Фармаско тесты для вич
Современные достижения в медицине предоставляют нам уникальные возможности, о которых мы не могли и мечтать всего каких-то пять-десять лет назад. К ним можно отнести также разработку экспресс-тестов на ВИЧ – маленьких наборов для быстрой и точной проверки на наличие опасной инфекции. И если раньше для того, чтобы узнать результаты относительно своего ВИЧ-статуса требовалось тревожно выжидать утомительно тянущиеся дни, то сегодня этот процесс занимает считанные минуты.
В каких случаях может понадобиться экспресс-тест на ВИЧ?
Любой из нас может получить этот вирус, в стоматологическом кресле, маникюрном и педикюрном кабинете, с переливанием крови или занимаясь незащищенным сексом с инфицированным партнером (о чем сам партнер может даже и не подозревать) о чем Самый же высокий риск заражения сохраняется при совместном использовании игл для инъекций. В целом же вирус иммунодефицита человека распространен среди людей любого возраста и сексуальной ориентации, хотя самый высокий уровень носительства ВИЧ-инфекции отмечается среди мужчин и женщин в возрасте от 35 до 44 лет. Тем не менее, медицинские специалисты рекомендуют проходить такую диагностику в рамках рутинного скрининга на наличие инфекций, передающихся половым путем, тем, кто практикует незащищенный секс с многочисленными партнерами.
Важный момент: возбудителя вируса иммунодефицита человека нельзя определить непосредственно после полового контакта – требуется время, чтобы в крови образовались антитела к возбудителю, причем в достаточном количестве. Обычно это время составляет от 2 недель до 3 месяцев от момента сексуального контакта с вирусоносителем.
Что касается этического и психологического аспектов использования экспресс-тестов на ВИЧ, то в данной процедуре нет ничего зазорного или компрометирующего. Наоборот, это говорит о привычке следить за своим здоровьем. К тому же, своевременная диагностика – залог информированности о состоянии собственного здоровья, которая обеспечит безопасность как человеку, проходящему экспресс-тест на ВИЧ, так и членам его семьи или партнерам. Впрочем, в любом случае экспресс-тест на ВИЧ позволяет сохранить полную анонимность.
Экспресс-тест на ВИЧ: принципы работы
Экспресс-тест на ВИЧ - антигены возбудителя фиксируются на полоске теста (там присутствует еще контрольная), и соответственно, при наличии антител к ВИЧ-инфекции в образце крови, тест дает об этом знать изменением цвета полоски. Чтобы облегчить процесс тестирования, к системе добавляется буфер, позволяющей крови с антителами беспрепятственно достигнуть полоски с антигенами.
Как сделать экспресс-тест на ВИЧ: быстро и просто
Единственный неудобный момент в применении экспресс-теста на ВИЧ – забор биоматериала: такая быстрая диагностика проводится только с использованием крови. Поэтому, чтобы узнать результаты экспресс-теста на ВИЧ, потребуется сдать небольшое количество крови из вены или из пальца. Если кровь забирается из пальца, она подлежит немедленному исследованию, венозную кровь можно хранить два дня при температуре 2-8 С.
Интерпретация результатов экспресс-теста на ВИЧ
Результаты экспресс-теста на ВИЧ однозначны – они могут быть либо положительными, либо отрицательными. Негативные результаты говорят об отсутствии инфекции в организме. Положительные, увы, об обратном, однако для полноценной постановки диагноза требуется еще дополнительный анализ-подтверждение, который проводится с использованием других методов диагностики.
Экспресс-тест на ВИЧ не заставляет долго ждать – для того, чтобы узнать свой результат, требуется всего 15 минут. Что касается достоверности результатов экспресс-теста на ВИЧ, то современные системы быстрой диагностики обеспечивают 99,99% чувствительности и такой же уровень специфичности (способности безошибочно определять возбудителя).
К новым и сверхточным системам быстрой диагностики относится CITO TEST HIV 1/2 - экспресс-тест на ВИЧ от компании Фармаско, который диагностирует возбудителей ВИЧ-инфекции и 1 и 2 типа. Для применения CITO TEST HIV 1/2 подходит венозная или капиллярная кровь, а также сыворотка, плазма. Для надежности CITO TEST HIV 1/2 оснащен системой внутреннего контроля, которая свидетельствует о корректности проведения анализа и, соответственно, о том, как следует интерпретировать полученные результаты.
CITO TEST HIV ½ - быстрый, доступный и точный экспресс-тест на ВИЧ любого типа.
CITO TEST HIV 1/2 - экспресс-тест для диагностики ВИЧ-инфекции 1 и 2 типа (кровь, сыворотка, плазма)
После выхода известного фильма Дудя большинство ВИЧ-сервисных НКО захлестнула волна желающих провериться. В том числе и СПИД.ЦЕНТР — поток клиентов увеличился почти втрое, а на тестирование пришли люди, раньше никогда не посещавшие открытого пространства фонда на Artplay.
Ввиду большого интереса публики, в том числе и клиентов, дошедших до нашего лофта на Нижней Сыромятнической, сегодня мы рассказываем, как устроены эти и другие тесты на ВИЧ. Почему на ручке тестера появляются полоски, насколько такое тестирование достоверно и надежно, а главное — какие альтернативы ему существуют.
Все, что вы хотели узнать о технологии тестирования на ВИЧ-инфекцию, — в одном материале.
Все анализы на ВИЧ предназначены для того, чтобы либо разыскать части вируса, либо зафиксировать реакцию организма на его присутствие. Поэтому, чтобы понять, как работают тесты на ВИЧ, нужно примерно представлять, как устроен вирус и как он себя ведет, оказавшись в клетке.
Вирус ВИЧ — член семейства ретровирусов (Retroviridae). Представители этого семейства выглядят как крохотные круглые частицы, у которых есть оболочка, усеянная особыми белками. При помощи этих белков вирус распознает клетку-жертву и прикрепляется к ней.
Тестов на ВИЧ очень много, но их можно разделить на несколько больших типов. Те экспресс-тесты, которыми пользуются большинство ВИЧ-сервисных НКО, устроены по принципу иммуноферментного анализа, или ИФА.
Их задача — определить антитела к ВИЧ, которые организм вырабатывает в ответ на проникновение в него вируса.
Как это работает? Когда вирус ВИЧ попадает в организм, иммунная система человека не сидит без дела. Она начинает продуцировать антитела — иммунные белки, которые помогают организму бороться с инфекцией. Эти белки можно обнаружить во многих биологических жидкостях.
Способов обнаружения таких антител существует много. Но наиболее популярным считается именно иммуноферментный анализ (ИФА). За рубежом этот тест называется enzyme-linked immunosorbent assay, сокращенно — ELISA.
В экспресс-тестах, которые используются фондом СПИД.ЦЕНТР и многими другими нашими коллегами для бесплатного и анонимного тестирования, антитела тонкой линией нанесены на специальную поверхность, спрятанную под пластмассовым корпусом тестера.
Сначала клиент промокает десневую жидкость лопаточкой, установленной на конце тестера. А как только жидкость собрана, лаборант опускает лопаточку в реагент, который в течение 15 минут поднимается по тестеру, достигая в итоге полоски с антигенами.
Если антитела в десневой жидкости, смешанной с реагентом, были — полоска краснеет.
Как правило, на ручке тестера имеется и вторая полоса — контрольная, она окрашивается в красный всегда. Так что, как правило, отрицательный результат (вируса в организме нет) маркируется одной полоской на рукоятке тестера, а положительный (вирус в организме есть) — двумя.
Две полоски на тестере — это верный признак того, что человек некоторое время назад получил ВИЧ-инфекцию. А стало быть, клиенту срочно нужно обратиться к врачу за терапией — в областной или городской центр СПИД. Там ему будут назначены подтверждающие анализы и прописана антиретровирусная терапия.
Точно такой же тест (ИФА), только лабораторный, можно сделать и во многих коммерческих клиниках — но за деньги. Технология его в целом выглядит так же, а точность отличается незначительно.
Какие бывают тесты ИФА?
● Лабораторный ИФА-тест — анализ на ВИЧ по форме 50. В нашей стране его применяют в качестве стандартной процедуры лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции. Материал для анализа — кровь из вены, которую нужно сдавать в лаборатории. Результаты приходят через 1—5 дней.
Что важно знать об ИФА-тестах?
Подтверждающие тесты: вестерн-блоттинг (WB)
Цель этого теста — подтвердить результаты первичного анализа.
Чтобы провести анализ, у человека берут кровь и добывают из нее сыворотку. Это все та же кровь, только без эритроцитов, иммунных клеток и всего остального, что может образовывать сгустки крови. Потом эту сыворотку наносят на полоску из нитроцеллюлозы, на которой в строгом порядке размещены различные антигены ВИЧ — белки из оболочки и нуклеокапсида вируса. Если в сыворотке крови уже успели появиться антитела, они свяжутся с антигенами, размещенными на полоске.
Какие бывают тесты этого типа? Разные. Некоторые позволяют подтвердить наличие вируса ВИЧ-1, некоторые — ВИЧ-2, а некоторые — обоих вариантов вируса сразу.
Пример: российская тест-система ИФА-Лайн-Блот-ВИЧ-1,2. Эта тест-система участвует в тендерах — закупках в государственные лаборатории, которые действуют при СПИД-центрах.
Что важно знать о вестерн-блоте?
В России вестерн-блоттинг считается золотым стандартом подтверждения ВИЧ-инфекции. Проблема заключается в следующем.
1. Вестерн-блоттинг все равно иногда дает неопределенный результат. В этой ситуации тест придется пересдать, причем только через три недели.
2. Вестерн-блоттинг дорогой и долгий. Тест требует сложного оборудования, кропотливой работы и квалифицированного персонала. А чтобы разобраться с результатами, нужна помощь эксперта.
В чем проблема с российскими анализами на ВИЧ?
В нашей стране для подтверждения ВИЧ-статуса используют лабораторный ИФА-тест и вестерн-блоттинг — это стандартная процедура. Однако Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) отмечает: в странах, где действует эта схема, на определение ВИЧ-статуса тратится очень много времени и средств. Причем ожидание результата настолько изматывает, что некоторые пациенты даже жалеют о решении узнать свой ВИЧ-статус.
Эксперты ВОЗ советуют отказаться от лабораторных ИФА-тестов и вестерн-блоттинга в пользу комбинированных экспресс-тестов, которые дают быстрый и более надежный результат. И это действительно работает.
Комбинированные тесты
Цель комбинированных тестов, как и вестерн-блоттинга, — определить ВИЧ-статус человека.
● Пример лабораторного комбинированного теста — HIV Ag/Ab Combo, который делают в частных лабораториях за деньги.
Что важно знать об этом тесте? Этот анализ относится к четвертому поколению. На сегодняшний день во всем мире именно он считается оптимальным способом выявления инфекции, потому что недорог и позволяет относительно рано узнать ВИЧ-статус клиента.
Если речь идет об определении ВИЧ-статуса, то в Европе и США чаще всего прибегают именно к комбинированным тестам. Если тест дает положительный результат, нет необходимости проводить подтверждающий анализ, его просто через некоторое время сдают повторно — и это считается достаточно надежным.
Дело в том, что антиген — вирусный белок р24 — появляется в крови уже в первую неделю после заражения, то есть задолго до того, как вырабатываются антитела. Поскольку комбинированный тест определяет антиген, шанс узнать свой статус есть уже через 21—28 дней после предполагаемого инфицирования.
После того как начинают вырабатываться антитела, вирусный белок р24 из крови пропадает. Иногда это происходит уже на вторую неделю, но у 90—95 % инфицированных людей антитела появляются в крови в первые три месяца после заражения.
Предсказать, когда именно появятся антитела, невозможно, ведь организм каждого человека по-своему реагирует на вирус ВИЧ. Но даже если антиген р24 из крови успеет исчезнуть, комбинированный тест найдет если не р24, то как минимум антитела, и все равно даст верный ответ.
ПЦР: самый сложный анализ
Тесты, позволяющие определить непосредственно генетический материал вируса ВИЧ, называются полимеразной цепной реакцией с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Методов полимеразной цепной реакции (ПЦР), при помощи которой можно определять вирус ВИЧ, существует много. Но понять, что именно происходит в пробирке, проще всего на примере ПЦР с обратной транскрипцией (ПЦР-ОТ).
Реакцию ПЦР-ОТ можно провести в режиме реального времени. Это помогает достаточно точно понять, сколько вирусных частиц находится в организме. Обычно для этого в реакционную смесь добавляют кусочек ДНК, помеченный химическим веществом, которое начинает светиться, когда кусок ДНК встраивается в молекулу. Так как этот кусочек ДНК подходит только к одному участку вирусной ДНК, можно подсчитать количество вспышек и понять, сколько же вирусной РНК первоначально было в образце.
Видео: как работает ПЦР-тест
Но тест этот очень дорогой и сложный. Впрочем, это не единственная причина, по которой его не используют для определения ВИЧ-статуса для всех, хотя и это можно сделать в частной лаборатории за деньги. Дело в том, что тест подходит для определения только одного типа вируса — ВИЧ-1. ВИЧ-2 он не находит. Поэтому анализы ПЦР на ВИЧ обычно используют только для контроля лечения человека, который уже знает свой ВИЧ-статус.
ВИЧ-статус есть у каждого человека, вот только у одних он положительный, а у других – отрицательный. Но, по статистике, каждый третий человек с положительным ВИЧ-статусом об этом не догадывается: 30% россиян-носителей вируса иммунодефицита человека, того самого ВИЧ, не знают, что в организме уже есть опаснейший агент. Если учесть данные о распространенности ВИЧ в РФ – около 1% – то из 1000 человек трое не знают о вирусоносительстве. А тем временем свой статус можно с достаточно высокой достоверностью выяснить при помощи экспресс-тестов. MedAboutMe рассказывает, какие экспресс-тесты на ВИЧ для домашнего использования бывают, чем они отличаются и можно ли им верить.
Разбираемся в видах тестов
Производители описывают тесты как простые и надежные. А вот если копнуть поглубже, то можно запутаться: в диагностике есть различные варианты. Классифицируют их с непростыми терминами, хотя на самом деле все довольно логично и просто.
Чтобы не путаться в многообразии тестов, надо знать термин ИФА: иммуноферментный анализ.
Экспресс-тесты на ВИЧ по слюне и моче основаны на ИФА третьего поколения, по крови и плазме – третьего и четвертого (большинство дорогих экспресс-тестов по образцу крови).
Это – основы анализов на ВИЧ (хотя в лабораторных условиях проводятся более сложные и чувствительные тесты для окончательного подтверждения или опровержения диагноза).
В тест-полосках или кассетах используется метод иммунохроматографического анализа: когда на реактивы попадает биологическая жидкость, начинается ее миграция по принципу тонкослойной хроматографии. При наличии в ней специфических антител (или антител и антигенов) цвет реактива изменяется. Если антител нет – изменяется цвет только контрольной полоски. Ферментные метки используются так же, как и при иммуноферментном анализе.
Какие есть экспресс-тесты на ВИЧ?
Основное различие, которое мы видим на коробочке с экспресс-тестом на ВИЧ, основано на образце нужной жидкости. Тесты могут работать на анализе мочи, слюны и крови.
- Определение антител в слюне
Самый популярный вариант – тесты по образцу слюны. Околодесневую жидкость легко собрать, не надо колоть палец, пользоваться тестами легко, а результаты появляются спустя 20 минут.
Самые распространенные на рынке экспресс-тесты на ВИЧ по образцу слюны – OraQuick и OraSure. Стоимость – от 600 руб. за одноразовый тест.
Чувствительность и специфичность таких тестов – почти 99%. Могут быть и ложноположительные, и ложноотрицательные результаты. Самое высокое количество ложноположительных результатов у таких тестов выявляется у будущих мам и при наличии хронических заболеваний. Так что паниковать при появлении второй полоски не стоит – можно переделать тест, а лучше обратиться в лабораторию.
- Тест по образцу мочи
Экспресс-тесты, которые работают с образцами мочи, не так распространены. Они не предназначены для основной диагностики: чаще это метод дополнительного исследования, в наборе с анализами на заболевания, передающиеся половым путем (а в некоторых планшетах заодно можно выяснить, был ли факт недавнего употребления наркотических веществ).
Вряд ли удастся найти такой тест в аптеке, но если он попадет в руки, то надо знать, что он проводится также, как тест на беременность: полоску с реактивами окунают в банку с мочой или же капают мочу из пипетки на несколько планшетов с окошками.
- Экспресс-тесты на ВИЧ по образцу крови
Хотя для таких тестов подходит кровь как из пальца, так и из вены, но для домашних условий берут, конечно, капиллярную кровь. Надо учитывать, что образец материала из пальца надо анализировать моментально (а вот с анализом венозной крови можно подождать, если хранить ее при низкой температуре).
Цены на экспресс-тесты зависят от компании-производителя и методики реализации анализа. Так что в аптеках есть тесты как стоимостью 200, так и более 2 000 рублей.
Большинство тестов, которые продаются в аптеках, основаны на ИФА-3, иммуноферментном анализе третьего поколения. С их помощью можно выявить вирус через 12 недель с момента заражения. Особенность этого этапа – высокая вирусная нагрузка.
У каждого теста есть свои показатели чувствительности и специфичности, и в инструкции указывается, сколько должно пройти времени от подозрительного контакта, чтобы реактивы показали результат с положенной достоверностью.
Чем быстрее определяется факт заражения, тем быстрее можно начать антиретровирусную терапию. Для сокращения периода от инфицирования до возможности провести анализ на рынке есть также экспресс-тесты 4 поколения.
Оставьте свой email, чтобы всегда получать важную информацию и сервисы для сохранения вашего здоровья
Какой экспресс-тест на ВИЧ лучше для дома?
Самое важное правило – приобретать тесты только в проверенных аптеках.
Стоит учитывать еще два фактора: комфорт и время с момента предполагаемого заражения. Хотя взять образец крови из пальца при помощи скарификатора из набора с тестом легко и почти не больно, кого-то этот способ может не устраивать – тогда предпочтительнее анализ по образцу слюны.
Насколько можно верить результатам экспресс-тестов на ВИЧ?
Разберемся в результативности и попробуем понять, стоит ли паниковать при получении положительного ответа от теста.
Экспресс-тесты с чувствительностью и специфичностью более 99%, которые работают по образцу крови, тем не менее могут давать неправильные результаты. Особенно, если использовать их без учета популяции. Что это значит?
Допустим, мы провели такой тест у людей из группы повышенного риска ВИЧ, тех, где частота инфекции примерно 3%, например, среди пациентов с ЗППП или инъекционных наркоманов.
И вот человек из этой группы получает положительный результат экспресс-тестирования, 2 полоски. Оценим вероятность правдивости этого результата: по расчетам положительной прогностической ценности она будет равна 94%. То есть 6% останется на ошибку.
А если у него отрицательный результат, то отрицательная прогностическая ценность будет 99,98!
Теперь рассмотрим тот же тест в группе, где уровень риска низок – молодые гетеро-пары без наркотических склонностей и с устойчивыми привязанностями. В этой когорте распространенность вируса в среднем 0,2%, а это важно для результата теста. Потому что при получении положительного ответа вероятность будет немногим выше 50% (а порой выше 70%)! Половина положительных результатов домашних экспресс-тестов окажется ложной: поэтому не надо паниковать, а нужно перепроверить все в лаборатории.
Редкая штука
Пришлось позвонить в единую справочную аптек Барнаула (тел. 8 (3852) 63-50-00 — прим. ред.) и узнать, где же купить такую редкость. Оказалось, тест на ВИЧ на тот момент продавался только в одной аптеке города — в центре, неподалеку от ЦУМа. Даже цену уточнили — 265 рублей.
Вечером того же дня после работы я зашла в указанную аптеку, и без проблем взяла тест. Провизоры отреагировали на запрос нормально, и сказали, что никакого ажиотажа на эти тесты не ощутили.
Что входит в набор теста на ВИЧ
Поскольку я сама на днях сдала экспресс-анализ в алтайском СПИД-центре, то предложила использовать тест из аптеки коллегам. Самой смелой оказалась Дарья Эйдемиллер. Мы вместе изучили инструкцию и принялись за дело.
Итак, в состав теста на ВИЧ 1/2 входят:
- тест-полоска в герметичной упаковке (на вид почти не отличается от теста на беременность);
- автоматический ланцет (скарификатор) для прокалывания пальца;
- пластиковая пробирка для сбора венозной крови;
- реагент для разведения венозной крови;
- пипетка для сбора крови;
- две спиртовых салфетки.
Как проходил тест
По составу уже можно понять, что тест годится для определения как по капиллярной, так и по венозной крови. Правда, приспособлений для взятия венозной крови в наборе нет — не ланцетом же вену прокалывать, в самом деле.
Мы волновались во время эксперимента, а потому не сразу поняли, что ни пробирка, ни реагент не нужны при взятии крови из пальца. Нужно было просто выдавить каплю на тест-полоску пониже стрелочек и подождать 10-15 минут. Но мы пошли другим путем.
Испытуемая сама проколола себе палец и стала собирать кровь в пипетку. Затем она выдавила кровь в пробирку, после чего я добавила туда две капли реагента. Далее мы опустили тест-полоску внутрь пробирки, вытащили и положили на сухое место. Довольно долго на тесте ничего не появлялось. Мы перечитали инструкцию и поняли свою ошибку. Тогда мы взяли и добавили крови на тест-полоску.
Наконец минут через 10 проявилась бледная розовая черточка. Одна, в верхней части теста, как и было указано в инструкции. Все выдохнули и признали, что самостоятельно проводить тест довольно волнительно, пока ждешь результата, можно и поседеть. Кажется, спокойнее всех была сама Дарья:
— Страшно не было. Благодаря интернету и работе я многое знаю о ВИЧ. На получении такой инфекции жизнь не заканчивается. Если даже был бы положительный результат, я не думаю, что это кардинально изменило бы мою жизнь. Наоборот, хорошо было бы узнать об этом — чем раньше, тем лучше, — поделилась впечатлениями испытуемая.
Какие риски несет домашнее тестирование на ВИЧ
В алтайском СПИД-центре не имеют ничего против такого тестирования, но предупреждают о возможных рисках. Во-первых, такие тесты имеют точность 95-98% — это ниже, чем даже при экспресс-тестировании в медучреждении. Во-вторых, в случае положительного результата в СПИД-центре сразу же начинают оказывать психологическую и информационную помощь, а при самостоятельном тестировании человек зачастую находится в помещении один, и ему некому будет помочь и уберечь от возможных неразумных действий.
Экспресс-тестирование в алтайском СПИД-центре проводится бесплатно и анонимно, в порядке живой очереди, без предварительной записи. Нужно просто приехать на ул. 5-я Западная, 62 и пройти к 119 кабинету. Тесты проводят по вторникам с 10 до 12 часов и по четвергам с 13 до 15 часов. В остальное время можно сдать кровь на ВИЧ из вены, но платно. Такой анализ стоит около 300 рублей, готовится минимум сутки, зато после него можно получить справку об отсутствии вируса.
Топ-семь главных вопросов о ВИЧ
Как передается вирус?
— Есть только три пути передачи: через кровь (инъекционный либо через ранки), через секс и от матери к ребенку (через родовые пути и грудное молоко). Нельзя заразиться ВИЧ в сауне через мокрые полотенца, в бассейне, от крышки унитаза и тому подобные места. Комары не способны распространять вирус.
Сколько раз нужно сдавать анализ?
Что будет, если не лечить ВИЧ?
— Многие люди могут жить до 10 лет без всяких симптомов. Затем иммунитет ослабевает и в конце концов развивается СПИД — синдром иммунодефицита. Это последняя стадия заболевания, при которой у человека развиваются другие инфекции, опухоли и болезни, от которых он в итоге и умирает.
Правда ли, что от ВИЧ не умирают?
— Правда. Умирают от СПИДа и сопутствующих заболеваний. СПИД-центры отслеживают причины смертности своих пациентов.
Презервативы защищают на 100%?
— Не на 100%, но близко к этой цифре при правильном использовании. В США проводили исследование в течение 4-х лет среди пар, где один партнер был ВИЧ-положительным. За это время никто из тех, кто правильно использовал презервативы, не заразился. А при приеме терапии возможен секс без презерватива и рождение здорового ребенка в 98% случаев.
Может ли терапия не помогать при ВИЧ?
Ни один из препаратов не может быть эффективен на 100% — бывают очень стойкие вирусы. Некоторые люди никогда не могут достичь не обнаруживаемых результатов вирусной нагрузки, но при этом хорошо себя чувствуют много лет.
Можно ли сдать тест без крови?
— Есть тесты, определяющие вирус по слюне — как в аптеках, так и в медучреждениях. Но это стоит дороже, чем анализ крови.
Какие тесты еще можно купить в аптеках
Производители выпускают множество тестов для самостоятельного использования: на уровень глюкозы в крови, на алкоголь в слюне, на гепатиты В и С, стрептатесты на выявление стрептококка в горле при ангине, на скрытую кровь в кале , на определение овуляции, на уровень кислотности влагалища, кольпо-тесты на половые инфекции для женщин, на определение молочницы и даже тест-прокладки на подтекание околоплодных вод при беременности.
ЧИТАЙТЕ ТАКЖЕ:
Все больше людей приходят сдать анализ в алтайский СПИД-центр: если раньше в день приходило по 20-25 человек, то сейчас — 30-40. И что самое важное: стало больше молодежи (подробнее)
[Weekly Epidemiological Record, 1998, 73, 42, 321-326]
С 1985 года, когда впервые появились коммерческие тест-системы для выявления антител к вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ), был достигнут значительный прогресс в диагностике ВИЧ/СПИДа. В настоящее время существует множество различных методов выявления антител к ВИЧ. До сих пор чаще всего применяется иммуноферментный анализ (ИФА); в то же время было разработано большое количество простых и быстрых тестов на ВИЧ-инфекцию, которые в специфических обстоятельствах имеют значительные преимущества. Поэтому сегодня особое значение имеет выбор тестов, которые имели бы наибольшую ценность при определенных обстоятельствах, особенно в такой ситуации, когда возможности лаборатории ограничены, но в то же время должна быть гарантирована надежность полученных результатов.
Тестирование на антитела к ВИЧ осуществляется, главным образом, с одной из трех целей:
1) скрининг донорской крови для обеспечения безопасности гемотрансфузий;
2) эпидемиологический надзор за превалентностью ВИЧ-инфекции;
3) диагностика ВИЧ-инфекции у отдельных индивидуумов.
В настоящее время практически повсеместно большинство тестов на ВИЧ-инфекцию производится с целью скрининга донорской крови. Так как вероятность передачи ВИЧ с контаминированной кровью чрезвычайно высока (около 100%), скрининг донорской крови является экономически целесообразным профилактическим мероприятием.
За многие годы требования к использованию тестов на ВИЧ для целей эпиднадзора практически не изменились. Эффективность различных стратегий по профилактике и борьбе с ВИЧ/СПИДом, а также оценка результативности проводимых мероприятий будет, как и прежде, базироваться на результатах мониторинга эпидемии как в популяции в целом, так и в специфических группах населения. В то же время обоснования для диагностического тестирования на ВИЧ претерпели существенные изменения. На начальном этапе эпидемии основное внимание уделялось в большей степени подтверждению клинического диагноза у больных с подозрением на ВИЧ/СПИД, а не профилактическим или терапевтическим аспектам ведения пациентов с известным ВИЧ-статусом.
Новейшие достижения в области профилактического лечения ВИЧ-инфицированных больных, а также стремление предупредить вертикальную передачу ВИЧ от матери к ребенку существенно изменили эту картину. В настоящее время все больше осознается важное значение консультирования и добровольного тестирования с целью как профилактики, так и лечения ВИЧ/СПИДа - особенно у женщин, обращающихся в антенатальные клиники. Такие изменения выдвинули новые требования к тестированию на ВИЧ, в частности - в отношение продолжительности исследования. В данной статье обсуждается практическое значение использования простых/быстрых тестов на ВИЧ и место этих исследований в глобальных усилиях по профилактике и борьбе с ВИЧ/СПИДом; при этом учтены достоинства и недостатки этих тестов, а также их приемлемость для использования в различных ситуациях. Приведенные в статье материалы будут представлять интерес для руководителей органов здравоохранения, директоров учреждений службы переливания крови, заведующих центрами по консультированию и добровольному тестированию и лабораториями, а также руководителей национальных программ борьбы со СПИДом.
Достоинства и недостатки
Иммуноферментный анализ (ИФА)
По традиции, диагностика ВИЧ-инфекции основана на выявлении антител к ВИЧ, причем для этих целей чаще всего применяют ИФА. С 1985 года, когда для выявления антител к ВИЧ стали доступны первые коммерческие тест-системы на основе вирусных лизатов (тест-системы первого поколения), удалось добиться значительного методического прогресса. Были разработаны ИФА-тест-системы второго и третьего поколений (на основе рекомбинантных белковых антигенов и синтетических пептидов), а также созданы новые тест-системы. В результате удалось существенно повысить чувствительность и специфичность исследования, разработать тест-системы, с помощью которых можно одновременно определять антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и к вариантам ВИЧ, а также значительно сократить продолжительность "периода окна", т.е. интервала от момента инфицирования до появления циркулирующих антител, выявляемых с помощью тест-систем.
ИФА предназначен для одновременного исследования большого количества образцов (например, для скрининга от 96 до нескольких сотен образцов в день); таким образом, его удобно использовать для целей эпиднадзора, а также в централизованных лабораториях службы переливания крови. В настоящее время существует тенденция создания полностью компьютеризированных систем для выявления антител к ВИЧ. Для проведения ИФА необходимо иметь достаточно сложное лабораторное оборудование и приспособления; кроме того, нужны автоматические пипетки, инкубаторы, автоматические промывные устройства ("вошеры"), считывающие/регистрирующие устройства ("ридеры") и источники постоянного электрического тока. Это оборудование требует постоянного ухода и ремонта, а также периодических поверок для обеспечения точности получаемых результатов. Достоверность результатов в существенной мере зависит от квалификации лабораторных работников, которые должны уметь готовить необходимые реагенты, аккуратно работать с пипетками и уметь обращаться с оборудованием и приборами. Для рационального использования тест-систем для ИФА необходимо иметь достаточно большое число образцов, чтобы максимально использовать имеющиеся в тест-системах микропланшеты для титрования; это снижает возможности использования тест-систем.
К сожалению не во всех странах мира можно создать в лабораториях условия, пригодные для проведения ИФА, поэтому сохраняется необходимость разработки тестов на ВИЧ-инфекцию, пригодных для использования в лабораториях с ограниченными техническими возможностями. Достижения в области технологии позволили разработать многочисленные простые/быстрые тесты, основанные на разнообразных принципах - реакции агглютинации, реакции точечного иммунного связывания с использованием твердой основы ("иммунокомб"), мембранных фильтров или более новых иммунохроматографических мембранных технологий.
Большинство простых/быстрых тест-систем выпускают в виде наборов, полностью готовых к использованию и не требующих применения каких-либо дополнительных реагентов и/или оборудования. Поскольку в методическом и техническом отношении процедуры очень просты, состоят из небольшого числа последовательных операций и не требуют особой точности, вероятность технических ошибок невелика, а постановку тестов могут производить сотрудники, не имеющие специальной лабораторной подготовки.
Интерпретация результатов этих тестов обычно не вызывает трудностей; кроме того, во многих простых/быстрых тест-системах используются внутренние контроли, помогающие правильно интерпретировать полученные результаты. Предварительные результаты исследования становятся известны уже через несколько минут после постановки теста. Таким образом, при использовании простых/быстрых тестов для подтверждающей диагностики (см. статью "Новые рекомендации по выбору и использованию тестов для выявления антител к ВИЧ" в "Wkly Epidemiol. Rec.", 1997, vol. 72, N12, pp. 81-87 - перевод этой статьи имеется в данном выпуске), окончательное заключение может быть сделано уже в первый день исследования. Простые/быстрые тесты рассчитаны на исследование единичных образцов или небольшого числа сывороток, т.е. позволяют одновременно тестировать любое количество образцов. Некоторые тест-системы для простых/быстрых тестов не требуют хранения в холодильнике - их можно оставлять в лаборатории при температуре от 2С до 30С.
Возможность получения точных и воспроизводимых результатов зависит не только от характеристик ("внутренних параметров") самих тест-систем, но и от некоторых внешних факторов - например, от квалификации лабораторных работников и/или от использования высококачественных стандартов при постановке тестов и учете их результатов.
Описанные выше качества простых/быстрых тестов снимают ряд проблем, нередко возникающих при использовании традиционных тест-систем; благодаря этим свойствам можно использовать простые/быстрые тесты и получать надежные результаты даже в лабораториях, не имеющих современного дорогостоящего оборудования для ИФА.
Детальные сведения о результатах сравнительных испытаний простых/быстрых тестов и традиционного ИФА, проведенных Всемирной организацией здравоохранения, представлены в серии отчетов "Технические характеристики коммерческих тест-систем для выявления антител к ВИЧ-1 и/или ВИЧ-2 в сыворотках людей" ("Operational characteristics of commercially available assays to determine antibodies to HIV-1 and/or HIV-2 in human sera"), которые можно получить из Отдела безопасности крови ВОЗ (Blood Safety Unit, World Health Organization, 1211 Geneva 27, Switzerland). Эти результаты подтверждают, что современные простые/быстрые тесты практически не уступают по качеству и надежности традиционному ИФА. Естественно, что из-за чрезмерной простоты методики простые/быстрые тесты обычно позволяют выявлять ВИЧ-сероконверсию на несколько дней позже, чем стандартный ИФА, однако в большинстве случаев эти различия не имеют принципиального значения. Правда, этот недостаток простых/быстрых систем может играть определенную роль там, где заболеваемость ВИЧ-инфекцией сравнительно высока. В таблице 1 суммированы некоторые свойства, влияющие на выбор наиболее подходящих тест-систем в специфических ситуациях.
Что же касается использования в полевых условиях, то было доказано, что результаты, получаемые с помощью простых/быстрых тестов, не уступают по точности результатам стандартного ИФА, а в ряде случаев - даже превосходят их.
Хотя стоимость одного исследования при использовании простых/быстрых тестов может быть выше, чем стоимость одного анализа в традиционном планшетном ИФА, при необходимости исследования небольшого числа образцов использовать эти тест-системы оказывается даже выгоднее, чем стандартный ИФА. В последнем случае большое число лунок нередко остается неиспользованным, поэтому при правильной оценке всех расходов с учетом специфичности, надежности и воспроизводимости получаемых результатов применять простые/быстрые тесты оказывается дешевле, чем стандартный ИФА.
Где и когда использовать простые/быстрые тесты
Передача ВИЧ в результате гемотрансфузий может быть практически полностью исключена путем тотального скрининга всех образцов донорской крови. В индустриальных странах, где осуществляется тщательный контроль всей донорской крови, и, кроме того, взятие крови производится от кадровых доноров, не относящихся к группам повышенного риска по ВИЧ/СПИДу, "остаточный риск" передачи ВИЧ через кровь связан только с периодом "окна" у ВИЧ-инфицированных доноров. Однако во многих развивающихся странах различные факторы (например, отсутствие современного лабораторного оборудования, нерегулярное поступление тест-систем, технические ошибки, низкая квалификация лабораторных работников и др.) могут сыграть большую роль в получении ошибочных результатов тестирования и, следовательно, иметь существенное значение в возникновении случаев посттрансфузионной ВИЧ-инфекции.
Методы скрининга донорской крови должны быть высоко чувствительными, чтобы иметь возможность выявлять наличие ВИЧ-инфекции как можно раньше (т.е. как бы "сократить" продолжительность "периода окна") и определять антитела к различным типам и вариантам ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Кроме того, эти методы должны быть достаточно специфичными, чтобы избежать ненужных потерь крови из-за ложноположительных результатов теста. Ведь в соответствии с действующими рекомендациями по безопасности крови и ее препаратов каждый образец донорской крови, при тестировании которого получены положительные или сомнительные результаты, должен быть уничтожен.
В индустриальных, а в ряде случаев - и в развивающихся странах службы переливания крови централизованы, поэтому ежедневно приходится тестировать огромное количество образцов донорской крови для предупреждения передачи ряда инфекций. В такой ситуации оптимальным является ИФА с использованием автоматических или полуавтоматических систем, так как современные тест-системы в значительной мере "сокращают период окна", а автоматизация уменьшает число технических ошибок.
Во многих странах с ограниченными ресурсами службы переливания крови функционируют независимо на базе отдельных больниц, поэтому кровь у доноров берут только при возникновении соответствующей потребности и не имеют запасов донорской крови. Многие медицинские учреждения, расположенные в сельской местности, получают от национальных программ борьбы со СПИДом сравнительно большое количество тест-систем для ИФА, чтобы обеспечить потребности в тестировании в течение определенного времени. Поскольку в таких условиях одномоментно тестируется небольшое число образцов донорской крови, значительная часть лунок на планшете для титрования не используется, что приводит к огромным потерям тест-систем и, в конечном итоге, к их нехватке. Лаборатории нередко оснащены недостаточно, оборудование устарело и плохо функционирует, персонал не имеет хорошей подготовки. Из-за нехватки или нерегулярности поставок тест-систем, а также из-за недостатка времени (кровь у доноров здесь берут именно в ургентных ситуациях) скрининг донорской крови на ВИЧ-инфекцию проводится далеко не всегда. Учитывая эти обстоятельства, можно сказать, что использование простых/быстрых тестов позволит существенно улучшить ситуацию в службе переливания крови. Это обеспечит более эффективное применение тест-систем в учреждениях, где работают с небольшими объемами донорской крови, а в экстренных ситуациях проверять кровь на ВИЧ-инфекцию непосредственно перед гемотрансфузией. Хотя применение простых/быстрых систем позволяет обследовать доноров перед кроведачей, такая практика не рекомендуется, так как она приведет к увеличению числа "доноров", желающих проверить свой ВИЧ-статус за счет службы переливания крови. Такие доноры представляют определенную угрозу безопасности гемотрансфузий, так как скорее всего они будут представителями групп повышенного риска по ВИЧ-инфекции. Кроме того, такое предварительное обследование доноров может оттолкнуть от сдачи крови именно кадровых доноров, которые сдают кровь добровольно и безвозмездно и тем самым повышают безопасность гемотрансфузий.
Эпиднадзор
В большинстве случаев для осуществления эпиднадзора используют большое количество образцов, собранных в течение определенного времени. Так как в этом случае нет необходимости в срочном получении результатов, образцы можно достаточно долго хранить и затем исследовать большими партиями. В зависимости от числа образцов и организации системы эпиднадзора, для тестирования образцов можно использовать как стандартный ИФА, так и простые/быстрые тесты.
Для обследования специфических "труднодостижимых" групп населения (например, внутривенных наркоманов или "коммерческих секс-работников"), а также при проведении исследований в отдаленных районах, где тестирование нужно выполнять непосредственно на местах, целесообразно использовать простые / быстрые тесты.
Диагностика ВИЧ-инфекции
В последнее время непрерывно возрастают потребности в проведении добровольного тестирования на ВИЧ-инфекцию с соответствующим до- и послетестовым консультированием, особенно в развивающихся странах. В столицах и крупных городах многих африканских и азиатских стран с высокой превалентностью ВИЧ-инфекции имеются центры для консультирования и добровольного тестирования (КДТ) на ВИЧ-инфекцию - как самостоятельные, так и при различных медицинских учреждениях. В то же время в небольших городах и в сельской местности таких центров КДТ мало. Одной из основных причин этого является отсутствие лабораторий и дефицит квалифицированного персонала. Появление простых/быстрых тестов позволит создать центры КДТ в сельской местности и в небольших городах, а также в антенатальной службе, где потребности в таких центрах будут постоянно расти в связи с новейшими возможностями предупреждения вертикальной передачи ВИЧ (см. "Wkly Epidemiol. Rec.", 1998, vol. 73, N 41, pp. 313-320).
Опыт работы центров КДТ показывает, что по разным причинам (неуверенность в сохранении конфиденциальности, неверие в возможности последующего лечения и др.) значительная часть посетителей (до 50%) в дальнейшем не обращаются повторно, чтобы узнать свои результаты тестирования на ВИЧ-инфекцию. Гораздо чаще не приходят за своими результатами не серонегативные клиенты, а именно те, у кого вероятность наличия ВИЧ-инфекции наиболее высока - и это совсем не случайно!
Люди, обратившиеся в центры КДТ, должны иметь возможность сделать свой выбор в отношение тестирования. Если они пришли к выводу о необходимости проверки, применение простых/быстрых тестов (результаты которых будут известны в тот же день) позволят снять многие вопросы, что в конечном счете будет способствовать значительному повышению эффективности работы таких центров. Более того, быстрое получение результатов тестирования поможет сразу же ими воспользоваться для интегрирования посетителя в систему медицинской и психологической помощи; при этом не требуется особой подготовки персонала и можно провести немедленное послетестовое консультирование.
Разработка и внедрение новейшей антиретровирусной терапии и других относительно недорогих мероприятий для снижения частоты вертикальной передачи ВИЧ требует быстрого расширения сети центров КДТ. В странах, где женщины по традиции обращаются в антенатальные учреждения на поздних сроках беременности, использование простых/быстрых тестов позволит сократить интервал между тестированием на ВИЧ-инфекцию и началом проведения соответствующих мероприятий.
Этические аспекты
Независимо от того, используется ли для тестирования стандартный ИФА или простые/быстрые тесты, этические принципы должны быть одинаковыми. Теститрование на ВИЧ-инфекцию, как и на любую другую инфекцию, должно осуществляться только при наличии информированного согласия обследуемого человека и с обязательной гарантией конфиденциальности результатов исследования. Обязательное тестирование на ВИЧ может быть оправдано только при проверке донорской крови. Тем не менее доноры должны быть обязательно предупреждены о том, что их кровь будет исследована на ВИЧ-инфекцию и другие инфекции. Очень важно, чтобы все первоначально положительные результаты были обязательно подтверждены и чтобы эти пациенты были направлены в соответствующие медицинские службы.
Заключение
В настоящее время существует множество вариантов простых /быстрых тестов на ВИЧ. Из-за технических проблем они могут быть несколько менее чувствительными по сравнению с ИФА, однако в то же время их достоинства "перевешивают" этот недостаток. ВОЗ рекомендует применять надежные простые/быстрые тесты там, где они имеют преимущества по сравнению с традиционным ИФА. [Weekly Epidemiological Record, 1998, 73, 42, 321-326].
Читайте также:
