Хламидийная инфекция у сельскохозяйственных животных

Хламидиоз крупного рогатого скота (chlamidiosis) – контагиозная инфекционная болезнь, характеризующаяся у молодняка ринитами, бронхопневмониями, гастроэнтеритами, полиартритами, кератоконъюнктивитами, энцефаломиелитами, маститами и рождением нежизнеспособного молодняка. Хламидиозом болеет и человек.

Хламидиоз крупного рогатого скота регистрируется во всех странах мира, в том числе и в Республике Беларусь и наносит хозяйствам ощутимый экономический ущерб.

Этиология. Хламидии представлены родом Chlamidia с четырьмя очень близкими видами Chl.psittaci, Chl.pecorum, Chl.trachomatis и Chl.pneumoniae. Они входят в группу облигатных внутриклеточных паразитов и занимают промежуточное положение между бактериями, риккетсиями и вирусами, содержат ДНК и РНК (чем существенно отличаются от истинных вирусов). Хламидии имеют шаровидную или овальную формы. Они могут существовать в виде ретикулярных телец (внутриклеточная форма), которые не превышают в диаметре 1,2 мкм и имеют структуру типичных грамотрицательных бактерий, а также в виде промежуточных телец диаметром 0,3-0,4 мкм, то есть имеют размеры крупных вирусов.

Хламидии сравнительно устойчивы во внешней среде. Хорошо сохраняются при низких температурах, чувствительны к ее повышению. В воде сохраняются до 17 дней, в лиофилизированном состоянии – до 3 лет, в непастеризованном молоке – 23 дня. Они легко инактивируются дезосредствами в обычных концентрациях (2 %-ный раствор натрия гидроокиси, 3 %-ный раствор фенола, 3-5-ный раствор формальдегида и др.). Хламидии чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда (геомицин-ретард, окситетрациклин).

Эпизоотологические данные. В естественных условиях хламидиозом болеет крупный рогатый скот, овцы, козы, птица и человек. Из лабораторных животных к хламидиозу чувствительны белые мыши, крысы, морские свинки, кролики и обезьяны.

Источником возбудителя инфекции являются больные и переболевшие животные, которые в течение 8-12 месяцев могут являться хламидионосителями и выделяют возбудителя с истечением из глаз, носа, с фекалиями, абортплодами, околоплодными водами и оболочками, с мочой, молоком и спермой. Заражение животных происходит алиментарным, аэрогенным и половым путями.

Заболеваемость при респираторной форме составляет 70-80 %, летальность до 15-25 %. При кишечной – соответственно 30-70 % и 20-30 %, при генитальной форме заболеваемость достигает до 25-60 %. При энцефалитной форме летальность составляет – 100%.

Патогенез. Хламидии в организм проникают алиментарным, аэрогенным или половым путями.
Обладая политропностью, возбудитель размножается в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка и кишечника, воздухоносных путей и легких, мочеполовых органов, в гепатоцитах, в эпителиальных клетках, конъюнктиве и синовиальной оболочке капсулы суставов. Особенно интенсивно хламидии размножаются в эпителиальных клетках хориона. Размножение хламидий в указанных органах приводит к развитию соответствующих симптомов.

Течение и симптомы болезни. У крупного рогатого скота хламидиоз протекает в кишечной, респираторной, генитальной, энцефалитной и конъюнктивальной формах. Возможно смешанное течение болезни.

Инкубационный период составляет от 3 до 20 дней. При кишечной форме повышается температура тела до 40-40,5 0С, наблюдается понос, угнетение, отказ от корма. Слизистая оболочка ротовой полости гиперемирована, иногда на ней обнаруживаются эрозии и язвы.

Респираторная форма характеризуется лихорадкой. Температура тела повышается до 40-41 0С и удерживается 1-2 дня, затем снижается до нормы. Наблюдаются серозные истечения, которые на 3-4 день болезни становятся слизисто-гнойными. Появляется кашель. Слизистая оболочка носовой полости гиперемирована, отечна. Учащается пульс, дыхание, наблюдается конъюнктивит или незначительное припухание век.

Генитальная форма заболевания характеризуется абортами и задержанием последа. Развиваются метриты, эндометриты. Наблюдаются перегулы, а иногда и бесплодие животных.

При энцефалитной форме имеют место признаки поражения центральной нервной системы. Движения животных становятся некоординированными. Незадолго до гибели наблюдаются судорожные сокращения шейных и затылочных мышц, дрожание головы.

Для конъюнктивальной формы характерны слезотечение, конъюнктивит, кератит.

Патологоанатомические изменения. У абортированных плодов обнаруживают серозные отеки подкожной клетчатки, множественные точечные кровоизлияния в плевре, эпикарде, эндокарде, слизистой оболочке сычуга, в почках, в портальных лимфоузлах. В брюшной и грудной полостях обнаруживают геморрагический транссудат, печень в состоянии зернистой и жировой дистрофии. Имеет место катаральный абомазит и энтерит.

При вскрытии павших животных при респираторной форме хламидиоза слизистая оболочка носовой полости, гортани гиперемированы, отечна с кровоизлияниями, очаги уплотнения в легких, в бронхах слизистый или слизисто-гнойный экссудат, средостенные бронхиальные лимфоузлы увеличены в объеме, сочны на разрезе, с кровоизлияниями.

При энтеральной форме наблюдается острый катаральный гастроэнтерит, точечные кровоизлияния. В печени, почках, селезенке – дистрофия.

У молодняка, а иногда и у взрослых животных обнаруживают пролиферативно-фибринозные артриты с увеличением количества жидкости в них.

Диагностика. Диагноз на хламидиоз ставят на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений, а также результатов лабораторных исследований.

От больных животных в лабораторию направляют пробы дефибринированной крови в объеме 3-5 мл в стерильных пробирках, смывы с носовой полости, конъюнктивы глаз и пробы фекалий.

От павших или вынужденно убитых животных берут кусочки внутренних органов (легких, средостенных и брыжеечных лимфоузлов, слизистой оболочки носовой полости, гортани, трахеи, селезенки, сычуга, тонкого отдела кишечника, твердой и мягкой мозговых оболочек, продолговатого мозга и кусочки синовиальной оболочки суставов).

При абортах берут кусочки плаценты, вагинальную слизь, абортировавших животных, паренхиматозные органы плодов и содержимое сычуга. От быков-производителей – пробы спермы, смывы с препуциального мешка, эякулят.

Отобранный материал замораживают и доставляют в лабораторию в термосе со льдом.
Для серологических исследований отбирают и посылают парные пробы сыворотки крови (в первые дни болезни и повторно через 14-20 дней).

Лабораторным методом диагноз на хламидиоз считается установленным при:

- выделении возбудителя из исследуемого материала и его идентификации;

- обнаружении возбудителя в исследуемом материале и получении положительных результатов исследования на хламидиоз сыворотки крови от этих животных;

- при нарастании титра антител в 2 и более раза при исследовании сыворотки крови абортировавших животных.

Дифференциальная диагностика. Респираторную и кишечную формы хламидиоза у крупного рогатого скота следует дифференцировать от инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, аденовирусной инфекции, рота- и коронавирусной инфекций, микоплазмоза, колибактериоза, сальмонеллеза, а хламидиозный энцефалит – от болезни Ауески, листериоза, бешенства и различных токсикозов.

Специфическая профилактика.Для специфической профилактики болезни в настоящее время применяют следующие вакцины:

- инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиозного аборта овец;
- инактивированная эмульсин-вакцина против хламидиоза крупного рогатого скота;
- инактивированная культуральная эмульсин-вакцина против хламидиоза животных.

Лечение. В связи с тем, что хламидии внутриклеточные микроорганизмы, применение традиционных антибиотиков и сульфаниламидных препаратов малоэффективно. Для лечения больных животных и хламидионосителей применяют антибиотики тетрациклинового ряда. Наиболее эффективным антибиотиком является геомицин-ретард, терамицин, которые применяются в дозе 1 мл на 10 кг живой массы двукратно с интервалом 3-4 дня.

Из специфических средств для лечения больных животных можно применять сыворотку реконвалесцентов.

Профилактика и меры борьбы.При установлении диагноза на хламидиоз территорию, на которой выявлено заболеваний (хозяйство, племпредприятие, ферму, базу, овчарню, свинарник), в установленном порядке объявляют неблагополучной по этой болезни и вводят ограничения.

По условиям ограничений запрещают:
- ввод (ввоз) и вывод (вывоз) крупного рогатого скота, овец и свиней из неблагополучного пункта, за исключением случаев отправки поголовья на убой;
- перегруппировку животных внутри неблагополучного хозяйства без разрешения ветеринарного специалиста;
- вывоз сырья, сырых продуктов от убоя больных животных;
- вольную случку, получение спермы от больных производителей, а также реализацию спермы, которая была заготовлена от них ранее.

В неблагополучных хозяйствах животных иммунизируют хламидиозными вакцинами в соответствии с наставлениями по их применению.

Животноводческие помещения, профилактории подвергают механической очистке и дезинфекции. Абортированные плоды, плодные оболочки, трупы утилизируют. Навоз, подстилку и т.п. обеззараживают биотермическим способом.

Молоко от клинически больных коров пастеризуют или кипятят и используют для кормления животных.
Ограничения с неблагополучного пункта снимают через 30 дней после последнего случая выздоровления больных животных и проведения заключительных мероприятий.

Хламидиоз крупного рогатого скота представляет собой инфекцию, поражающую, в большинстве случаев, околоплодные оболочки и приводящую к абортированию плода. У молодняка, пораженного хламидиозом, могут наблюдаться проявления гастроэнтероколита, кератоконъюнктивита, полиартрита или бронхопневмонии. У племенных быков это заболевание протекает, как правило, бессимптомно.

Крупный рогатый скот

Хламидиоз КРС описывается как хроническая болезнь, которая способна наносить большой урон животноводческому хозяйству.

СПРАВКА. Хламидиоз, выявляемый у крупного рогатого скота, вызывает внутриклеточный паразит Chlamydia psittaci кокковидной формы диаметром 0,2-1,5 мкм. Это заболевание также известно под другими названиями: орнитоз, вульвовагинит, энтерит, офтальмия, энзоотический аборт, пситтакоз и пр. Первые описания болезни встречаются в источниках начиная с 1923 года. Возбудитель хламидиоза КРС впервые был выделен в 1957 году в результате исследования абортированных плодов коров.

Что собой представляет хламидиоз?

Хламидиоз КРС – группа заболеваний, которые имеют схожие этиологические признаки, однако, могут отличаться по характеру течения заболевания и клинической картины. Хламидиозу подвержены коровы, лошади, свиньи, козы и овцы: у зараженных особей отмечаются аборты, преждевременные роды, слабое или нежизнеспособное потомство. Это одно из наиболее распространенных заболеваний в мире, которое наносит ощутимый урон фермерским хозяйствам.

Возбудитель хламидиоза выделяется из плаценты, печени, селезенки и почек, выделений из матки, а также из содержимого сычуга абортированного плода. Паразиты Chlamydia репродуцируются в желточном мешочке эмбрионов кур за срок от 6 до 7 дней, вызывая гибель эмбриона не позднее чем через 6 суток. Также инфекция является патогенной для мелких животных, например, морских свинок.

Возбудитель хламидиоза КРС отличается устойчивостью в открытой среде: при попадании в водопроводную воду он остается жизнеспособным на протяжении 17 дней, при попадании на снег – до 18 дней, под снег – до 29 суток. Возбудитель также сохраняется в пастеризованном молоке на протяжении 23 суток. В помещениях, где находится крупный рогатый скот, возбудитель сохраняет вирулентность на 5 недель.

ВАЖНО! Для того чтобы убить Chlamydia psittaci, находящийся в воде или молоке, требуется кипячение на протяжении 2-10 минут. Также хламидии погибают в результате обработки поверхностей дезинфицирующими растворами с включением формалина, едкого натра, хлорамина, хлорной извести.

Основные источники заражения хламидиозом КРС — больной и зараженный скот через выделения во время аборта или отела, через мочу, фекалии, сперму, а также через молоко. Пути заражения:

фекально-оральный;
воздушно-капельный;
контактный (естественное/искусственное осеменение).

Симптомы

Специфика развития хламидиоза КРС зависит от места поражения, а также возраста животного. Первые проявления наступают на 3-20 сутки после инфицирования. Различают следующие формы хламидиоза:

Респираторная форма. Проявляется повышением температуры до 40-41°С, учащением пульса, отечностью слизистых носа, припуханием век, конъюнктивитом, появлением сродных истечений, которые на 3-4 сутки становятся слизистыми с примесью гноя.
Кишечная форма. Проявляется повышением температуры до 40-40,5°С, появлением поноса. Животное отказывается от корма. Также отмечается общее угнетенное состояние, гиперемированная слизистая ротовой полости. Иногда во рту появляются язвы и эрозии.
Генитальный хламидиоз. Проявляется абортами, задержкой последа, метритами, эндометритами. Перенесенный хламидиоз иногда заканчивается бесплодием.
Энцефалитный хламидиоз. Проявляется раскоординированностью движений, непроизвольными сокращениями мышц на шее и затылке животного, дрожанием головы.
Конъюнктивальная форма. Характеризуется появлением кератита, конъюнктивита, слезотечения.

При респираторном проявлении хламидиоза заболевание охватывает 70-80% поголовья, а летальные случаи составляют 15-25% от общего числа заболевших. Кишечный вид хламидиоза характеризуется охватом от 30 до 70% и смертностью от 20 до 30%. Заболеваемость при генитальном хламидиозе составляет 25-60%. При энцефалитном виде смертность скота составляет 100%.

У молодняка на первый план при заражении хламидиозом выходят следующие признаки:

гастроэнтероколиты;
полиартриты (чаще у телят возрастом 3-10 дней, отмечается поражение запястных и заплюсневых суставов);
бронхопневмонии (чаще у молодняка возрастом от 20-30 дней до 5-6 месяцев);
конъюнктивиты.

У недавно рожденных телят может отмечаться диарея, в фекалиях появляется примесь слизи или крови. При анализе крови выявляется лейкоцитоз и нейтрофилия. Хламидиоз у взрослых быков может иметь симптомы орхита, уретрита или баланопостита, а также протекать в бессимптомной форме с ухудшением качества спермы.

Диагностика хламидиоза КРС

Для диагностики хламидиоза у животных фермерских хозяйств используют эпизоотологические данные, выводы о патологоанатомических изменениях, результаты клинических наблюдений. Также хламидиоз выявляют путем проведения лабораторных исследований, для чего у зараженного КРС берут на анализ кровь, фекалии, смывы из слизистой носа и конъюнктивы.

Смывы из слизистой носа и конъюнктивы

Для патологоанатомических исследований от павшего скота отбирают части всех основных внутренних органов, а при абортивных процессах исследуют плаценту, вагинальную слизь, содержимое сычуга и образцы печени, селезенки, почек. Для выявления хламидиоза у племенных быков проводят лабораторные анализы спермы, эякулята, а также анализы смыва с препуциального мешка.

Постановка диагноза осуществляется по данным лабораторных анализов в следующих случаях:

когда в отобранных тканях и жидкостях выделяется возбудитель Chlamydia psittaci;
при обнаружении в отобранных анализах Chlamydia psittaci и положительных итогах анализа сыворотки крови;
при росте титра антител в сыворотке крови абортировавшего КРС.

При выдаче диагноза стоит отличать респираторный и кишечный тип заболевания от ринотрахеита инфекционного происхождения, микоплазмоза, сальмонеллеза, аденовирусного заболевания и колибактериоза. Энцефалитную форму стоит дифференцировать с такими заболеваниями, как листериоз, бешенство, болезнь Ауески.

Патологоанатомические исследования выявляют увеличенную зернистую печень, специфические очаги воспаления в миокарде, воспалительные процессы в почках животного. Также у трупов животных могут наблюдаться признаки гастроэнтероколита, плеврит, пневмония, некрозы хрящей в суставах, кровоизлияния и скопление серовато-желтой жидкости. Все эти признаки наиболее характерны для плодов КРС, абортированных на 7-9 месяце. При более ранних сроках абортирования внутренние органы плода не имеют видимых очагов поражений за исключением скоплений красноватой жидкости в брюшной и плевральной области и красноватых подкожных отеков.

Лечение

Особенности лечения хламидиоза КРС заключаются в низкой эффективности традиционных антибиотиков и сульфаниламидов. Наибольшая эффективность лечения отмечается при использовании геомицина-ретарда и терамицина, которые назначаются в дозировке 1 мл/10 кг живой массы. Препарат вводится двукратно с перерывом в 4 или 3 дня. Также для лечения хламидиоза у заболевших животных и носителей используют антибиотики тетрациклины, а также специфические средства, такие как сыворотка реконнвалесцентов.

Профилактика хламидиоза КРС

Главное профилактическое мероприятие в отношении хламидиоза животных состоит в своевременном выявлении заболевания и принятии мер по ограничению неблагополучной территории. В свинарниках, в фермерских и домашних хозяйствах запрещают вывоз сырья, мяса, молочных продуктов, свободную случку, перевод животных внутри хозяйства, ввоз/вывоз КРС. Скот хозяйств, в которых отмечены случаи хламидиоза, может быть иммунизирован вакцинами.

Все помещения подлежат тщательной механической чистке и дезинфекции. Все абортированные части и трупы инфицированных животных подлежат строгой утилизации, а подстилки в стойлах проходят биотермическое обеззараживание. Молоко от зараженного хозяйства подлежит пастеризации или кипячению (30 минут), после чего оно может использоваться для вскармливания животных. Ограничительные меры при выявлении хламидиоза действуют на протяжении срока лечения поголовья, а также еще 30 дней после последнего случая выздоровления.

На племенных предприятиях, где регистрируются случаи хламидиоза, проводят дополнительный микроскопический анализ эякулята для определения его клеточного состава. При выявлении антител и самого возбудителя животное направляется на убой. Убой животных, зараженных хламидиозом, выполняется в помещениях санитарной бойни. Измененные органы подлежат утилизации, а неизмененные могут быть выпущены после проварки. Шкуры зараженных животных могут выпускаться после проведения дезинфицирующих мероприятий.

Хламидии, которые попадают в организм животного, вызывают появление гуморального и клеточного иммунитета, который имеет нестерильный характер. В результате в организме образуются особые иммунные комплексы. Вырабатываемые антитела не способны предотвратить заболевание, однако обеспечивают устойчивость к попаданию в организм малого количества возбудителей инфекции, что характерно для естественного инфицирования. При использовании вакцины стойкий иммунитет сохраняется на протяжении 12 месяцев. В России при оздоровлении поголовья от хламидиоза используют эмульсин-вакцину культуральную инактивированную.

Хламидиоз КРС – заболевание, которое требует безотлагательных мер по лечению и профилактике распространения. Хламидиоз не только является причиной существенного экономического урона для животноводческих хозяйств, но и несет угрозу здоровью человека. Все работники хозяйств и лабораторий, которые контактируют с больным животным, должны строго соблюдать мероприятия для личной профилактики.

Саратовская межобластная ветеринарная лаборатория

Новости

Хламидиоз (Chlamydiosis) с/х животных — это большая группа болезней, объединенных этиологически, но в большинстве своем различающихся по характеру течения инфекционного процесса и формам его клинического проявления. Хламидиозы характеризуются абортами маточного поголовья (коровы, овцы, козы, свиньи, лошади), рождением нежизнеспособного или слабого молодняка с симптомами пневмонии, полиартритов, энтеритов, энцефаломиелитов и конъюнктивитов. Хламидиозы относятся к зооантропонозам с выраженной природной очаговостью.

Болезнь у животных известна под разными названиями: пситтакоз, орнитоз, неориккетсиоз, парариккетсиоз спорадический энцефаломиелит, энцефалит Басса, орнитозная пневмония, вульвовагинит, энтерит, пневмоэнтерит, офтальмия, энзоотический аборт и другие.

История изучения хламидийных инфекций начинается с 1876 года, когда была установлена взаимосвязь между своеобразно протекающей пневмонией человека и болезнями попугаев, завезенных из тропических стран.
Роль попугаев в заражении людей окончательно была установлена в 1892 году во время вспышки болезни у людей, имевших контакт с попугаями, завезенными из Буэнос-Айреса. Morang в 1895 году предложил заболевание, возникшее при контакте с попугаями, именовать пситтакозом (psittacus) — попугай.
Позднее Haagen и Maurer в 1938 году установили, что птицы, не принадлежащие к семейству попугаев, также являются резервуаром возбудителя инфекции и источником заражения человека, инфекция стала называться орнитозом (ornix) — птица.

С вирусами их сходство — в облигатном внутриклеточном паразитировании, т.е. они размножаются только внутри клеток макроорганизма.

Выделенные хламидии от разных видов животных и птиц отличаются между собой по патогенности и антигенным свойствам.

Патогенность. К хламидиям чувствительны все виды с/х животных и птицы.

Эпизоотологические данные.

К хламидиозам восприимчивы все основные виды с/х животных, а также птицы, собаки, кошки. Болеет и человек.
Источником возбудителя инфекции служат больные животные и птицы. Выделение патогена больными животными происходит с секретом из носовых ходов, при кашле, с молоком, мочой, фекалиями, спермой. Особенно интенсивно его выброс во внешнюю среду отмечается с околоплодными водами, абортированными плодами, последами, выделениями из половых органов. Происходит контаминация возбудителем окружающей среды: воздух, полы, стены, кормушки, подстилка, корма, вода. Все это служит факторами передачи патогена здоровым животным.
Основные пути передачи возбудителя алиментарный и аэрогенный. Среди млекопитающих животных обмен возбудителем возможен при акте случки, через сперму при искусственном осеменении. Плоды заражаются внутриутробно, в момент рождения, при употреблении молозива и молока.
Возникновению заболевания способствуют неудовлетворительные условия кормления и содержания, переохлаждение. В стадах животных активизация эпизоотического процесса происходит после отелов, окотов, абортов. Различные стрессовые ситуации дают толчок для активизации эпизоотического процесса и проявления клинической патологии.
Сезонность. С учетом особенностей циркуляции возбудителя наибольший риск для возникновения патологии существует в весенне-летнее время. К этому времени заканчивается весенняя миграция птиц, накапливается восприимчивое поголовье молодняка с/х животных, осуществляется выгон животных на пастбищное содержание, появляются условия для неограниченного контакта животных с окружающей средой.

Патогенез
Главными воротами инфекции являются слизистые оболочки пищеварительного, дыхательного трактов, а также плацента и слизистые оболочки половых органов.
Попав в организм возбудитель первоначально локализуется в регионарных лимфатических узлах, а затем разносится лимфой и кровью по всему организму. Наиболее интенсивное размножение микроба происходит в ретикулоэндотелиальных и лимфоидных клетках, в эпителии бронхов и бронхиол, в альвеолярном эпителии, в органах половой системы.
Под влиянием микроорганизма происходит разрушение клеток. Возбудитель вместе с содержимым разрушенных клеток проникает в кровь, вызывая бактериемию, токсемию, аллергизацию макроорганизма, поражения различных паренхиматозных органов.
Для хламидий характерно длительное персистирование в организме животных, обуславливающее возможность возникновения болезни.

Клинические признаки
Б олезнь характеризуется клиническим полиморфизмом. По преобладанию поражения отдельных органов и систем выделяют самостоятельные формы проявления инфекции: у взрослого рогатого скота — хламидийный аборт к.р.с., хламидийный аборт овец.

Инкубационный период при спонтанном заражении длится от 2 до 3-х месяцев.
Хламидиоз характеризуется абортами маточного поголовья на 7-9 месяце беременности, но могут быть и на 4-ом месяце. Заболевание начинается внезапно, и коровы перед абортом не проявляют особых клинических признаков, повышается лишь температура тела. Иногда отмечается прогрессивное истощение животных.

У коров отмечаются маститы, изменение свойств молока или полное прекращение лактации (агалактия).
У быков-производителей инфекция протекает бессимптомно или со слабо выраженным уретритом, реже орхитом.
У телят хламидиоз характеризуется энтеритами, бронхопневмонией, кератоконъюнктивитами, иногда полиартритами и нарушением функций Ц.Н.С. Эти признаки могут развиваться неодновременно.

В начале у новорожденных телят появляется энтерит, сопровождающийся повышением температуры тела, угнетенным состоянием, отсутствием или уменьшением аппетита, залеживанием, а также непроизвольным выделением каловых масс с примесью слизи, а иногда и крови. Отмечаются явления обезвоживания и токсикоза организма. В ряде случаев энтерит протекает в легкой форме, лишь с кратковременным повышением температуры тела, а иногда и бессимптомно.

Патологоанатомические изменения
Макроскопические изменения половых органов у коров не характерны. После аборта обнаруживают катаральный эндометрит, цервицит и вагинит с многочисленными кровоизлияниями на слизистой оболочке. Кровоизлияния обнаруживают и в регионарных лимфатических узлах. В полости скапливается гнойно-катаральный, фибринозный или ихорозный экссудат. Плодные оболочки отечны. В котиледонах много мелких некротических очажков серовато-желтого цвета.

Диагноз.

В лабораторию для исследования на хламидиоз направляют:
— материал от абортировавших животных (кусочки плаценты, влагалищную слизь); — абортированные плоды целиком или паренхиматозные органы от них;
— сыворотку крови в количестве 2-3 мл от абортировавших и подозрительных по заболеванию животных.
Материал отбирают не позднее 2-х часов после аборта в стерильные, герметически закрывающиеся флаконы.
Флаконы с материалом помещают в термос со льдом, а абортированные плоды во влагонепроницаемую тару и в этот же день, но не позже чем через 24 часа после аборта, доставляют в лабораторию с соблюдением мер, исключающих распространение инфекции.

Дифференциальный диагноз
У взрослых животных хламидиоз клинически сходен с бруцеллезом, кампилобактериозом, ИРТ, трихомонозом и листериозом. У молодняка необходимо дифференцировать от ряда вирусных (ПГ-3, аденовирусная инфекция, вирусная диарея, ИРТ) и бактериальных инфекций, таких как пастереллез, сальмонеллез, стрептококкоз, диплококкоз и др.).

Для диагностики хламидиоза следует использовать все доступные методы: эпизоотологические, клинические, патологоанатомические данные, РСК, РДСК, РИФ, ПИФ, ИФА, ПЦР.

ПО ВОПРОСАМ ПРОФИЛАКТИКИ, ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ ЖИВОТНЫХ ОБРАЩАЙТЕСЬ ПО АДРЕСУ:

г. Саратов, ул. БЛИНОВА, 13.

Тел. (8452) 62-16-54, 89297795032
ОТДЕЛ ГЕНОДИАГНОСТИКИ И ИФА.

УТВЕРЖДАЮ Заместитель руководителя Департамента ветеринарии В.В.Селиверстов 30 июня 1999 г. N 13-7-2/643

1. Общие положения

1.1. Лабораторные методы исследования на хламидийные инфекции животных включают:

- выявление специфических антител в сыворотке крови больных животных в РСК (РДСК) или ИФА;

- обнаружение хламидий и их антигенов в патологическом материале методом световой или люминесцентной микроскопии;

- выделение хламидий на куриных эмбрионах в культуре клеток или лабораторных животных с последующей их идентификацией;

- выявление ДНК хламидий в патологическом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

1.2. В лабораторию для исследования на хламидийные инфекции направляют:

- сыворотку крови в количестве 3-5 см от абортировавших или подозрительных по заболеванию животных, а также во всех случаях, предусмотренных действующей инструкцией. Кровь от абортировавших животных берут дважды: в период клинического проявления болезни и повторно, от них же, через 14-21 день. Сыворотки направляют в лабораторию в количестве 1-2 см . Сыворотки хранят при температуре минус 20°С и исследуют одномоментно. Сыворотки гемолизированные или контаминированные бактериальной и грибковой флорой непригодны;

- патологический материал (соскобы с конъюнктивы, гениталий, фекалии) берут только одноразовыми или стерильными инструментами в одноразовые пластиковые пробирки с крышками или в стерильные пробирки (флаконы) с резиновыми пробками с физраствором в количестве 1 см и доставляют в лабораторию в емкости со льдом в течение 24 часов. Хранить материал можно не более 7 суток при 4°С и 10-12 мес при температуре минус 20°С;

- пробы эякулята или замороженной спермы, полученные от производителей, подозрительных по заболеванию. Пробы эякулята направляют для исследования в количестве 1 см ; замороженную сперму в количестве не менее 2 гранул доставляют в лабораторию в контейнере с жидким азотом или в пробирке с сухим льдом;

- патологический материал от павших или убитых больных животных (кусочки паренхиматозных органов, лимфатических узлов и семенников), от абортировавших животных (кусочки плаценты);

- абортированные плоды целиком или паренхиматозные органы и сычуг плода.

Патологический материал отбирают в стерильные, герметически закрывающиеся флаконы не позднее двух часов после гибели, убоя животного или аборта.

Флаконы с патматериалом помещают в термос со льдом, а абортированные плоды во влагонепроницаемую тару и в тот же день, но не позже 24 часов, доставляют в лабораторию с соблюдением мер, исключающих распространение возбудителя инфекции.

2. Серологические исследования

2.1. Серологические исследования на хламидийные инфекции основаны на выявлении специфических антител в сыворотке крови животных в реакции связывания комплемента (РСК), реакции длительного связывания комплемента (РДСК) и методом иммуноферментного анализа (ИФА), у абортировавших животных - на установлении нарастания титра антител в 4 и более раз.

Животных, вакцинированных против хламидийного аборта, серологически не исследуют в течение 1 года после вакцинации.

2.2. В РСК, РДСК используют следующие компоненты:

- комплементсвязывающий группоспецифический хламидийный антиген;

- контрольный антиген;

- позитивную (иммунную) сыворотку крови овец, содержащую группоспецифические хламидийные антитела;

- негативную (отрицательную) сыворотку крови овец;

- комплемент (свежая, консервированная или лиофильно высушенная сыворотка крови морской свинки);

- гемолизин (сыворотка крови кролика, иммунизированного эритроцитами барана);

- эритроциты барана;

- испытуемые сыворотки;

- физиологический раствор, рН 7,0-7,2.

Специфический и контрольный антигены, позитивную и негативную сыворотки изготавливают биофабрики, выпускающие их в специальных наборах.

Антиген разводят в дистиллированной воде и применяют в РСК, РДСК в рабочих титрах, указанных на этикетке.

2.3. Гемолизин в РСК и РДСК используют в удвоенном титре (например, при титре гемолизина 1:1000 его берут 2:1000).

2.4. Эритроциты барана отмывают физиологическим раствором путем центрифугирования при 2500-3000 об./мин в течение 10-15 мин до полной прозрачности надосадочной жидкости.

Для РСК применяют 2,5%-ную, для РДСК - 3%-ную взвесь эритроцитов из осадка.

Перед работой взвесь эритроцитов и гемолитическую сыворотку в рабочем разведении смешивают в равных объемах, полученную гемолитическую систему ставят в термостат при 37°С на 20-30 мин для сенсибилизации. Во время работы гемолитическую систему хранят при комнатной температуре или в холодильнике при 2-4°С.

2.5. Для серологического исследования пригодны лишь свежие испытуемые сыворотки. Допускаются к исследованию и однократно замороженные, а также сыворотки, консервированные борной кислотой (2% к объему) или мертиолятом (1:10000).

Мутные, проросшие или гемолизированные сыворотки для исследования непригодны.

2.6. Физиологический раствор для разведения компонентов (0,85% раствор химически чистого хлорида натрия в дистиллированной воде, рН 7,2-7,4) готовят и кипятят в течение 5 минут за день или в день постановки реакции.

2.7. Постановка реакции связывания комплемента (РСК).

2.7.1. Реакцию ставят в объеме 1 см (по 0,2 см каждого компонента).

Комплемент титруют каждый раз перед постановкой главного опыта на позитивной и 1-2 испытуемых сыворотках.

2.7.2. Титрование комплемента. Сухой биофабричный комплемент растворяют физиологическим раствором до первоначального объема, указанного на этикетке, и готовят основное разведение 1:20.

Каждую сыворотку, разведенную 1:5 (1 см сыворотки + 4 см физиологического раствора) инактивируют при 58-60°С 30 мин, разливают по 0,2 см в два ряда пробирок штатива Флоринского. Титрование комплемента начинают с дозы 0,02 см до 0,2 см с интервалом по 0,02 см . Для этого в дополнительный ряд пробирок вносят разведенный 1:20 комплемент в десятикратном объеме в дозах 0,2; 0,4; 0,6 и т.д. до 2,0 см и добавляют в каждую пробирку недостающее до 2 см количество физиологического раствора, т.е. 1,8; 1,6; 1,4 и т.д. Затем из первого разведения комплемента переносят по 0,2 см в первые пробирки всех сывороток, из второго разведения соответственно во вторые и т.д. (это можно выполнять аппаратом Флоринского с мерными пипетками по 0,2 см ).

Первые ряды пробирок с позитивной и испытуемыми сыворотками (взятыми из опыта) разливают специфический антиген в рабочем разведении в антигенные ряды по 0,2 см , а во вторые ряды - по 0,2 см физраствора. Пробирки встряхивают и ставят в водяную баню на 60 мин при 37-38°С.

Затем во все пробирки разливают гемолитическую систему по 0,4 см , встряхивают и ставят в водяную баню на 20 мин при 37-38°С (схему титрования комплемента см. в таблице 1).

СХЕМА ТИТРОВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА (ПО ПЕРВОМУ РЯДУ ПРОБИРОК)

Читайте также: