Для выделения гонококков используют

Гонококк относится к трудно культивируемым бактериям. Для его выращивания требуются питательные основы, богатые аминокислотами и ростовыми факторами, также обязательно добавление крови, нормальной сыворотки или куриного желтка. Культивирование происходит при высокой влажности (что достигается использованием свежеприготовленных сред) и повышенной концентрации CO2 (5-10%) в атмосфере. В качестве питательной основы сред для гонококка рекомендован МПА, приготовленный на мясной воде с использованием мяса кролика или бычьих сердец, pH 7,3±0,1.

Возможно применение сухих коммерческих питательных основ (например, GC-агар, агар Мюллера-Хинтона и др.) с добавлением 20% нормальной сыворотки или 5% свежей крови.

а) Приготовление ватных тампонов для взятия материала на гонококк. Ватные тампоны на деревянных палочках или стержнях из нержавеющей стали (диаметром около 2,0 мм), вмонтированные в ватные пробки, окунают в фосфатный буфер (pH 7,4), кипятят в нем в течение 20 мин, после чего импрегнируют в течение 24 ч 1%-ной водной суспензией тонко измельченного активированного угля. После этого тампоны высушивают, вставляют в бактериологические пробирки диаметром, равным диаметру пробирок с транспортной средой, и стерилизуют в автоклаве при 121°С 20 мин.

б) Среда для хранения и транспортировки гонококка (среда Стюарта). Готовят две смеси.

Смесь №1:
Агар — 3,0 г
Вода дистиллированная — 1000,0 мл
Смесь нагревают до полного растворения агара.

Смесь №2:
Кислота тиогликолевая — 2,0 мл
Натрия гидроксид NaOH 1М раствор — 12,0 мл
Натрия фосфата однозамещенного (NaH2PO4*2H2O)
20%-ный раствор — 100,0 мл
Хлористого кальция (CaCl2) 1%-ный раствор — 20,0 мл
Вода дистиллированная — 900,0 мл

К смеси №1 добавляют смесь №2, доводят pH до 7,3-7,4. Полужидкую агаровую среду разливают в стерильные пробирки по 10,0 мл и стерилизуют текучим паром в течение 60 мин.

Готовую среду сохраняют в холодильнике не более суток. Применяют для транспортировки патологического материала, взятого непосредственно, на ватном тампоне, импрегнированном углем, погруженном в среду. При доставке в лабораторию тампоном производят посев на плотные среды.

в) Среда для транспортировки проб материала, исследуемого на гонококк или менингококковое носительство (среда Эймиса [Amies]). Среда содержит тиогликолят (натриевую соль меркаптоацетиловой кислоты) в качестве редуцирующего агента. При применении среды Эймиса используют обыкновенные ватные или дакроновые тампоны, не импрегнированные углем.

Состав:
Натрия хлорид (NaCl) — 3,0
Калия хлорид (KCl) — 0,2
Фосфат натрия двузамещенный (безводный) (Na2HPO/i) — 1,15 или Na2HPO4*12H2O — 2,9
Фосфат калия однозамещенный (KH2PO4) — 0,2
Натрия тиогликолят — 1,0
Кальция хлорид (CaCl2), 1%-ный раствор — 10,0 мл
Магния хлорид (MgCl2*6H2O), 1% -ный раствор — 10,0 мл
Уголь фармацевтический нейтральный — 10,0
Агар — 4,0
Вода дистиллированная — 1000,0 мл

Вначале растворяют агар в воде при подогревании. Затем в горячий раствор последовательно вносят все перечисленные ингредиенты, кроме угля. После тщательного перемешивания и полного растворения добавляют уголь. Среду быстро разливают по 6,0 мл и автоклавируют при 112°С 20 мин. После автоклавирования, прежде чем дать среде застыть, пробирки несколько раз опрокидывают для равномерного распределения угля, после чего, в случае надобности, заменяют пробки. Среду хранят в холодильнике.

г) Основа питательных сред лабораторного приготовления для выделения и культивирования гонококка (среда ЦКВИ). Питательной основой является мясопептонный агар (МПА), приготовляемый следующим образом. Готовят мясную воду: фарш из мяса кролика или бычьих сердец заливают водой (1 часть фарша и 2 части водопроводной воды) и оставляют на одни сутки при +4°С. Затем смесь кипятят 10 мин, охлаждают и фильтруют через марлю. К фильтрату добавляют 1% сухого коммерческого пептона, 0,5% натрия хлорида (NaCl) и 2% агара. pH смеси 7,4-7,6. Далее среду доводят до кипения (при помешивании), фильтруют через ватно-марлевый фильтр и мерно разливают в стерильные флаконы. Стерилизуют при 112°С 20 мин. Основу хранят в холодильнике.

д) Варианты готовых питательных сред для выделения и культивирования гонококка. Перед использованием, независимо от выбранного варианта, питательную основу расплавляют, остужают до 50-45°С и вносят в нее 20% нормальной сыворотки лошади или крупного рогатого скота, а также следующие биодобавки (на 100,0 мл питательной основы):
Вариант 1. Гидролизат казеина для парентерального белкового питания — 2,0;
Стерильный аутолизат дрожжей (или 1,5%-ный раствор ЭКД) — 2,0 мл
Вариант 2. 5%-ный раствор Гемогидролизата — 2,0 мл
Стерильный аутолизат дрожжей (или 1,5%-ный раствор ЭКД) — 2,0 мл
Вариант 3. Среда 199 для культур тканей (без антибиотиков) — 2,0 мл
Стерильный аутолизат дрожжей (или 1,5%-ный раствор ЭКД) — 2,0 мл
Вариант 4. Желток куриного яйца — 10,0 мл
Основу хорошо перемешивают с биодобавками, разливают в чашки Петри или в пробирки (скашивают!). Хранят в холодильнике не более 4-5 дней.

е) Селективная среда Тейера-Мартина для выделения гонококка из патологического материала, рекомендованная ВОЗ. В качестве основы используют сухую коммерческую среду GC-arap, или агар Мюллера-Хинтона, или питательную основу ЦКВИ, или любую пригодную для гонококка агаровую питательную основу.

К готовой питательной основе, расплавленной и охлажденной до 50-45°С, стерильно добавляют 20% нормальной лошадиной сыворотки или плазмы либо 5% дефибринированной крови. В качестве ингибиторов посторонней флоры в среду вносят растворы антибиотиков — ванкомицина (в конечном содержании 3 мкг/мл), колистина (10,0 мкг/мл) и нистатина (12,5 мкг/мл). Иногда смесь трех антибиотиков выпускается фирмами в виде отдельной добавки VCN (см. ниже).

Среду разливают в чашки Петри для посева нативного материала или смешанной культуры, содержащей гонококк.

ж) Селективная среда для выделения гонококка при экстрагенитальной гонорее. Селективная среда применяется для первичного посева материала с целью выделения чистой культуры гонококка при экстрагенитальной гонорее (миндалин, глотки, прямой кишки). К одному из вариантов МПА, обогащенного для гонококка, добавляют антибиотики (полимиксина М сульфата — 20 ЕД/мл и линкомицина гидрохлорида — 2,0 мкг/мл). Готовую селективную среду разливают в чашки Петри. Среды с антибиотиками используют обязательно одновременно со средой без антибиотиков (одним из обогащенных вариантов МПА).

з) Среда Тейера-Мартина для выращивания N. gonorrhoeae из клинического материала (сухая), HiMedia, Thayer Martin Medium Base. Основу среды Тейера-Мартина с добавками используют для выделения N. gonorrhoeae из клинического материала.

Состав, г/л:
Пептон специальный — 23,0
Крахмал — 1,01
Натрия хлорид — 5,0
Агар — 1,0
pH 7,2±0,2

1. Сухую основную среду в количестве 21,0 г суспензируют в 250,0 мл дистиллированной воды. Среду кипятят до полного растворения.

2. Одновременно с основной средой готовят раствор гемоглобина. Haemoglobin Powder, Soluble (HiMedia, ED 022) представляет собой специально приготовленный порошок гемоглобина, сохраняющего активность после стерилизации. Для этого в 5,0 г порошка гемоглобина при постоянном помешивании медленно вливают 250,0 мл дистиллированной воды для получения однородной массы 2%-ного раствора гемоглобина.

Основу среды и раствор гемоглобина стерилизуют раздельно при 121°С в течение 15 мин. Затем оба компонента охлаждают до 45-50°С и соединяют, соблюдая правила асептики.

Состав, мг:
1. Состав FD 025 на флакон (на 500,0 мл среды)
Витамин В12 — 0,1
L-глутамин — 100,0
Аденин SO4 — 10,0
Гуанин HCl — 0,3
Р-аминобензойная кислота — 0,13
L-цистин — 11,0
НАД (кофермент) — 2,5
Кокарбоксилаза — 1,0
Железа нитрат — 0,2
Тиамин HCl — 0,03
Цистеин HCl — 259,0
Декстроза — 1,0

2. Жидкость для регидратации (на 500,0 мл среды):
Декстроза — 1,0
Вода дистиллированная — 10,0

Растворяют содержимое части 1 в 10,0 мл жидкости для регидратации, стерилизуют при 121°С в течение 15 мин. После стерилизации раствор остужают до 50°С и добавляют к среде Тейера- Мартина.

Для выделения N. gonorrhoeae из урогенитального тракта, где, кроме него, присутствует обычно множество других бактерий и грибов, в среду для придания ей селективности вносят добавку VCN, состоящую из комплекса антибиотиков "VCN Supplement" (HiMedia).

Состав добавки VCN (на 500,0 мл среды):
Ванкомицин — 1,5 мг
Колистин метан сульфонат — 3,75 мг
Нистатин — 6250 ЕД

Комплекс перечисленных антибиотиков регидрируют в 10,0 мл дистиллированной воды и вливают в растопленную и охлажденную до 45-50°С среду при тщательном перемешивании, чтобы внесенные в нее антибиотики распределились равномерно. Дальнейшее повышение селективности среды может быть достигнуто внесением в нее триметоприма в дозе 2,5 мг на 500,0 мл среды.

и) Среды с углеводами для дифференциации гонококка и других нейссерий. Используется желточный МПА (вариант 4, но без сыворотки), содержащий 1% одного из углеводов (глюкоза, мальтоза, сахароза, фруктоза, лактоза) и индикатор феноловый красный, в чашках Петри. Разложение углевода до кислот сопровождается пожелтением среды вокруг роста культуры.

Приготовление среды. К 100,0 мл расплавленного питательного агара для гонококка, охлажденного до 45-50°С, добавляют смесь, состоящую из 15,0 мл желтка, раствора 1,5 г одного из углеводов в 2,0 мл дистиллированной воды (этот раствор простерилизован в кипящей водяной бане 15 мин) и 6,0 мл 0,2%-ного водного раствора водорастворимого фенолового красного.

Приготовление раствора индикатора. 2,0 г водорастворимого фенолового красного разводят в 1000,0 мл дистиллированной воды, доводят pH до 7,8 (при помощи 20%-ного раствора гидроксида натрия — NaOH). Раствор стерилизуют в автоклаве при 121 °С в течение 20 мин.

После перемешивания среды разливают в 5 чашек Петри (по числу углеводов). Засеянные испытуемыми культурами среды инкубируют при 37°С в эксикаторе с влажной ватой, но без свечи, в течение 1-2 сут.

При небольшом количестве испытуемых культур используют тот же желточный агар без сыворотки в одной чашке Петри. Чашку делят на 5 секторов (по числу углеводов). На каждый сектор пипеткой наносят по 1 капле стерильного 80%-ного раствора одного из углеводов в 0,2% растворе фенолового красного. Смесь углевода и индикатора предварительно стерилизуют в кипящей водяной бане 15 мин. После диффузии растворов углеводов в агар сектора засевают штрихами испытуемой культуры.

Посевы на средах с углеводами инкубируют без CO2!

к) Среда для определения чувствительности гонококка к антибиотикам. К расплавленному и охлажденному до 50°С питательному агару для гонококка (GC-агар) добавляют 1% (по объему) комплексной питательной добавки (взамен нестандартных биодобавок).

Состав комплексной питательной биодобавки (КПД):
Глюкоза — 100,0 г
L-цистеин-гидрохлорид* — 25,0 г
L-глютамин — 10,0 г
L-цистин — 1,1 г
Никотинамид-адениндинуклеотид (НАД) — 0,25 г
Витамин В12 — 0,1 г
Тиамина пирофосфат — 0,1 г
Гуанина гидрохлорид — 0,03 г
Железа нитрат [Fe(NO3)3*6H2O] — 0,02 г
Парааминобензойная кислота — 0,013 г
Тиамина гидрохлорид — 3,0 г
Дистиллированная вода — 1000,0 мл

* При определении чувствительности к карбапенемам и клавулоновой кислоте цистеин-гидрохлорид не применять!

Готовую питательную среду после добавления 1% раствора КПД, как и самое КПД, нельзя автоклавировать.

При разливе в чашки Петри, после застывания агара, чашки оставляют при комнатной температуре на 10-12 ч. Чашки с готовой средой можно хранить в герметичных пластиковых пакетах при +4°С не более 2 нед.

Некоторые штаммы гонококка плохо растут на среде без гемоглобина. В таких случаях их необходимо 2-3 раза пассировать на данной среде перед определением чувствительности.

Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 27.2.2020

Гонококки – это грамотрицательные, неподвижные, не имеющий капсулы, неспо­рообразующие диплококки. В мазках кокки прилегают плоскими по­верхностями друг к другу и по очертанию похожи на кофейные зерна. Он имеет характерную для грамотрицательный микроорганизмов клеточ­ную структуру, и может размножаться вне, и внутри клеток хозяина. Не имеет внутривидовых вариантов.

Род Neisseriae включен в семейство Neisseriaceae, объединяющее грамотрицательные коккобактерии. Человек является един­ственным естественным хозяином двух патогенных гноеродных нейссерий – Neisseriae gonorrhoeae и Neisseriae meningitidis. Это фа­культативные анаэробы, паразитирующие на слизистых человека, продуцирующие оксидазу и каталазу.

Neisseriae gonorrhoeae (гонококк) является возбудителем гонореи – широко распространенной заразной инфекции, передающейся поло­вым путем. Болезнь была известна еще древним китайцам, египтя­нам, иудеям. Название свое получила от двух греческих слов gone – семя и rhein – истечение, то есть болезнь, передающаяся с семенной жидкостью. Так назвал ее Гален в начале новой эры. Гонококки так­же называют диплококками – это название дано ему немецким вра­чом Альбертом Нейссером, который в 1879 году обнаружил его в гнойном отделяемом уретры, шейки матки и конъюнктивы глаз. Возбудитель был назван в честь Нейссера – Neisseriae gonorrhoeae.

Гонококки. Общая характеристика

Гонорея – это болезнь, сопровождающаяся выделениями из уроге­нитального тракта, вначале жидкими, водянистыми, а затем гной­ными. Инкубационный период короткий – 3-5 дней. В первые дни болезни гонококки обнаруживаются свободно лежащими в серозном экссудате или прикрепившимися к эпителиальным клеткам. Когда отделяемое становится гнойным, кокки фагоцитируются и их можно увидеть в цитоплазме клеток гноя (долиморфонуклеарные нейтрофильные лейкоциты). В одной клетке могут быть от 20 до 100 гоно­кокков, которые будучи поглощенными, не погибают и остаются ви­рулентными. В поздней стадии болезни они могут быть обнаружены вне клеток, в стадии формирования хронического процесса чаще во­обще не обнаруживаются.

Гонококки – весьма прихотливые микробы, не растут на обычных пи­тательных средах, его с трудом удается культивировать на специ­ально приготовленных для них обогащенных средах. Лучше растут при слегка пониженной (до 35,5°С) температуре в присутствии ки­слорода и 10% СО2.

Описано 4 типа колоний:
– гонококки 1 и 2 типа образуются вирулентными го­нококками;
– гонококки 3 и 4 типа – невирулентными.
Кокки, образующие колоши 1 и 2 типов имеют пили – фактор адгезии. Именно пилями бактерия прикрепляется к клеткам цилиндрического эпите­лия уретры, лейки матки, прямой кишки и не фагоцитируется, а за­селяет клетки этих отделов (колонизация). Прикрепление – необходимое условие инфекции, только бактерии, имеющие пили, счита­ются патогенными.

Гонококки продуцируют фермент индофенол оксидазу, катализи­рующую восстановление молекулярного кислорода независимо от перекиси водорода. Проба на оксидазу используется для идентифи­кации колоний в лабораторных культурах. Гонококки, относящиеся ко всей типам, продуцируют фермент, расщепляющий секреторный IgA, находящийся в секретах слизистой.

Несмотря на то, что гонококки в организме больного разрушаются с трудом, они крайне нестойки во внешней среде. Они погибают весьма быстро на солнечном свету и при высушивании. В гное или на белье, находящемся в темном влажном месте, могут сохраняться от 18 до 24 часов. Очень чувствительны к дезинфицирующим сред­ствам, особенно солям серебра. Температура +60°С убивает их через 10минут.

Гонококки. Патогенность

Гонококки являются специфическими паразитами человека. Экспе­риментальный гонококковый уретрит удается вызвать только у шимпанзе.В типичных случаях гонореи местами первичной инфицированности у женщин является уретра и шейка матки; у мужчин, соответствен­но, уретра.

Гонококки повреждают цилиндрический эпителий, выстилающий шейку матки и прямую кишку, а также промежуточный (урогени­тальный) эпителий, выстилающий мочевой тракт. Вагинальная инфекция не обнаруживается, поскольку эпителий, выстилающий вла­галище взрослой женщины – это ороговевающий многослойный плоский эпителий, устойчивый к гонококкам. До наступления половой зрелости вагина выстлана более мягким, особенно восприимчи­вым эпителием. Гонорейный вульвовагинит у препубертатных де­вушек может быть эпидемическим и трудно вылечиваемым. Изменение эпителия с окончанием пубертатного периода полностью ис­ключает эту форму гонореи.

В настоящее время важным первичным местом инфицирования яв­ляется конъюнктива глаза, и этот процесс (гонорейный конъюнкти­вит и кератит) активно повреждает глаза. Ophthalmia neonatorum – гонорейный конъюнктивит новорожденных, возникает при инфици­ровании глаз плода во время прохождения через родовые пути. Обильные гнойные выделения из глаза новорожденного могут соз­дать значительное давление под веками. Если веки насильно ра­зомкнуть, гной может брызнуть наружу. Врачи и медицинский пер­сонал, лечащие таких детей, должны тщательно оберегать свои гла­за. У детей или взрослых такая инфекция легко приводит к слепоте или серьезному ухудшению зрения вследствие воспалительных из­менений структур глаза.

Гонококковая инфекция из мужской уретры может непосредственно проникать в другие части мужской репродуктивной системы. У женщин она также может проникать в другие части тракта, особен­но в Бартолиниевы железы и фаллопиевы трубы.

Слизистая матки устойчива к воздействию гонококков, но примене­ние контрацептивов может облегчить внедрение гонококков в эндо­метрий, увеличивая риск осложнений в фаллопиевых трубах. Ин­фицирование фаллопиевых труб обычно происходит в первый или второй менструальный цикл после заражения, но в некоторых случаях оно происходит позже.

Вовлечение в воспалительный процесс фаллопиевых труб (сальпин­гит) приводит к значительному их перекручиванию и рубцеванию в случае, когда заболевание принимает хроническую форму.

Рубцевание уретры у мужчин может привести к стриктуре или об­литерации мочеиспускательного канала в одной или нескольких фо­кальных точках.

Иногда гонококки мигрируют из мочеполового тракта в лимфатиче­скую систему или кровоток, образуя дистантные фокусы инфициро­вания (например, эндокардит, перигепатит и менингит).

Гонококцемия связана с различными кожными повреждениями, из которых могут быть выделены микроорганизмы. Существенным проявлением экстрагенитальной гонококковой инфекции является гнойный деструктивный артрит, особенно часто встречающийся у лиц в возрасте от 15 до 35 лет. С увеличением числа случаев забо­левания гонореей, экстрагенитальные повреждения становятся более заметными.

Гонококки. Источники и пути заражения инфекцией

Гонококки никогда не обнаруживаются вне человеческого организма, если только они не находятся на объектах, совсем недавно загряз­ненных гонорейными выделениями. Поэтому гонорейные инфекции практически всегда распространяются путем прямых контактов, в основном при половом акте. Крайне редко гонорея предается не­прямым путем через загрязненные объекты,

Гонорейная офтальмия у взрослых обычно случайна. Инфекция из урогенитального тракта неумышленно заносится в глаза руками са­мого больного или: другого лица.

Вульвовагинит среди детей распространяется путем использования общего постельного белья, ванны, туалетных принадлежностей и т.д. Он обычно возникает там, где дети живут в перенаселенных квар­тирах.

Нелеченные гонорейные инфекции имеют тенденцию переходить в хроническое состояние. При отсутствии лечения или неправильном лечении женщины становятся бактерионосителями в течение мно­гих лет после исчезновения признаков заболевания. У 60-80% ин­фицированных женщин болезнь протекает бессимптомно. Примерно у 40% мужчин болезнь также протекает бессимптомно.

Гонококки. Лабораторный диагноз инфекции

Для установления диагноза гонореи используется несколько микро­биологических методов. Мазки, культуры и оксидазная реакция яв­ляются предварительными тестами. Для установления точного ди­агноза гонореи и подтверждения результатов предварительных тес­тов используется метод флуоресцирующих антител и реакция фер­ментации карбогидрата.

Бактериоскопическая диагностика. Прямые мазки генитальных вы­делений могут быть окрашены по Граму. Обнаружение грамотрицательных дипло­кокков в гнойных клетках генитального экссудата является сильным доводом в пользу того, что это гонококки. Это особенно верно, если отделяемое взято из мужской уретры, где, в случае типичного ост­рого гнойного уретрита, окрашенный по Граму мазок, содержащий ясно видимые внутриклеточные диплококки предполагает одно­значный диагноз.

У женщин типичные диплококки могут обнаруживаться в мазках материала, взятого из бартолиниевых желез и желез Скена на ран­ней стадии заболевания. Но на основании только этого нельзя по­ставить даже рабочий диагноз.

Причин насколько:
1. грамотрицательные диплококки (но не гонококки) встречаются вне клеток;
2. гонококки в одиночку или парами встречаются вне клеток;
3. в клетках встречаются грамположительные микроорганизмы с морфологией гонококков.

Все, что можно сказать о грамотрицательных диплококках, обнаруживаемых вне клеток, – так это то, что они могут быть гонококками. Весьма редко внутри гнойных клеток генитального экссудата находят грамотрицательные дип­лококки, не являющиеся гонококками.

Мазок, приготовленный из гонорейного экссудата, должен быть очень тонким. Гонококки реагируют на окраску по Граму таким об­разом, что в случае толстого и неравномерного по толщине мазка может быть получен ошибочный результат. В случае хронической гонореи микробы обычно не обнаруживаются в экссудате.

Разработаны специальные транспортные среды, которые позволяют отсылать подозреваемые культуры для дальнейшей идентификации. При этом используют пробирки с завинчивающимися пробками, со­держащие среду и смесь воздуха с СО2. После инокуляции материа­ла рост гонококков поддерживается в течение 48-96 часов.

Согласно современным рекомендациям, материал, подозрительный на выделение культуры гонококка, должен быть получен не только из урогенитального тракта (эндоцервикального канала, передней уретры), но и из аноректальной области и глотки. Ректальную гоно­рею можно легко просмотреть. Тщательная работа с использованием тампонов необходима при обследовании мужчин-гомосексуалистов. У женщин необходимо орать цервикальные и ректальные мазки, поскольку у 50% инфицированных женщин гонококки оседают в рек­тальной области. Инфекция может оставаться там и после того, как она исчезнет из шейки матки.

Стерильные ватные тампоны часто содержат жирные кислоты и другие вещества, которые подавляют рост гонококков. Поэтому для взятия образцов рекомендуется использовать нейтральные в этом отношении тампоны, например из альгината кальция.

Гонококки могут быть получены из мочи мужчин, если первые 10 мл выделяемой мочи центрифугировать и выделить культуру из осадка. При более простом методе скрининга первые несколько ка­пель мочи, попавшие на сухой тампон, немедленно переносятся на среду. Культуры мочи при скрининговых программах помогают ус­тановить источник инфекции, среди мужчин с бессимптомным те­чением заболевания.

Следующей ступенью в бактериологическом изучении гонококков является качественный анализ биохимических реакций и идентифи­кация микроорганизмов с помощью антисывороток. Наличие у го­нококков специфического К-антигена дает возможность использо­вать метод флуоресцирующих антител, при обнаружении гонокок­ков в прямых мазках или экссудате, либо в мазках, приготовленных на культур.

Гонококки. Социальное значение гонореи

Гонорея имеет далеко идущие медицинские, социальные, психоло­гические и даже судебно-медицинские последствия. Болезнь приоб­рела характер близкий к пандемии – по наиболее вероятным оцен­кам ежегодно в мире регистрируется от 2,5 до 3 миллионов новых случаев в год, примерно 1 случай каждые 15 секунд. Более полови­ны случаев составляют подростки и молодые люди до 25 лет. Гоно­рея регистрируется не только среди подростков, но и среди детей, не достигших половой зрелости. Подозрительными должны быть любые выделения из влагалища или уретры у детей.

Отмечено, что гонорея является самой распространенной причиной бесплодия у обоих полов. У женщин стерильность обусловлена об­литерацией фаллопиевых труб рубцовой тканью, образовавшейся при разрешении гонорейного сальпингита. У мужчин стерильность обусловлена облитерацией семенных протоков, вызванной анало­гичным процессом гонорейного заражения и разрешением воспали­тельного процесса с последующим рубцеванием.

Гонококки. Иммунитет

Заболевание гонореей почти или вообще не создает иммунитета к последующим случаям заражения. Реакция антител слабо выражена. Очевидный дефицит иммунитета может быть главной причиной, почему болезнь остается эндемичной в человеческой популяции. Существует выраженная чувствительность к повторному инфициро­ванию. Относительный типоспецифический иммунитет к гонорее обусловлен опсонинами.

Гонококки. Профилактика

Вульвовагинит у детей может быть предотвращен путем надлежа­щей обработки постельного белья, ночной одежды, воды для мытья и ванны. Все дети должны быть обследованы на гонорею прежде чем получат разрешение на контакт с другими детьми в детских уч­реждениях или больницах. Врачи и медперсонал, использующие ре­зиновые или пластиковые перчатки для пальпации и обследования шейки матки и влагалища должны эти перчатки заменить перед пальцевым исследованием прямой кишки.

В связи с тем, что половым путем передается не только гонорея, каждый гонорейный больной должен пройти серологическое тести­рование на сифилис и ВИЧ-инфекцию.

Гонококковая вакцина была получена путем выделения и очистки белка пилей. Ее действие заключается в том, что антитела, продуци­руемые реципиентом, обволакивают ворсинки любого проникшего в организм человека гонококка, что препятствует фиксации бактерий на клетках хозяина и, тем самым, препятствует развитию заболева­нию.

Существует гонококковая вакцина (гоновакцина), представляющая собой взвесь инактивированной культуры гонококков в 0,9% рас­творе хлорида натрия. Используется при диагностике (установлении излечения гонореи), и как вспомогательный метод лечения при вяло протекающих рецидивах, при свежих торпидных и хронических формах заболевания. Назначается мужчинам с осложненной и женщинам с восходящей гонореей (после стихания острых воспали­тельных явлений).

Заключение

1. Нейссерии – это грамотрицательные, аэробные или факультативно- анаэробные микроорганизмы, паразитирующие на слизистой че­ловека.

2. Гонококки (возбудители гонореи) – это диплококки, которые могут быть расположены внутри- и внеклеточно.

3. Нейссерии растут только в атмосфере, содержащей 10% СО2, и лишь на специально обогащенных средах.

4. Пили гонококка являются структурой, обеспечивающей при­крепление микроба к цилиндрическому эпителию слизистой оболочки.

5. Гонококки из первичного очага инфекции (эпителий уретры, шейки матки, прямой кишки) распространяются в другие отде­лы организма, в том числе в репродуктивные органы. При повторяющихся заражениях происходит деформация фаллопиевых труб, вызванная формированием рубцов. Возможна полная не­проходимость. У мужчин образование рубцов приводит к суже­нию (структуре) уретры.

6. Одной из форм проявления гонококковой инфекции взрослых и, особенно, новорожденных детей, является специфическое гнойное воспаление конъюнктивы. В процесс иногда вовлекают­ся ткани глаза, что может привести к серьезному нарушению зрения.

7. Ophthalmia neonatorum – гонококковая инфекция, возникающая при прохождении плода через зараженный родовой канал. С целью профилактики всем новорожденным в конъюнктиваль­ный мешок обоих глаз вводят нитрат серебра (метод Креде).

Гонококки

Гонококки (Neisseria gonorrhoeae) относятся к специфическим паразитам, поражающим организм человека. Они открыты в1879 году немецким учёным Альбертом Нейссером. Это неподвижные бобовидные, не образующие спор гноеродные бактерии, относящиеся к роду Neisseria, вызывающие воспалительные процесс на слизистых оболочках мочеполовых путей и конъюнктивы глаз у новорожденных. Также в некоторых случаях они могут поражать эндокард, железы и суставы.

Биологические свойства и морфология гонококков

Гонококки по своей форме напоминают бобы или кофейные зёрна, расположенные попарно, вогнутыми сторонами внутрь. Размеры возбудителя колеблются в среднем от 0,7 до 1,3 мкм. В гнойном отделяемом человека эти микроорганизмы локализуются в цитоплазме лейкоцитов, где долго сохраняют свою жизнеспособность (незавершённый фагоцитоз). На культуральных средах гонококки располагаются беспорядочно, имеют разные размеры и круглую или бобовидную форму.

Гонококки относятся к грамотрицательным бактериям и поддаются окрашиванию всеми анилиновыми красителями. При бактериоскопическом исследовании выделяется характерная триада свойств, отличающая гонококки от других диплококков: грамотрицательная окраска (окрашивание в красный цвет по методу Грамма), бобовидная форма и внутриклеточное расположение.

Необходимо отметить, что под воздействием лекарственных препаратов, а также при хронической форме заболевания, микроорганизмы могут видоизменяться. В этом случае в мазках наряду с грамотрицательными возбудителями встречаются грамположительные бактерии разной величины и формы (шаровидные L-формы гонококка).

Гонококки – это ээробные микроорганизмы, образующие в патологическом отделяемом слизистое капсулоподобное вещество. Чаще всего они расположены скоплениями, напоминающими пчелиный рой.

Возбудители требовательны к питательным средам. Они хорошо растут при достаточной влажности на средах, содержащих в своём составе нативный белок.

При разрушении клетки гонококки выделяют эндотоксин, экзотоксина не образуют.

Устойчивость возбудителя

Гонококки быстро погибают во внешней среде. Они не переносят охлаждения, а при повышении температуры до 40 градусов гибнут за 3 – 6 часов. При 56 градусах Цельсия возбудитель погибает через 5 минут. Микроорганизм не переносит соли серебра, высокочувствителен к антибиотикам пенициллинового и стрептомицинового ряда, однако в процессе лечения способен приобретать к ним устойчивость.

В гнойном отделяемом человека бактерия сохраняется в течение суток.

Гонококки. Клиника и патогенез.

Гонококки являются возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний мочеполовых путей (гонорея) и глаз (бленнорея). Этим инфекциям подвержен только человек. Урогенитальное заражение, как правило, происходит при незащищённых сексуальных контактах. Поражение глаз происходит через предметы обихода (полотенце, губка и пр.). Чаще всего бленнореей страдают маленькие дети.

Инкубационный период заболевания 3 – 7 дней (иногда 10 – 15). В этот период, попадая на слизистые оболочки мочеполовых органов, возбудитель начинает там размножаться, после чего он мигрирует в подслизистую соединительную ткань. Чаще всего происходит поражение уретры и слизистой оболочки матки. Далее, при отсутствии лечения, процесс может распространяться по восходящему пути через лимфатическую систему.

Клиническими симптомами гонореи являются рези и боли при мочеиспускании, чувство тяжести внизу живота, а также возникновение гнойных выделений из наружных половых органов.

В том случае, когда гонококк по кровотоку проникает в другие органы, он может оседать на суставах или сердечных клапанах, провоцируя гонококковый артрит или гонорейный эндокардит. Также существует угроза заражения крови (сепсис). У новорожденных гонококковая инфекция вызывает гнойное воспаление слизистой оболочки глаз.

Иммунитет к возбудителю.

К сожалению, у человека не вырабатывается иммунитет после перенесенного заболевания, в связи с чем, существует вероятность повторного заражения. Также не бывает и врождённого иммунитета к гонококковой инфекции. Из-за синдрома незавершённого фагоцитоза, возбудители не только сохраняются в лейкоцитах, но и прекрасно там размножаются, а также способны переноситься с током крови в различные органы.

Диагностика возбудителя.

Идентификация гонококка, как правило, из-за крупных размеров и характерной морфологии возбудителя, не представляет сложностей. Наиболее распространённый метод лабораторной диагностики - это бактериоскопическое исследование мазка отделяемого, окрашенного по Грамму.

В том случае, когда при микроскопии возникают какие-либо сомнения, назначается культуральная диагностика (бактериологическая методика на питательных средах).

Также в некоторых случаях применяются иммуноферментный, серологический и иммунофлюоресцентный методы выявления гонококковой инфекции.

Новейшими перспективными методами диагностики гонореи считаются молекулярно-биологические методики, такие, как ПЦР и ЛЦР.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.