Иерсиниозы микробиология мед колледж
Псевдотуберкулез и иерсиниоз — инфекционные болезни из группы зоонозов. Первые сведения о бактериях, вызывающих псевдотуберкулез, появились в конце XIX в. Многие годы эти микроорганизмы не считались патогенными для человека. Единичные случаи заболевания людей, описанные в литературе, не всегда были достаточно достоверными. Только в 50-е гг. XX в. были обнаружены заболевания людей со своеобразным проявлением — мезентериальный лимфаденит, клинически протекающий как острый или подострый аппендицит. С этого времени началось активное изучение псевдотуберкулеза во многих странах, в том числе и в России.
В течение длительного времени после открытия возбудителя псевдотуберкулеза, а затем и кишечного иерсиниоза многочисленные исследователи изучали различные свойства выделенных штаммов, что, несомненно, способствовало определению местоположения возбудителей в системе бактерий. В настоящее время эти бактерии отнесены к семейству Enterobacteriaceae, роду Yersinia, куда включен также возбудитель чумы, с которым возбудитель псевдотуберкулеза имеет сходство по морфологическим, культуральным, биохимическим и иммуногенным признакам.
Со временем накопились данные о существовании еще нескольких видов микроорганизмов, имеющих сходство с представителями рода иерсиний. результате в род Yersinia были включены следующие виды: Y. pestis, Y. pseudotuberculosis, Y. enterocolitica, Y. intermedia, Y. kristensenii, Y. frideriksenii, Y. aldovae и др.
Большинство перечисленных бактерий патогенны для человека и животных, но степень их значимости при заболевании людей различна. Y.pestis — возбудитель чумы, является особо опасной природноочаговой инфекцией, протекающей с выраженной интоксикацией, бактериемией и сопровождающейся высокой летальностью. Псевдотуберкулез и кишечный иерсиниоз — заболевания, встречающиеся среди населения достаточно часто; они протекают с поражением желудочно-кишечного тракта (особенно выраженным при кишечном иерсиниозе), лимфатического аппарата кишечника и в отдельных случаях с генерализацией процесса.
Три других представителя — Y. kristensenii, Y. intermedia, Y. frideriksenii как причина заболевания людей недостаточно изучены и встречаются намного реже, чем Y.enterocolitica. Остальные представители этого рода обнаруживаются в окружающей среде, но их участие в патологии человека пока не описано.
Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica во многом сходы между собой. Эти микроорганизмы имеют форму палочек длиной 1,8-1,5 нм, шириной 0,5-1,0 нм с закругленными концами. Размеры тела бактерий могут колебаться в зависимости от условий их культивирования. Бактерии, выращенные при температуре 22-25°С, более крупные цилиндрические, а выращенные при 37°С — короткие, кокковидные.
В мазках из культур, выращенных на жидких средах, бактерии располагаются короткими цепочками (по 2-4 клетки). При культивировании при 37°С чаще выражено свойство располагаться цепочками. При выращивании в температурных условиях 18-22°С более характерно одиночное или парное расположение микробных клеток.
В препаратах из органов животных или человека микроорганизмы располагаются одиночно, парами или в виде отдельных скоплений. Оба микроорганизма хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красителями, грамотрицательные. В мазках выявляются клетки, окрашенные биполярно. Это свойство более выражено у Yersinia pseudotuberculosis в мазках от погибших биопробных животных и в бульонных культурах. Бактерии не образуют спор. В определенных условиях (в организме биопробных животных) иногда удается выявить небольшую капсулу, окружающую микробную клетку.
Оба микроорганизма подвижны, причем подвижность присуща штаммам, выращенным при температуре 18—22°С, тогда как штаммы, культивирование которых осуществлялось при 37°С, всегда неподвижны. Подвижность обеспечивается жгутиками, расположенными перитрихиально, реже полярно или экстраполярно. У клеток Y. enterocolitica жгутиков значительно больше, в связи с чем они более подвижны, и их подвижность меньше зависит от температуры культивирования.
Помимо жгутиков оба вида бактерий имеют фимбрии (пили), которые располагаются по всей поверхности тела клетки. Их намного больше и они длиннее жгутиков, но значительно тоньше.
Иерсинии неприхотливы и нетребовательны к питательным веществам, растут на обычных питательных средах. Оба возбудителя способны расти на голодных средах (голодно-кислотный агар, фосфатно-буферный раствор). Оптимальная температура для их жизнедеятельности 25-28°С. При культивировании в этих условиях колонии бактерий имеют гладкую форму. Они могут расти и при более высокой температуре (37-40°С), но обычно в этих условиях они переходят в шероховатую форму, что более выражено у возбудителя псевдотуберкулеза. При этом отмечается полиморфизм колоний по размеру и форме. Могут размножаться при температуре 4-10°С, но рост их замедлен. По признаку способности к росту при низких температурах эти бактерии отнесены к группе психрофилов.
Оптимальным является pH 7,2-7,4, но микробы могут расти и в более кислой или более щелочной среде — при pH от 5,2 до 10,0.
Оба вида бактерий относятся к факультативным анаэробам. Хорошо растут в аэробных и микроаэрофильных условиях. В анаэробных условиях не растут.
При культивировании на слабощелочных средах в течение 18-20 ч вырастают колонии размером от 0,1 до 1 мм в диаметре, выпуклые полупрозрачные с ровным краем. Часть колоний может иметь волнистый край и исчерченную поверхность. При температуре 37"С колонии возбудителей псевдотуберкулеза имеют неровный утонченный край, выпуклый бугристый коричнево-золотистого цвета центр (R-форма) или исчерченную поверхность и волнистый край (SR- и RS-формы). Колонии возбудителей кишечного иерсиниоза обычно более гладкие с волнистым или ровным краем.
Часто в посеве регистрируют полиморфизм колоний по величине и различные их варианты (S, R, RS, SR). При длительном культивировании размер колоний увеличивается. Они становятся мутными и полупрозрачными беловато-серого или коричневатого цвета. При старении изолированные колонии иногда достигают в диаметре 1 см и более. При дальнейшем культивировании без пересева у части колоний проявляется фаголизабельность.
По данным различных авторов, возбудитель псевдотуберкулеза не растет на среде Плоскирева, лишь в некоторых случаях отмечается слабый рост через 7-10 дней. На агаре Лейфсона наблюдается хороший рост. На висмут-сульфатном агаре палочки псевдотуберкулеза не растут при 37°С и слабо растут при 22°С. Микроб растет на средах Левина, Дригальского и генцианвиолетовой. На среде Симмонса рост наблюдается только при 18-22°С.
На среде Эндо через 24-48 ч при температуре 22-25°С вырастают мелкие блестящие неокрашенные или слегка розоватые колонии на неизмененной или слегка обесцвеченной поверхности среды. Колонии Y. enterocolitica полиморфны.
На среде с бромтимоловым синим через 24-48 ч образуются круглые гладкие колонии размером от 1,5 до 2,0 мм голубого цвета с фестончатым краем и выпуклым центром на темно-голубом фоне среды. При взятии колонии петлей они сдвигаются по поверхности агара.
Возбудитель псевдотуберкулеза продуцирует пигмент золотисто-коричневого цвета, ярче выраженный при культивировании при 37°С. При росте на питательной среде имеет легко улетучивающийся запах.
В жидкой бульонной питательной среде шероховатые культуры растут в виде хлопьевидного осадка на дне, оставляя бульон прозрачным. Гладкие культуры мутят среду. При старении культуры в бульоне появляются осадок и пристеночное кольцо на поверхности, которое, утолщаясь, превращается в пленку.
В тетратионатовом бульоне отмечено лишь сохранение, но не накопление микробов, а в селенитовой среде число микробных клеток быстро уменьшается. Плохо выживают эти возбудители в глицериновом консерванте.
Y. pseudotuberculosis обладают гемолитической активностью в отношении эритроцитов кролика, морской свинки, лошади и барана. Это свойство не выявлено в отношении эритроцитов человека, а также собак, крыс, коз. Гемолитические свойства лучше выражены при pH 7,8-8,0. Кроме того, изучение показало, что они различаются при разных температурах. В отношении гемолитических свойств Y.enterocolitica сообщений нет.
Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica имеют широкий спектр биохимической активности. Они ферментируют до кислот без газа глюкозу, галактозу, маннозу, мальтозу, маннит, ксилозу, трегалозу. Обладают способностью восстанавливать нитраты в нитриты. Большинство штаммов продуцируют сероводород. На среде Хью — Лейфсона окисляют и ферментируют глюкозу. Дают положительную реакцию на метиловый красный. Хорошо выражена восстановительная способность по отношению к лакмусу, тимолу, нейтральному красному, метиленовому синему, тионину янус-грюну, индиго, малахитовому зеленому фуксину. Продуцируют каталазу и бета-галактозидазу. Не ферментируют лактозу, рафинозу, дульцит. Не образуют оксидазу, фенилаланин-дезаминазу, лизин-декарбоксилазу. Не имеют фибринолитических, плазмокоагулирующих, протеолитических ферментов, не образуют индола. Не продуцируют ацетилметилкарбинола.
Различаются возбудители псевдотуберкулеза и иерсиниоза по отношению к рамнозе, сахарозе, целлобиозе, сорбиту, сорбозе и реакции Фогес-Проскауэра (при 22-25°С).
По биохимическим свойствам возбудители псевдотуберкулеза более однородны. В то же время Y. pseudotuberculosis серовара 01 независимо от объекта выделения могут ферментировать мелибиозу, что не отмечено у штаммов серовара 03. Y. enterocolitica биохимически неоднородны и различаются между собой по комплексу биохимических тестов (с трегалозой, ксилозой, салицином) и образованию индола. По этим признакам они разделяются на 5 биоваров.
Биовар 1, в свою очередь, делится на две подгруппы 1А и 1В. Установлено, что патогенные свойства иерсиний более выражены у биоваров 1В, 2,3,4,5. У людей чаще встречаются бактерии биоваров 4 и 3, реже 2.
В эти же биогруппы входят и штаммы патогенных сероваров, которые постоянно встречаются при заболеваниях людей и выделяются от животных (0:8, 0:9, 0:5,27; 0:3;).
В биоподгруппу 1А включены серовары, которые не считаются патогенными. В то же время есть сообщения о выделении от людей, страдающих диареей, штаммов сероваров 0:6,30; 0:7,8, относящихся к этой биоподгруппе, и выявлении антител к ним в сыворотках людей.
а) Биологические модели. Известно, что разные штаммы возбудителя псевдотуберкулеза, циркулирующие среди грызунов и в объектах окружающей среды, обладают различной вирулентностью для одной модели и один и тот же штамм — для разных лабораторных животных. Они всегда патогенны для кроликов, морских свинок, в повышенной дозе вызывают гибель мышей и не убивают серых крыс даже в больших дозах. Штаммы Y. enterocolitica практически не вызывают гибели лабораторных животных.
При заражении через рот умеренными дозами у кроликов, как правило, не возникает манифестного инфекционного процесса. И только при введении большой дозы возможно поражение мезентериальных лимфоузлов.
При внутрибрюшинном заражении часто развивается генерализованная инфекция с последующей гибелью подопытного животного. У морских свинок инфекционный процесс развивается медленно — в течение нескольких недель и сопровождается воспалительной реакцией и формированием типичных псевдотуберкулезных бугорков в паренхиматозных органах и лимфатических узлах. Гибель животных отмечается редко, преимущественно при заражении их большими дозами. Белые мыши погибают только от больших доз, причем не все изучаемые штаммы как при вну-трибрюшинном, так и при подкожном введении их убивают. Заражение per os обычно не ведет к гибели животного.
При заражении морских свинок через глаз псевдотуберкулезные бактерии вызывают поражение его, чаще в виде конъюнктивита. Штаммы Y.enterocolitica обычно не повреждают ткани глаза.
Сходные результаты отмечаются при использовании культуры ткани. Так, например, на культуре Нер-2 некоторые штаммы псевдотуберкулезных бактерий вызывают патологический процесс в клетках, тогда как Y.enterocolitica обычно никакого повреждающего действия не оказывают.
В связи с нестабильностью результатов, получаемых при использовании биологических моделей, последние крайне редко используются для диагностики заболевания у людей. Они нашли применение при научных исследованиях бактерий, изучении инфекционного процесса у грызунов и др.
б) Постинфекционный иммунитет. Постинфекционный иммунитет при псевдотуберкулезе стойкий. Повторных случаев заболевания не наблюдали. Антитела к Y. pseudotuberculosis в титрах 1:50 и выше могут сохраняться в сыворотках переболевших до 1,5-2 мес. и даже год. Об этом свидетельствует и достаточно высокий иммунный фон среди населения (от 4 до 7%) на разных территориях.
Повторных заболеваний кишечным иерсиниозом также не отмечено. Однако в связи с наличием разных антигенных вариантов Y. enterocolitica не исключена возможность заболевания, вызванного другими сероварами.
При серологических исследованиях сывороток крови практически здорового населения в 10-15% случаев обнаруживаются антитела, притом к различным серова-рам иерсиний, а в некоторых случаях в одной и той же сыворотке выявляют антитела к двум и даже к трем сероварам одновременно. Особенно высок процент выявления антител у лиц, профессия которых предполагает контакт с животными (ветеринары, работники животноводческих и птицеводческих ферм).
в) Лечение и профилактика. Лечение псевдотуберкулеза и иерсиниоза начинают как можно раньше. Назначение лечения позже 3-го дня болезни не предупреждает развития обострений, рецидивов и хронизации заболевания. В качестве этиотропных средств применяют ципрофлоксацин, офлоксацин, доксициклин, метациклин и другие антибиотики при установлении чувствительности к ним выделенных штаммов. Курс лечения заканчивают не ранее 10-12-го дня после нормализации температуры тела. Можно применять в качестве альтернативных и другие препараты — ко-тримоксазол, гентамицин, цефтриаксон. Сохраняется у возбудителей чувствительность к левомицетину.
При генерализованной форме болезни применяют парентеральное введение комбинированных антибактериальных средств.
В случаях рецидивов необходимо проводить повторный курс лечения, используя другие антибиотики.
Обязательна дезинтоксикационная терапия с применением кристаллоидных и коллоидных растворов.
При развитии вторично-очаговой формы обязательна десенсибилизационная терапия, антигистаминные препараты.
При лечении полиартритов назначают антиревматические средства. Используются антиоксиданты и различные иммуностимуляторы.
Комплекс профилактических мероприятий включает систему надзора, предусмотренную санитарным законодательством, направленную на предупреждение контаминации иерсиниями пищевых продуктов в процессе их централизованного хранения и производства на всех этапах реализации.
Наиболее значимые и позволяющие снизить и даже прекратить вспышечную заболеваемость в организованных коллективах — это мероприятия по предупреждению контаминации иерсиниями пищеблоков; строгий санитарный контроль общего состояния пищеблоков, качества овощей и готовых салатов; соблюдение сроков хранения и реализации готовой продукции.
Редактор: Искандер Милевски. Дата публикации: 30.12.2019
Учебник предназначен для студентов, аспирантов и преподавателей высших медицинских учебных заведений, университетов, микробиологов всех специальностей и практических врачей.
5-е издание, исправленное и дополненное
Книга: Медицинская микробиология, иммунология и вирусология
Иерсинии – возбудители псевдотуберкулеза (Y. pseudotuberculosis) и кишечного иерсиниоза (Y. enterocolitica)
Иерсинии – возбудители псевдотуберкулеза (Y. pseudotuberculosis) и кишечного иерсиниоза (Y. enterocolitica)
Основные различия между возбудителями чумы, псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза представлены в табл. 29.
Все три вида иерсиний отличаются и по антигенным свойствам.
Возбудитель псевдотуберкулеза по О-антигенам разделяется на восемь групп (I – VIII) с 20 О-факторными антигенами (1 – 20). По О– и Н-антигенам (а – е) этот вид подразделяют на 13 сероваров и подсероваров (Ia, Ib, IIa, IIb, IIc, III, IVa, IVb, Va, Vb, VI, VII, VIII).
Y. enterocolitica характеризуется неоднородностью по О-антигену. Различают 34 серовара этого вида. Большинство из них адаптированы к некоторым видам животных или широко распространены во внешней среде. Подавляющее большинство штаммов, выделенных от человека, принадлежит к сероварам О3 и О9, реже встречаются серовары О6, О8, О5 и очень редко серовары О1, О2, О10, О11, О13 – О17.
От больных псевдотуберкулезом чаще всего выделяются штаммы сероваров I (Ib), III и IV.
Основные различия между возбудителями чумы, псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза
Примечание. (+) – признак положительный; ( – ) – признак отсутствует;? – не известно.
В ходе эволюции у иерсиний закрепилась необходимость существования в двух средах обитания – внешней (сапрофитическая фаза) и в организме теплокровных животных и человека (паразитическая фаза). Для осуществления паразитической фазы иерсинии должны проникнуть в организм теплокровного животного. Заражение возбудителем псевдотуберкулеза чаще всего происходит при употреблении в пищу инфицированных иерсиниями продуктов, хранившихся при пониженной температуре (4 – 12 °C) в холодильниках и овощехранилищах. В этих условиях в силу своей психрофильности бактерии могут размножаться и накапливаться в пищевых субстратах. Примером такого способа заражения является заболевание в 1988 г. псевдотуберкулезом 106 человек в Краснодарском крае, связанное с употреблением капусты, инфицированной Y. pseudotuberculosis. Основным резервуаром ее служит почва. Иерсинии при пониженной температуре обладают высоким потенциалом клеточной и тканевой инвазивности и способны сохранять высокий уровень вирулентности, однако возбудитель может проникнуть в организм человека и через любые слизистые оболочки, вероятно, за счет неспецифических механизмов. Источником иерсиниозов являются также дикие и синантропные грызуны, домашние и сельскохозяйственные животные. Возможно заражение человека от человека.
Штаммы Y. pseudotuberculosis выделены от 175 видов млекопитающих, 124 видов птиц, 7 видов рыб. Зараженные грызуны, животные и люди выделяют возбудителя с испражнениями и мочой, загрязняя воду, растения и другие объекты внешней среды, а через них заражается и человек. Таким образом, пищевой путь в передаче возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза является ведущим: заражение происходит в результате употребления в пищу сырых или недостаточно термически обработанных продуктов (мяса, мясных продуктов, молока, овощей, фруктов, зелени). Оба вида возбудителя способны размножаться не только на растениях, но и внутри них (салата, гороха, овса и т. п.).
Заболевания, вызываемые иерсиниями, характеризуются полиморфностью клинических проявлений, поражением желудочно-кишечного тракта, тенденцией к генерализации, септикопиемии и поражению различных органов и систем.
Y. enterocolitica вызывает у человека гастроэнтерит с повреждением стенок тонкого кишечника. Нередко после перенесенной болезни наблюдаются аутоиммунные спондилоартриты типа синдрома Рейтера и реактивного артрита. Полагают, что эти последствия связаны с наличием у Y. enterocolitica суперантигенов. Свойствами суперантигенов обладают мембранные белки этих бактерий.
Псевдотуберкулез людей на Дальнем Востоке описан как Дальневосточная скарлатиноподобная лихорадка. Она протекает тяжелее, чем псевдотуберкулез в западных областях, и характеризуется более сильными аллергическими и токсическими проявлениями, особенно на 2-й стадии болезни.
Патогенные свойства иерсиний обоих видов, как и возбудителя чумы, определяются не только хромосомными, но и плазмидными генами. У них обнаружены плазмиды, очень сходные с плазмидами Y. pestis, которые кодируют синтез антигенов V – W и наружных белков (Yop), таких же, как у Y. pestis, и других факторов вирулентности. Они имеют общий с Y. pestis кластер генов, связанных с системой транспорта железа. Установлено, что Y. pseudotuberculosis синтезирует термостабильный токсин, вызывающий гибель морских свинок при внутрибрюшинном заражении. Важную роль в патогенезе псевдотуберкулеза играет способность возбудителя к адгезии и колонизации слизистой кишечника.
Микробиологическая диагностика иерсиниозов включает использование бактериологических методов и серологических реакций. При бактериологическом методе исследуемый материал от больного (испражнения, кровь, слизь из зева), а также подозрительные продукты или воду засевают на среды Эндо, Плоскирева, Серова (индикаторную и дифференциальную) и инкубируют при 37 °C в течение 48 – 72 ч. Подозрительные колонии (мелкие бесцветные на средах Эндо и Плоскирева и окрашенные колонии двух различных форм на средах Серова) пересевают для получения чистых культур, которые идентифицируют по биохимическим признакам и окончательно типируют с помощью диагностических агглютинирующих сывороток.
Для серологической диагностики псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза используют развернутую реакцию агглютинации (по типу реакции Видаля) с соответствующими диагностикумами или РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом. Положительными считают реакции при титре антител 1: 400 и выше. Реакции рекомендуется ставить с парными сыворотками с интервалом в несколько дней. Нарастание титра антител свидетельствует о специфичности инфекционного процесса.
Рефераты и конспекты лекций по географии, физике, химии, истории, биологии. Универсальная подготовка к ЕГЭ, ГИА, ЗНО и ДПА!
Микробиологическая диагностика иерсиниоза
Кишечный иерсиниоз и псевдотуберкулез - острые инфекционные заболевания, протекающие с преимущественным
поражением желудочно-кишечного тракта. Возбудители принадлежат к семейству Enterobacteriaceae, рода Yersinia (Y.pseudotuberculosis и Y. enterocolitica).
Микробиологической диагностики этих заболеваний используют микроскопический, бактериологический, серологический и аллергологический методы.
Материалом для исследования кровь, моча, стул, продукты питания.
Микроскопический метод. В мазках, изготовленных из испражнений, мочи и крашеных по Граму Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica имеют вид безспорових грамотрицательных палочек размером от 1-3 - 0,5-0,8 мкм. Оба вида бактерий подвижные при температуре 18-20ºС и неподвижные при температуре 37 ° С.
Бактериологический метод. Основан на выделении возбудителя, как правило, с каловых масс больного. Сначала материал для исследования высевают в жидкие среды накопления (фосфатно-буферный раствор, 1% пептонная вода) и выдерживают в холодильнике при температуре 5-6 ° С для накопления иерсиний в микробных ассоциациях. При недостаточности питания и низкой температуре иерсинии накапливаются быстрее других энтеробактерии. На 3-5 сутки выполняют висел из среды накопления на чашки Петри со средами Эндо, Плоскирева, Серова, предварительно обработанные слабым раствором щелочи, и помещают в термостат для культивирования.
Y. enterocolitica на плотных средах образует мелкие, круглые, выпуклые блестящие колонии с ровными краями, с блакитино-серым оттенком. В процессе старения колонии сливаются и растут сплошь. На среде Эндо образуются колонии с розовым оттенком. В редких питательных средах наблюдают диффузный рост в виде помутнения.
Y. pseudotuberculosis образуют как S- так и R-формы колоний. S-формы Y. pseudotuberculosis - мелкие, блестящие, серовато-желтые и менее прозрачные чем в Y. enterocolitica. На среде Эндо колонии бесцветные. R-формы - выпуклые, бугристые, средних размеров, часто с фестончатыми краями. В процессе старения колонии увеличиваются в размерах и теряют свою прозрачность. В жидкостных питательных средах иерсинии дают диффузный рост в виде помутнения или в виде осадка хлопьев, оставляя среду прозрачным. Отбирают подозрительные колонии, выросшие и изготавливают из них мазки, которые окрашивают по Граму, микроскопируют. Часть колонии, которая остались, пересевают на скошенный питательную среду для накопления чистой культуры микробов. Пробирки помещают в термостат на 48-72 часов при температуре 22-30 ° С.
Полученную чистую культуру микроорганизмов высевают в пестрый ряд Гиса для изучения биохимических свойств.
Иерсинии не образуют сероводорода, проявляют уреазная активность. Ферментируют большинство углеводов, исключая лактозу и мычать, без образования газа. В иерсиний псевдотуберкулеза реакция Фогеса-Проскауера всегда отрицательная, тогда как в кишечных иерсиний при температуре 22-28 ° C она положительная. Псевдотуберкульозни микробы от кишечных иерсиний отличаются по отношению к сахарозы и рамнозы, лизабельнистю псевдотуберкульозним бактериофагом и аглютинабельнистю соответствующими видовыми сыворотками.
Для изучения антигенных свойств выполняют реакцию агглютинации на стекле с адсорбированной диагностической сывороткой при разведении 1:10. Результаты оценивают через 3-5 минут.
Серологический метод. С целью выявления специфических антител в крови больного используют реакцию агглютинации и реакцию пассивной гемагглютинации (см. Приложение). Исследуют парные сыворотки, отобранные в начале и на 3-й неделе заболевания. Развернутая РА типа Видаля выполняется с соответствующими диагностикумами. Реакцию считают положительной при титре антител 1: 200 и выше. Реакцию пассивной гемагглютинации (РПГА) ставят с эритроцитарных псевдотуберкульозним и кишковоиерсиниозним диагностикумами. РПГА считается положительной при титре 1: 160 - 1: 200 и выше.
При исследовании парных сывороток, наиболее вероятным считают прирост титров антител в 4 раза и больше.
В экспресс-диагностике псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза для выявления антигенов иерсиний в материале, который исследуется, в первые дни заболевания может быть использован ИФА (см. Приложение).
Аллергологический метод. Для постановки внутрикожной пробы * используют алергодиагностични препараты "псевдотуберкулин" и "ентероиерсин". Учет пробы проводят через 24 часа. Реакция считается положительной, если в месте введения 0,1 мл аллергена образуется папула и зона гиперемии диаметром 10 мм и более.
Исследование, выявляющее специфические антитела серотипов O3, O9 к возбудителю псевдотуберкулёза методом РПГА (реакции пассивной, или непрямой, гемагглютинации). Исследование полуколичественное (выдается результат и титр).
Возбудитель псевдотуберкулеза, антиген возбудителя псевдотуберкулеза, РПГА - реакция пассивной гемагглютинации.
Y. pseudotuberculosis, serotypes 03 and 09.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Иерсинии – грамотрицательные палочки из семейства энтеробактерий. Y. pseudotuberculosis является причиной псевдотуберкулеза, Y. enterocolitica – кишечного иерсиниоза. Эти микроорганизмы опасны не только для человека, но и для многих животных. В распространении инфекции большое значение имеют грызуны. Бактерии устойчивы к окружающей среде, способны размножаться и накапливаться в почве, водопроводной воде, но быстро гибнут под действием солнечных лучей и при кипячении.
Источником инфекции может быть больной человек, животное или почва. Человек заражается в основном через мясо, рыбу, молоко, овощи, фрукты и сырую воду, а также при уходе за больными животными.
Отмечается сезонность инфекции – большинство случаев регистрируется в холодное время года, что связано с массовой миграцией грызунов в продуктовые хранилища. Возможны как единичные случаи заражения, так и эпидемические вспышки в коллективах.
Тяжесть заболевания зависит от свойств (вирулентности) возбудителя, количества бактерий, попавших в организм, возраста инфицированного, состояния его иммунной системы и сопутствующих заболеваний, генетических особенностей. Чаще им страдают дети.
При псевдотуберкулезе инкубационный период составляет от 24 часов до 4 недель (в среднем 7-10 дней). Заболевание начинается с лихорадки, боли в животе и диспепсии, интоксикационного синдрома, но диарея при псевдотуберкулезе присутствует не всегда. На 1-4-й день болезни у 90 % инфицированных Y. pseudotuberculosis появляется скарлатиноподобная сыпь, отечность и гиперемия кистей и стоп. Заболевание может как ограничиться проявлениями острой кишечной инфекции с рвотой, диарей, так и иметь более распространенные формы с поражением мезентериальных лимфатических узлов и развитием терминального илеита, мезаденита или приобрести генерализованный характер вплоть до сепсиса. В некоторых случаях клиническая картина инфекции напоминает острый аппендицит. В патологический процесс нередко вовлекается печень, поджелудочная железа, почки, сердечно-сосудистая и нервная системы. Иногда отмечается развитие респираторного синдрома с болями в горле, покраснением задней стенки глотки, отечностью неба, кашлем и заложенностью носа.
После инфицирования Y. enterocolitica в редких случаях бывают такие осложнения, как реактивный увеит, ирит, конъюнктивит, гломерулонефрит, гемолитико-уремический синдром, узловатая эритема.
Данное исследование представляет собой обнаружение антител серотипов O3, O9 к антигенам возбудителя псевдотуберкулеза методом РНГА (реакция непрямой гемагглютинации). Также встречается название РПГА - реакция пассивной гемагглютинации.
Возбудитель иерсиниоза - внутриклеточный Гр(-) микроорганизм Y. еnterocolitica имеет 31 серотип. Иерсиниоз вызывает в основном Yersinia enterocolitica серотипов O3, O5, O8 и O9. Большинство изолятов относится к серотипам O3 и O9, причем серовары O3 имеют большую энтеротоксичность, а O9 - большую инвазивность. Иерсинии серовара O3 несут плазмиды вирулентности, в связи с чем чаще вызывают генерализацию инфекционного процесса.
Для чего используется исследование?
Для диагностики псевдотуберкулеза, в целях подтверждения клинического диагноза в случае отрицательного результата бактериологического исследования.
Для дифференциальной диагностики острых инфекционных заболеваний с полиорганным поражением и скарлатиноподобной сыпью.
Для выяснения причин реактивного артрита.
Для ретроспективного подтверждения диагноза.
Когда назначается исследование?
При симптомах острой кишечной инфекции (рвоте, диарее, лихорадке), сопровождающихся поражением печени, лимфатических узлов, скарлатиноподобной сыпью, отечностью кистей и стоп, артритами.
При подозрении на аппендицит и мезаденит инфекционного происхождения.
При обследовании пациента с реактивным артритом, болезнью Бехчета, синдромом Рейтера, инфекционными артропатиями.
В случае позднего обращения заболевшего лица, назначения антибактериальной терапии.
Что означают результаты?
anti-Yersinia enterocolitica O3, anti-Yersinia enterocolitica O9 - результат: отрицательно.
псевдотуберкулез (присутствие Y. pseudotuberculosis) - текущая или ранее перенесенная инфекция.
Исследование необходимо проводить не менее двух раз - в частности, в начале болезни и с промежутком в 7-10 дней; при перекрестных реакциях.
отсутствие инфицирования Y. pseudotuberculosis;
- К туберкулезу данная патология отношения не имеет.
- При диагностике псевдотуберкулеза необходимо учитывать схожесть его симптомов с кишечным иерсиниозом.
- У HLA-B27-положительных лиц более высокий риск развития реактивного артрита и аутоиммунных заболеваний при иерсиниозной инфекции.
- Результат исследования может не всегда являться достаточно специфичным и достаточным критерием для формирования заключения. Он не должен служить для самодиагностики и самолечения. Окончательный диагноз устанавливается только врачом при сочетании полученных данных с результатами других методов исследования.
Кто назначает исследование?
Литература
- Возианова Ж. И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. - К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 458-497.
- Кишкун А. А. Иммунологические и серологические исследования в клинической практике. - М.: ООО МИА, 2006: 401-404 с.
- Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 923-929.
Читайте также:
