Для подтверждения вич проводят исследования

При положительном результате ИФА пациенту рекомендуют обратиться к инфекционисту Центра СПИД или специализированных клиник для консультации и проведения повторного исследования крови. Дополнительно назначают специальный подтверждающий тест – иммунный блотинг, принцип которого заключается в выявлении антител к определенным белкам ВИЧ, или гликопротеидам (gp). На нитроцеллюлозу нанесен вируснный АГ (env,pol полимераза,gag - сердцевина) - инкубация с образцами- промывка -+АТ к IgGпациента. Меченные щелочной фосфатазой, икуб, отмвыка+хромоген - появление специф. окраш полос - наличие АТ. Результат: + - наличие 1/2 полос env+-pol+-gag, не опред. - pol +gag, отр - нет полос

При выявлении антител к одному из гликопротеидов - gp 41, 120, 160 – результат считают положительным. В случае обнаружения антител к другим белкам вируса ответ расценивают как сомнительный и рекомендуют повторить обследование через 3 и 6 месяцев. Отсутствие антител к белкам вируса в реакции иммунного блотинга означает, что первый ИФА был ложноположительным.

Следует правильно понимать, что позитивный результат ИФА на антитела к ВИЧ – это не диагноз. Только врач может поставить диагноз ВИЧ-инфекции после повторного ИФА, врачебного осмотра и проведения дополнительных лабораторных тестов. И только врач может исключить этот диагноз при отрицательных повторных результатах ИФА.

Если человек попал в ситуацию, потенциально опасную по передаче ВИЧ, ему рекомендуется как можно раньше обратиться за медицинской помощью и начать проведение постконтактной профилактики АРВ-препаратами, не дожидаясь, пока истекут необходимые для появления антител и проведения ИФА 3 месяца.

Тесты 1 уровня- серологич. скрининговое обслед-е ИФА;

Тесты 2 уровня - арбитражные исследования первично серопозитивных проб ИФА - макс возможные наборы тест-систем;

Тесты 3 уровня - скрининговые арбитражные и подтверждающие исследования ИФА, иммуноблотинг.

2. Проточная цитофлюориметрия

3. СД4 - 200 - критический уровень

(ВИЧ – медленно прогрессирующее заболевание с многолетней репликацией вируса в лф, мф и клетках нервной ткани, вызывающей нарушение иммунной и нервно-психической регуляции организма => гибель больного от поражений вторичного порядка, обусловленных нарастающим иммунодефицитом. ВИЧ относится к РНК-содержащим ретровирусам. Способен синтезировать в клетках хозяина ДНК своего генома. Вирусная ДНК включается в геном лиц, где ее экспрессия создает условия развития хронической инфекции. Вирус иммунодефицита человека генетически и антигенно неоднороден: выделены ВИЧ-1 и ВИЧ-2. При заражении ВИЧ-1 продолжительность жизни составляет 10-12 лет, а ВИЧ-2 – свыше 20-25 лет. Впервые был выделен в 1983 от больного лимфоаденопатиейв институте Пастера и в 1984 в США.

Чувствителен к действию детергентов. ПАВ, спиртов, хлорсодерж., перекись (1-3% хлорамин, 3% хлорной извести - через 15 мин). Полная инактивация при56С 30мин. Устойчив к УФ. Сохраняется на высушенных субстратах 7 сут.

Патогенез - цитопатическое действие на ИКК (разрушение, нарушение функций, спонтанная поликлональная активация В-л, гипергаммаглобулинемия). АГ вируса выступают в роли суперантигенов - гиперактивация специфичных и неспецифичных клонов - апоптоз - дефицит. Время от момента заражения до появления антител -3нед -3 мес. до 6 мес

Пути заражения ВИЧ инфекцией: -парантеральный -внутриутробный-вертикальный - половой

1стадия : Латентный период. Период вирусоносительства без клинической манифестации. ПЦР

2 стадия: Первичной манифестации. От 2 нед до неск месяцев. острая инфекция(похожа на грипп,высокая тем-ра, инфекц.мононуклеоз) от 1 недели до месяца, ИФА ВИЧ- отрицателен.

3-стадия: ассимптомной инфекции (д-з.ставится на основании эпид.анализа и лаб-ых исследований)Отсутствуют клинические признаки, длится от 1 года до 10 лет.Продолжительность зависит от образа жизни, материального достатка и др)

4-стадия:персистирующая генерализованная лимфоаденопатия (увеличение лимф. узлов)

5-стадия: пре СПИД - от 2до 10 лет.Переход от ВИЧ-инфекции к стадии вторичных заболеваний + оппортунистические инфекции (кандидоз полости рта, туберкулёз лёгких,опоясывающий лишай,локализ.форма саркомы Капоши)Снижение массы тела на 10%, немотивированная лихорадка, диарея,общая слабость. и др.)

Риск передачи ВИЧ в мед.уч. При парантеральном пути передачи (от пациента к персоналу и наоборот). При в/в; в\м; и др. инъекциях. При переливании крови и кровезаменителей, стоматолог, хирург, гинекологическом кабинете.

КЛ диагностика ВИЧ-инфекции имеет 3 направления: 1. Установление факта инфицированности ВИЧ, диагноза ВИЧ инфекции; 2. Определение стадии клинического течения б-ни и выявление вторичных заб-ий; 3. Прогноз прогрессии клин течения заб-ия и лаб контроль проводимого лечения.)

95. Микробиологические методы диагностики туберкулеза и определения лекарственной резистентности возбудителя.

Включает микроскопию препаратов, окрашенных по Цилю - Нильсену для выявления ми­кобактерий туберкулеза (кислотоустойчивых бактерий, КУБ),

Сбор мокроты для анализа на КУБ. На исследование на­правляются три пробы мокроты от каждого пациента. Первую пробу мокроты пациент собирает через 1-2 ч после сна под на­блюдением медицинского работника. Вторая проба мокроты со­бирается больным в тот же день через несколько часов после взятия первой пробы. Третья проба - утром следующего дня.

Пациенту следует откашливать мокроту из более глубоких отделов легких. Во время забора мокроты медработник должен стоять за спиной больного. Для исследования необходимо полу­чить достаточное количество мокроты (3-5 мл), содержащей плотные гнойные частицы, а не слюну.

Техника приготовления и окраски препаратов Бактерии чаще обнаруживаются в плотных гнойных частицах мокроты. Результат исследования в большей степени зависит от правильного выбора этих частиц. Гнойные частицы выбирают из 4-6 разных мест, распределяют по предметному стеклу тонким слоем. Мазок можно приготовить и другим способом. Стекло с отобранной мокротой покрывают другим предметным стеклом и, придавливая друг к другу, тщательно растирают, раздвигая стек­ла в противоположном направлении.

Подготовленные мазки про­сушивают на воздухе в течение 15-30 мин. Подогревать препа­рат для высушивания не рекомендуется, так как при этом легко происходит разрушение микробных клеток. Высушенный мазок фиксируют трехкратным проведением его в течение 3-5 с через среднюю и наиболее яркую часть пламени спиртовки. Нужно из­бегать следующих ошибок: 1) изготовлений слишком толстых препаратов (трудно искать бактерии), 2) фиксирования плохо вы­сушенных мазков (получается плохая окраска), 3) недостаточной фиксации, ведущей к сползанию препарата, 4) длительной фик­сации над пламенем, вызывающей обугливание мокроты, что сильно отражается на качестве окраски.

Окраска по Цилю - Нильсену Предметные стекла помещают на мостик с промежутками между краями. Мазки накрывают фильтровальной бумагой. На всю по­верхность фильтровальной бумаги, покрывающей стекло, нано­сят карболовый фуксин Циля (1 г основного фуксина растворя ­ют в 10 мл этилового спирта, раствор выливают в 100 мл 50 г/л раствора карболовой кислоты). Стекло с мазком медленно нагре­вают над пламенем спиртовки до появления пара. Не допускает­ся кипение или высушивание окрашивающего раствора на пред­метном стекле. Если раствора недостаточно, его можно добавить еще и нагреть второй раз. Мазок с прогретым раствором остав­ляют на 5 мин, после чего фильтровальную бумагу удаляют пин­цетом и помещают в бачок для сбора отходов. Каждое предмет­ное стекло аккуратно ополаскивают отдельно под слабой струей воды из водопроводного крана до полного удаления окраши­вающего раствора. Мазок держат ребром к струе воды. Не раз­решается смывать и обесцвечивать одновременно несколько маз­ков во избежание перекрестного заражения. Все стекла помеша­ют на мостик и обрабатывают, каждый из них индивидуально, 250 г/л раствором серной кислоты до полного отхождения крас­ки. Смывают каждое предметное стекло как описано выше. За­тем каждый мазок обрабатывают 96% этиловым спиртом в течение 5 мин и промывают водой. Обесцвеченные, промытые стекла с мазками докрашивают (3 г/л водным раствором метиленового синего в течение 60 с), промывают, как описано выше, оставля­ют сушить на воздухе.

Механическое удерживание земляных масс: Механическое удерживание земляных масс на склоне обеспечивают контрфорсными сооружениями различных конструкций.

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют. Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает. С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно. Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди. Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован. Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам. Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования. Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

• увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
• лихорадка;
• мышечные или головные боли;
• молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
• воспаление слизистой носа, рта или глотки;
• ночная потливость;
• ломота в суставах;
• длительная диарея;
• тошнота, рвота;
• резкое снижение массы тела;
• высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования. Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

• ИФА (иммуноферментный анализ).
• Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

• Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
• ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

ВИЧ (вирус иммунодефицита человека) может годами не выдавать своего присутствия. Он коварно пользуется человеческой беспечностью, проникая внутрь организма нового хозяина и длительное время атакуя свою жертву изнутри. Эффективное оружие в борьбе и сдерживании этого микроскопического врага — профилактика и диагностика. Поэтому следует своевременно сдавать назначенные анализы на ВИЧ, даже если они кажутся вам излишними.

Диагностика ВИЧ и СПИД — задача первоочередной важности

После попадания в пораженную клетку, вирусный фермент — обратная транскриптаза — синтезирует соответствующий ей участок ДНК, а затем достраивает вторую комплементарную цепь. Зараженная ДНК проникает в ядро лимфоцита и встраивается в его генный аппарат. Далее ВИЧ либо сразу использует клетку как донорский материал, выделяя из нее участки с вирусным кодом, либо, оставшись в форме провируса, позволяет инфицированной клетке размножаться, вкладывая в новые клетки свое вирусное потомство. Позже провирус, передавшийся новым клеткам CD4, пробуждается и уже тогда начинает дробить их на вирусные фрагменты.

С момента заражения иммунная клетка начинает снижать свою функциональную активность, а после расщепления вирусом погибает. ВИЧ-инфекция, распространяясь по организму, за десяток лет уменьшает количество Т-хелперов с 400–1900 (в норме) до 200 и менее [1] , что соответствует стадии СПИДа. Больной становится беспомощным при атаке любых микроорганизмов и вирусов. Даже привычные для организма сапрофиты на коже и внутренних органах могут привести к смерти.

ВИЧ-инфекция относится к медленно текущим заболеваниям. От первой до фатальной, четвертой стадии, проходит 10 и более лет [2] .

• Инкубационная стадия — период от проникновения вируса в организм до выработки в крови человека антител (протеинов иммунной системы) к ВИЧ. Анализы будут отрицательны, но человек уже заразен. Инкубационный период может длиться до трех месяцев (чаще — около месяца).
• На этапе первичных проявлений отмечается резкое повышение количества вируса в крови и ответная выработка антител в количестве, достаточном для выявления лабораторным путем. Большинство ВИЧ-положительных пациентов при этом чувствуют себя нормально. Но часть заболевших фиксируют симптомы, похожие на грипп: повышается температура, увеличиваются лимфатические узлы, беспокоят головная боль и слабость. Через пару недель недомогание проходит само, без лечения. Длительность стадии — порядка двух–трех недель.
• Бессимптомная (или субклиническая) — фаза затяжной борьбы иммунной системы с вирусом с постепенной победой последнего (без соответствующего лечения). Количество лимфоцитов снижается, а вирусных частиц — неуклонно растет. К концу данного периода у инфицированных отмечается увеличение лимфатических узлов, общее недомогание. На фоне чрезмерно ослабленного иммунитета проявляются признаки оппортунистических инфекций, которым ВИЧ, словно троянский конь, отрывает прямой доступ к незащищенному организму. В дальнейшем эти условно-патогенные вирусы и клеточные организмы, вполне безвредные при нормальном иммунитете, становятся виновниками смерти 90% ВИЧ-инфицированных людей [3] . Стадия при отсутствии терапии длится приблизительно от 6 до 19 месяцев, иногда дольше [4] .
• Заключительная стадия — СПИД (синдром приобретенного иммунодефицита). Название закрепилось вследствие того, что изначально заболевание выявлялось именно на этом необратимом этапе, имеющем явные патологические признаки. Взрослые пациенты умирали от бактерий, вирусов и грибков, с которыми справляется даже неокрепшая иммунная система детей первых лет жизни. Это позволило врачам сделать логичное предположение о том, что снижение защитных свойств организма вызвано внешними причинами, т.е. приобретено извне.
  В стадии СПИДа анализ крови на ВИЧ показывает очень низкое количество CD4 T, пациент страдает от запущенной формы оппортунистических инфекций, онкологии или энцефалопатии (поражение нервных клеток мозга, вызывающее слабоумие).

ВИЧ присутствует во всех биологических жидкостях организма инфицированного человека. Но в слезах, потовых выделениях и моче ВИЧ-положительного лица наличие вирусных частиц настолько мало, что не способно вызвать инфицирование [5] . Угрозу заражения представляют кровь, сперма, вагинальные выделения и грудное молоко, в которых концентрация ВИЧ наиболее высокая. В этой связи существуют 3 способа передачи вируса иммунодефицита:

1. Заражение половым путем , т.е. при незащищенном сексуальном контакте (анальном, вагинальном, реже — оральном). Риск заражения увеличивается при нарушениях целостности слизистой оболочки (ранки, язвы, трещинки), контактирующей с источником ВИЧ. До 20 раз больше вероятность передачи ВИЧ человеку, имеющему на момент контакта воспаления или поражение другой инфекцией. Вероятность заражения женщины от инфицированного мужчины втрое выше, чем наоборот.
2. Паренетальное, или заражение через контакт с кровью , возможно несколькими путями. При использовании общих игл и шприцев при употреблении наркотиков, нестерильных медицинских и других колющих и режущих предметов (например, при нанесении татуировок, мезотерапии и сходных косметических процедурах, удалении кутикулы при маникюре), донорстве инфицированных органов, семенной жидкости, крови и ее компонентов. Наиболее высок риск для наркоманов, т.к. при медицинских и косметических процедурах регламентировано использование одноразовых или продезинфицированных инструментов и приборов, а донорская кровь и сперма тщательно проверяется.
3. Вертикальный путь передачи — от ВИЧ-инфицированной матери к ребенку внутриутробно (через плаценту), во время родов (если ребенок получит травмы кожи), а также при кормлении грудью (через ранки в ротовой полости ребенка). Благодаря своевременной и регулярной антиретровирусной терапии риск инфицирования новорожденного возможно свести к нулю.

Итак, вирус не передается бытовым, воздушно-капельным путем, при поцелуях, совместном употреблении пищи и напитков, в сауне или бассейне, а также при укусах кровососущих насекомых [6] . ВИЧ погибает при температуре 56°С в течение 30 минут, при нагревании до 100°С — мгновенно [7] . Вирус не выдерживает воздействия спирта, перекиси водорода, хлорамина и других дезинфицирующих средств.

По данным ВОЗ [8] , в 2015 году вирус иммунодефицита человека унес более миллиона жизней. В течение указанного года вдвое большее число людей заразились ВИЧ, а общая численность ВИЧ-инфицированных составила примерно 36,7 миллионов (две трети из них — жители африканского континента).

35 миллионов жертв числятся за смертоносной инфекцией с момента ее открытия (80-е годы). Вместе с тем за период с 2000 по 2015 гг число новых ВИЧ-инфицированных уменьшилось на 35%. Потенциально около 8 миллионов человек были спасены в результате профилактики, диагностики и оказания медикаментозной помощи.

Даже на сегодняшний день, при наличии высокой технической оснащенности и доступности анализов, о своем ВИЧ-статусе знают лишь порядка 60% больных на планете [10] . Максимально полный охват человечества диагностикой на ВИЧ/СПИД — верный путь к снижению новых случаев инфицирования.

Косвенно на наличие ВИЧ-положительного статуса может указать и общий анализ крови (из пальца) — отклонение от нормы лейкоцитов, эритроцитов и, главное, лимфоцитов в исследуемом биоматериале должно вызвать подозрение на инфекцию и потребовать дополнительного анализа.

Кроме того, ВОЗ активно разрабатывает программы самодиагностики по слюне, моче, сперме. Самотестирование не отличается высокой точностью, но оправдано в районах с высоким уровнем заражения и недостаточной медицинской оснащенностью.

Итак, достаточно достоверно выявить наличие ВИЧ помогает исследование венозной крови, проводимое двумя основными способами.

Более распространен метод ИФА (иммуноферментный анализ) , позволяющий определить количественное содержание вируса-возбудителя в сыворотке крови. ИФА на ВИЧ-инфекцию определяет антитела к обеим разновидностям вируса (ВИЧ 1/2).

Для определения ВИЧ кровь пациента соединяется с белком, в котором содержится вирус в несколько подходов. При многократной стойкой реакции сыворотки крови с реагентом и выработке антител выносится положительное заключение. ИФА-скрининг производится повторно для перепроверки, и только при двух положительных заключениях следует вывод о присутствии вируса иммунодефицита. Но так как достоверность метода составляет до 98% [11] (невозможно исключить ложноположительные и ложноотрицательные результаты), для подтверждения диагноза назначается анализ методом иммуноблота.

Иммунный блоттинг — более дорогой и точный путь определения ВИЧ, сочетающий в себе ИФА с предварительным разделением белков вируса электрофорезом. У метода высокая чувствительность (99,3–99,7%) и специфичность (99,7%) [12] .

Раз в квартал диагностику на ВИЧ проходят медики. Регулярно проверяются доноры крови, спермы, яйцеклеток и сданные ими биоматериалы. Так, часть сданной крови тут же подвергается исследованию, повторно ее проверяют через 3 месяца хранения и только после этого используют для переливания.

Забор крови на ВИЧ производится у будущих матерей (3 раза в течение беременности) и отцов (однократно), т.к. выявление положительного ВИЧ-статуса при лечении позволит родить здорового малыша.

Результаты скрининга на ВИЧ в обязательном порядке требуются при оформлении пациента в стационар, призыва на военную службу, а также в случаях оформления права на временное проживание и вида на жительство для иностранных граждан. Назначение анализа на вирус последует и при нахождении у человека других половых инфекций, облегчающих проникновение ВИЧ в организм.

Кроме того, каждый человек вправе обратиться к диагностике в случае попадания в рискованную ситуацию, например, при незащищенном половом акте или сомнениях в стерильности введенных инъекций.

Каждые три месяца рекомендуется проверяться на ВИЧ людям из групп повышенного риска: употребляющим наркотики, имеющим многочисленные случайные связи и гомосексуальные связи, постоянным партнерам ВИЧ-положительного лица.

Помимо специализированных СПИД-центров и кожно-венерических диспансеров, кровь на ВИЧ берут в государственных поликлиниках и больницах, частных медучреждениях и клинических лабораториях.

По медицинским показаниям в государственных учреждениях тестирование проводится бесплатно, но результат предоставляется не ранее чем через полторы недели. Платная услуга оказывается в случаях, когда требуется срочное установление ВИЧ-статуса (например, при неплановой госпитализации), при анонимной сдаче анализа (кроме СПИД-центра), в платных центрах. Средняя цена платного иммуноферментного анализа на ВИЧ — от 700 рублей (включая затраты на забор крови). Методом иммуноблота — от 3500 рублей.

Кроме того, из-за повышенной чувствительности, такие тесты выдают до 5% ложноположительных результатов [13] . Поэтому эксперты рекомендуют все же производить столь важные анализы в лабораторных условиях (с многократным повторением) и с участием врача, который сможет корректно преподнести полученные данные пациенту.

Достоверность диагностики зависит от стадии инфицирования. Так, на начальном этапе заражения ИФА не покажет признаков заражения. А с учетом того, что длительность латентной фазы колеблется от двух недель до полугода, полное исключение инфекции подтверждается двукратным отрицательным тестированием (примерно через 6 недель после рисковой ситуации и повторно через три месяца).

В общих случаях анализы на ВИЧ берутся при предоставлении удостоверения личности (для учета инфицированных и исключения факта подлога результата). Вместе с тем каждый желающий имеет право сдать анализы анонимно (с присвоением кода, по которому идентифицируются результаты). Подготовка к тестированию включает воздержание от половой жизни, жирной, соленой пищи, алкоголя и курения как минимум на сутки. Кровь сдается утром натощак.

Забор биоматериала (достаточно 5 мл) производится из вены.

Обычно в платной клинике пациента знакомят с результатами ИФА-тестирования на следующий день после забора. В государственных учреждениях пациент может томиться в ожидании результата до полутора недель (если кровь направляется на исследование не сразу, а по мере накопления определенного количества пробирок и возникла потребность перепроверки результатов).

На исследование методом иммуноблота (для подтверждения или опровержения двойного ИФА) потребуется еще 3–10 дней [14] . Для этого анализы направляются в референс-лабораторию (СПИД-центр), где сыворотка снова подвергается двойной ИФА-проверке с другой тест-системой (отличающейся по составу антигенов и антител). И в случае подтверждения подозрений, проводится верификация методом иммуноблота.

При отрицательном результате ИФА антиген р24 и антитела к ВИЧ 1/2 не обнаруживаются. Положительное заключение делается при выявлении специфических антител.

Возможен также ложноположительный результат, обусловленный беременностью, ошибками медперсонала и техники. Он также встречается на фоне аутоиммунных заболеваний, инфицирования герпесом, гепатитами и даже гриппом.

При иммунном блоттинге о положительном результате свидетельствует наличие гликопротеинов вирусов gp160, gp120, gp41.

Отрицательный результат анализа методом иммуноблота ставится при отсутствии данных белков-индикаторов ВИЧ.

Сочетание ИФА и иммуноблота дают 99,9% [15] достоверности. При положительном результате ИФА, но отрицательном — методом иммуноблота (не выявлен ни один из трех гликопротеинов ВИЧ), результат признается сомнительным или неопределенным. В таких случаях может быть назначено исследование методом ПЦР [16] — полимеразной цепной реакции (эффективен через 4 недели после предполагаемого заражения [17] ). В ходе анализа вирусу создаются условия для лабораторного размножения — при высокой концентрации ДНК или РНК вирус легко обнаружить. Исследование носит вспомогательное значение. Может быть назначено как в целях диагностики (выявление ДНК или РНК ВИЧ), так и в целях контроля заболевания (количественное определение РНК ВИЧ) [18] .

Сдача анализа на ВИЧ может вызывать страх, если перед тестированием невольно припоминаются случаи, несущие потенциальную угрозу: незащищенные половые связи, инъекции, недавнее посещение салона татуажа, лечение у сомнительного стоматолога. Но чем сильнее этот страх, тем важнее пройти исследование. Если реакция дважды окажется отрицательной — опасения развеются, в противном случае — у пациента будет возможность быстро начать антиретровирусную терапию, обезопасить партнера, свести к минимуму риск инфицирования ребенка от ВИЧ-положительной матери.

Когда последняя из вакцин провалилась, было принято консенсусное решение в научном сообществе, что мы недостаточно знаем фундаментальные механизмы ВИЧ-инфекции, и это является самым главным: чтобы бороться с инфекцией, нужно для начала понять фундаментальный механизм инфекции и на основе этого разработать превентивные меры. Поэтому мои коллеги и я занимаемся именно фундаментальными проблемами ВИЧ-инфекции. Почему этот вирус так успешен с его точки зрения? Почему, справившись со многими другими вирусами, этот вирус остается пока непобедимым?

Основная причина в выборе очень удачной с точки зрения вируса, конечно, стратегии. Во-первых, в отличие от других вирусов, он заражает именно те клетки, которые призваны бороться с инфекцией. Во-вторых, он выбрал удачный половой путь размножения — это преимущественный способ размножения вируса. Важно, что он заражает не просто иммунные клетки, которые призваны с ним бороться, но и клетки активированные. То есть когда другой вирус заражает организм, то клетки иммунной системы активируются и уничтожают вирус или клетки, зараженные вирусом. Однако ВИЧ атакует активированные клетки, то есть именно те, которые призваны его уничтожать, — в этом его преимущество.

Долгое время казалось, что болезнь течет следующим образом: вирус заражает человека, есть некие легкие симптомы, а потом он исчезает, и происходит многомесячная, иногда даже многолетняя латентная фаза. Но потом оказалось, что это не так. Понятие латентной фазы появилось потому, что основывались на анализе крови заболевших пациентов. Оказалось, что во время этой фазы вирус действительно из крови исчезает, но он продолжает размножаться и разрушать лимфоидную ткань, лимфатические узлы, которые являются центрами возникновения иммунного ответа на инфекцию.

Когда это выяснилось, стало понятно, что необходимо изучать, как эти вирусы размножаются не просто в суспензии в лаборатории или в крови у больного, а именно в ткани. Поэтому группа, которой я руковожу, мои коллеги и я создали такую лабораторную систему, которая позволяет изучать в контролируемых условиях размножение и патогенез этого вируса в лимфатических тканях. По разным и техническим, и этическим соображениям практически невозможно изучать, как размножается вирус в ткани больного человека. Анализ крови можно взять без всяких последствий, но в ткань проникнуть трудно и во многих случаях невозможно.

Из истории медицины следует, что механизмы большинства болезней человека стали понятны, когда были созданы либо животные, либо другие лабораторные модели для их изучения, потому что для науки нужно контролировать все условия для изучения любого процесса. В человеке это, конечно, невозможно. Животной модели ВИЧ-инфекции практически нет, хотя есть похожий вирус, который заражает обезьян, но, в отличие от многих других вирусов, ВИЧ заражает человека, и только человека.

Мы создали такую систему, которая состоит из кусочков лимфатической ткани. Для ее создания можно брать оперативный материал, например, после тонзиллэктомии или аденэктомии, когда вырезают гланды или аденоиды. В основном вырезают гланды у детей по показаниям частых простуд. Мы берем эти кусочки, знаем, как их культивировать в лабораторных условиях в течение двух-трех недель, искусственно заражаем их ВИЧ и смотрим, как происходит патогенез. На этом пути мы получили довольно интересные данные.

Также эта система используется для тестирования различных противовирусных препаратов, потому что исследования заражения ВИЧ очень дороги. Любые клинические испытания требуют многолетней подготовки, поскольку лекарство проходит разные стадии испытания, прежде чем будет введено даже здоровым добровольцам для проверки токсичности. Наша система позволяет без всяких проблем, связанных с этикой, с разрешениями, посмотреть в доклинических испытаниях, как это лекарство действует на вирус.

Кроме того, такая система очень полезна и дает много информации о заражении вирусом, трансмиссии, как говорят специалисты, то есть как вирус передается от зараженного человека к здоровому, например от мужчины к женщине. У нас есть система, которая позволяет культивировать, например, шейку матки, где происходит заражение при передаче вируса от мужчины к женщине половым путем.

Мы получили много интересных результатов, в частности, о процессе заражения вирусом. ВИЧ заражает активированные иммунные клетки, некоторые из них переходят в это состояние при заражении вирусом, но могут активироваться и заражением другим вирусом. Именно поэтому другие патогены, даже не столь страшные, как ВИЧ, например герпес-вирусы для здорового человека, не представляющие опасности, активируют клетки иммунной системы, тем самым создавая новые мишени для ВИЧ-инфекции.