется на обогащенное питьевое молоко.
Требования, обеспечивающие безопасность продукта, изложены в 5.1.4, 5.1.5, требования к качеству — в 5.1.2, 5.1.3, требования к маркировке — в 5.3.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:
ГОСТ 8.579-2002 Государственная система обеспечения единства измерений. Требования к количеству фасованных товаров в упаковках любого вида при их производстве, расфасовке, продаже и импорте
ГОСТ 2493-75 Реактивы. Калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный. Технические условия
ГОСТ 3622-68 Молоко и молочные продукты. Отбор проб и подготовка их к испытанию
ГОСТ 3623-73 Молоко и молочные продукты. Методы определения пастеризации
ГОСТ 3624-92 Молоко и молочные продукты. Титриметрические методы определения кислотности
ГОСТ 3625-84* Молоко и молочные продукты. Методы определения плотности
________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 54758-2011, здесь и далее по тексту. — Примечание изготовителя базы данных.
ГОСТ 4172-76 Реактивы. Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный. Технические условия
ГОСТ 5538-78 Реактивы. Калий лимоннокислый 1-водный. Технические условия
ГОСТ 5867-90 Молоко и молочные продукты. Методы определения жира
ГОСТ 8218-89 Молоко. Метод определения чистоты
ГОСТ 9225-84* Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа
________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 53430-2009, здесь и далее по тексту. — Примечание изготовителя базы данных.
ГОСТ 14192-96 Маркировка грузов
ГОСТ 15846-2002 Продукция, отправляемая в районы Крайнего Севера и приравненные к ним местности. Упаковка, маркировка, транспортирование и хранение
ГОСТ 22280-76 Реактивы. Натрий лимоннокислый 5,5-водный. Технические условия
ГОСТ 23452-72* Молоко и молочные продукты. Методы определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 23452-79, здесь и далее по тексту. — Примечание изготовителя базы данных.
ГОСТ 23285-78 Пакеты транспортные для пищевых продуктов и стеклянной тары. Технические условия
ГОСТ 23327-98 Молоко и молочные продукты. Метод измерения массовой доли общего азота по Кьельдалю и определение массовой доли белка
ГОСТ 25228-82 Молоко и сливки. Метод определения термоустойчивости по алкогольной пробе
ГОСТ 25776-83 Продукция штучная и в потребительской таре. Упаковка групповая в термоусадочную пленку
ГОСТ 26663-85 Пакеты транспортные. Формирование на плоских поддонах. Общие технические требования
ГОСТ 26754-85 Молоко. Методы измерения температуры
ГОСТ 26809-86 Молоко и молочные продукты. Правила приемки, методы отбора и подготовка проб к анализу
ГОСТ 28283-89 Молоко коровье. Метод органолептической оценки запаха и вкуса
ГОСТ 26927-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения ртути
ГОСТ 26932-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения свинца
ГОСТ 26933-86 Сырье и продукты пищевые. Методы определения кадмия
ГОСТ 30178-96 Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбционный метод определения токсичных элементов
ГОСТ 30347-97 Молоко и молочные продукты. Методы определения Staphylococcus aureus
ГОСТ 30519-97* Продукты пищевые. Метод выявления бактерий рода Salmonella
________________
* На территории Российской Федерации документ не действует. Действует ГОСТ Р 52814-2007, здесь и далее по тексту. — Примечание изготовителя базы данных.
ГОСТ 30538-97 Продукты пищевые. Методика определения токсичных элементов атомно-эмиссионным методом
ГОСТ 30711-2001 Продукты пищевые. Методы выявления и определения содержания афлатоксинов и
ГОСТ 31449-2013 Молоко коровье сырое. Технические условия
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
3.1 питьевое молоко: Молочный продукт с массовой долей жира менее 10%, подвергнутый термической обработке, как минимум пастеризации, без добавления сухих молочных продуктов и воды, расфасованный в потребительскую тару.
4.1 Продукт в зависимости от молочного сырья изготовляют:
— из цельного молока;
4.2 Продукт по 4.1 в зависимости от режима термической обработки подразделяют:
5 Технические требования
5.1 Основные показатели и характеристики
5.1.1 Продукт изготовляют в соответствии с требованиями [1] настоящего стандарта по технологическим инструкциям с соблюдением гигиенических требований для предприятий молочной промышленности, действующих на территории государства, принявшего стандарт.
5.1.2 По органолептическим характеристикам продукт должен соответствовать требованиям таблицы 1.
Непрозрачная жидкость. Для продуктов с массовой долей жира более 4,7% допускается незначительный отстой жира, исчезающий при перемешивании
Жидкая, однородная нетягучая, слегка вязкая. Без хлопьев белка и сбившихся комочков жира
Характерные для молока, без посторонних привкусов и запахов, с легким привкусом кипячения. Для топленого и стерилизованного молока — выраженный привкус кипячения. Допускается сладковатый привкус
Белый, допускается с синеватым оттенком для обезжиренного молока, со светло-кремовым оттенком для стерилизованного молока, с кремовым оттенком для топленого
5.1.3 По физико-химическим показателям продукт должен соответствовать нормам, указанным в таблице 2.
Значение показателя для продукта с массовой долей жира, %, не менее
обезжиренного, менее 0,5
2,7; 2,8; 3,0; 3,2; 3,5; 4,0; 4,5
4,7; 5,0; 5,5; 6,0; 6,5; 7,0; 7,2; 7,5; 8,0; 8,5; 9,0; 9,5
Плотность, кг/м, не менее
Массовая доля белка, %, не менее
Кислотность, °Т, не более
Массовая доля сухого обезжиренного молочного остатка (СОМО), %, не менее
Фосфатаза или пероксидаза (для пастеризованного, топленого и ультрапастеризованного продукта без асептического розлива)
Группа чистоты, не ниже
Температура продукта при выпуске с предприятия, °С:
— пастеризованного и топленого, ультрапастеризованного (без асептического розлива);
— ультрапастеризованного (с асептическим розливом) и стерилизованного
От 2 до 25 включ.
5.1.4 Допустимые уровни содержания потенциально опасных веществ (токсичные элементы, микотоксины, диоксины, меламин, антибиотики, пестициды, радионуклиды) в продукте не должны превышать требований [1].
5.1.5 Допустимые уровни содержания микроорганизмов (КМАФАнМ, БГКП, патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы, стафилококки S.aureus, листерии L.monocytogenes) в пастеризованном, топленом и ультрапастеризованном без асептического розлива продуктах не должны превышать требований [1].
5.1.6 Стерилизованные и ультрапастеризованные с асептическим розливом продукты должны соответствовать требованиям промышленной стерильности, установленным [1].
5.2 Требования к сырью
5.2.1 Для изготовления пастеризованного и топленого продукта применяют:
— молоко коровье сырое по ГОСТ 31449 и нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— молоко обезжиренное — сырье по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— сливки — сырье по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— пахту, полученную при производстве сладкосливочного масла по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
5.2.2 Для изготовления стерилизованного и ультрапастеризованного продукта применяют:
— молоко коровье сырое по ГОСТ 31449 и нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт, кислотностью не более 18,0 °Т, с содержанием соматических клеток не более 500 тыс/см, термоустойчивостью по алкогольной пробе не ниже третьей группы по ГОСТ 25228;
— молоко обезжиренное — сырье по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— сливки — сырье по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— пахту, получаемую при производстве сладкосливочного масла на предприятии — изготовителе продукта, по нормативным и техническим документам, действующим на территории государств, принявших стандарт, кислотностью не более 17 °Т.
Для стерилизованного и ультрапастеризованного продукта допускается применять соли-стабилизаторы:
— натрий лимоннокислый 5,5-водный по ГОСТ 22280;
— калий лимоннокислый трехзамещенный 1-водный по ГОСТ 5538;
— калий фосфорнокислый двузамещенный 3-водный по ГОСТ 2493;
— натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный по ГОСТ 4172.
5.2.3 Сырье, применяемое для изготовления продукта по показателям безопасности, должно соответствовать требованиям [1].
5.2.4 Допускается использование аналогичного сырья отечественного и другого производства, не уступающего по показателям качества и безопасности, указанным в 5.2.1-5.2.3.
5.3 Маркировка
5.3.1 Маркировку потребительской тары осуществляют в соответствии с [2] со следующим уточнением:
— для обезжиренного продукта допускается не указывать массовую долю жира;
5.3.3 При обандероливании прозрачными полимерными материалами маркировку на боковые поверхности групповой упаковки, транспортной тары и транспортного пакета допускается не наносить. Маркировкой в этом случае служат видимые надписи на потребительской таре или групповой упаковке, или транспортной таре, дополненные информацией о количестве мест и массе брутто. Непросматриваемые надписи, в том числе манипуляционные знаки, наносят на листы-вкладыши или представляют любым другим доступным способом.
5.4 Упаковка
5.4.1 Тара и материалы, используемые для упаковывания и укупоривания продукта, должны соответствовать требованиям [3], документов, в соответствии с которыми они изготовлены, и обеспечивать сохранность качества и безопасности продуктов при их перевозках, хранении и реализации.
5.4.2 Формирование групповой упаковки — в соответствии с ГОСТ 25776.
5.4.3 Транспортные пакеты формируют по ГОСТ 23285 и ГОСТ 26663.
5.4.4 Укладку транспортного пакета осуществляют так, чтобы была видна маркировка не менее одной единицы потребительской тары и/или групповой упаковки, и/или транспортной тары, и/или многооборотной тары с каждой боковой стороны транспортного пакета.
Укладку транспортного пакета осуществляют способами, обеспечивающими сохранность нижних рядов потребительской тары и/или групповой упаковки, и/или транспортной тары, и/или многооборотной тары без их деформации.
Упаковывание продукта, отправляемого в районы Крайнего Севера и приравненные к ним местности, проводят по ГОСТ 15846.
5.4.5 Допускаемые отрицательные отклонения содержимого нетто от номинального количества — в соответствии с ГОСТ 8.579.
6 Правила приемки
6.1 Правила приемки — по ГОСТ 26809 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
6.2 Продукт контролируют по показателям качества и безопасности, предусмотренным в разделе 5, в соответствии с программой производственного контроля, утвержденной в установленном порядке.
7 Методы контроля
7.1 Отбор и подготовка проб к анализу — по ГОСТ 26809 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.2 Определение внешнего вида, консистенции, цвета проводят органолептически и характеризуют в соответствии с требованиями 5.1.2.
7.3 Определение вкуса и запаха — по ГОСТ 28283 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.4 Определение объема или массы нетто — по ГОСТ 3622, температуры продукта при выпуске с предприятия — по ГОСТ 26754 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.5 Определение массовой доли жира — по ГОСТ 5867 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.6 Определение массовой доли белка — по ГОСТ 23327 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.7 Определение массовой доли СОМО проводят расчетным путем, исходя из массовых долей сухих веществ и жира или по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт. Определение массовой доли сухих веществ — по ГОСТ 3626 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.8 Определение чистоты — по ГОСТ 8218 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.9 Определение плотности — по ГОСТ 3625 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.10 Определение титруемой кислотности — по ГОСТ 3624 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.11 Определение показателей эффективности термической обработки:
— пастеризации (проба на фосфатазу или пероксидазу) — по ГОСТ 3623 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— стерилизации, ультрапастеризации (с асептическим розливом) (соответствие требованиям промышленной стерильности) — по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.12 Определение токсичных элементов:
— свинца — по ГОСТ 26932, ГОСТ 30178, ГОСТ 30538 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— мышьяка — по ГОСТ 30538 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— кадмия — по ГОСТ 26933, ГОСТ 30178, ГОСТ 30538 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— ртути — по ГОСТ 26927 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.13 Определение пестицидов — по ГОСТ 23452 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.14 Определение микотоксинов (афлатоксина ) — по ГОСТ 30711 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.15 Определение антибиотиков — по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.16 Определение радионуклидов — по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.17 Определение содержания ГМО, меламина, диоксинов (в случае обоснованного предположения о возможном их наличии) — по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
7.18 Определение микробиологических показателей:
— КМАФАнМ, БГКП (колиформы) — по ГОСТ 9225 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— S.aureus — по ГОСТ 30347 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— патогенные микроорганизмы, в том числе сальмонеллы — по ГОСТ 30519 и нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт;
— листерии L.monocytogenes — по нормативным документам, действующим на территории государств, принявших стандарт.
8 Транспортирование и хранение
8.1 Продукт транспортируют специализированными транспортными средствами в соответствии с правилами перевозок скоропортящихся грузов, действующими на данном виде транспорта.
8.2 Транспортирование и хранение продукта, отправляемого в районы Крайнего Севера и приравненные к ним местности, — по ГОСТ 15846.
8.3 Продукт пастеризованный, топленый, ультрапастеризованный (без асептического розлива) хранят при температуре (4±2) °С.
Продукт стерилизованный и ультрапастеризованный (с асептическим розливом) хранят при температуре от 2 °С до 25 °С.
Срок годности продукта с момента окончания технологического процесса устанавливает изготовитель с учетом требований нормативных правовых актов в области безопасности пищевой продукции.
Читайте также:
