Пцр в диагностике микозов

27 апреля 2017, 11:38 Эксперт статьи: Блинова Дарья Дмитриевна 0 5,260

При поражении организма грибками крайне сложно вовремя обнаружить заболевание и выявить возбудителя. Довольно проблематична диагностика микозов, по той причине, что заболевание не проявляется никакими признаками либо имеет очень разнообразную симптоматику. В зависимости от того какой участок заражен паразитами для диагностики берут волосы, зараженные ногти, часть кожи, мокроту, кровь, небольшую часть внутреннего органа или лимфоузлов. Микоз — довольно серьезное поражение паразитами кожных покровов и внутренних органов, которое способно значительно навредить здоровью человека. Крайне важно своевременно провести качественную диагностику, которая заключается в лабораторных исследованиях.

Важность своевременной диагностики микоза

Микоз — достаточно серьезное поражение паразитами кожных покровов и внутренних органов. Заболевание способно нанести непоправимый вред здоровью, а порой и привести к летальному исходу. Поэтому крайне важно своевременно выявить патологию и предупредить развитие осложнений. В противном случае на коже возникают пятна, которые имеют свойство загнаиваться и лопаться с последующим вытеканием гноя. Возникает неприятный запах, который сложно устранить. С помощью ранних диагностических процедур у больных можно провести своевременное противогрибковое лечение с применением антифунгальных средств широкого спектра действия. Такая терапия позволит предотвратить распространение микоза по всему организму.

Первый прием

При подозрении на микоз кожи или внутренних органов следует незамедлительно обратиться к дерматологу, а если есть возможность, к микологу. Эти специалисты в первую очередь проводят опрос больного, чтобы выяснить возможные пути инфицирования. Врач уточняет, не работал ли больной последнее время с животными или птицами, которые переносят паразитов. Крайне важно выяснить, в каких жилищных условиях обитает человек, не был ли он в неблагоприятных регионах. Затем проводится осмотр, в результате которого выявляются поврежденные кожные покровы, и определяется масштабность поражения. В процессе осмотра врач обращается внимание на иммунодефицитные состояния больного. Для диагностики микозов производится забор материала, который затем отправляют на лабораторное исследование.

Лабораторная диагностика

Самыми эффективными методами диагностирования микозов кожи являются различные лабораторные исследования, которые способны выявить возбудителя и помочь в подборе схемы терапии. Для выявления возбудителя микоза назначают такие лабораторные исследования:

• гистологический анализ;
• бактериологический посев;
• иммунологическое исследование;
• ПЦР-диагностирование;
• культуральное обследование;
• микробиологические исследования.

Вернуться к оглавлению

Микробиологическая диагностика является наиболее распространенным и самым простым методом выявления микоза в крови и на коже. Для выявления точного диагноза, следует знать, как правильно собирать материал, который необходим при исследовании. Пораженные волосы следует собирать при помощи пинцета. Если инфицирована кожа, то для микроскопии следует соскоблить с поврежденного участка кожный покров. Весь забранный материал помещают в 30% раствор гидроксида калия, а затем на предметное стекло. Микробиологическая диагностика способна выявить, где именно расположен грибок (внутри или снаружи волоса, кожи) и его размеры.

Чтобы предотвратить ошибочный диагноз микоза, следует правильно и грамотно забирать материал для микробиологического обследования.

В медицине существуют такие методы микробиологической диагностики:

• Микроскопия с применением нативных или неокрашенных препаратов. Для этого материал осветляют с помощью 10—30% растворов гидроксида калия или натрия. Затем обработанный материал кладут на лабораторное стеклышко, куда предварительно накапали немного глицерины. Сверху прикрывают стеклянной пластинкой и проводят анализ.
• Микроскопию окрашенных препаратов проводят несколькими способами, которые идентифицируют бактерии, дифференцируют различные бактерии и выявляют разные грибы.

Вернуться к оглавлению

Сбор бактериологического посева на питательную среду является точным способом диагностики микоза. Учитывая внешний вид и характеристики выросшей колонии грибка, дерматолог устанавливает тип возбудителя, вызвавшего микоз. Единственный минус обследования в том, что требуется много времени, чтобы вырастить колонию. В среднем необходимо около 3-х недель, чтобы выяснить штамм возбудителя. В некоторых случаях метод не приносит ожидаемых результатов.

Метод ПЦР-диагностирования предполагает выявление возбудителя микоза с применением полимеразной цепной реакции. При обследовании увеличивается чувствительность гибридизации, что повышает содержимое вирусного ДНК в исследуемом материале. Этот метод обследования является новым и требует нескольких анализов от пациента. Считается, что такой вид диагностики достаточно затратный, но дает точные результаты.

Культуральные диагностические мероприятия рекомендуются на финальном этапе постановки диагноза. Метод заключается в получении культуры грибка, которая потом отправляется на обследование с помощью микроскопа. Полученный материал кладут на искусственно созданную питательную среду и выявляют род возбудителя, внешний вид, размеры. После чего показано специальное лечение, которое направлено на борьбу с конкретным видом возбудителя микоза.

Иммунологический анализ часто применяется при подозрении на микозы крови. Этот метод предполагает обследование крови, спинномозговой жидкости или урины на наличие возбудителя. При иммунологической диагностике используют коммерческие тест-системы, которые выявляют специфические антигены в биоматериале. С помощью этих методов можно выявить специфичные антитела в сыворотке крови.

Гистологический анализ способен выявить грибки в тканях, волосах, ногтях. При обследовании применяются гистологические окрасы. Чаще всего применяют периодическую кислотную реакцию, поскольку она является максимально информативной. При диагностике грибы проявляются в незначительном количестве и имеют вид спор или нитей мицелия.

Дифференциальный анализ

В связи с тем, что при разных видах микоза проявляются различные симптомы. Это затрудняет постановку точного диагноза. В таком случае медики прибегают к методу дифференциальной диагностики и сравнивают микоз с другими дерматологическими болезнями. Нередко симптомы псориаза путают с микозом, но важно знать, что при микозе соскабливаемые чешуйки не будут кровоточить, в отличие от псориатических бляшек.

Часто микоз путают с парапсориазом, который имеет похожую симптоматику, но не отмечается шелушением кожи.

Важно дифференцировать микоз от нуммулярной экземы. Такое заболевание является особым видом экземы, но выявить это можно лишь при лабораторной диагностике. Часто признаки микоза принимают за проявления полиморфного фотодерматоза, который свойствен только для взрослых. Он никогда не диагностируется у детей.

Проведение лабораторной и дифференциальной диагностики — важная мера при постановке точного диагноза и назначения необходимого лечения. Чтобы устранить до конца признаки микоза, требуется достоверно выявить возбудителя. При несвоевременном проведении диагностических процедур, патология прогрессирует и поражает все большую часть кожи и внутренних органов, вызывая осложнения.

Метод ПЦР на грибок ногтей дает максимально точный и быстрый результат определения возбудителя онихомикоза.

Подробно о методе ПЦР

В основе цепной реакции – работа с отдельными участками ДНК, которые многократно увеличиваются. Некоторого количества участков ДНК будет достаточно, чтобы выявить возбудителя. Проводится копия только того праймера ДНК, который обнаружили в исследуемом образце. Праймер ДНК должен соответствовать определенным параметрам. Этот процесс профессионалы называют амплификацией.

ПЦР-методом определяют возбудителя на стадии его развития.

Диагностика полимеразной цепной реакции дает возможность выявлять возбудителей заболевания, когда другие методы показывают отрицательный результат.

Максимальный эффект метода ПЦР достигается при выявлении скрытых форм грибков.

Что происходит в лаборатории

Процесс цепной реакции проходит в амплификаторе. В этом приборе пробирки с отобранным материалом периодически нагреваются и охлаждаются. Чтобы смесь в процессе таких манипуляций не испарялась, в нее добавляют вазелиновое масло. Для улучшения реакции также добавляют специальные ферменты. Каждый цикл проходит через 3 этапа. Количество циклов не ограничивается цифрой 35, их может быть меньше или больше. Все зависит от качества полученных для анализа образцов и ожидаемого результата.

Нагрев до 98°C проводят для того, чтобы две ленты ДНК стали не связанными. Этот процесс называется денатурацией. Происходит разрушение водородных связей. Затем температуру снижают, чтобы отдельные фрагменты могли объединиться с матрицей. Такие действия называют отжигом. И последняя стадия – элонгация. Используя праймер, реплицируется матричная цепь.

Особенности методики ПЦР

• Метод дает возможность выявить возбудителя заболевания по прямому указанию на него.
• При проведении анализа ПЦР работают с любым биологическим материалом.
• Данная методика позволяет выделить фрагмент ДНК конкретного возбудителя.
• При таком методе ответ на анализы получают в кратчайшее время. Результат можно получить через 5 часов.
• Высокая чувствительность метода позволяет выявить не только возбудителя на пике заболевания, но и возбудителей хронических заболеваний. Даже можно выявить единичный экземпляр грибка.

Очень редко, но в отдельных случаях, пользуясь таким методом, можно получить ложноположительный результат, если в отобранном материале на анализ попала мертвая часть ДНК возбудителя. Анализы покажут наличие такого возбудителя. Поэтому важно задолго до начала проведения ПЦР анализов отказаться от применения лекарственных препаратов.

Нужен ли ПЦР тест при грибке ногтей

• Такой анализ со 100% точностью определит вид поселившегося в организме грибка.
• Знание конкретного возбудителя позволит лечащему врачу назначить наиболее эффективный метод лечения.
• Антигрибковый препарат будет назначен под конкретного возбудителя.
• Процесс выздоровления наступит в кратчайшие сроки.

Как подготовиться к ПЦР исследованию

Для проведения ПЦР анализов на наличие грибка можно воспользоваться фрагментом с пораженного участка или сдать кровь на анализ.

Перед отбором биологического материала на анализ ПЦР надо знать, что существуют общие правила подготовки к анализам и узконаправленные.

• До начала сдачи анализов не следует употреблять пищу в течение 12 часов.
• Если нет четких указаний врача, то лекарственные препараты употреблять не следует, лечебные процедуры следует приостановить. Отбор проб на анализы лучше проводить утром, после отбора можно принимать лекарства.
• Не следует принимать алкоголь в течение суток до сдачи анализов.
• Не следует курить в течение 2 часов до отбора материалов.
• Исключите эмоциональные нагрузки и стрессы накануне проведения отбора.
• Приходите на отбор анализов заблаговременно. Желательно за полчаса успокоиться и отдышаться.

Не пользуйтесь в течение двух недель противогрибковыми препаратами и мазями.

• По возможности несколько дней не обрезайте ногти.
• За несколько дней до сдачи биоматериала удалите декоративную косметику с ногтевой пластины, и в течение этих дней не используйте в местах заражения другую любую декоративную косметику.
• Не воздействуйте в течение трех дней на пораженные участки агрессивными средами, к которым можно отнести декоративные химические препараты, например: жидкость для снятия лака, лосьоны для ног и другие препараты.
• Откажитесь на несколько дней, во время проведения гигиенических процедур, от применения дезинфицирующих средств и мыла. Обтирайте пораженные участки влажной теплой салфеткой.
• Не проводите паровые бани, пораженных грибком участков.

Не принимайте антибиотики и другие лекарственные средства в течение двух недель.

Правила отбора для ПЦР диагностики грибка

Успех проведения анализов на 70% зависит от этапа пробоподготовки.

При проведении соскоба инструменты и пробирки должны быть стерильными. Врачу необходимо проводить манипуляции в перчатках. Его рот должен быть защищен специальной повязкой.

Для взятия крови лучше использовать вакуумную систему. При таком отборе исключен контакт отобранного образца с персоналом и окружающей средой.

Помещение, в котором проводится отбор, должно быть максимально стерильным.

Вышеперечисленные действия способствуют получению объективных результатов проведенных анализов на выявление грибка. Риск загрязнения отобранных материалов посторонним биоматериалом сводится к нулю.

Куда обратиться для ПЦР-диагностики

Современные методы требуют современного дорогостоящего оборудования и высококлассных специалистов. Высокотехнологичная автоматизированная система под силу крупным современным лабораториям.

Уточняйте наличие системы контроля качества в лаборатории.

Это не прихоть, а важная часть процесса проведения анализов, которая дает возможность исключить человеческий фактор из числа рисков получения ошибок.

Системы контроля должны соответствовать требованиям международных стандартов.

Видео: Подробный обзор ПЦР-анализа

Грибковые заболевания занимают второе место по распространенности среди кожных болезней. Для того чтобы правильно подобрать лечение, нужно вовремя сделать анализ на грибок, определить вид микоза и его чувствительность к лекарственным препаратам. Существует несколько видов анализов на грибковые заболевания кожи, ногтей и внутренних органов. Об этих исследованиях мы подробно расскажем в статье.

Виды грибов и провоцируемые ими заболевания

Грибковые заболевания человека можно разделить на пять основных групп. Это дерматомикозы, кератомикозы, кандидозы, глубокие микозы и псевдомикозы.

К дерматомикозам относят:

• микроспорию (возбудитель — рода Microsporum);
• трихофитию (грибки рода Trichophyton);
• эпидермофитию (Epidermophyton floccosum);
• рубромикоз (Trichophyton rubrum);
• эпидермомикоз (эпидермофитию) стоп (Trichophyton mentagrophytes).

Дерматомикозы вызывают воспалительные процессы в коже, могут поражать ногти и волосы. Источниками инфекции выступают животные (при микроспории) или больные люди.

Ярким признаком дерматомикоза является очаг поражения кожи или ногтей с активно отслаивающимися чешуйками. Последние содержат высокую концентрацию грибков и являются источником инфицирования здоровых людей. Грибок активно размножается во влажной среде, поэтому микозами чаще всего заражаются в сауне, в бассейне или в спортзале.

При кератомикозах происходит повреждение рогового слоя кожи, но при этом нет воспалительной реакции. К кератомикозам относят два заболевания — узловатая трихоспория и отрубевидный лишай, который вызывает грибок Malassezia furfur (он же — Pityrosporum orbiculare). Первое заболевание характерно для жаркой местности, в частности Африки и Южной Америки, поэтому о нем мы говорить не будем.

Возбудитель отрубевидного лишая — дрожжеподобный грибок — питается выделениями сальных желез. Заболевание начинается с появления мелких желтоватых чешуек около волосяных фолликулов. Постепенно очаги заболевания сливаются, образуя покрытые мелкими чешуйками пятна от розоватого до бурого цвета Из-за того, что на коже могут одновременно находиться пятна разного цвета, это заболевание еще называют разноцветным лишаем.

На коже головы Malassezia furfur может спровоцировать себорейный дерматит.

Дрожжеподобные грибки рода Candida в небольших количествах являются частью нормальной микрофлоры. Но при снижении иммунитета Candida может начать усиленно размножаться, вызывая заболевание, известное как кандидоз . В зависимости от места поражения выделяют кандидоз кишечника, кожи, ротовой полости, мочеполовой системы. При размножении этого грибка в крови возникает системный кандидоз.

Глубокие микозы чаще всего поражают органы дыхательной системы. Болезнь развивается в основном у ослабленных людей с хроническими заболеваниями.

К числу глубоких микозов относятся:

• аспергиллез (род Aspergillius);
• мукороз (род Absidia, Mucor, Rhizopus);
• пенициллиоз (род Penicillium);

Мукороз чаще всего поражает полость носа и гортани. Аспергиллез может вызывать заболевания полости носа, гортани, легких. Грибки рода Penicillium могут вызывать отомикоз (заболевания уха), поражение легких, абсцессы.

Выделяют также псевдомикозы . Эти патологии провоцируют особые группы грамположительных бактерий: актиномицеты и нокардии, имеющие много общего в строении вегетативных и репродуктивных форм клеток с грибами.

Зачастую при грибковых поражениях всех типов не развиваются специфические симптомы и установить причину заболевания бывает трудно. Поставить достоверный диагноз можно только на основе совокупности внешних признаков и результатов лабораторных анализов.

При проведении анализа на грибки исследуют кровь, мокроту, соскоб с кожи и слизистых, волосы или ногти. Анализ может проводиться микробиологическим методом (микроскопия, посев), методами ПЦР и ИФА.

Микроскопическое исследование позволяет быстро определить, вызвано ли заболевание грибком. Биологический материал (кусочек ногтя, волосы, соскоб с поверхности кожи или другой материал) обрабатывают специальным образом, при необходимости окрашивают и рассматривают под микроскопом. При микозах в препарате обнаруживают нити мицелия, споры гриба, дрожжевые клетки.

Микроскопическое исследование назначают при подозрении на микоз кожи, волос или ногтей.

Материалом для анализа грибка ногтей является соскоб с помощью стерильного скальпеля с разных участков ногтевой пластинки. При поражении кожи делают соскоб с границы очага — здесь наибольшая концентрация возбудителя. Если поражена волосистая часть головы, то кроме чешуек кожи забирают на исследование и волосы. Их осторожно изымают с помощью пинцета.

Микроскопическое исследование обычно длится около 3–5 дней. В большинстве случаев речь идет о качественном анализе — результат будет содержать лишь информацию о наличии или отсутствии грибов. В редких случаях определяется тип возбудителя (дрожжеподобный или плесневый грибок) и его концентрация (единичные или множественные клетки), а также тип обнаруженных элементов (гифы, споры, конидии).

В норме в исследуемом материале не должно быть грибков. Единичные клетки могут говорить не о заболевании, а о бессимптомном носительстве, поэтому интерпретировать результат должен только врач.

Посев, или культуральный метод , дает более точные данные о возбудителе заболевания, хотя и занимает больше времени. Такой анализ на грибки в зависимости от их вида может занимать от 2–4 дней до 4 недель.

Материал с поверхности кожи или ногтя собирают так же, как и для микроскопии. В лаборатории биоматериал помещают в специальную питательную среду. Если в материале были грибки, то через некоторое время появляются характерные колонии. Грибки из каждой колонии исследуют под микроскопом, определяют род и вид грибка, его концентрацию. В некоторых случаях исследуется чувствительность к определенным лекарственным препаратам.

Иммуноферментный анализ крови на грибок используется для диагностики глубоких микозов, когда получить материал для посева или микроскопии сложно.

ИФА позволяет определить титр антител к конкретному грибку. Чаще всего используется определение IgG к кандидозу и аспергиллезу. Чувствительность и специфичность этих тестов около 80%. Но это исследование может выдать положительный результат и при поверхностных поражениях — ярко выраженных кандидозе влагалища или ротовой полости.

Для ИФА забирается кровь из вены. Особой подготовки к исследованию не требуется. Можно забирать кровь натощак или не ранее чем через 4 часа после еды.

Результат готовится от 1–2 до 5 дней. В зависимости от установленного оборудования и проведения подтверждающих проб. Обычно в результатах такого анализа содержится одна из трех формулировок — положительный, отрицательный или сомнительный результат.

ПЦР-исследование позволяет установить наличие грибка определенного вида. Из плюсов этого метода можно выделить его точность, скорость и достоверность (специфичность около 100%). Из минусов — узкую направленность. То есть для проведения ПЦР-анализа на грибок нужно точно знать, что именно искать.

Для исследования делают соскоб с поверхности пораженной кожи или слизистых оболочек. Также на исследование могут забирать кровь, мочу, секрет простаты.

Метод ПЦР может быть как качественным, так и количественным. В первом случае в результате будет указано только наличие или отсутствие ДНК возбудителя. Во втором — количество его клеток в исследуемом материале. Анализ занимает в среднем от 1 до 3 дней.

По результатам одного ПЦР-анализа на грибки нельзя поставить диагноз. Говорить о кандидозе можно только при наличии специфических симптомов.

Стоимость анализов на грибок зависит от типа исследования, от ценовой политики лаборатории, а также от ряда дополнительных факторов. Анализ в клинике обычно стоит дороже, чем непосредственно в лаборатории. Посев — дороже микроскопии. Количественные методы ПЦР будут дороже качественных.

В среднем исследование соскобов с кожи или ногтей под микроскопом будет стоить около 600–800 рублей. Микологический посев для определения грибков рода Candida — 400–500 рублей без определения чувствительности и 600–700 рублей с чувствительностью к противогрибковым препаратам. Анализ на грибок кожи или ногтей стоит дороже — порядка 1500 рублей. Эта стоимость уже включает взятие биоматериала.

ИФА на определение иммуноглобулинов к определенному виду грибка стоит 500–800 рублей за один анализ, плюс около 120–170 рублей за взятие крови. Анализ на грибок методом ПЦР — около 200–300 рублей за качественный анализ и около 700–800 за количественный. Также нужно заложить в бюджет около 200–250 рублей за взятие соскоба.

Не каждая лаборатория проводит микологические исследования. Работа с грибками требует особого разрешения, оборудования и квалификации персонала. Поэтому лучше заранее узнать, какие именно исследования проводятся в конкретных медицинских учреждениях.

При грибковых заболеваниях кожи и ногтей нужно выбрать лабораторию, в которой могут профессионально сделать забор материала, так как от этого во многом зависит результат. Чем меньше времени прошло с момента забора материала до начала исследования, тем лучше.

Для проведения ПЦР- и ИФА-исследований используются микропланшетки на несколько анализов. Лаборант обычно сдает материал на исследования только после того, как заполнится вся планшетка. Это может увеличить срок готовности результатов. Проблема типична для учреждений с небольшим потоком клиентов.

Некоторые клиники заключают договор с лабораториями. В этом случае забор материала осуществляется на базе лечебного учреждения, само же исследование проводится в лаборатории подрядчика. Поэтому стоит уточнить заранее, где именно будет проводиться исследование.

Также стоит обратить внимание на способ получения результатов. В некоторых лабораториях результаты можно получить не только в виде стандартного бумажного бланка, но и через интернет, в личном кабинете или письмом на электронную почту.

Найти надежную лабораторию, где можно сдать все необходимые анализы на грибки, не всегда просто. Однако потраченное на ее поиски время окупится точными результатами, правильным диагнозом и вовремя начатым лечением грибковых заболеваний.

Грибковые инфекции (микозы) заняли третью позицию в списке наиболее распространенных дерматологических заболеваний. Они не относятся к трудноизлечимым болезням, но борьба с ними занимает много времени и требует квалифицированной помощи. Чтобы подобрать правильную терапию и избавиться от микоза навсегда, надо пройти лабораторную диагностику. Это комплекс обязательных процедур, которые позволят установить вид возбудителя грибковой инфекции и степень запущенности болезни. Направление на сдачу анализов выдает дерматолог, он же назначает курс лечения.

Методы анализа микоза ногтей, кожи и слизистых оболочек

Для лабораторной диагностики грибковой инфекции пациенту необходимо сдать биологический материал. Это может быть:

• соскоб с кожи,
• слизистые выделения,
• волос,
• частичка ногтевой пластины,

Некоторые виды диагностических мероприятий позволяют использовать любой из перечисленных биоматериалов, но большинство методик требуют взятия твердого образца, например, кусочка кожи, ногтя или слизистой.

Для определения типа микоза, концентрации и степени его запущенности прибегают к таким методам:

• микроскопия,
• иммуноферментный анализ (ИФА),
• полимеразно-цепная реакция (ПЦР).

Также иногда врач назначает посев на обнаружение патогенной микрофлоры или люминесцентную диагностику (ЛД). Эти способы анализа грибка не могут использоваться в качестве основных и являются вспомогательными. К ним обращаются в случае неясных результатов микроскопии, ИФА или ПЦР для более точной постановки диагноза.

Важно! Отказываться от анализов на грибок нельзя. Диагностировать заболевание самостоятельно и правильно подобрать лечение в домашних условиях невозможно. Заниматься этим должен только дерматолог.

Микроскопия (микробиологический анализ) – самый распространенный, но малоэффективный метод диагностики. Для исследования на грибок у пациента берется срез ногтя, соскоб с кожи или кусочек волоса (если у больного по предварительному диагнозу обнаружен микоз волосистой части головы). Далее биоматериал помещается в лабораторный контейнер (стерильная емкость небольшого размера с плотной крышкой). Он может выдаваться на месте взятия образца тканей или же его потребуется приобретать самостоятельно. Зависит от того, где берут пробу на микоз. В частной лаборатории контейнер выдают на месте, обычно бесплатно, а в государственной больнице надо принести свой.

Суть метода диагностики заключается в визуальном обнаружении грибковой инфекции. Для этого частичка биоматериала помещается в специальный раствор, расслаивается и исследуется при помощи увеличительного оборудования. Работник лаборатории тщательно рассматривает образец ткани и выявляет в нем патогенную микрофлору.

Недостатком этого способа анализа стала низкая эффективность. Порой, результаты ложные. Грибок не обнаруживается, но он есть. Назначают микроскопию при запущенной болезни или же тогда, когда у пациента нет возможности оплатить высокоточную лабораторную диагностику. В первом случае результаты исследования зачастую правдивы до 80%. Это объясняется тем, что при запущенной стадии развития микоза количество клеток патогенной микрофлоры слишком большое и не обнаружить их практически невозможно.

Несмотря на то, что микроскопический метод не всегда дает правдивые ответы, у него есть масса преимуществ:

• быстрота получения результата анализа,
• низкая цена (в государственных больницах его делают бесплатно),
• позволяет выявить все виды грибковой инфекции,
• можно использовать любой вид биологического материала.

Чтобы микроскопия дала максимально точные результаты, нужно подготовиться к сдаче биоматериала. За неделю до похода в лабораторию требуется прекратить принимать антибиотики. Это обязательное правило, игнорировать которое нельзя.

Если в качестве образца будет взята моча, то недопустимо пить большое количество жидкости накануне. Лучше всего собрать урину сразу после пробуждения, в день сдачи анализа.

Если пациент – женщина, то проходить диагностику надо через 3-4 для после окончания менструального цикла.

Когда проводят анализ на грибок ногтей, нужно убрать с их поверхности все химические покрытия. Это касается как лечебных, так и декоративных лаков.

Если для исследования используется кусочек дермы, волос или соскоб со слизистой оболочки, то место взятия тканей запрещено обрабатывать антисептиками, косметикой и другими средствами за сутки до похода в лабораторию.

Иммуноферментный анализ позволяет выявить концентрацию грибковых клеток в организме и вид возбудителя заболевания. В качестве образца для исследования используют кровь пациента, которую забирают из вены непосредственно перед проведением диагностики.

ИФА в основном используется для обнаружения микоза, поразившего внутренние органы. Но также метод назначается при подозрении на кандидоз (грибок в интимной зоне, молочница) и поражение кожных покровов болезнетворными микроорганизмами. Иммуноферментный анализ на онихомикоз не выполняется, однако ее можно провести, если помимо ногтя поражены стопы на ногах.

К плюсам ИФА-метода надо отнести:

• высокую чувствительность и точность показателей (до 95%),
• быстроту получения результатов,
• возможность проведения диагностики на начальной стадии развития микоза,
• доступность.

Кроме того, иммуноферментный анализ на грибок позволяет следить за динамкой инфекционного заболевания, что пригодится для корректировки медикаментозной терапии в дальнейшем.

Важно! ИФА – это метод широкого охвата. Он способен выявит практически все наиболее распространенные инфекции (ВИЧ, ВПЧ, гепатиты, ЗППП). Если пациент хочет установить наличие других заболеваний помимо грибка, то ему нужно сообщить это медработнику в момент сдачи крови.

К минусам данного вида диагностики относится небольшая вероятность получения ложных положительных или отрицательных результатов. В этом случае назначается дополнительное исследование. Для повторного анализа кровь берут заново.

Прежде чем сдавать кровь на иммуноферментную диагностику пациент должен:

• не курить и не принимать алкогольные напитки за трое суток,
• за неделю прекратить прием антибактериальных, антимикотических и противовирусных средств,

• приостановить лечение симптомов грибка препаратами местного действия,
• исключить физические нагрузки за сутки до забора крови,
• не есть жирной и сладкой пищи за 5 часов.

ПЦР диагностика микозов основана на исследовании структуры ДНК патогена, и используется для выявления инфекции вне зависимости от места ее локализации и степени развития. При помощи методики можно с точностью выявить вид возбудителя болезни, его концентрацию в организме и стадию.

Полимеразно-цепную реакцию часто назначают при грибке ногтей, микозе волосистой части головы и инфекциях, поразивших слизистые оболочки половых органов, гортани.

Положительными особенностями метода диагностики является:

• возможность использовать любой тип тканей (ногти, волосы, соскоб, биологические жидкости),
• безболезненность забора образца для исследования,
• результаты становятся известными в течение дня (если забор тканей произведен утром),
• высокая точность (до 98%),
• выявление сразу нескольких видов инфекции.

К недостаткам ПЦР относится только большая стоимость. Также услугой нельзя воспользоваться в лаборатории при государственной больнице. Сдать анализ можно в приватной клинике или крупном медцентре.

В отличие от ИФА и микроскопии, полимеразно-цепная реакция не требует серьезной подготовки. Перед сдачей образца тканей нужно отказаться от алкоголя и сигарет. Также надо приостановить прием противогрибковых средств на неделю. Это касается как таблетированных, так и местных препаратов.

Дополнительная диагностика грибковых заболеваний

Прохождение дополнительного исследования актуально только тогда, когда основные методы диагностики дали результат, не позволяющий точно определить наличие грибка или его тип. Обычно необходимость в этом возникает в трех случаях:

• когда концентрация патогена в биоматериале незначительная,
• когда анализ тканей был выполнен в несоответствии с требованиями,
• когда нет возможности воспользоваться более точным способом диагностики (например, там, где проживает больной, нет клиник, предоставляющих услуги по проведению ПЦР).

Вспомогательные методы исследования биоматериала не могут дать 100% точный ответ. Они всего лишь подтверждают или опровергают результаты предыдущего анализа. Принимать решение о том, нужно ли проходить дополнительную диагностику, должен только врач, но пациент может отказаться от нее.

В ходе исследования лампа направляется на зону локализации патогена и по характеру свечения определяется ее тип:

• губы, пораженные болезнью Либмана (системная красная волчанка), светятся голубовато-зеленым светом,
• плоские лишайные бляшки проявляются желтоватым свечением,
• грибок в волосах светится ярко-зеленым светом.

Важно! Для выявления других видов патогенной микрофлоры лампа Вуда будет бесполезной. Поэтому в этих случаях вместо люминесцентного анализа назначают посев.

Микологический посев часто называют культуральным способом диагностики грибков. Он дает точные данные относительно вида и концентрации патогенных микроорганизмов в структуре эпидермиса или ногтевой пластины.

Забор тканей осуществляется в лабораторных условиях по принципу микроскопии. Соскоб на грибок ногтей или эпидермиса помещается в стерильную емкость и передается для исследования специалисту.

По сути, микологический посев – это аналог микроскопического анализа. Разница между ними заключается в том, что при культуральной диагностике образец помещается в особую питательную среду, которая приводит к активному размножению грибковых спор. В жидкости-реагенте образуются целые колонии болезнетворной микрофлоры, они извлекаются и рассматриваются под микроскопом.

При необходимости сотрудник лаборатории соединяет грибки с лекарственными препаратами и следит за реакцией микроорганизма. Это позволяет узнать, на какие вещества реагирует патоген, и дает возможность подобрать правильную терапию.

Подготовка к культуральному анализу требует:

• отказа от обработки пораженной зоны противогрибковыми препаратами, антисептиками и антибактериальными средствами,
• прерывания грибковой терапии, даже если она назначена врачом.

Также желательно отказаться от спиртного за несколько суток до сдачи анализа, но особой необходимости в этом нет. Однако надо помнить, что высокая концентрация этанола в организме влияет на точность результатов анализа.