Скрининговое обследование на сифилис что это
В последнее десятилетие заболеваемость сифилисом, как во всем мире, так и в России, значительно возросла, что обуславливает насущную необходимость в проведении активной лечебной и профилактической работы. Одной из мер вторичной профилактики сифилиса являются скрининговые обследования.
Традиционно скрининг на сифилис состоит из 2 этапов:
- первичные нетрепонемные тесты - VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) и тест быстрых плазменных реагинов (RPR) и
- подтверждающие тесты - реакция иммунофлюоресценции с адсорбцией (РИФ-абс, FTA-abs) и тест частичной агглютинации Treponema pallidum (TP-PA).
Эффективность проведения 2-х этапного скрининга зависит от характеристик тестов (чувствительность, специфичность) и заболеваемости в популяции. Чувствительность RPR и VDRL достигает 78-86% при первичном, 100% - при вторичном и 95-98% при скрытом сифилисе. Специфичность варьирует в пределах 85-99% и может снижаться у лиц, страдающих тяжёлыми сопутствующими заболеваниями (коллагенозы, онкологическая патология, туберкулёз, малярия, вирусные и риккетсиозные инфекции), а также у наркоманов и беременных женщин, что приводит к появлению ложно-положительных результатов. Чувствительность РИФ-абс достигает 84% при первичном сифилисе и практически 100% при других стадиях инфекции, специфичность - 96%. Поскольку характеристики тестов остаются постоянными, эффективность скрининга прямо пропорциональна заболеваемости в обследуемой популяции.
Однако существует ли необходимость в проведении тотального скрининга населения на сифилис или достаточно обследования отдельных групп лиц?
Обзорное исследование, проведённое специалистами U.S. Preventive Services Task Force (USPSTF), ставило целью выявить на основании достоверных данных группы лиц, скрининг которых необходим и оправдан. Для выявления влияния скрининга на заболеваемость сифилисом как в популяции в целом, так и в группе повышенного риска заражения и среди беременных женщин, были проанализированы данные исследований, опубликованных за период с 1994 по 2003 гг.
В ходе исследования не было выявлено прямой связи между проведением скрининга и снижением заболеваемости или смертности от сифилиса, как в популяции в целом, так и в группе повышенного риска. Однако было достоверно доказано, что проведение скрининга у беременных женщин и/или новорожденных приводит к снижению частоты возникновения врожденного сифилиса.
Исследования по оценке неблагоприятных последствий скрининга и необоснованного назначения антибактериальной терапии при сифилисе не проводились. Тем не менее, были определены потенциально негативные моменты проведения скрининга, такие как нецелесообразные экономические затраты, возможность ложно-положительных результатов, причиняющих моральный вред и вызывающих необходимость в дальнейшем обследовании и лечении здоровых лиц. Негативные эффекты необоснованного лечения включают нежелательные лекарственные реакции (анафилаксия, реакция Яриша-Герксгеймера), которые могут возникнуть в первые 24 часа после начала проведения противосифилитической терапии.
На основании полученных данных в рекомендациях были выделены 5 классов (A, B, C, D, I) в зависимости от степени достоверности доказательств и выраженности преимуществ использования скрининга (соотношение польза/вред):
A. Проведение скрининга настоятельно рекомендуется. Достоверно доказано, что проведение скрининга приводит к положительному эффекту, преимущества процедуры значительно превышают потенциальный вред.
B. Проведение скрининга рекомендуется. Доказано, что проведение скрининга приводит к положительному эффекту, преимущества процедуры превышают потенциальный вред.
C. USPSTF не дает каких-либо рекомендаций за или против проведения скрининга в плановом порядке. Показано, что проведение скрининга может приводить к положительному эффекту, однако преимущества от проведения процедуры практически равны потенциальному вреду.
D. Проведение скрининга не рекомендуется. Доказано, что проведение скрининга неэффективно, а потенциальный вред превышает преимущества.
I. USPSTF не дает каких-либо рекомендаций за или против проведения скрининга из-за отсутствия достаточного количества доказательств, их недостоверности или противоречивости, что не позволяет определить соотношение польза/вред.
Основные положения рекомендаций:
- настоятельно рекомендуется проводить скрининг лиц, относящихся к группе повышенного риска (класс А):
- гомосексуалисты,
- лица, ведущие беспорядочную половую жизнь,
- лица, занимающиеся проституцией,
- лица, находящиеся в местах лишения свободы,
- наркоманы.
Лица, заражённые другими инфекциями, передающимися половым путём (хламидиоз, гонорея, генитальный герпес, папилломовирусная инфекция и ВИЧ) нередко ведут беспорядочную половую жизнь, что позволяет отнести их к группе повышенного риска заражения сифилисом, хотя прямых доказательств в поддержку необходимости проведения скрининга данных лиц в плановом порядке нет.
Частота обследования должна определяться индивидуально в зависимости от локальной эпидемической ситуации.
настоятельно рекомендуется проводить скрининг на сифилис всем беременным женщинам (класс А).
Все беременные женщины должны проходить тестирование при первом посещении врача. Для женщин, относящихся к группе повышенного риска, может быть необходимо повторное обследование в третьем триместре и при родоразрешении.
не рекомендуется проводить плановый скрининг лиц, не имеющих клинических проявлений инфекции и не относящихся к группе повышенного риска (класс D).
Учитывая низкую частоту заражения сифилисом в популяции в целом, и, следовательно, низкую эффективность скрининга было сделано заключение, что потенциальный вред превышает преимущества от проведения данной процедуры.
Другие рекомендации:
U.S. Preventive Services Task Force
Screening for syphilis infection: recommendation statement.
Серологическое обследование населения на сифилис (скрининг)
![]()
Массовый скрининг населения с целью выявления больных с активными формами сифилитической инфекции (поликлиники, стационары общего профиля за исключением специализированных, декретированные контингенты)
Нетрепонемные тесты (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) или иммунохроматографические (трепонемные) тесты.
Скрининг в особых целевых группах для выявления болеющих сифилисом или лиц, перенесших сифилитическую инфекцию:
– беременные, в том числе направляемые на искусственное прерывание беременности;
– доноры крови, спермы и тканей;
– пациенты специализированных стационаров (офтальмологических, неврологических, психоневрологических, кардиологических);
Комплекс нетрепонемного (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) и трепонемного (РПГА, ИФА, ИБ, ИХЛ, ИХГ) тестов
Диагностика клинических форм приобретенной сифилитической инфекции.
Комплекс нетрепонемного (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) в количественном варианте постановки и трепонемного (РПГА, ИФА, ИБ, ИХЛ, ИХГ) тестов
Диагностика скрытых и поздних форм приобретенного сифилиса, дифференциальная диагностика скрытого сифилиса и ложноположительных результатов нетрепонемных и трепонемных тестов, подозрение на поздний врожденный сифилис
Комплекс нетрепонемного (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) теста в количественном варианте постановки и не менее двух трепонемных тестов (РПГА, ИФАIgM+IgG, РИФабс/200, РИТ, ИБ ИХЛ)
Обследование лиц, бывших в половом и тесном бытовом контакте с больным сифилисом, при давности первого контакта не более 2 месяцев
Один их трепонемных тестов (ИФАIgM, ИФАIgM+IgG, РИФабс/200, ИБIgM)
Обследование новорожденных с целью выявления врожденного сифилиса
Комплекс нетрепонемного (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) теста в количественном варианте постановки (+ сравнение титров с аналогичными у матери) и трепонемного (РПГА, ИФАIgM, ИФАIgM+IgG, РИФабс/200? ИБIgM) теста.
Исследование цереброспинальной жидкости
Комплекс нетрепонемного (РМП, PПP, VDRL) и нескольких трепонемных тестов (РПГА, РИФц, ИФАIgM, ИФАIgM+IgG,, ИБIgM, ИБIgG) + определение количества форменных элементов, уровня белка
Контроль эффективности терапии
Нетрепонемный тест (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) в количественном варианте постановки и один из трепонемных тестов (РПГА, ИФАIgG, ИФАIgG+IgM, РИФабс/200, ИБ, ИХЛ, РИБТ)
Подтверждение реинфекции, дифференциальная диагностика реинфекции с клиническим и серологическим рецидивом
Нетрепонемный тест (РМП, РПР, VDRL и другие аналоги) в количественном варианте постановки и трепонемные тесты (РИФабс/200, ИФАIgM, ИФАIgM+IgG, ИБIgM, РПГА), динамическое наблюдение за уровнем антител
Рекомендованные серологические реакции для обследования населения на сифилис
![]()
Серологические реакции различаются по своей чувствительности и специфичности при разных формах сифилиса. Сложность их постановки также неодинаковая, и для каждой из них требуются соответствующее оборудование и реагенты. Поэтому у каждой из серологических реакций имеется свое предназначение, и при обследовании различных категорий населения необходимо использовать взвешенный и разумный подход.
Профилактическое обследование на сифилис населения рекомендуется проводить с помощью одного из тестов РМП, ИФА или РПГА в зависимости от условий и возможностей органов здравоохранения и лабораторных служб на местах.
При этом, если в обследуемых группах инфекция не является распространенной (обследование проходят пациенты соматических стационаров, поликлиник, кабинетов медицинских осмотров), то обследование предпочтительнее проводить с помощью трепонемного теста, поскольку при этом можно сразу выделить группу больных или пациентов, в прошлом перенесших сифилис.
Скрининговое исследование на сифилис группы лиц с высоким процентом инфицированных (работники коммерческого секса, заключенные, больные в клиниках инфекций, передаваемых половым путем) целесообразно начинать с нетрепонемного теста в количественном варианте. Это позволит разделить лиц, перенесших сифилис в прошлом (у них нетрепонемный тест, скорее всего, будет отрицательным, а трепонемный — будет давать положительный результат) от больных с активной инфекцией (у них нетрепонемный тест будет положительным).
Поскольку существует возможность выявления поздних форм сифилиса среди больных глазных, психоневрологических, кардиологических стационаров, у этих категорий обследуемых следует использовать РМП (качественный и количественный вариант) в сочетании с ИФА, РПГА, РИФ или иммуноблоттингом (любая из реакций на выбор) в зависимости от возможностей клинико-диагностических лабораторий лечебно-профилактических учреждений.
Из-за серьезных последствий в случае недостаточной диагностики сифилиса, при профилактическом обследовании на сифилис беременных женщин и доноров крови важна высокая чувствительность тестов. При скрининговом обследовании беременных и доноров рекомендуется использовать РМП (качественный и количественный вариант) в сочетании с ИФА, РПГА, РИФ или иммуноблоттингом (в зависимости от возможностей лаборатории — любая из реакций на выбор). При получении неоднозначных, разноречивых, труднотрактуемых результатов исследование должно быть дополнено постановкой РИБТ, проводимой в крупных специализированных лабораториях кожно-венерологических диспансеров.
В связи с высоким уровнем заболеваемости сифилисом в Российской Федерации беременные должны быть подвергнуты профилактическому обследованию на сифилис трижды: при постановке на учет, при сроке 18-20 и 32 недель беременности.
Лица с клиническими проявлениями, подозрительными на наличие первичного сифилиса, должны быть обследованы с помощью РМП (качественный и количественный вариант), РИФ или иммуноблоттинга: при возможности — ИФА-IgM или 19S IgM-РИФ с абсорбцией.
Лица с клиническими проявлениями, подозрительными на наличие вторичного сифилиса, должны быть обследованы с помощью РМП (качественный и количественный вариант) в сочетании с РПГА, ИФА или РИФ (любой из трепонемных тестов на выбор).
Лица без клинических проявлений заболевания, бывшие в половом или тесном бытовом контакте с больными заразными формами сифилиса, если с момента контакта прошло не более 2 мес, должны быть обследованы как больные с подозрением на первичный сифилис: с помощью РМП (качественный и количественный вариант), РИФ или иммуноблоттинга; при возможности — ИФА-IgM или 19S IgM-РИФ с абсорбцией.
Новорожденных от матерей, перенесших сифилис и не получивших адекватную терапию или проходивших лечение по поводу сифилиса во время беременности, необходимо обследовать с помощью РМП (качественный и количественный вариант), а также тестов на выявление ранней инфекции — РИФ или иммуноблоттинга; при возможности 19S IgM-РИФ с абсорбцией или ИФА-IgM. Ввиду простоты постановки и информативности возможно дополнение исследования методом РПГА в количественном варианте.
Новорожденных от матерей, перенесших сифилис и пролеченных в полном объеме, необходимо обследовать с помощью РМП (качественный и количественный вариант). При позитивном результате — с помощью ИФА на суммарные антитела или ИФА-IgG, РИФ или иммуноблоттинга (любая из реакций — на выбор) и при возможности — 19S IgM-РИФ с абсорбцией или ИФА-IgM.
Важно помнить, что единственный достоверный лабораторный критерий диагноза сифилиса — обнаружение патогенной бледной трепонемы методом темнопольной микроскопии или ПЦР при наличии клинических симптомов сифилиса.
Серологические методы при наличии клинических симптомов сифилиса также достоверно подтверждают диагноз.
С осторожностью следует относиться к результатам серологического исследования, если клинические симптомы заболевания отсутствуют. При этом необходимо учитывать все дополнительные сведения, способствзчощие установлению диагноза (анамнез, данные конфронтации, результаты обследования трепонемными тестами).
Все виды исследований на сифилис следует проводить с использованием тест-систем, разрешенных к применению на территории Российской Федерации.
Рекомендации: Общая проверка на сифилис у лиц без симптомов рекомендуется для группы риска и беременных женщин.
В 1987 году в США было зарегистрировано более 35000 случаев первичного и вторичного сифилиса. Первичный сифилис вызывает язвы половых органов, глотки и прямой кишки. Вторичный сифилис вызывает такие осложнения, как поражение кожи, лимфоаденопатию и кондиломы. Болезнь развивается в латентном периоде, в котором сифилис может быть клинически бессимптомным. У больных, не получавших лечения, 1/3 случаев дает сердечно-сосудистые и неврологические осложнения третичного сифилиса. Сифилис сердечно-сосудистой системы вызывает болезни аорты (недостаточность, аневризмы, воспаления), сифилис нервной системы может стать причиной менингита, заболеваний периферической нервной системы (например, сухотка спинного мозга), сосудистых поражений мозга, нарушений психики. У жертв третичного сифилиса сокращается продолжительность жизни, и они частично или полностью теряют трудоспособность. Долговременная госпитализация необходима для пациентов, страдающих тяжелыми неврологическими и психическими расстройствами.
Сифилис может быть связан эпидемиологически с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД); возможная связь между болезнями, вызывающими язвы половых органов, такими, как сифилис и заражение ВИЧ в настоящий момент исследуется. Количество заболеваний сифилисом в настоящее время возрастает и сейчас находится на самом высоком уровне с 1950 года. Рост наиболее заметен среди негров и латиноамериканцев. Возрастание числа заболеваний зарегистрировано также среди проституток и наркоманов. Заболеваемость сифилисом возрастает также у беременных женщин. Передача заболевания плоду приводит к врожденному сифилису, ведет в 40% случаев к смерти плода, увеличению медицинских осложнений у выживших новорожденных. Число заболеваний врожденным сифилисом в США стабильно возрастает с 1978 года. В 1987 году было 10,5 случаев на 100 000 новорожденных. Скорость возрастания числа случаев резко увеличилась в 1987 году, и эксперты предсказывают, что при невмешательстве эта тенденция будет продолжаться.
![]()
Микробиологическая диагностика сифилисаРаннее обнаружение сифилиса у лиц без симптомов позволяет начать лечение антибиотиками, предотвратить развитие болезни и ее передачи половым путем. Лечение антибиотиками: пенициллином или гидрохлоридом тетрациклина высоко эффективно для уничтожения Treponema pallidum, вызывающих в организме сифилис. Раннее обнаружение и пенициллиновое лечение в течение беременности увеличивают шансы сократить риск передачи болезни плоду. Пренатальное лечение антибиотиками не полностью эффективно в предотвращении врожденного сифилиса. В частности, это происходит, когда при аллергии на пенициллин у матери приходится использовать опитомицин, антибиотик с ограниченной эффективностью в предотвращении врожденного сифилиса, или если лечение антибиотиками не было начато до третьего триместра.
С тех пор, как уровень заболеваниями сифилисом составляет менее 15 случаев на 100 000 человек, общее обследование всего населения не обязательно. Обследование должно проводиться в группах риска, таких, как проститутки, лица, имевшие контакт с носителями инфекции. Беременные женщины относятся к группе низкого риска по сифилису. Положительный результат в этой группе по VDRL менее 1%. Однако предродовое обследование должно проводиться для предотвращения детской смертности, связанной с врожденным сифилисом. Ряд исследований показывает, что предродовое обследование на сифилис эффективно даже если процент заболевших среди беременных составляет 0,005%. Сейчас число случаев врожденного сифилиса 0,001 %.
Канадские специалисты рекомендуют проводить обследование на сифилис в группах повышенного риска, таких как лица, имеющие большое число сексуальных партнеров, все беременные женщины в их первый пренатальный визит и беременные женщины из групп повышенного риска на 34—36 неделе беременности. Американский колледж акушеров и гинекологов также рекомендует всеобщее пренатальное обследование на сифилис. Центр по контролю за заболеваниями рекомендует проводить серологическое обследование в начале пренатального периода и перед родами; на 28 неделе — тестирование для женщин из групп риска.
Общее серологическое тестирование рекомендовано лицам из групп риска, таким, как проститутки, лица, имеющие большое число половых партнеров в регионах с широким распространением сифилиса и имевшие половые контакты с носителями активного сифлиса. Оптимальная частота исследований не установлена и определяется клиническими условиями. Все беременные женщины должны быть тестированы в их первый пренатальный визит и перед родами; для женщин из групп риска необходим дополнительный тест на 28 неделе беременности.
Анализ на сифилис давно стал частью рутинного медицинского обследования. Его обязательно назначают при беременности, перед госпитализацией. Результаты анализа часто требуют при приеме на работу или в ходе диспансеризации. Сегодня диагностика сифилиса находится на высоком уровне развития, но искоренить болезнь окончательно не удается — каждый год выявляют тысячи новых случаев заболевания.
Так ли страшен сифилис, как о нем говорят?
Сифилис вызывает бактерия Treponema pallidum, или бледная трепонема. Попадая в организм, она постепенно поражает все органы. Причем вне организма трепонема быстро погибает. Дезинфицирующие, моющие средства и даже обычный солнечный свет губительно воздействуют на нее. Эта бактерия может долго сохраняться только во влажных условиях и при замораживании.
Первый симптом сифилиса — сифилома. Уплотнение на коже, на котором появляется эрозия или язвочка. Она возникает в том месте, где трепонема проникла в организм. Чаще всего это кожа половых органов и промежности.
Через некоторое время язвочка бесследно проходит и человек часто думает, что полностью излечился. Но примерно через 1,5 месяца на коже появляется сыпь в виде розовых небольших пятен. Это стадия вторичного сифилиса, которая может длиться несколько лет.
Если и на этой стадии человек не проходит лечение, развивается третичный сифилис. Болезнь поражает все органы и ткани, появляются гуммы — плотные узлы, которые разрушаются и оставляют грубые рубцы.
Самые серьезные осложнения сифилиса — нейросифилис, поражение внутренних органов, воспаление суставов. Особенно тяжело протекает врожденный сифилис. Если во время беременности женщина переносит это заболевание, то примерно в 25% случаев ребенок погибает на 6–7 месяце беременности, еще в 14% — сразу после рождения [2] . А у выжившего младенца развиваются тяжелые поражения кожи, легких, печени и внутренних органов.
На рубеже XX–XXI веков Россия пережила вспышку сифилиса. За 2000 год было выявлено более 239 тысяч новых заболевших. После этого заболеваемость начала снижаться. В 2005 году новых заболевших было 97,9 тысяч, в 2010 — 63,7 тысяч, а в 2015 — только 34,4 тысячи. В феврале 2017 года за один месяц в России выявлено 2300 новых случаев сифилиса [3] . Но, к сожалению, как говорят специалисты, реальное количество заболевших примерно в 3–4 раза больше.
Сифилис до сих пор является распространенной болезнью в том числе и из-за проблем диагностики. Первичная сифилома не вызывает боли и самостоятельно бесследно заживает, поэтому далеко не все обращаются к врачу. Сыпь во вторичном периоде не вызывает боли, зуда и шелушения, проходит сама и не оставляет следов. В третичном периоде количество антител против этой инфекции может снижаться настолько, что не обнаруживается серологическими тестами. Есть проблемы и с обследованием половых партнеров — далеко не все готовы раскрыть врачу историю своих любовных похождений и пригласить своих партнеров на обследование.
Стоит помнить, что любые высыпания, особенно возникшие на половых органах — повод обратиться к дерматовенерологу и пройти обследование.
Для беременных и доноров анализ на сифилис обязателен. Для некоторых работающих (госслужащие, военнослужащие, медицинские работники, повара) предоставление результатов данного исследования обязательно при поступлении на работу и затем каждый год при диспансеризации.
Анализ также сдают перед плановой операцией, при поступлении в стационар или при обращении к врачу с симптомами, характерными для этого заболевания.
Основная часть методов диагностики предполагает анализ сыворотки крови. Из нее выделяют антитела к трепонеме и ДНК возбудителя. Сами трепонемы чаще обнаруживают в соскобах с высыпаний, которые появляются при сифилисе.
Для выявления ДНК трепонемы также могут проводить исследование мочи, эякулята, соскоба со слизистых оболочек, спинномозговой жидкости, клеток кожи или конъюнктивы глаза. То есть биоматериала из тех органов, которые могут быть поражены сифилисом.
В зависимости от вида исследования кровь могут брать из вены или из пальца. Некоторые исследования желательно проводить натощак, для других достаточно не есть 4 часа до забора биоматериала.
Материал для выявления ДНК трепонемы лучше собирать до начала антибактериальной терапии. Спинномозговую жидкость забирают только в стационаре в стерильную емкость. Соскоб со слизистых оболочек, с поверхности кожи или глаза не требует особой подготовки. Его может взять врач или специалист лаборатории.
Женщинам, перед тем как сдавать анализ на сифилис из влагалища, желательно воздержаться от спринцевания, половых контактов, диагностических гинекологических манипуляций хотя бы в течение двух суток.
Исследования на сифилис разделяют на две группы — выявление трепонемы или косвенных следов ее присутствия. Для выявления возбудителя заболевания исследуют материал с язвы или из пораженных органов. Эти методы эффективны уже при первых признаках болезни.
Серологические исследования можно проводить примерно через 8–9 дней после появления первичной язвы. То есть сдавать анализ на сифилис сразу после полового контакта бесполезно.
К прямым методам относят темнопольную микроскопию, ПЦР и RIT-тест. Темнопольная микроскопия — это быстрое исследование, которое занимает один рабочий день. Его достоверность — 100%. Но при выраженном воспалении, кровоточивости, при травме элемента или после начала наружного лечения обнаружить живые трепонемы становится почти невозможно.
Микроскопия практически полностью уступила место ПЦР-диагностике. Метод ПЦР позволяет выделить участки ДНК трепонемы в соскобах с кожи и слизистых, из другого биологического материала.
Специфичность ПЦР диагностики приравнивается к 100%. Чувствительность зависит от расходных материалов, которые используются в лаборатории.
RIT-тест — это биологический метод, при котором материал от заболевшего человека прививают лабораторным кроликам. Этот метод очень точен, но сейчас используется только в исследовательских целях. Во-первых, это дорого. Во-вторых, ждать, пока у животного появятся признаки заболевания, слишком долго. Поэтому рассматривать его как реальную альтернативу другим методам диагностики нет смысла.
Непрямые методы позволяют выявить в крови признаки присутствия трепонемы — различные виды антител. Они разделяются на специфические и неспецифические.
РПР-тест (RPR) , или тест с быстрыми плазменными реагинами — это современный зарубежный аналог реакции микропреципитации. К этой же группе относится исследование с толуидиновым красным.
Все эти методы обладают хорошей чувствительностью, но могут давать положительные результаты при отсутствии заболевания. Поэтому если одна из этих проб оказалась положительной, проводятся подтверждающие тесты. К ним относят РСКт, РИТ, ИФА, РИФ, РПГА и иммуноблот.
ИФА и РПГА — это специфичные (100%), чувствительные (95%) и незатратные методы. Эти реакции иногда дают ложный положительный результат при воспалении и некоторых нарушениях обменных процессов. Поэтому чтобы поставить диагноз, нужны результаты минимум двух тестов.
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) и иммобилизации бледных трепонем (РИТ) — это специфичные, но достаточно дорогие методы. На практике они почти не используются.
Реакция связывания комплимента с трепонемным антигеном (РСКт) является более точным аналогом реакции Вассермана. В ней анализируется антиген, характерный только для бледной трепонемы.
Еще одним подтверждающим тестом является иммуноблот . Этот метод используется для углубленной диагностики в сомнительных случаях. В отличие от других анализов, которые могут быть готовы за 1–2 рабочих дня, результата иммуноблота придется ждать около недели.
Цена анализа на сифилис зависит от его вида. Скрининговые реакции, такие как РМП или RPR, обойдутся примерно в 320–380 рублей. Определение ДНК в различных субстратах от соскобов со слизистых оболочек до спинномозговой жидкости стоит около 350–450 рублей. Стоимость зависит от ценовой политики лаборатории и используемых расходных материалов. Чем более чувствителен тест, тем больше будет его цена.
ИФА анализ на сифилис стоит приблизительно 500–800 рублей в зависимости от модификации метода. За иммуноблот придется отдать около 1600–1700 рублей. Другие методы исследования практически не используются в реальной практике.
Кровь для исследования на сифилис можно сдать в любой поликлинике или лаборатории. Преимущество поликлиники в том, что биоматериал на анализ по направлению можно сдать бесплатно. Это актуально при обследовании перед плановой госпитализацией, при диспансеризации или если человек устраивается на работу. Минус — время ожидания, в некоторых случаях отсутствие современного оборудования и относительная открытость информации.
Если результат нужен быстро, точно и строго конфиденциально, возможно, стоит обратиться в частные лаборатории. За такой анализ придется заплатить, но при этом есть возможность выбрать метод исследования, а результат в большинстве случаев будет готов уже через 1–2 дня. Для особенно нетерпеливых есть возможность заказать экстренное проведение исследования и получить результаты уже через 2 часа.
Некоторые лаборатории проводят такие исследования на условиях анонимности: личные данные пациента не фигурируют даже в бланке направления. Результат такого анализа нельзя предъявить в больницу или работодателю, но зато можно не беспокоиться за раскрытие личных данных.
Обязательно обратите внимание на метод исследования. Вместо морально устаревшей RW желательно выбирать более современные тесты — РМП или RPR и их аналоги. При ПЦР исследовании обратите внимание на чувствительность метода, количество копий ДНК в образце, при котором тест сработает как положительный.
Сифилис — заболевание, которое может вызвать многочисленные осложнения. Но оно развивается достаточно медленно. Это значит, что у человека есть время, чтобы сдать биоматериал на анализы и пройти лечение до того, как последствия станут необратимыми.
Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — бледная трепонема. При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.
Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.
Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.
Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика
При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.
Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.
Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.
Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).
Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.
Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.
Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций
Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.
В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.
В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.
Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.
Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.
Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов
Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра. Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.
Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.
Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.
Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)
Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.
Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).
Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.
При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.
Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.
Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.
Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.
Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.
Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).
Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.
Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов
При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.
РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.
Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.
Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.
Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.
С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.
Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.
РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.
Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.
Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).
Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.
Микробиологическая диагностика
Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).
Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.
Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.
Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.
Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.
Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.
Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.
Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.
Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.
Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.
ПЦР на сифилис
Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.
Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.
Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.
Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.
ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.
Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.
Читайте также:
