Ботулизм морфологические физические особенности

Глава 36. Возбудитель ботулизма

Clostridium botulinum (от лат. botulus - колбаса) были открыты Ван-Эрменгеном в 1896 г. Выделены они были из ветчины, послужившей причиной массового отравления.

Морфология. Возбудители ботулизма - палочки размером 4-9 × 0,6-1 мкм с закругленными концами. Палочки полиморфны: встречаются короткие формы и длинные нити. Возбудители ботулизма образуют споры, располагающиеся субтерминально. Споры шире палочки и поэтому палочка со спорой имеют вид теннисной ракетки. С. botulinum не имеют капсул. Подвижны - перитрихи. Молодые культуры окрашиваются грамположительно.

Культивирование. С. botulinum - строгие анаэробы. Растут при температуре 25-37° С и рН среды 7,3-7,6. Культивируют их на казеиновых, мясных и других средах. На глюкозокровяном агаре микробы дают неправильной формы колонии с нитевидными отростками. В агаре столбиком колонии напоминают комочки ваты, иногда колонии имеют вид чечевичных зерен. На кровяном агаре в чашках Петри вырастают колонии в виде росинок с блестящей поверхностью и ровными или изрезанными краями (R-форма). На печеночном бульоне клостридии растут с образованием мути и последующим выпадением осадка, при этом бульон просветляется.

Ферментативные свойства (см. табл. 51). Сахаролитические свойства: расщепляют лактозу, глюкозу, мальтозу и глицерин с образованием кислоты и газа. Протеолитические свойства: расплавляют кусочки печени, расщепляют яичный белок, разжижают желатин, пептонизируют молоко, образуют сероводород и аммиак.

Токсинообразование. С. Botulinum продуцируют яд, самый сильный из всех биологических токсинов (в 1 мкг ботулинического токсина содержится 100000000 смертельных доз для белой мыши). Токсин состоит из двух компонентов: нейротоксина и гемагглютинина.

Антигенная структура. По антигенным свойствам нейротоксина все штаммы делят на семь сероваров: А, В, С, D, E, F и G. Каждый серовар характеризуется специфической иммуногенностью. Наиболее частой причиной заболевания ботулизмом являются токсины сероваров А, В и E, реже встречаются заболевания, вызываемые сероварами С, D и F. Токсины серовара G мало изучены.

Устойчивость к факторам окружающей среды. Вегетативные формы C. botulinum погибают при 80° С через 30 мин. Споры устойчивы. Они выдерживают кипячение в течение нескольких часов (до 5 ч). В больших кусках мяса, консервных банках большой емкости споры сохраняются даже после автоклавирования. В 5% растворе фенола споры сохраняются сутки. Ботулинический экзотоксин выдерживает кипячение в течение 10 мин. Он устойчив к действию солнечного света, низким температурам и к дезинфицирующим веществам.

Восприимчивость животных. К возбудителям ботулизма чувствительны мелкий и крупный рогатый скот, лошади, грызуны и птицы. Из экспериментальных животных чувствительны белые мыши, морские свинки, кролики, кошки.

Источники инфекции. Возбудители ботулизма широко распространены в природе: почве, воде, куда они попадают с фекалиями животных и рыб. В почве C. botulinum живут и размножаются. Человек заражается при употреблении продуктов, содержащих возбудителей и экзотоксин.

Пути передачи. Пищевой (при употреблении в пищу зараженных мясных, овощных и рыбных консервов, грибов, осетровых рыб и т. д.). Особенно опасны консервированные продукты, приготовленные в домашних условиях.

Патогенез. Входные ворота - слизистая оболочка кишечного тракта. Нейротоксин, образующийся при размножении вегетативных форм возбудителей ботулизма, не чувствителен к протеолитическим ферментам желудочно-кишечного тракта. Патологический процесс обусловливается нейротоксином, который через кишечник всасывается в кровь, разносится по всему организму, поражая центральную нервную систему. В основном поражаются: клетки (ядра) продолговатого мозга, сердечно-сосудистая система. У больных отмечают изменения со стороны органов зрения, расстройство дыхательных и глотательных функций.

Иммунитет. Естественной резистентности нет. Человек высокочувствителен к токсину C. botulinum. Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета.

Профилактика. Предупреждение возможности загрязнения пищевых продуктов, правильная технология производства изготовления консервов и других продуктов. Профилактика ботулизма в быту: продукты домашнего консервирования перед употреблением следует кипятить в водяной бане (или кастрюле) в течение 15-20 мин.

Специфическая профилактика и лечение. Людям, употреблявшим продукты, где возможно содержится возбудитель ботулизма или ботулинический токсин, вводят противоботулиническую поливалентную антитоксическую сыворотку типов А, В, Е. После установления типа токсина вводят противоботулиническую сыворотку того типа, который соответствует типу выделенного штамма.

Цель исследования: обнаружение C. botulinum, ботулинического токсина, определение серовара.

Ботулизм— острое инфекционное заболевание, ха­рактеризующееся интоксикацией организма с пре­имущественным поражением центральной нервной системы. Болезнь возникает в результате употреб­ления пищевых продуктов, содержащих токсины Clostridium botulinum.

Таксономия. Возбудитель ботулизма относится к отделу Firmicutes, роду Clostridium.

Морфологические и тинкториальные свойства. C.botulinum — грамположительные палочки с закругленными концами, образуют споры и имеют вид веретена. Капсулой не обладают, перитрихи.

Культуральные свойства. Строгий анаэроб. Оптимальными для его роста являются температура 30С. На кровяном агаре образует небольшие прозрачные колонии. В столбике сахарного агара можно обнаружить R-формы формы зерен чечевицы и S-формы – пушинок.

Биохимическая активность. Выделяют 4 группы: бактерии I группы – выраженные протеолитические свойства, гидролизуют желатину, ферментируют глк. и мальтозу; II группы – проявляют сахаролитическую активность, протеолитической – нет. III группа – проявляют липазную активность, гидролизуют желатину. VI – гидролизуют желатину, не проявляют сахаролитических свойств.

Все типы образуют желатиназу, лецитиназу, H₂S.Бактерии типа А, В, Е, F – ферментируют глк., фруктозу, мальтозу, сахарозу. Типа С,D – глк, мальтозу.

Антигенные свойства. Имеются группоспецифические жгутиковые – Н и типоспецифические О-АГ бактерий, не проявляющие токсических свойств. По структуре экзотоксинов бактерии разделяют на 8 сероваров: А, В, С1,С2, D, E, F и G.

Факторы патогенности. Выделяет экзоток­син, самый сильный из всех биологических ядов. Ботулинический эк­зотоксин обладает нейротоксическим действием. Его особенностью является высокая устойчивость к нагреванию (сохраняется в течение 10—15 мин при 100 °С), к кислой среде, высоким концентрациям поваренной соли, замораживанию, пищевари­тельным ферментам.

Резистентность. Споры обладают очень боль­шой резистентностью к высокой температуре (выдерживают ки­пячение в течение 3—5 ч).

Эпидемиология. Широко распро­странен в природе. Его обнаруживают в организме животных, рыб, откуда он попадает в почву и воду. В почве C.botulinum долгое время сохраняется в виде спор и даже может размножаться, что позволяет отнести ботулизм к сапронозным инфекциям. Из почвы возбудитель попадает в пищевые продукты и при наличии анаэробных условий раз­множается там и выделяет экзотоксин. Путь заражения боту­лизмом — пищевой. Чаще всего фактором передачи этой ин­фекции являются консервы (как правило, домашнего приго­товления) — грибные, овощные, мясные, рыбные.

Патогенез. Ботулинический токсин попадает с пищей в ЖКТ. Устойчивый к действию пищеварительных ферментов и хлористоводородной кислоты, токсин всасывается через стенку кишечника в кровь и обусловливает длительную токсинемию. Токсин связывается нервными клетками и блокирует передачу импульсов через нервно-мышечные синапсы. В результате разви­вается паралич мышц гортани, глотки, дыхательных мышц, что приводит к нарушению глотания и дыхания; наблюдаются изменения со стороны органа зрения.

Клиника. Инкубационный период продолжается от 6—24 ч до 2—6 дней и более. Чем короче инкубационный период, тем тяжелее протекает болезнь. Обычно болезнь начинается остро, но температура тела остается нормальной. Возможны различные варианты ботулизма — с преобладанием симптомов поражения ЖКТ, зрения, глотания, речи или дыхательной функции. В первом случае болезнь начинается с появления сухости во рту, тошно­ты, рвоты, поноса, во втором — начальные проявления болезни связаны с нарушениями со стороны зрения (снижение остроты зрения, двоение). В результате паралича мышц гортани появляется осиплость, а затем голос пропадает.

Иммунитет. После перенесенной болезни иммунитет не фор­мируется. Однако введение ботулинических анатоксинов создает прочный искусственный вариантоспецифический антитоксичес­кий иммунитет.

Микробиологическая диагностика. Исследуют про­мывные воды желудка, рвотные массы, остатки пищи, кровь. Применяют бактериологический метод, биологический (реакцию нейтрализации токсина антитокси­ном), с помощью реакции обратной непрямой гемагглютинации, и серологический (РПГА) методы, позволяющие выявить в исследуемом материале ботулинический токсин.

Лечение. Ан­титоксические противоботулинические гетерологичные сыворот­ки и гомологичные иммуноглобулины.

Профилактика. Соблюдение правил приготовления продуктов, домашних консервов. Для специфической актив­ной профилактики ботулизма разработаны и применяются по показаниям тетра- и трианатоксины, в состав которых входят ботулинические анатоксины типов А, В и Е. Для экстренной пассивной профилактики используют противоботулинические антитоксические сыворотки.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Глава III
Биологические свойства возбудителей ботулизма

Все шесть типов палочки ботулизма (А, В, С, D, E, F) очень близки по своим морфологическим, культуральным свойствам. Действие некоторых токсинов на чувствительных к ним животных (в эксперименте) или действие токсинов А, В, Е, наблюдаемое в клинике (при возникших отравлениях), обусловливает одинаковую клиническую картину.

Однако указанные типы возбудителя отличаются по свойствам вырабатываемых ими токсинов, т.е. они обладают разными антигенными свойствами. Это значит, что токсин каждого типа нейтрализуется только сывороткой такого же типа.

В связи с этим ботулизм, вызванный микробом типа А, можно лечить только противоботулинической сывороткой типа А, а ботулизм, где причиной болезни были возбудители ботулизма другого типа, можно лечить только иммунной сывороткой соответствующего типа.

По морфологии возбудители ботулизма представляют собой небольшие палочки длиной от 4 до 9 и шириной от 0,6 до 0,9 с закругленными концами. Палочки образуют споры и приобретают при этом вид теннисной ракетки. Эти микробы легко окрашиваются различными анилиновыми красками. Молодые клетки окрашиваются по Граму положительно. При старении культуры (через 4-5 суток роста) палочки не окрашиваются по Граму. Микробы подвижны, имеют от 4 до 35 жгутиков, которые расположены по всей поверхности тела микроба (перитрих). При доступе воздуха подвижность микробов быстро ослабевает. Капсулы они не имеют.

Возбудители ботулизма - строгие анаэробы. Они растут без доступа воздуха, поэтому обычно размножаются и образуют токсин внутри больших кусков рыбы, ветчины, колбасы либо в герметически закрытых банках консервов, а также в условиях биологического анаэробиоза. Очень благоприятные условия для образования токсина создаются в продуктах (рыба), упакованных под вакуумом герметически в мешочки из газонепроницаемой полиэтиленовой пленки.

На специальных жидких питательных средах рост бактерий происходит с помутнением среды и газообразованием, имеется запах прогорклого масла, но эти признаки непостоянны. Нередко банки консервов, в которые вместе с продуктом попадал и возбудитель ботулизма, оказываются бомбажными за счет образования микробом газа, однако иногда при наличии микробов ботулизма и ботулимических токсинов пищевые продукты выглядят внешне доброкачественными, и консервные банки не дают "бомбажа". Необходимо также отметить, что размножение возбудители ботулизма и образование токсина может иметь в консервах и других продуктах очаговый характер. Токсин может содержаться только в том месте, куда попали споры возбудителя, причем остальная часть продукта остается свободной от токсина.

Оптимальной для роста бактерий типов А, В, С, Д является температура 35°, для типов Е и F -28 +30°. Установлено, что выработка ботулинических токсинов в консервах может происходить и при 16-18°, если консервы были заражены массивными дозами спор (не менее 10 000 спор на банку).

Зарубежными исследователями (Schmidt и другие, 1961, Walls, 1967) доказано, что споры палочек ботулизма типа Е и F могут прорастать, размножаться и образовывать токсин три температуре 3,3°, правда при сравнительно длительной инкубации (31-45 дней) и в меньших количествах, чем при 28-30°.

Микробы типов А и В обладают сильными протеолитическими свойствами; они расплавляют кусочки печени или мясного фарша в питательных средах; менее выражены протеолитические свойства у типа F, у типов С, D, Е способность к протеолизу выражена слабо. В связи с вышесказанным нередко твердые пищевые продукты, в которых развиваются микробы ботулизма, могут выглядеть размягченными ввиду расплавления белковых веществ. Однако и этот признак не является постоянным, так как существуют штаммы возбудителей ботулизма, которые не обладают способностью расплавлять вещества белковой природы.

Самым характерным признаком всех типов возбудителей ботулизма является их способность вырабатывать в анаэробных условиях токсины - яды большой силы. Эти токсины вырабатываются микробами ботулизма в различных консервированных пищевых продуктах: грибах, овощах, рыбе, ветчине, фураже, на искусственных питательных средах. Сила токсинов на искусственных питательных средах может быть от 1000 до 3 млн. смертельных доз для белой мыши в 1 мл.

Ботулинические токсины устойчивы к воздействиям внешней среды (температура, свет, рН, встряхивание, концентрация различных солей). Действие прямого солнечного света и воздуха не разрушает их полностью в течение значительного времени. В кислой среде устойчивость токсинов больше, чем в щелочной среде. Щелочи ослабляют и даже разрушают ядовитые свойства токсинов. Ботулинические токсины обладают значительной теплоустойчивостью. Об этом важно помнить при прогревании различных подозрительных продуктов. Токсин иногда разрушается только при кипячении в течение 10-15 минут. Ботулинические токсины устойчивы к высокой концентрации поваренной соли. Если токсин в рыбе или ветчине образовался до засола рыбы, то добавление соли (10%) не разрушает его. Характерной особенностью этих токсинов является их свойство не разрушаться в желудочно-кишечном тракте под влиянием пищеварительных ферментов. Эти яды по силе своего действия превосходят все другие бактериальные токсины и химические яды.

Человек очень чувствителен к ботулиническим токсинам некоторых типов, однако данные о смертельной дозе ботулинического токсина для человека довольно разноречивы. Одни ученые предполагают, что для человека смертельной дозой типа А является 3 500 Dlm (смертельных мышиных доз), другие - 250 000 Dlm.

В почве, на искусственных средах, в пищевых продуктах, в корме для животных возбудители ботулизма образуют споры. В высушенном состоянии они могут сохранять жизнеспособность десятилетиями. Лишь при благоприятных условиях споры прорастают, бактерии размножаются и вырабатывают токсин. Споры возбудителей ботулизма очень устойчивы к различным химическим и бактерицидным веществам, причем большую роль в их устойчивости к физическим и химическим факторам играет принадлежность спор к тому или иному типу Cl. botulinum. Споры возбудителей типов А и В хорошо переносят кипячение в течение 5 часов, типа Е - менее устойчивы к кипячению, чем типов А и В. Споры типов С и Д занимают промежуточное положение между типами А, В и Е. Вновь выделенный тип F обладает высоко термоустойчивыми спорами.

Эксперименты, проводившиеся в целью изучения устойчивости спор палочки ботулизма к воздействию различных физических и химических факторов в пищевых продуктах, показали, что автоклавирование консервов остается пока основным способом уничтожения спор. В тех случаях, когда в консервах остаются неубитые споры, прорастание их и образование токсина может происходить очень быстро.

Установлено, что кипячение не убивает споры в продуктах. Так, красную рыбу заражали токсической культурой палочки ботулизма, содержащей споры, а затем подвергали ее кипячению (от 30 минут до 1 часа). После этого рыба теряла свою ядовитость, так как введенный в нее с культурой токсин разрушался. Однако через 1 1/2 суток хранения при температуре 15-17° рыба становилась снова ядовитой. Эти опыты объясняют, почему в отдельных случаях проваренные продукты через некоторое время вызывают смертельные отравления.

Из вышеизложенного следует, что так называемая "стерилизация" продуктов питания в банках в домашних условиях не может обеспечить гибель попавших в банки спор палочки ботулизма.

Важно знать, какое действие оказывает замораживание на споры и токсин палочки ботулизма. Установлено, что споры после длительного содержания в замороженном состоянии сохраняют способность прорастать и образовывать токсин. При хранении продуктов, инфицированных микробами ботулизма, в течение 4 месяцев в замороженном состоянии продуцированный ими токсин не разрушался.

Споры могут переносить воздействие очень низких температур, они не погибают при -190°. Температуру -16° они переносят хорошо в течение года, но при этом часть спор подвергается разрушению, вследствие чего, согласно мнению некоторых авторов, освобождается содержащийся в них токсин. Последнее может привести к тому, что продукты, содержащие большое количество спор, после оттаивания могут быть ядовитыми.

Установлено, что споры возбудителей ботулизма типов А и В обладают более высокой радиорезистентностью, чем споры нетоксигенных клостридий, обычно вызывающих гнилостные процессы в пищевых продуктах. Споры некоторых штаммов ботулинических микроорганизмов могут выдерживать облучение порядка 2,5-3 Mrad в зависимости от состава и количества спор на 1 г среды. Споры Cl. botulinum типа Е менее устойчивы к облучению, чем типы А и В.

Споры очень устойчивы к химическим дезинфицирующим веществам, формалин при концентрации 20% убивает споры только через 24 часа, 10% раствор соляной кислоты убивает их через 2 часа выдерживания при комнатной температуре; в этиловом спирте могут сохранять жизнеспособность в течение 2 месяцев. Споры не погибает при довольно высоких концентрациях поваренной соли. Введенные в балык, содержащий 14% поваренной соли, они оказались жизнеспособными через 2 месяца. Споры, посеянные в желудочный, кишечный и панкреатический соки, а также в желчь, прорастали и иногда даже вырабатывали токсин.

> Патогенез ботулизма и патологическая анатомия

Содержание Методические указания "Ботулизм" (утв. Заместителем Министра здравоохранения СССР, Главным санитарным врачом СССР.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Ботулизм – инфекционная болезнь, характеризующаяся интоксикацией организма с преимущественным поражением ЦНС, возникает в результате употребления пищевых продуктов, содержащих токсины Clostridium botulinum (отдел — Firmicutes, род – Clostridium).

Ботулизм имеет 8 сероваров: A, B, C, D, E, F, G, H, из которых наиболее важны A, B и E.

Развитие инфекции зависит от:

Развитию инфекции способствуют:
– глубокие рваные раны в т.ч. огнестрельные с наличием ранящего предмета;
– некроз
– повреждение крупных сосудов
– нарушения микроциркуляции
– недостаточно грамотные манипуляции (глухая герметичная повязка, жгут на 2 часа)

Г+, образуют различные токсины и ферменты облад-е let, некротизирующим и гемолитическим действием

Ботулизм — представляет собой граммположительные палочки длиной 3-9 мкм, шириной 0,6-1 мкм с закруглёнными концами. Палочки образуют терминально и субтерминально расположенные споры и имеют вид теннисной ракетки. Капсулы не образуют, подвижны, имеют 25 перетрихиев.

Ботулизм. Культуральные и ферментативные свойства

Ботулизм (Clostridium botulinum) — строгий (облигатный) анаэроб. Оптимальная температура для роста 25-35 С, рН среды 7,2-7,4. На кровяном агаре образует небольшие прозрачные колонии, окруженные зоной гемолиза. В высоком столбике сахарного агара колонии имеют вид пушинок или зёрен чечевицы.

Ботулизм (Clostridium botulinum) обладает большим набором сахаролитических или протеолитических ферментов.

Для культивирования используют среды с повышенным содержанием животного белка, т.е. гидролизат казеина, мясные и рыбные гидролизаты. Углеводы сбраживает до кислоты и газа.

Ботулизм. Антигенные свойства:

Антигенные свойства наиболее важными для идентификации возбудителя

Ботулизм имеет 8 сероваров (по разным источника от 5 до 8): A, B, C, D, E, F, G, H, из которых наиболее важны A, B и E.

Ботулизм. Факторы патогенности:

Ботулизм (Clostridium botulinum) выделяет экзотоксин,самый сильный из всех биологических ядов. Смертельная доза для человека-0,3 мкг. Ботулинический экзотоксин оказывает нейротоксическое, гемагглютинируеющее действие. Его особенность – высокая устойчивость к нагреванию (сохраняется в течение 10-15 мин при 100 С), кислой реакции, высоким концентрациям поваренной соли, замораживанию, пищеварительным ферментам.

К факторам патогенности относятся также ферменты агрессии: ДНК-аза, гиалуронидаза, бета токсин. Бета-токсин является самым сильным бактериальным токсином,(летальность 1,6 нанограмм для белых мышей, что в 1006 раз сильнее гремучей змеи. Бета-токсин содержит два компонента: нейротоксин и гемаглютинин. Гемагглютинин – трансмембранный проводник, обеспечивает транспорт нейротоксина через клеточную мембрану. Нейротоксин, попадая в кровь разносится по организму и действует на нервно-мышечные синапсы, нарушает высвобождения ацетилхолина, в результате чего развивается паралич и поражаются ядра черепных нервов.

Ботулизм. Резистентность:

Ботулизм (Clostridium botulinum) имеет споры, которые обладают очень высокой резистентностью к высоким температурам(выдерживают кипение в течение 3-5 часов)

Ботулизм. Восприимчивость животных:

К экзотоксину этого возбудителя наиболее чувствительны лошади,морские свинки,белые мыши и др. животные.

Ботулизм. Эпидемиология:

Широко распространён в природе. Его обнаруживают в организме животных, рыб, ракообразных, откуда он попадает в почву и воздух. В почве долгое время сохраняется в виде спор и даже может размножаться,что позволяет отнести ботулизм к сапронозным инфекциям. Из почвы ботулизм попадает в пищевые продукты, где размножается и выделяет экзотоксин. Путь передачи инфекции – пищевой. Чаще всего фактором передачи инфекции являются консервы(грибные, овощные, мясные, рыбные).От человек человеку заболевание не передаётся.

Ботулизм. Патогенез:

Ботулинический токсин попадает с пищей в пищеварительный тракт. Усойчивый к действию пищеварительных ферментов, токсин всасывается через стенку кишечника в кровь и обуславливает длительную токсинемию. Токсин связывается нервными клетками и блокирует передачу импульсов через норвно-мышечные синапсы. В результате развивается пралич мышц гортани,глотки,дыхательных мышц,что приводит к нарушению глотания и дыхания,наблюдаются изменения со стороны органов зрения.

Ботулизм. Клиническая картина:

Продолжительность 6-24 ч до 2-6 дней. Чем короче инкубационный период, тем тяжелее протекает болезнь. Обычно заболевание начинается остро, но температура тела при этом остаётся нормальной. Есть различные варианты ботулизма – с преобладанием симптомов поражения пищеварительного тракта, расстройств зрения или дыхательных функций.

1-ый случай: заболевание начинается с появления сухости во рту, тошноты, рвоты, поноса.

2-ой случай: нарушение зрения (туман перед глазами и двоение). В результате паралича мышц гортани появляется осиплость, а затем пропадает голос. Больные могут погибнуть от паралича дыхания. Заболевание может осложниться острой пневмонией,токсическим миокардитом, сепсисом. Летальность при ботулизме составляет 15-30%

Выделяют 4 категории инфекции:
1. Пищевая – интоксикация продуктами с токсином, чаще консервы (грибы, овощи, фрукты, если герметично закатаны, рыбные консервы, мясные когда нарушалась технология и мясо соприкасалась с кишечным содержимым). Заболевание начинается с появления сухости во рту, тошноты, рвоты, диареи.
2. Раневая – редкая форма, развивается инфекционный процесс при попадании микроорганизма в открытую рану.
3. Ботулизм новорожденных – развивается в случае, когда споры с воздухом или жидкостью попадают в желудочно-кишечный тракт. Поскольку у новорожденных в ЖКТ отсутствует часть нормальной микрофлоры, которая присутствует у взрослых, развивает патологическая колонизация ботулинических палочек и возникает генерализованный ботулизм
4. Неопределённо классифицированный (криптогенный) — диагностируется в случае, если есть все признаки ботулизма, но точную причину установить не удается.

Ботулизм. Иммунитет:

Постинфекционный иммунитет не формируется. Антитела, которые вырабатываются в течение заболевания, направлены против определённого серовара.

Ботулизм. Микробиологическая диагностика:

Исследуют промывные воды желудка, рвотные массы, остатки пищи.

Применяют следующие методы:
– бактериологический метод, направленный на обнаружение возбудителя,
– биологический метод (р-ю нейтрализации токсина антитоксином in vivo)
– серологический метод (РНГА), позволяющие выявить в исследуемом материале ботулинический токсин.

Ботулизм. Лечение:

Используют антитоксические противоботулинические гетерологические сыворотки и гомологичные иммуноглобулины.

Ботулизм. Профилактика:

Основную роль в предупреждении ботулизма играет соблюдение определённых правил приготовления продуктов,прежде всего домашних консервов. Для специфической профилактики ботулизма ограниченно применяют тетра- и трианатоксин,в состав которых входят ботулинические анатоксины типов А,В,Е. Экстренная профилактика осуществляется с помощью противоботулинических сывороток.

Ботулизм – это тяжелая форма пищевой интоксикации, развивающаяся в результате употребления в пищу продуктов, зараженных токсином Cl.perfringens, характеризующаяся специфическим поражением ЦНС.

известен давно под названием “аллантиазис” (от греч. “колбаса”), “ихтиоизм” (от греч. “рыба), botulus (от лат. “колбаса”). Кернер в 1815 г. описал 230 случаев отравления, в 1896 г. бельгийский врач Э.Ван Эрменгем выделил возбудителя из остатков ветчины, в 1914 г. русский врач Констансов выделил из осетрины. В настоящее время отравления связывают не с употреблением колбасы, а консервированных продуктов.

Таксономия: семейство Bacillaceae, род: Clostridium, вид CL.botulinum (от лат. botulus – колбаса).

Полиморфные палочки с закругленными концами, длина 4-10 мкм, ширина 0,3 – 1,0 мкм, слабоподвижны (перитрихи), образуют терминально или субтерминально расположенные споры, возбудители при этом напоминают теннисную ракетку, капсул не имеет.

Тинкториальные свойства: граммоположительные, по методу Ожешко споры окрашиваются в красный цвет, а вегетативные формы – в синий.

Строгие анаэробы. Растут на казеиновых или мясных средах, в жидкие казеиновые среды добавляют отварное пшено или вату, а в мясные – мясной или печеночный фраш. На кровяном агаре с глюкозой через 24-46 часов образуют крупные круглые колонии, окруженные зоной гемолиза (тип А). Цвет колонии слегка коричневый или серовато-мутный. В столбняке агара могут быть в виде двух форм: S-формы в виде пушинок с боле плотным центром и R-формы чечевицеобразные. В жидких средах – мутность.

Оптимум pH – 7,2 – 7,4; температура культивирования 35 °C для сероваров A, B, C, D, F; 28 °C – для сероваров Е и непротеолитических штаммов B и F; 37 °C – для серовара G; время культивирования – 24-48 часов.

Сахаролитические свойства выражены у типов А и B (разлагают с образованием кислоты и газа глюкозу, мальтозу, глицерин, фруктозу, левулезу). Тип С слабо разлагает сахара или так же, как и серовар G – не обладают сахаролитическими свойствами, типы Д и Е занимают промежуточное положение. Все штаммы типов А и В обладают мощными протеолитическими свойствами: гидролизуют казеин и образуют сероводород, в средах Китта-Тароцци расплавляют кусочки печени или мясного фарша. Типы С, Д, Е такими свойствани не обладают.

Неоторые авторы выделяют 4 группы бактерий по способности разлагать сахара и белки:

1 группа - расщепляют глюкозу, мальтозу; протеолитическая активность в виде желатиназы; липазная активность на среде с яичным белком;

2 группа – обладают сахаролитическими свойствами;

3 группа – липолитическая активность и разжижение желатина;

4 группа – гидролиз желатина, не проявляют сахаролитической активности.

Указать, что дифференциация возбудителей по биохимической активности используется редко.

Имеют О и Н- антигены. Однако, по ним идентификация возбудителя не проводится. По антигенной специфичности токсина различают 8 сероваров: А, В, С₁, С₂ , Е, F, G. Тип токсина определяется в реакции нейтрализации с соответствующими антитоксическими сыворотками.

а) экзотоксин (нейротоксин) – белок, получен в кристаллической форме (отметить, что самый сильный биологический яд - в 3 раза сильнее цианистого калия), образуется в анаэробных условиях на питательных средах, в различных консервированных пищевых продуктах, устойчив к действию протеолитических ферментов ЖКТ, обладают способностью гемагглютировать эритроциты человека, кролика, птиц; обладает тропизмом к нервной ткани (фиксируется на рецепторах синаптических мембран и изменяет чувствительность ацетилхолинового рецептора к действию медиатора). Токсин сероваров Е и В образуется в виде протоксина и активируется трипсином. Обратить внимание на то, что для людей наиболее патогенными являются типы А, В, Е (очень токсичен Е), менее патогенные – С, Д, F.

В настоящее время считают, что токсин – это Zn 2+ зависимые эндопептидазы. При протеолизе разлагается на 2 связанных дисульфидной связью фермента (L и Н цепи). Одна субъединица отвечает за адсорбцию на рецепторах нейронов, другая – за проникновение в них путем эндоцитоза, ингибирование Са 2+ - зависимого освобождения ацетилхолина, в результате блокируется передача нервного импульса через синапсы, поражаются бульбарные нервные центры, нарушается походка, зрение, возникает асфиксия.

Типы токсинов различают по антигенной структуре и молекулярной массе, по скорости седиментации выделяют 12S-, 16S- и 19S токсины.

12S-токсины (М-токсины) состоят из молекулы нейротоксина (Н цепь) и молекулы нетоксичного и негемагглютинирующего белка (L цепь);

16S-токсины (L-токсины) состоят из молекулы нейротоксина и гемагглютининового нетоксичного белка;

19S-токсины (L L – токсины) с большой молекулярной массой, включающие в себя нейротоксин и нетоксический белок с гемагглютинирующими свойствами.

б) гемолизин (лизирует эритроциты барана) и вызывает гибель лабораторных животных. Надо отметить, что гемолизин продуцируют только некоторые штаммы.

Вегетативные формы малоустойчивы (погибают при 80 °C в течение 30 мин.);

Споры выдерживают кипячение в течение 1-5 часов, при 105 °C погибают через 2 час, при 120 °C – через 10-20 мин. Отметить, что в больших кусках мяса, в банках болшой емкости жизнеспособны после автоклавирования при 120 °C в течение 15 мин; 10 % соляная кислота убивает споры через 1 час, 40 % раствор формалина – через сутки, устойчивы к кислой среде желудка, споры прекращают прорастать при 2 % растворе уксусной кислоты при рН 3-4,5.

Ботулотоксин – при кипячении разрушается в течение 15 мин., устойчив к действию солнечного света, высоких концентраций хлорида натрия, к замораживанию, кислотам, рН ниже 7,0, к действию протеолитических ферментов ЖКТ; длительно сохранятеся в воде, в консервах – 6-8 мес.

Роль в патологии: вызывают ботулизм.

Естественная среда обитания клостридий – кишечник травоядных животных, человека, рыб, ракообразных, моллюсков.

Пути заражения (основной) алиментарный, но может проникать через раневую поверхность. Отметить, что ботулотоксин способен проникать через неповрежденную кожу и слизистые. Больной человек не заразен. Указать, что в консервированных пищевых продуктах наличие самого возбудителя не обязательно. Отметить – ботулотоксин может располагаться в продукте в виде очагов, не изменяя органолептические свойства его.

В зависимости от путей заражения различают 4 формы болезни:

ботулизм грудных детей;

неопределенно классифицируемый ботулизм (у детей старше 1 года и у взрослых, не связано с употреблением в пищу и попаданием через раны).

1. Пищевой ботулизм – ботулотоксин, попадая в ЖКТ, проникает в кровь, поражает нервную систему, действуя на мотонейроны спинного мозга и ядра продолговатого мозга, прочно связывается с нервными клетками, вызывая нарушение передачи возбуждения с нерва на мышцу, действуя на сосуды (сужение с последующим парезом и повышение ломкости).

Инкубационный период: от нескольких часов до 8-10 дней.

Клиника: боли в животе, ощущение тяжести в желудке, рвота, общая интоксикация, возможно расстройство стула. Затем возникают жалобы на ухудшение зрения, двоение в глазах, нарушение глотания, потеря голоса, поражаются III, IY, YI пары черепномозговых нервов, головная боль, паралич дыхательного центра, смерть. Летальность 60-80 %. Обратить внимание на то, что заболевание может начинаться с жалоб на “туман” или “сетки” пред глазами, двоение предметов.

2. Раневой ботулизм – отметить, что в последнее время участились случаи его, поражает преимущественно детский возраст, в основном мальчиков.

3. Ботулизм грудных детей - в возрасте 3-20 недель при попадании спор или вегетативных форм с пищей ребенка (с молоком, с медом, особенно при искуственном вскармливании). Симптомы такие же, как и при пищевом ботулизме. Указать, что при диагностике заболевания у новорожденных следует обращать внимание на слабость в сочетании с нарушением сосания и глотания + птоз, мидриаз, офтальмоплегия. Заболевание может заканчиваться внезапной смертью (не > 4 %), так называемая “смерть в колыбели”.

Иммунитет постинфекционный не формируется, так как иммунная доза токсина превышает летальную.

Микробиологическая диагностика (см. схему).

Обратить внимание на выявление ботулотоксина и возбудителя в исследуемом материале (исследование проводится одновременно), в крови определяют токсин, в кале только возбудитель, остальной материал исследуется на токсин и бактерии.

а) неспецифическая – соблюдение технологии обработки продуктов (консервы автоклавируют 30-40 мин при температуре 120 °C), в продукты вносятся ингибиторы: нитриты.

б) специфическая – только по экстренным показаниям: лицам, употреблявшим в пищу зараженные продукты, но еще не заболевшим, назначают поливалентную противоботулиническую сыворотку и ботулинический анатоксин, эатем типовые противоботулинические сыворотки по мере установление типа токсина.

Активная иммунизация проводится работникам лабораторий, военнослужащим и лицам, чья профессия связана с контактом с ботулотоксином.

а) неспецифическое – промывание желудка, дезинтоксикационные мероприятия, антибиотики: пенициллин, тетрациклин;

б) специфическое – срочно поливалентную противоботулиническую (А,В,Е) сыворотку, внутривенно или внутримышечно, после установления типа токсина – моносывортки.